CONCLUSION

La verificación del equipo es una serie de pruebas de funcionamiento validadas profesionalmente, están determinados parámetros de calidad para dicha aceptación en cada prueba. Los resultados son arrojados por el equipo al terminar cada procedimiento de verificación. La verificación incluye las siguientes validaciones:

- Verificación de volumen alto y bajo del pipetor - Verificación del lavador (aspiración y dispensado) - Verificación de temperaturas de los incubadores - Verificación del lector

La verificación está basada en límites de valores en que debe estar las lecturas y así determinar si se acepta o no el funcionamiento. También se hace un análisis por mínimos cuadrados donde nos arroja la ecuación que define la recta y la covarianza, la cual nos indica la dispersión de los valores medidos a analizar.

Esto es: se calcula la media de los valores del sistema y los valores de la pipeta calibrada y se multiplicaran estas dos medias, X*Y, después de calcula la media de la multiplicación elemento a elemento de las medidas los cual da la sumatoria y se divide entre el número de elementos a analizar, esta resta representa la covarianza, este valor nos indica la relación de los parámetros a medir y mientras menor sea mejor será el resultado y funcionalidad. La grafica resultante nos indica de mejor manera el comportamiento de los datos analizados, lanzando una curva que define el análisis del sistema.

54 Esta verificación es una prueba que validara que el pipetor esté tomando y dispensando los volúmenes correctos de reactivos y/o muestras. Esto para asegurar que los protocolos que se llevan a cabo están siendo con las cantidades especificadas para los ensayos.

Esta comprobación se realiza comparando los volúmenes altos (70, 80, 90, 100 µL) y bajos (14, 16, 18, 20 µL) que dispensa el pipetor con los volúmenes que se introducen manualmente por el ingeniero o asesor, es decir, el especialista en una microplaca dispensara volúmenes de reactivo con una pipeta calibrada certificada, y el pipetor dispensara los mismos volúmenes y los comparara con los del especialista. El reactivo dispensado se homogeniza en agua desionizada y se harán lecturas fotométricas del tono de color que se presenta en cada pocillo y se comparara con las referencias del especialista, para determinar si los volúmenes son los correctos para validar el funcionamiento.

La verificación fue aceptada ya que el pipetor mostro eficazmente su desempeño en volumen alto y bajo (VER ANEXO 1 PARA OBSERVAR LOS RESULTADOS DE LA VERIFICACIÓN DEL PIPETOR) 6.1.2 VERIFICACIÓN DEL LAVADOR (ASPIRACIÓN Y DISPENSADO)

En esta verificación analizamos que el lavador este haciendo una aspiración correcta del ensayo, esto es, cuando se ingresa la microplaca al lavador, este hace un lavado con una solución y se lleva a cabo una aspiración de esto lo cual se va al desecho, lo que se busca medir es que se esté separando el líquido adecuado y solo deje un remanente que pueda ser leído por el espectrofotómetro, los resultados no serán aceptados cuando el valor medido sea mayor al valor que se define en el rango, ya que esto quiere decir que está dejando solución de más y el resultados será alterado.

Por parte de la verificación de dispensado, el protocolo que se corre es para comprobar que se dispensa en todos los pocillos de la microplaca en las cantidades especificadas por el protocolo, se checa que todo el peine dispense y aspire por cada una de las tuberías. El lector determinara la longitud de onda en todos los pocillos para asegurar que todas las posiciones de la microplaca en que dispenso, ninguna rebasa el límite de la referencia.

La verificación fue aceptada debido a que se cumplió con los parámetros especificados

55 6.1.3 VERIFICACIÓN DE LOS INCUBADORES

Aquí se validara la temperatura de cada incubador, tanto la temperatura más baja como la más alta. Como se describió anteriormente, los incubadores deben estar a 37º C en su máxima temperatura para poder incubar el virus, por lo tanto se verificara que los cuatro incubadores estén dentro de esta temperatura dentro de un rango.

Para esta verificación se usó una herramienta, la cual es un sensor de temperatura que registra y guarda las temperaturas en un rango de tiempo, es decir, puede ser que mida temperatura cada 1, 2, 5,10 dependiendo la prueba.

Figura 37. Herramienta de verificación de temperaturas

Esta herramienta se coloca como se ve en la figura, en una microplaca y se corre el protocolo de verificación. Para el uso de esta herramienta es necesario un programa el cual activa y desactiva la herramienta, cuando se activa, automáticamente comienza a registrar temperatura y cuando se vuelve a conectar, se mandan el registro a la computadora en una tabla de tiempo y temperatura y se muestra una gráfica como la que se muestra en el anexo 3.

Para esta verificación el resultado es aceptado ya que las temperaturas están dentro del rango delimitado.

56 Esta verificación es realizada con una herramienta con distintos rangos de luz, los cuales deben ser leídos por el lector con sus diferentes filtros de luz, esta validación para ser aceptada necesita que las lecturas estén dentro del rango especificado en el protocolo, además que nos arroja el valor real del filtro utilizado

Este procedimiento es introducir en una microplaca la herramienta mostrada en la figura 38, la cual como se puede ver, tiene distintos rangos de colores, los filtros del lector leerán estos colores 10 veces y hará un cálculo de la media de los valores medidos, el resultado es aceptado cuando estos valores están en el rango y el filtro leído está dentro de su valor límite.

Figura 38. Herramienta para verificación del lector

La verificación fue aceptada debido a que el lector mostro funcionalidad correcta en cada filtro de luz, así como todos los valores leídos entraron dentro de los valores de rango especificados.

57 6.2 APORTACIONES A LA COMPAÑÍA

Como resultados en la compañía después de la implementación de este trabajo, se han tenido logros como el reacondicionamiento de tres equipos EVOLIS, haciendo que estos se pongan a disposición en centros usuarios de estos sistemas. Como se puede ver en los anexos los resultados de las verificaciones son aceptados, estos resultados son proporcionados al cliente para que pueda asegurarse de que el sistema es funcional y cumple con los requerimientos para llevar a cabo la detección de virus en sangre con un rendimiento muy cercano a un sistema nuevo.

Una de las aportaciones más importantes con este trabajo es que la compañía, el área de ingeniería se ha visto beneficiada, desde el punto de vista “optimización de tiempo”, ya que desde mi incorporación en estos procesos he apoyado al área, dado que antes de esto, los ingenieros invertían tiempo de trabajo a estos procesos y por consiguiente mientras se llevaba a cabo el reacondicionamiento, se perdía en parte el enfoque al cliente que requería un servicio. Cabe mencionar que Bio-rad Ingeniería tiene la necesidad de atender diariamente a clientes para distintos tipos de servicios, con mi empleo en estos sistemas el área se vio beneficiada ya que yo dedico mi tiempo en la compañía al reacondicionamiento de los equipos en sitio, con esto el ingeniero de servicio puede invertir más tiempo en atención al cliente en campo y así no estar detenidos a realizarlo debido a equipos que están en proceso de reacondicionamiento.

Otra ventaja con esto es que cuando es necesario el reacondicionamiento de estos equipos, es porque un cliente está solicitando un equipo de este ámbito, con mi trabajo estamos logrando reducir tiempos de entrega y respuesta al cliente ya que anteriormente estos tiempos eran muy retrasados debido a que el enfoque del ingeniero de servicio debe estar más hacia el campo y estos procesos de reacondicionamiento nos eran muy seguidos continuamente, ahora también los ingenieros se ven beneficiados en tiempo y calidad en el servicio al cliente. Estos tiempos de respuesta y entrega están en un rango de entre 4 a 10 días, anteriormente los tiempos variaban dependiendo el tiempo disponible del Ingeniero de servicio, y estos tiempo podían ir de 2 semanas a 1 mes aproximadamente.

El trabajo del área de Ingeniería ha ido en aumento, es por eso que se necesita distribuir el trabajo de tal manera que los tiempos de respuesta y entrega al cliente disminuyan, ahora los Ingenieros se dedican directamente al cliente en campo y mi labor va enfocada al servicio y reacondicionamiento de equipo en la compañía.

58

CAPÍTULO VII CONCLUSIONES

Desde distintas perspectivas, la realización de una estancia industrial aporta una gran cantidad de habilidades y amplios conocimientos a un Ingeniero Biomédico, ya que al incorporarse al ámbito profesional de esta rama se logran desarrollar destrezas que el estudiante de dicha área va generando durante sus estudios y es capaz de reflejar en sus actividades, ya que nos enfrentamos a diversas problemáticas y situaciones en donde podemos interactuar para aportar ideas nuevas a su solución. El desarrollar la estancia nos ayuda a ampliar el panorama de aplicaciones reales e innovadoras donde podemos tener actividad continua, incorporándonos a procesos, toma de decisiones, aportación a sistemas de trabajo, etc.

La realización de este trabajo está enfocada al diagnóstico clínico, la cual es un área de suma importancia por las aplicaciones que involucran estos procesos. El Ingeniero Biomédico tiene la capacidad de desarrollo en este ámbito, así como también se cuenta con la preparación necesaria para poder comprender los procedimientos y ejecutarlos con la disposición y eficacia oportuna, ya que como se analizó en todo este trabajo, estos sistemas comprenden temas y aspectos de: electrónica, electromecánica, automatización, fisiología y otros conceptos que durante el proceso de reacondicionamiento, es interesante, la cantidad de aprendizaje retroalimentado que se obtiene y que con nuestra preparación somos capaces de aportar beneficios y al mismo tiempo adquirir aprendizaje continuo; creo que la gran experiencia que logra generar un Ingeniero se da en mayor cantidad durante el desarrollo profesional, siempre apoyándose y basándose en las armas intelectuales y físicas que se dan en la preparación escolar.

Con lo que respecta el trabajo realizado, se reacondicionaron tres equipos Evolis Premium (en distintos tiempos) los cuales llegaron a la compañía después de haber sido retirados de campo, estos sistemas fueron solicitados por nuevos clientes, por lo cual, se solicitó un reacondicionamiento de estos sistemas, después de haber sido reacondicionados los equipos mostraron un funcionamiento óptimo, siendo capaces de hacer ensayos en campo con una alta efectividad. Si comparamos un equipo reacondicionado con un equipo nuevo, tiene ventajas y desventajas; entre sus ventajas esta el bajo costo y también se garantiza un óptimo funcionamiento, en comparación con un equipo nuevo la desventaja es el tiempo efectivo de vida útil, ya que existirá mayor posibilidad de desgaste de piezas y presencia de fallas más cercanas, sin embargo el equipo nuevo tiene un costo muy alto en comparación, el equipo reacondicionado está garantizado que tendrá un excelente funcionamiento y es por tal motivo el uso de ellos por clientes que ponen en balance el costo- beneficio.

59 Alérgeno.- Es una sustancia que puede provocar una reacción alérgica. Los alérgenos son sustancias que, en algunas personas, el sistema inmunitario las reconoce como "extrañas" o "peligrosas", pero que en la mayoría de las personas no causan ninguna respuesta.

Basófilos.- Tipo de glóbulo blanco que segrega sustancias anticoagulantes y participa en el control de la inflamación.

Catalizador.- Es una sustancia que disminuye la energía de activación de una reacción química. Al disminuir la energía de activación, se incrementa la velocidad de la reacción

Dispensación.- es la acción de liberar el fluido de un instrumento como una pipeta, puede ser continuo o por tiempos definidos.

Enzima.- Son proteínas que catalizan todas las reacciones bioquímicas. Además de su importancia como catalizadores biológicos, tienen muchos usos médicos y comerciales.

Eosinófilos.- Es un leucocito de tipo granulocito pequeño derivado de la médula ósea, que tiene una vida media en la circulación sanguínea de 3 a 4 días antes de migrar a los tejidos en donde permanecen durante varios días.

Fagocito.- Son células presentes en la sangre y otros tejidos animales capaces de captar microorganismos y restos celulares e introducirlos en su interior con el fin de eliminarlos, en un proceso conocido como fagocitosis.

Fibrinógeno.- Es una proteína producida por el hígado que ayuda a detener el sangrado al favorecer la formación de coágulos de sangre.

Incubación.- Intervalo de tiempo entre la exposición a un agente infeccioso y la aparición del primer signo o síntoma de la enfermedad, esto apoyado en un rango de temperaturas en las cuales este virus provocara sus efectos.

Linfocitos.- Los linfocitos son un tipo de glóbulos blancos comprendidos dentro de los granulocitos. Son los glóbulos de menor tamaño (entre 7 y 15 μm), y representan del 24 a 32% del total en la sangre periférica, se encargan de la producción de anticuerpos y de la destrucción de células anormales.

60 desde la sangre a partir de un tipo de leucocito llamado monocito.

Péptidos.- Los péptidos son un tipo de moléculas formadas por la unión de varios aminoácidos mediante enlaces peptídicos, o enlace triple con una conjugación de ADN.

PCR.- Cs una técnica de biología molecular, cuyo objetivo es obtener un gran número de copias de un fragmento de ADN particular, partiendo de un mínimo; en teoría basta partir de una única copia de ese fragmento original, o molde.

Rack.- Compartimento específico en dimensiones para posicionar instrumentos como puntas, tubos de ensayo, reactivos, etc., sus dimensiones son de acuerdo a la herramienta u objeto a localizar.

Virus.- Son un reino de parásitos intracelulares obligatorios, de pequeño tamaño, de 20 a 500 milimicras, constituidos sólo por dos tipos de moléculas: un ácido nucleico y varias proteínas. El ácido nucleico, que puede ser ADN o ARN, según los tipos de virus, está envuelto por una cubierta de simetría regular de proteína, denominada cápside.

61

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1.- Aclaración a la Norma Oficial Mexicana NOM-087-ECOL-1995, Que establece los requisitos para la separación, envasado, almacenamiento, recolección, transporte, tratamiento y disposición final de los residuos peligrosos biológico-infecciosos que se generen en establecimientos que presten atención médica, publicada el 7 de noviembre de 1995.

2.- Collier, L; Balows, A; Sussman, M. 1998 Microbiology and Microbial Infections 9th. edition, Volume 1, Virology.

3.- Firestein GS. 2007. The inflammatory response. 23rd edition. Ed. Philadelphia. Chap 45.

4.- Garner JS, 1996. Hospital infection control practices advisory commitee. Guideline for isolation precautions in hospitals. Infect Control Hosp Epidemiol. 53-80.; 24-52.

5.- Goronzy JJ, Weyand CM. 2007. The innate and adaptive immune systems. 23rd edition. Ed. Philadelphia. Chap 42.

6.- Hudson L. C. Hay F. 1979. Inmunología práctica. Ed. Jims, España.

7.- IEC 61010-1 Ed. 2.0 b: 2001 Safety requirements for electrical equipment for measurement, control, and laboratory use - Part 1: General requirements Edition: 2.0 International Electrotechnical Commission. 231 pages

8.- Margni A. 1996. Inmunología e inmunoquímica fundamentos. Ed. Panamericana, Argentina.

9.- Ponce de León RS. 1998. Manual de prevención y control de infecciones hospitalarias. Editorial Glaxo Wellcome, 2ªedición, México. 150-151.

10.- Rubenstein, P. 1998. Outcomes among 562 recipients of placental-blood transplants from unrelated donors. New England Journal of Medicine. Volumen 339.

11.- Weinstein S, Kotilainen HR, Moore N. 1988. Microbiologic contamination of hospital trash from patients on isolation precautions versus standard care. 16:76.

62 ANEXO 1

68 RESULTADOS DE LA VERIFICACIÓN DEL LAVADOR (ASPIRACIÓN Y DISPENSADO)

72 RESULTADOS DE VERIFICACIÓN DE LOS INCUBADORES

74 RESULTADOS DE VERIFICACIÓN DEL LECTOR

Verification Plate Results

Plate Serial Number: 203700947000063 Reader Serial Number: 0271700273 Date: 01/11/2011

Time: 10:25:20

Calibration expires on the 27/11/2012

Result Expected Result Outcome Alignment

x -0,2 mm >=-1.0mm, <=1.0mm Pass y -0,4 mm >=-1.0mm, <=1.0mm Pass Skew -0,0 mm >=-1.0mm, <=1.0mm Pass Wavelength: 405nm Result Expected Result Outcome Accuracy 1,446 >=1,418, <=1,504 Pass Linearity 0,724 >=0,711, <=0,762 Pass Linearity 1,446 >=1,418, <=1,504 Pass Linearity 1,868 >=1,821, <=1,948 Pass Linearity 3,337 >=3,021, <=1,#QO Pass t-value 46,675 >=9.925 Pass Uniformity: A 1,449 >=1,422, <=1,467 Pass Uniformity: B 1,453 >=1,422, <=1,467 Pass Uniformity: C 1,452 >=1,422, <=1,467 Pass Uniformity: D 1,448 >=1,422, <=1,467 Pass Uniformity: E 1,443 >=1,422, <=1,467 Pass Uniformity: F 1,442 >=1,422, <=1,467 Pass Uniformity: G 1,443 >=1,422, <=1,467 Pass Uniformity: H 1,436 >=1,422, <=1,467 Pass Dynamic range: 100% 0,000 <=0.005 Pass Dynamic range: 0% 3,982 >3.000 Pass Crosstalk 3,989 >3.000 Pass Filter: 1 1,728 Pass Filter: 2 2,862 Pass Filter: 3 3,097 Pass Filter: 4 3,133 > 2,500 Pass Filter: 5 3,136 > 2,500 Pass Filter: 6 3,159 > 2,500 Pass Filter: 7 3,262 > 2,500 Pass Filter: 8 3,430 > 2,500 Pass

75 Filter: 10 3,909 > 2,500 Pass Filter: 11 4,000 > 2,500 Pass Filter: 12 4,000 > 2,500 Pass Filter: 13 4,000 > 2,500 Pass Filter: 14 4,000 > 2,500 Pass Filter: 15 4,000 > 2,500 Pass Filter: 16 4,000 > 2,500 Pass Centre wavelength 407 >=385, <=425 Pass Precision 0,001 <=0.010 Pass

Wavelength: 450nm Result Expected Result Outcome Accuracy 1,297 >=1,272, <=1,346 Pass Linearity 0,673 >=0,660, <=0,707 Pass Linearity 1,297 >=1,272, <=1,346 Pass Linearity 1,644 >=1,605, <=1,708 Pass Linearity 2,855 >=2,648, <=3,109 Pass t-value 245,897 >=9.925 Pass Uniformity: A 1,299 >=1,274, <=1,316 Pass Uniformity: B 1,302 >=1,274, <=1,316 Pass Uniformity: C 1,301 >=1,274, <=1,316 Pass Uniformity: D 1,298 >=1,274, <=1,316 Pass Uniformity: E 1,295 >=1,274, <=1,316 Pass Uniformity: F 1,294 >=1,274, <=1,316 Pass Uniformity: G 1,294 >=1,274, <=1,316 Pass Uniformity: H 1,289 >=1,274, <=1,316 Pass Dynamic range: 100% 0,000 <=0.005 Pass Dynamic range: 0% 4,000 >3.000 Pass Crosstalk 3,970 >3.000 Pass Filter: 1 0,156 Pass Filter: 2 0,170 Pass Filter: 3 0,622 Pass Filter: 4 3,009 Pass Filter: 5 3,125 Pass Filter: 6 3,175 > 2,500 Pass Filter: 7 3,293 > 2,500 Pass Filter: 8 3,458 > 2,500 Pass Filter: 9 3,944 > 2,500 Pass Filter: 10 3,874 > 2,500 Pass Filter: 11 3,991 > 2,500 Pass Filter: 12 3,998 > 2,500 Pass Filter: 13 3,998 > 2,500 Pass Filter: 14 4,000 > 2,500 Pass Filter: 15 4,000 > 2,500 Pass Filter: 16 4,000 > 2,500 Pass

76 Precision 0,001 <=0.010 Pass

Wavelength: 492nm Result Expected Result Outcome Accuracy 1,269 >=1,243, <=1,315 Pass Linearity 0,676 >=0,664, <=0,711 Pass Linearity 1,269 >=1,243, <=1,315 Pass Linearity 1,601 >=1,562, <=1,660 Pass Linearity 2,772 >=2,585, <=2,983 Pass t-value 317,566 >=9.925 Pass Uniformity: A 1,271 >=1,248, <=1,289 Pass Uniformity: B 1,274 >=1,248, <=1,289 Pass Uniformity: C 1,274 >=1,248, <=1,289 Pass Uniformity: D 1,271 >=1,248, <=1,289 Pass Uniformity: E 1,269 >=1,248, <=1,289 Pass Uniformity: F 1,267 >=1,248, <=1,289 Pass Uniformity: G 1,266 >=1,248, <=1,289 Pass Uniformity: H 1,263 >=1,248, <=1,289 Pass Dynamic range: 100% 0,000 <=0.005 Pass Dynamic range: 0% 4,000 >3.000 Pass Crosstalk 4,000 >3.000 Pass Filter: 1 0,126 < 1,000 Pass Filter: 2 0,116 < 1,000 Pass Filter: 3 0,119 Pass Filter: 4 0,211 Pass Filter: 5 0,554 Pass Filter: 6 2,964 Pass Filter: 7 3,249 Pass Filter: 8 3,445 > 2,500 Pass Filter: 9 3,981 > 2,500 Pass Filter: 10 3,903 > 2,500 Pass Filter: 11 3,985 > 2,500 Pass Filter: 12 4,000 > 2,500 Pass Filter: 13 4,000 > 2,500 Pass Filter: 14 4,000 > 2,500 Pass Filter: 15 4,000 > 2,500 Pass Filter: 16 4,000 > 2,500 Pass Centre wavelength 491 >=472, <=512 Pass Precision 0,001 <=0.010 Pass