CHAPTER 4: ONSET OF ORBITAL MOTION IN A TRAILING VORTE
4.3 UNSTEADY VORTEX STRUCTURE
4.3.2 Initial State of Vortex at Trailing Edge
Objetivos y alcance. Este documento se elabora con el objetivo de que todo el personal técnico siga este procedimiento para la correcta ejecución del ensayo de Determinación de cobre en el suero en el Departamento de Riesgos Químicos.
Fundamento del método. El método se basa en la lectura directa del suero diluido, con llama de aire acetileno en el espectrofotómetro de absorción atómica a 324,8 nm.
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Toxicología OcupacionalLa concentración del metal se determina mediante una curva de calibración de concentración conocida.
Aplicable a: muestras de suero.
Responsabilidades. Es responsabilidad del personal calificado (técnico, ingeniero o licenciado en Química) que labora en el laboratorio, el cumplimiento de este PNO.
El Jefe de Departamento supervisará su cumplimiento, así como el responsable de la calidad.
Operaciones preliminares. Se realizará la toma de muestra según el PNO. RQ.01.002.
Condiciones de seguridad. Se trabajará con las condiciones de seguridad reque- ridas para los reactivos químicos y las muestras biológicas (según MP.RQ.01) y con las del equipamiento según los instructivos de uso.
Equipos, utensilios y medios de medición. Toda la cristalería utilizada, previamente tratada según el anexo:
– Espectrofotómetro de absorción atómica con lámpara de cátodo hueco de co- bre, quemador de aire/acetileno (INS.RQ.01.028).
– Centrífuga de hasta 3 000 r.p.m. (INS.RQ.01.036).
– Tubos de cultivo de 10 mL o tubos para centrifugar de 10 mL. – Pipetas graduadas y aforadas.
– Frascos volumétricos. – Probetas con tapa esmerilada. – Viales plásticos de 25 mL con tapa. – Jeringuillas de 10 mL.
– Agujas hipodérmicas No. 20. Materiales y reactivos:
– Solución de referencia de cobre 1 000 µg/mL (PNO.RQ.01.003) (4.15.1). – Solución de referencia de cobre 100 µg/mL (PNO.RQ.01.003) (4.15.2). – Solución de referencia de cobre 10 µg/mL (PNO.RQ.01.003) (4.15.3). – Acetileno filtrado, certificado.
– Heparina 25 000 UI/5 mL. Procedimiento:
Muestras. Si el análisis no se va a realizar en el momento, las muestras de suero son estables durante 4 días a 15 oC y 7 días en congelación.
Técnica operatoria:
– Preparación de la porción de ensayo. Se toma 1 mL de suero y se coloca en un frasco volumétrico de 10 mL o probeta graduada con tapa de calidad A. – Determinación. A la porción de ensayo se enrasa con agua destilada a 10 mL
– Ensayo en blanco. El blanco será agua destilada.
– Curva patrón y calibración. Se preparará según PNO.RQ.01.003.
Medición fotométrica. Las mediciones se realizarán en el equipo de absorción atómica y se ajustan los parámetros y demás pasos de la operación indicados por el fabricante para la determinación de cobre, con llama de aire/acetileno y lámpara de cátodo hueco. La medición fotométrica se realiza a 324,8 nm.
La concentración en las muestras se obtendrá por interpolación en recta de re- gresión ajustada por el método de mínimos cuadrado (RL), en el cual se observa el comportamiento gráfico de la curva y la linealidad (r2 >0,99).
El equipo de absorción atómica utiliza este sistema estadístico para la cuantifica- ción de los resultados de manera automática por medio de una computadora acoplada al equipo, se recogen los datos manualmente en la libreta de trabajo.
Expresión de los resultados. Por lo general las muestras se realizan por duplicados y se promedian para emitir el resultado final.
Los resultados de los análisis se informarán en sus respectivas órdenes y, cuando sea una entidad, se realizará un informe según el modelo. Los resultados se expresarán en mg/L o μmol/L y se aproximan hasta la décima.
Registro. Es obligatoriedad del técnico anotar en el registro correspondiente a la toma de muestra el número de registro, la fecha, nombre y apellidos del paciente, análisis solicitados, procedencia y cualquier observación necesaria.
En el registro de uso del equipo deberán reflejarse los datos de la determinación según PNO.
Es responsabilidad del técnico anotar en el registro de entraba, así como en la orden, el resultado del paciente, si se requiere un informe, el responsable de calidad deberá ejecutarlo.
Vigencia/periodicidad. Este documento es de carácter permanente hasta tanto no sean aprobadas otras resoluciones y legislaciones por los organismos rectores de la actividad, y se utilizará cada vez que se efectúe la determinación de cobre en el suero.
Aprobaciones:
Nombre y apellidos
Cargo Firma Fecha de
implantación 09/2014
Elaborado por: Téc. Lilian
Villalba Técnica de Laboratorio Revisado por: Lic. Arelis
Jaime Novas Investigadora Auxiliar Aprobado por: Ing. Heliodora
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Toxicología OcupacionalANEXO A. Limpieza de la cristalería. La cristalería se limpiará inmediatamente después de concluido el análisis. Se lavará con detergente y enjuague con agua corriente y destilada, y se colocará en solución de ácido nítrico al 5 % de un día para el otro. Si se necesita una limpieza inmediata se sumerge en una solución de ácido nítrico al 50 % durante media hora. Se saca de esa solución y se lava con agua destilada y bidestilada.
Determinación de manganeso en las heces fecales
Objetivos y alcance. Este documento se elabora con el objetivo de que todo el personal técnico siga este procedimiento para la correcta ejecución del ensayo de De- terminación de manganeso en heces fecales en el Departamento de Riesgos Químicos. Fundamento del método. El método se basa en la oxidación de los compuestos de manganeso hasta ácido permangánico por el persulfato de amonio, en presencia de nitrato de plata en un medio ácido.
La intensidad de la coloración rojo-violeta que se observa es proporcional a la concentración de manganeso, el cual se calcula mediante un método colorimétrico.
La concentración del metal se determina mediante una curva de calibración de concentración conocida.
Aplicable a: muestras de heces fecales.
Responsabilidades. Es responsabilidad del personal calificado (técnico, ingeniero o licenciado en Química) que labora en el laboratorio, el cumplimiento de este PNO.
El Jefe de Departamento supervisará su cumplimiento, así como el responsable de la calidad.
Operaciones preliminares. Se realizará la toma de muestra según el PNO. RQ.01.002.
Condiciones de seguridad. Se trabajará con las condiciones de seguridad reque- ridas para las muestras biológicas (según MP.RQ.01) y según las de cada equipo que se utilice.
Equipos, utensilios y medios de medición: – Espectrofotómetro UV visible (INS.RQ.001.038). – Centrífuga de hasta 3 500 r.p.m. (INS.RQ.01.036). – Baño de arena (INS.RQ.01.029).
– Baño María (INS.RQ.01.005). – Mufla (PNO.RQ.01.050).
– Cápsulas de porcelana de 50 mL. – Probetas.
– Pipetas graduadas y volumétricas. – Tubos de ensayo.
Materiales y reactivos:
– Solución de ácido sulfúrico 1:20 (PNO.RQ.01.003) (4.4.1) – Solución de ácido oxálico 80 g/L (PNO.RQ.01.003) (4.4.2) – Solución de nitrato de plata 10 g/L (PNO.RQ.01.003) (4.4.3)
– Solución de persulfato de amonio 100 g/L, se prepara en el momento del aná- lisis (PNO.RQ.01.003) (4.4.4).
– Solución de ácido sulfúrico y oxálico (PNO.RQ.01.003) (4.4.5).
– Solución de referencia de manganeso de 1 000 µg/mL (PNO.RQ.01.003) (4.4.6). – Solución de referencia de manganeso de 50 µg/mL (PNO.RQ.01.003) (4.4.7). – De una solución de 10 µg/mL de manganeso nitrato (solución estándar) (PNO.
RQ.01.003) (4.4.8).
Procedimiento. Muestras. El tiempo óptimo para recoger la muestra de los tra- bajadores expuestos es en horario de la mañana después de tres días de trabajo. Inmediatamente de llegar al laboratorio, se procesará sin añadir preservante.
Técnica operatoria:
– Preparación de la porción de ensayo. Se homogeniza la muestra y se pesan 15 g de heces fecales y se colocan en una cápsula de porcelana, se traslada a la mufla fría y se va aumentando lentamente la temperatura hasta 700 oC, en
la cual se mantiene durante una hora, transcurrido este tiempo se deja enfriar y se le añaden 2 mL de la solución de ácido sulfúrico concentrado y ácido oxálico, se coloca en baño de arena tapándola con un vidrio reloj para evitar salpicaduras. Cuando está prácticamente evaporada se destapa y se escurre el vidrio reloj en la cápsula, se evapora por completo, se deja enfriar y se disuelve la ceniza seca con 50 mL de ácido sulfúrico 1:20, decantando cuantitativamen- te una probeta graduada de 50 mL. Después de disuelta la ceniza, se agita y se pasa una porción de 10 mL de esta a un tubo de centrifugar a 3 000 r.p.m. durante 5 min. Para el análisis se toman 1 mL del sobrante y se completa hasta 5 mL con solución de ácido sulfúrico 1:20.
– Determinación. A la porción de ensayo se le añade 0,1 mL solución de nitrato de plata y 1 mL de persulfato de amonio, se agita y se coloca en baño de agua a 80 oC durante 5 min para dejarlo enfriar.
– Ensayo en blanco. Se realiza según el procedimiento indicado en la determi- nación, utilizando 5 mL de la solución de ácido sulfúrico 1:20 en lugar de la porción de ensayo.
– Curva patrón y calibración. Se preparará según PNO.RQ.01.003 (4.9). Se conti- núa según se describe en la determinación.
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Toxicología OcupacionalMedición fotométrica. Las mediciones se realizarán en el equipo de espectrofo- tómetro UV-VIS, se ajustan los parámetros y demás pasos de la operación indicados por el fabricante. Antes de realizar la determinación fotométrica, se agita fuertemente hasta el cese de las burbujas. La lectura se realiza en el espectrofotómetro a 525 nm en celdas de 1 cm y ajustando el equipo contra el blanco de reactivos.
La concentración en las muestras se obtendrá mediante interpolación en recta de regresión ajustada por el método de mínimos cuadrado, en el cual se observa el comportamiento gráfico de la curva y la linealidad (r2 >0,99).
El equipo espectrofotómetro UV-VIS utiliza este sistema estadístico para la cuanti- ficación de los resultados de manera automática mediante una computadora acoplada al equipo, se recogen los datos manualmente en la libreta de trabajo.
Expresión de los resultados. Casi siempre las muestras se realizan por duplicados, y se promedian para emitir el resultado final.
Se calcula mediante la fórmula siguiente:
donde:
a: Contenido de manganeso en la porción de ensayo (µg). p: Peso tomado de la muestra en gramo.
V: Volumen de la porción de ensayo que se toma para la muestra (mL). 50: Volumen total de la porción de ensayo.
100: Factor para expresar los resultados en 100 g de muestra. 1000: Factor para expresar los resultados en miligramo.
Los resultados de los análisis se informarán en sus respectivas órdenes y, cuando sea una entidad, se realizará un informe según el modelo. Los resultados se expresarán en µg/100 y se aproximan hasta la décima.
Registro. Es obligatoriedad del técnico anotar en el registro correspondiente a la toma de muestra el número de registro, la fecha, nombre y apellido del paciente, análisis solicitados, procedencia y cualquier observación necesaria.
En el registro de uso del equipo deberán anotarse los datos de la determinación según PNO.
Es responsabilidad del técnico anotar en el registro de entraba, así como en la orden, el resultado del paciente, si se requiere un informe, el responsable de la calidad deberá confeccionarlo.
Vigencia/periodicidad. Este documento es de carácter permanente hasta tanto no sean aprobadas otras resoluciones y legislaciones por los organismos rectores de la actividad, y se utilizará cada vez que sea realizada la determinación de manganeso en las heces fecales.
Aprobaciones:
Nombre y apellidos
Cargo Firma Fecha de
implantación 01/09/2011
Elaborado por: Lic. Arelis
Jaime Novas Aspirante a Investigadora Revisado por: Téc. María
Elena Guevara Técnica de Laboratorio Aprobado por: Ing. Heliodora
Díaz Jefa de Departamento
Anexo A. Limpieza de la cristalería. Se limpia la cristalería con detergente, se enjua- ga con agua corriente, destilada y bidestilada. Las cápsulas de porcelana se colocan en mezcla sulfocrómica durante 24 h y luego se lavan como el resto de la cristalería.
Valor de referencia:
– Manganeso en las heces fecales: