Las semillas de las especies en estudio mostraron diferencias entre los porcentajes de viabilidad y germinación. Las de Tillandsia macdougallii presentaron una viabilidad de 72 % y una germinación de 98 % (localidad “Las Juntas”) y 84 % de germinación en la localidad de CICITEC-IPN. En las de T. violacea se obtuvo un 10 % y 13 % respectivamente (Localidad “Dos aguas”). Esta última información se relaciona con los bajos porcentajes de germinación que se obtuvieron para T. violacea de Oaxaca (15.2 %) (Sosa-Luría et al., 2012).
Las semillas de Tillandsia macdougallii en el sustrato aserrín presentaron una germinación de 85% y en cultivo in vitro en la primer siembra el porcentaje de germinación fue 80% en T. macdougallii y 15% en semillas de T. violacea. De la misma manera el tiempo de germinación fue similar entre estas dos, mientras que para
T. macdougallii en sustrato la germinación se dio en 6 días para T. violacea fueron 10 días, en cultivo in vitro se dio a los 4 y 8 días respectivamente.
Uno de los sustratos que permitió el establecimiento de T. macdougallii fue la fibra de coco-vermiculita (3:1) este presento el 50% de sobrevivencia a los 140 días, en comparación con la siembra 3 en cultivo in vitro este porcentaje fue menor 14% a los 140 días. De acuerdo con esta información se debe considerar que la etapa de plántula es el lapso en que un vegetal es más vulnerable al efecto de limitaciones meteorológicas, agentes bióticos, daño mecánico y competencia (Camacho, 2011).
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El periodo de sobrevivencia en sustratos fue mayor (336 días) a diferencia del cultivo in vitro que fue de 180 días, la oxidación de los tejidos no permitió la sobrevivencia de las plántulas.
En cuanto al tamaño de plántulas el sustrato FC-V (3:1) mostro en promedio 8.64 mm de longitud y 3.71mm de ancho, estos resultados coinciden con lo reportado por Marinho de Assis et al.,(2005) que demostró que el sustrato fibra de coco es favorable para el crecimiento de la especie Dendrobium nobile, (Orquideacea) argumentando que si se combinan fibra de coco en cubos y fibra de coco en polvo, el crecimiento es mayor, debido a que se tiene una mejor aireación y retención de humedad en el sustrato.
T. macdougallii presento diferencias significativas, en cuanto al número de hojas (11 a 16), en el sustrato perlita-vermiculita (1:1), esta respuesta se infiere fue porque al mantenerse de manera directa las hojas en el sustrato este permitió que se adsorbieran los nutrientes del fertilizante orgánico que se habían aplicado previamente con el riego. Tomando en cuenta que la vermiculita presenta una elevada capacidad de intercambio catiónico, es decir que los nutrientes adsorbidos por este material se encuentran disponibles y son liberados paulatinamente y de esta manera fueron aprovechados por las plántulas de T. macdougallii (Burés, 1997). Sin embargo, la mezcla de estos dos materiales presento el crecimiento de algas que afecto la sobrevivencia de numerosas plántulas, debido a factores como: el color blanco de la perlita que al combinarse con un exceso de humedad, iluminación y temperatura, favorecieron las condiciones necesarias para el establecimiento de estos organismos, que generaron competencia entre las plántulas de T. macdougallii.
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En tanto que el número de hojas (9 por plántula) que se presento en el medio de cultivo enriquecido con thidiazuron a los 140 días fue menor, que en sustratos.
Las características físicas en un sustrato son importantes para el establecimiento de plantas cultivadas y los valores óptimos establecidos de acuerdo con Ansorena et al., (1994) son los siguientes: Densidad aparente <0.7, porcentaje total de poros >85, porosidad de aireación 10-30, porosidad de retención de humedad 55-70. Teniendo estos valores como referencia podemos decir que los sustrato que cumplieron con estos valores son las mezclas de fibra de coco-vermiculita (3:1) y la perlita-vermiculita (1:1), que mostraron su eficiencia al mantener una sobrevivencia constante y un crecimiento óptimo en las plántulas de T. macdougallii.
En la tercera siembra en cultivo in vitro los resultados mostraron que el mayor porcentaje de germinación (90 %) ocurrió en el medio MS al 50% de su concentración. Esta respuesta fue parecida a lo reportado para las especies Billbergia rosea con 95% (Pardo et al., 2007) y Vriesea splendens var. Splendens con 99% (Pardo et al., 2010). Esta concentración es favorable para algunas especies de la familia Bromeliaceae que presentan cierta susceptibilidad a la salinidad bajo condiciones in vitro. Luttge (2004) menciona que las plantas epífitas-CAM son altamente sensibles a la salinidad, ya que, al absorber agua y nutrimentos por las hojas, no están forzadas a desarrollar un mecanismo de tolerancia a la presencia de sales. Sin embargo, en la especie
Acanthostachys strobilacea se presentó una mejor respuesta bajo la concentración de
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La propagación in vitro de T. macdougallii y T. violacea es una alternativa de producción a gran escala. Sin embargo, es importante llevar a cabo otras metodologías de micropropagación que nos permitan establecer el protocolo de regeneración in vitro para estas dos especies.
Para que se pueda llevar a cabo el aprovechamiento sustentable de la especie T. macdougallii se recomienda que su cultivo sea en sustratos y de preferencia que se establezca en el lugar en donde crecen, por lo menos en el periodo de plántula que es el más vulnerable a diversos factores ambientales, además el cultivo convencional, presenta ventajas sobre el cultivo in vitro en cuanto a costos de producción. Sin embargo, el cultivo in vitro es una alternativa para especies con baja germinación o cuando las poblaciones son muy reducidas, como fue el caso de T. violacea.
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7.1 Literatura citada
Ansorena, M. J. 1994.Sustratos, Propiedades y Caracterización. Mundi Prensa, Madrid. 172p.
Burés, S. 1997.Sustratos. Ediciones Agrotécnicas G. L. España, Madrid. pp. 182,189, 238, 243.
Camacho, F. M. 2011. Dormición de semillas: causa y tratamientos. 2da edición. Ed. Trillas. México, D. F. 232p.
Luttge,U. 2004. Ecophysiology of crassulacea acid metabolism (CAM).Annals of Botany
93: 629-652.
Marinho de Assis, A., R. Tadeu de Faria, L. A. Colombo e Jane & F. P. Rodrigues.2005. Utilização de substratos à base de coco no cultivo de Dendrobium nobileLindl. (Orchidaceae). Acta Scientiarum Agronomy Maringá.27(2): 255-260.
Pardo, A., C. Michelangeli & N. Mogollón. 2007. Conservación in vitro de Billbergia rosea (Bromeliaceae). Boletín del Centro de Investigaciones Biológicas. Universidad Del Zulia, Maracaibo, Venezuela. 41 (4): 517-529.
Pardo, A., M. DaCosta, G. Alvarado&J. Lorbes. 2010. Conservación in vitro de Vriesea splendens var. Splendens(Bromeliaceae). Boletín del Centro de Investigaciones Biológicas. Universidad Del Zulia, Maracaibo, Venezuela. 44(3): 317-330.
Santos, D. S., Tamaki V. & Carvalho N. C. 2010. In vitro propagation of the ornamental bromeliadAcanthostachysstrobilacea (Schult.f.)Klotzsch via nodal segments.In Vitro Cellular&Developmental Biology–Plant. 46:524-529.
Sosa-Luría, D., Chávez-Servia J. L., Mondragón-Chaparro D., Estrada-Gómez y Ramírez-Vallejo P. 2012. Viabilidad y Germinación de seis especies de Tillandsia