THE PATH FORWARD: A TECHNOLOGY-CENTERED APPROACH

Figura 26. Módulo pipetor

El pipeteador contiene un mecanismo complejo de sensores. Trabaja con puntas desechables. En algunos instrumentos, el pipeteador también lleva un dispositivo de control de la presión. El carril guía se utiliza para desplazar el pipeteador en las direcciones X e Y. El pipeteador también puede desplazarse sobre el eje Z. La posición inicial del pipeteador se encuentra situada sobre su espacio de Lavado. El pipeteado de las placas test se realiza cuando estas se encuentran colocadas en su posición de funcionamiento.

45 apertura de la puerta del módulo de muestras y reactivos detendrá automáticamente el funcionamiento del pipeteador. El pipeteador se conecta a la jeringa a través de un tubo (1000 μl) localizado en el panel trasero del aparato, y al contenedor del líquido de sistema a través de la puerta del líquido del sistema. El pipeteador se rellena automáticamente con líquido de sistema durante cada ciclo.

Cuando se hace su reacondicionamiento, se limpia se desinfecta, se desmonta. Se verifica el cable flexible que lo conecta con la tarjeta controladora. Se lubrica el eje que le permite el movimiento y se reemplazan las piezas necesarias. El adaptador de puntas es una pieza muy sensible, se verifica que este en correcto funcionamiento y que logre moverse en el eje Z. Otra parte importante es verificar los motores ya que estos ejercen el movimiento en X y Y, estos movimientos solo se controlan con el encoder del motor. Este encoder está programado para cada milímetro del desplazamiento logrando reflejar movimientos precisos y no exista un choque con las paredes.

46 En esta parte del trabajo se explicara la calibración que se debe realizar en la zona del pipetor, ya que como se mencionó anteriormente, el pipetor es la parte móvil que estará desplazándose en toda la mesa de trabajo, desde el área de placas de dilución hasta el área de pipeteo en microplacas. Cada zona está estrictamente limitada, es decir, en cada zona el pipetor hace una función específica y debe estar precisamente calibrado en cada punto de cada zona para que cada movimiento se encuentre en la posición correcta. Esto lo hace por medio de un programa interno que guarda las coordenadas de cada posición y cuando el pipetor necesita llegar a cierta zona, manda a llamar esas coordenadas para saber hacia dónde dirigirse.

A continuación se muestra el área de pipeteo, esta pantalla es la que el ingeniero de servicio puede ver para esta calibración y saber que zonas o puntos debe calibrar.

Figura 28. Panel de calibración 1 frascos de reactivo y placas de dilución

2 racks de puntas para el tip adapter 3 rack de pacientes y reactivos 4 posición de pipeteo

5 posición de desecho de puntas 6 posición de lavado

7 posición de referencia

47 5.4.1 HERRAMIENTAS PARA LA CALIBRACIÓN

Figura 29. MTP teaching tool

Figura 30. Rack teaching tool

48 5.4.2 CALIBRACIÓN DE LA ZONA DE FRASCOS DE REACTIVO Y PLACAS DE DILUCIÓN

Esta zona cabe mencionar que es muy poca utilizada, salvo algunos procedimientos, aun así la calibración debe incluir esta zona. La calibración o ajuste debe realizarse de tal manera que el pipetor este centrado en la posición de los frascos de reactivo (se coloca 1 frasco en cada posición) para que pueda entrar libremente sin chocar con las paredes, así como también se ajusta la altura hasta donde entrara el pipetor, se aconseja 6 pasos del motor arriba de la base del frasco.

El área de placas de dilución, se calibran las 2 zonas para cada microplaca. El panel de calibración (figura 28) nos muestra tres puntos en cada zona que hay que calibrar, esos tres puntos son a los que se desplazara el pipetor, cada punto se calibra de tal manera que la punta del pipetor (sin punta para reactivo) coincida con el punto de la placa de calibración (figura 29), posteriormente se baja a una altura tal que la punta del pipetor coincida con el ras de la placa ajustando los tres puntos indicados en el panel el sistema electrónico automáticamente interpola los demás puntos de la microplaca.

49 Esta zona es donde el tip adapter tomara las puntas para dispensar muestras o reactivos, por lo tanto se necesita asegurar que el tip adapter tome adecuadamente dicha punta, esto lo hace solamente bajando en el eje Z y a presión se insertara en la punta. La calibración se hace solamente con la base contenedora de puntas (figura 33) y se centra el tip adapter en el espacio de la base y se baja hasta la altura adecuada en que el tip adapter tome la punta adecuadamente.

Figura 33. Calibración de rack de puntas 5.4.4 CALIBRACIÓN DE RACKS DE PACIENTES Y REACTIVOS

Esta zona es en donde se encontraran las muestras de pacientes y reactivos para los protocolos, esta calibración es tal que el pipetor con puntas se introduzca correctamente en los tubos de ensayo (figura 31) o en los frascos de reactivo (figura 34), en el panel de calibración se muestran tres puntos que calibrar y se utiliza la herramienta de la figura 30, se coloca y el pipetor sin punta coincidirá con los puntos indicados de la herramienta, la altura será un paso mínimo arriba de la base de la herramienta. Con esta calibración aseguramos el ajuste de la zona, sin embargo, es necesario ajustar y calibrar en esta zona los racks de pacientes, rack de muestras, rack de controles y rack de reactivos; los racks se colocan con las herramientas necesarias (figura 34) ya sea tubos de ensayo o frascos de reactivos, y el tip adapter con punta chica se calibrara centrado y altura en cada uno 7 pasos mínimos arriba de la base de los contenedores.

50 5.4.5 CALIBRACIÓN DEL ÁREA DE PIPETEO, DESECHO DE PUNTAS Y LAVADO.

En esta zona se incluyen tres partes de la calibración, ya que cuando el pipetor hace el pipeteo en las microplacas, en ese proceso estará desechando las puntas y lavando el pipetor, este proceso lo hará cíclicamente. Por lo tanto la calibración será; en la zona de pipeteo se hará igual que el área de dilución, con la misma herramienta se calibran los tres puntos y el sistema interpolara las coordenadas restantes, esto para las 4 zonas. Se calibran las microplacas que están dadas de alta en el sistema, generalmente las opciones de microplacas de Bio-Rad.

La zona de desecho de puntas solo consiste en que el pipetor baje en el eje Z hasta que la base fija se junte con la base del tip adapter hasta que la punta se deseche por presión.

La zona de lavado solo es centrar el tip adapter en el pocillo de lavado para que el líquido de sistema enjuague y limpie el tip adapter.

51 5.4.6 CALIBRACIÓN DE POSICIÓN DE REFERENCIA Y DETECCIÓN DE PUNTAS

Estas posiciones son rápidas de calibrar pero importantes ya que en la posición de referencias, es el punto donde se toma como inicio y desde ahí se hace el conteo de pasos del motor, es importante que este punto sea el primero en calibrar ya que si no se hace así, y el punto de referencia está mal ubicado, la calibración estará mal.

La detección de puntas es en la base superior del cajón de racks, y esta posición es tal que cuando el tip adapter toma una punta, se desplazara a esa posición para reconocerla, esto lo hace bajando hasta un punto (coordenada) y si en ese lapso no choca con la base, eso lo tomara como punta corta y si encuentra un choque lo tomara como punta larga. Esto se hace para asegurar que está tomando la punta adecuada y no confundirlas para que a la hora de correr el proceso no haya un choque y un error en el ensayo.

52 Esta calibración es debido a que el transportador de placas hace la función de tomar la microplaca y llevarla hasta posicionarla en las posiciones de: pipeteo, lavador, incubadores, lector. Para hacer esto necesita ser ajustado en las coordenadas correctas y precisas las cuales serán mostradas en la siguiente pantalla:

Figura 36. Pantalla de calibración del transportador de placas

Se selecciona la posición a calibrar (lavador, pipeteo, incubadores, lector), se introduce manualmente a la posición y se guardan los datos en coordenadas que se generan cuando se coloca la microplaca. Posteriormente se comprueba haciendo que el sistema electromecánico lo haga sin que exista obstrucción alguna. Así se hace con cada una de las posiciones del transportador.

Para comprobar el funcionamiento, se realiza un protocolo llamado “control plate transport” donde el sistema realizara el procedimiento en cada posición (sacar placa, introducir placa).

53 Durante el reacondicionamiento de equipos automatizados se lograron resultados aceptables para determinar que su funcionamiento es el correcto, logrando ponerlo a disposición para clientes usuarios de estos sistemas. En esta sección se reportaran los datos arrojados por las verificaciones de los equipos, las cuales se toman en cuenta para validar el funcionamiento óptimo durante su servicio. Así como también se mencionara el aporte hacia la compañía y los beneficios que se obtuvieron tanto para Bio-Rad como para mi persona y preparación.