Sintonización
automática SWARM
El espectrómetro de masas Agilent 6545 Q-TOF utiliza la sintonización automática SWARM. Las opciones disponibles en la pestaña Sintonización y calibración son distintas para este instrumento.
La sintonización de sistema es la Sintonización automática inicial SWARM que comienza con todos los valores predeterminados e incluye la sintonización del detector. Puede realizar una sintonización de sistema tras seleccionar
estándar (3200 m/z) como rango de masa. Las sintonizaciones de sistema son adecuadas para instalaciones iniciales de sistemas, tras un ciclo de
ventilación, tras la retirada o sustitución de componentes de las ópticas de iones o del analizador de masas, o si la calibración / comprobación de masa o la sintonización de transmisión no se pueden completar con éxito.
Si selecciona bajo (1700 m/z) como rango de masa, no puede realizar una sintonización de sistema. Puede realizar una Sintonización de transmisión que no incluye la sintonización del detector y se parece más a la sintonización estándar en sintonización automática clásica. La sintonización de transmisión debe realizarse con tanta frecuencia como sea preciso (por ejemplo, cuando se analiza una clase distinta de muestras). La mejor práctica es realizar la sintonización de transmisión comenzando desde la última sintonización de sistema del Q-TOF o de la última sintonización del detector, ya que los parámetros del detector y de la resolución no se incluyen en estas sintonizaciones.
1 En la lista Context (Contexto) seleccione Tune (Sintonizar).
Aparece la ventana Tune (Sintonización). Las ventanas Instrument Status (Estado de instrumento), Actuals (Actuales) y Tune (Sintonización) estarán disponibles en el contexto Tune (Sintonización). Observe que puede seleccionar sintonizar el Cuadripolo, el TOF o ambas partes del espectrómetro de masa.
Si se acaba de instalar el software y se ha completado una sintonización automática tal como se describe en la Guía de instalación, vaya a “Conmute la corriente del LC a MS.”en página 37.
Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF
Figura 7 Pestaña Sintonización y calibración para un Agilent Q-TOF serie 6545
2 Desmarque la casilla de verificación Pausa entre sintonizaciones automáticas (para cambio de disolución de calibración).
3 Haga clic sobre la pestaña Instrument State (Estado de instrumento). 4 Seleccione el Rango de masa. Si tiene un Agilent 6545 Q-TOF y selecciona
Bajo (1700 m/z), en la pestaña Sintonización y calibración aparecen opciones adicionales disponibles para sintonización de masas bajas. 5 Seleccione o bien Disabled (Deshabilitado) o Enabled (Habilitado) para
Fast Polarity Switching (Cambio rápido de polaridad).
6 Si está disponible, seleccione el Modo rebanador. Puede pulsar o bien Alta resolución or Alta sensibilidad. Si selecciona cualquiera de las opciones puede ejecutar la Calibración / Comprobación de masa. Se recomienda encarecidamente que seleccione Alta resolución para el Modo rebanador para otros algoritmos de sintonización automática. Debe seleccionar Alta resolución para el Modo rebanador antes de realzar una Sintonización de sistema.
7 Seleccione el modo. Si desea que esté disponible el mayor número de opciones de sintonización, seleccione Rango dinámico extendido (2 GHz). 8 Pulse Apply (Aplicar). Debe pulsar Apply (Aplicar) para que estos cambios
se envíen al instrumento. Las opciones de la pestaña Tune & Calibration (Sintonización y calibración) no se actualizan hasta que pulse Apply (Aplicar).
Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF
Figura 8 Pestaña Instrument State (Estado de instrumento)
9 Haga clic en la pestaña Tune & Calibration (Sintonización y calibración). 10 Marque la polaridad. Puede marcar Positiva, Negativa, o ambas casillas de
verificación. Si ha seleccionado Habilitado para Cambio rápido de polaridad, estas casillas de verificación no estarán disponibles.
11 Haga clic sobre la parte del Q-TOF que se sintonizará. Puede seleccionar cuadripolo, TOF, o Ambos. Si ha seleccionado Habilitado para Cambio rápido de polaridad, estas casillas de verificación no estarán disponibles. 12 Si ha seleccionado Bajo (1700 m/z) como rango de masa, entonces
seleccione el tipo de sintonización automática de masa baja que se
realizará. Si elige cuadripolo o Ambos, la sintonización automática de masa baja de 50 - 1700 m/z se ejecuta automáticamente, y no puede pulsar en ninguna de las otras opciones.
13 Si pulsa en 50 - 250 m/z o en 50 - 750 como el tipo de sintonización automática de masa baja que realizar, marque o desmarque la casilla de verificación Fragile Ions (Iones frágiles). Es aconsejable marcar esta casilla cuando se espera la presencia de moléculas frágiles. Ejemplos de moléculas frágiles incluyen aquellas moléculas que muestran
Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF
14 Pulse Comenzar calibración de masa de TOF o Comenzar comprobación de cuadripolo y calibración de masa de TOF.
La duración de cada sintonización de comprobación es de aproximadamente 30 segundos.
Si los resultados de la sintonización de comprobación son aceptables, puede pasar a “Conmute la corriente del LC a MS.”en página 37.
Si los resultados de la sintonización de comprobación no son aceptables, continúe con paso 15.
15 Si está disponible, pulse Sintonización de transmisión. Pulse Comenzar sintonización de transmisión del TOF o Comenzar sintonización de transmisión del QTOF.
La duración de cada Sintonización de transmisión es aproximadamente de entre seis y diez minutos. Debido a que es un proceso rápido, se recomienda realizar sintonizaciones de transmisión de forma habitual.
Las sintonizaciones de moléculas pequeñas están diseñadas para una sensibilidad incrementada y pueden producir pequeñas pérdidas de resolución para masas que estén fuera de la ventana especificada. Si la resolución obtenida es insuficiente para la aplicación, realice una
sintonización en un rango de m/z mayor. Los iones en valores de m/z más altos que la ventana de masa especificada se reducen comparados con las sintonizaciones de transmisión con tamaños de ventana mayores.
Si la casilla de verificación Iones frágiles está marcada, el voltaje del fragmentador se reduce para minimizar la fragmentación. Esto puede dar lugar a una señal más baja de iones calibrantes comparada con la opción de
Las opciones de esta pestaña solo están disponibles cnado selecciona Bajo (1700 m/z) para el rango de masa y el modo Rango dinámico extendido. Ambas opciones se hallan en la pestaña Estado de instrumento.
Paso 3. Prepare el instrumento TOF y Q TOF
Si los resultados de la sintonización de transmisión son aceptables, puede pasar a “Conmute la corriente del LC a MS.”en página 37.
Si los resultados de la sintonización de transmisión no son aceptables, continúe con paso 16.
16 Pulse Sintonización de sistema. Si esta opción no está disponible, haga lo siguiente:
a Haga clic sobre la pestaña Instrument State (Estado de instrumento). b Seleccione Estándar (3200 m/z) en el rango de masa.
c Pulse Apply (Aplicar).
d Haga clic en la pestaña Tune & Calibration (Sintonización y