ﯽﺳرﺮﺑ
دﺮﮑﻠﻤﻋ
IRFI005
رد
لﻮﻠﺳ جرﺎﺧ و ﻞﺧاد دازآ يﺎﻫ لﺎﮑﯾدار فﺬﺣ
ﺎﺟﻮﻗ ﺮﻬﭼﻮﻨﻣ ﺋ ﯽ 1 ، ﺮﮔزﺮﺑ ﻞﻀﻔﻟاﻮﺑا 2 هدازﺪﺳا ﺎﺿر ، 3 1( هوﺮﮔ ﯽﺳﺎﻨﺷ ﺖﺴﯾز بﺎﻨﺑ ﺪﺣاو ﯽﻣﻼﺳا دازآ هﺎﮕﺸﻧاد ،ﻪﯾﺎﭘ مﻮﻠﻋ هﺪﮑﺸﻧاد ، 2( ﺰﯾﺮﺒﺗ هﺎﮕﺸﻧاد ،ﻪﯾﺎﭘ مﻮﻠﻋ تﺎﻘﯿﻘﺤﺗ ﺰﮐﺮﻣ ،ﯽﺳﺎﻨﺷ ﺖﺴﯾز هوﺮﮔ 3 ( ﯽﺳﺎﻨﺷ ﺖﺴﯾز هوﺮﮔ ﻪﯿﻣروا ﺪﺣاو ﯽﻣﻼﺳا دازآ هﺎﮕﺸﻧاد ،ﻪﯾﺎﭘ مﻮﻠﻋ هﺪﮑﺸﻧاد ، ﺖﻓﺎﯾرد ﺦﯾرﺎﺗ : 18 /9 / 92 شﺮﯾﺬﭘ ﺦﯾرﺎﺗ : 7/ 12 / 92 ژاو يﺎﻫ ه يﺪﯿﻠﮐ : ،دازآ لﺎﮑﯾدار ﻦﯿﻣﺎﺘﯾو ،ناﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ E ، IRFI005 لﻮﺌﺴﻣ هﺪﻨﺴﯾﻮﻧ : بﺎﻨﺑ ﺪﺣاو ﯽﻣﻼﺳا دازآ هﺎﮕﺸﻧاد ،ﻪﯾﺎﭘ مﻮﻠﻋ هﺪﮑﺸﻧاد ،ﯽﺳﺎﻨﺷ ﺖﺴﯾز هوﺮﮔ Email: Ghojaie@gmail.com هﺪﯿﮑﭼ ﻪﻣﺪﻘﻣ : ﺎﻫ ناﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ ﻪﮐ ﺪﻨﺘﺴﻫ ﯽﯾﺎﻫ لﻮﮑﻟﻮﻣ ﻞﻤﻋ ﻊﻧﺎﻣ ﻦﯿﻣﺎﺘﯾو و هﺪﺷ دازآ يﺎﻫ لﺎﮑﯾدار E ﻦﯾﺮﺗ ﻢﻬﻣ زا ﯽﮑﯾ دﻮﺷ ﯽﻣ بﻮﺴﺤﻣ ﯽﻧاﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ تﺎﺒﯿﮐﺮﺗ . يﺎﻫ ﻂﯿﺤﻣ رد نآ دﺮﺑرﺎﮐ ﻪﻠﺌﺴﻣ ﻦﯿﻤﻫ و ﺖﺳا لﻮﻠﺤﻣﺎﻧ بآ رد ﻦﯿﻣﺎﺘﯾو ﻦﯾا ﯽﻣ دوﺪﺤﻣ ار ﯽﺒﻄﻗ دزﺎﺳ . مﺎﺠﻧا ﺐﯿﮐﺮﺗ ﻦﯾا بآ رد لﻮﻠﺤﻣ يﺎﻫ گﻮﻟﺎﻧآ زا هدﺎﻔﺘﺳا ياﺮﺑ يدﺎﯾز يﺎﻫ ﯽﺳرﺮﺑ ﺮﺿﺎﺣ لﺎﺣ رد دﺮﯾﺬﭘ ﯽﻣ . ﻦﯾا رد ﻦﯿﻣﺎﺘﯾو رﺎﻈﺘﻧا درﻮﻣ صاﻮﺧ ﯽﺳرﺮﺑ رﻮﻈﻨﻣ ﻪﺑ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ E زا ﯽﺒﻄﻗ يﺎﻫ ﻂﯿﺤﻣ رد 005 IRFI ﻪﮐ گﻮﻟﺎﻧآ ﯽﺒﻄﻗ ﯽﻋﺎﻨﺻ و ﻦﯿﻣﺎﺘﯾو E ﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ . ﺎﻫ شور و داﻮﻣ : ﺖﯿﻟﺎﻌﻓ ﯽﺳرﺮﺑ ﯽﻟﻮﻠﺳ نوﺮﺑ ﯽﻧاﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ 005 IRFI جﻮﻣ لﻮﻃ رد ﮏﯾﺮﺘﻣﻮﺘﻓوﺮﺘﮑﭙﺳا شور ﻪﺑ nm 430 و دازآ لﺎﮑﯾدار زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ Galvinoxyl ﯽﻟﻮﻣ يﺎﻫ ﺖﻈﻠﻏ رد 1:4 و 1:2 ) Galvinoxyl : 005 IRFI ( درﻮﻣ ﺖﻓﺮﮔ راﺮﻗ ﯽﺳرﺮﺑ . ﯽﻟﻮﻠﺳ نورد ﺮﺛا µM 5 زا 005 IRFI شور ﻪﺑ ﺰﯿﻧ DCF ﯽﮕﻧر بوﺮﭘ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ و -2 DCFH DA ﺪﺷ ﯽﺳرﺮﺑ ﺪﯾﺎﺴﮐوﺮﭘ ورﺪﯿﻫ ﻦﻣﻮﯿﮐ و . ﺶﻫوﮋﭘ يﺎﻫ ﻪﺘﻓﺎﯾ : IRFI005 رد دﻮﺷ ﯽﻣ ﯽﻧاﺪﯿﺴﮐا ﺖﯿﻟﺎﻌﻓ رﺎﻬﻣ ﺚﻋﺎﺑ لﻮﻠﺳ ﻞﺧاد و جرﺎﺧ . لﺎﮑﯾدار Galvinoxyl ﺖﺒﺴﻧ رد 1:2 يرﻮﻧ بﺬﺟ ياراد ) OD ( ﺖﺳا هﺪﺷ فﺬﺣ ﻂﯿﺤﻣ زا ًﻼﻣﺎﮐ و ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ يﺮﺗ ﻦﯿﯾﺎﭘ . ﺮﻫ لﻮﮑﻟﻮﻣ 005 IRFI ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ دازآ لﺎﮑﯾدار لﻮﮑﻟﻮﻣ ود فﺬﺣ ﻪﺑ ردﺎﻗ . ﺰﯿﻧ لﻮﻠﺳ ﻞﺧاد رد 005 IRFI ﺮﺛا بﻮﮐﺮﺳ ﺚﻋﺎﺑ ﻦﻣﻮﯿﮐ دﻮﺷ ﯽﻣ ﺲﻧﺎﺳرﻮﻠﻓ تﺪﺷ ﺶﯾاﺰﻓا رﺎﻬﻣ و ﺪﯾﺎﺴﮐوﺮﭘ ورﺪﯿﻫ . يﺮﯿﮔ ﻪﺠﯿﺘﻧ و ﺚﺤﺑ : ،ﯽﺒﻄﻗ ﻂﯿﺤﻣ رد ﻪﮐ ﺪﻫد ﯽﻣ نﺎﺸﻧ ﺎﻫ ﻪﺘﻓﺎﯾ 005 IRFI ،يﻮﻗ رﺎﯿﺴﺑ ناﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ ﮏﯾ ددﺮﮔ ﯽﻣ لﻮﻠﺳ جرﺎﺧ و ﻞﺧاد رد ناﺪﯿﺴﮐا لﻮﮑﻟﻮﻣ رﺎﻬﻣ ﺚﻋﺎﺑ ﯽﺑﻮﺧ ﻪﺑ ﻪﮐ ﺖﺳا لﺎﻌﻓ و زود ﻪﺑ ﻪﺘﺴﺑاو .
ﻪﻣﺪﻘﻣ ﻪﺘﺳﻮﯿﭘ رﻮﻃ ﻪﺑ دازآ يﺎﻫ لﺎﮑﯾدار لﻮﻠﺳ ﻞﺧاد رد ﻪﺑ ﻨﻋ ﯽﻣ ﺪﯿﻟﻮﺗ ﮏﯿﻟﻮﺑﺎﺘﻣ يﺎﻫ ﺶﻨﮐاو ﯽﺒﻧﺎﺟ تﻻﻮﺼﺤﻣ ناﻮ ﺪﻧدﺮﮔ . ﻊﺒﻨﻣ ﮏﯾ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ ﺰﯿﻧ ﺎﻫﻮﺗﺮﭘ ضﺮﻌﻣ رد ﻦﺘﻓﺮﮔ راﺮﻗ نوﺮﺑ ﺚﻋﺎﺑ ﺪﻧاﻮﺗ ﯽﻣ داز ﻞﯿﮑﺸﺗ لﺎﮑﯾدار يﺎﻫ دازآ ددﺮﮔ ،) 1 .( ﺖﻔﺟ نوﺮﺘﮑﻟا ياراد تﺎﺒﯿﮐﺮﺗ دازآ يﺎﻫ لﺎﮑﯾدار ﺪﻨﺘﺴﻫ هﺪﺸﻧ ،) 2( ، ﯽﯾﺎﻧاﻮﺗ ﻪﮐ زا يرﺎﯿﺴﺑ ﻪﺑ ندز ﺐﯿﺳآ ﻫ لﻮﮑﻟﻮﻣ و ﺎﻫ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ،ﺎﻫﺪﯿﺳا ﮏﯿﺌﻠﮐﻮﻧ ﻞﺜﻣ ﯽﺘﺴﯾز يﺎ ﺪﻨﺷﺎﺑ ﯽﻣ اراد ار ﺎﻫﺪﯿﭙﯿﻟ و رﺎﺘﺧﺎﺳ رد ﺺﻘﻧ دﺎﺠﯾا ﺚﻋﺎﺑ و ﺪﻧدﺮﮔ ﯽﻣ ﺎﻫ لﻮﮑﻟﻮﻣ ﻦﯾا دﺮﮑﻠﻤﻋ ،) 5 -3( . ﺖﻠﻋ ﻦﯿﻤﻫ ﻪﺑ زا ﺶﯿﺑ و يﺮﯿﭘ هﺪﯾﺪﭘ ﯽﻠﺻا ﻞﻣاﻮﻋ زا ﯽﮑﯾ 100 يرﺎﻤﯿﺑ عﻮﻧ ﺷﺎﺑ ﯽﻣ ﻒﻠﺘﺨﻣ ﻨﺪ ،) 6( . ﯽﺜﻨﺧ و ﻪﻠﺑﺎﻘﻣ ﺖﻬﺟ هﺪﻧز تادﻮﺟﻮﻣ ا ندﻮﻤﻧ زﺎﺳ ياراد ،ﺮﮕﺸﻨﮐاو داﻮﻣ ﻪﻧﻮﮔ ﻦﯾا ﺮﺛ و يﺎﻫرﺎﮐ ﻧاﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ ﯽﻋﺎﻓد يﺎﻫ ﻢﺘﺴﯿﺳ ﻪﻠﻤﺟ زا ﯽﻔﻠﺘﺨﻣ ﯽ ﯽﻣ ﺷﺎﺑ ﻨﺪ ﯽﯾﺎﻫ ﻢﯾﺰﻧآ و ﺎﻫ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﻪﺑ ناﻮﺗ ﯽﻣ ﺎﻫ نآ زا ﻪﮐ زﺎﺗﻮﻤﺴﯾد ﺪﯿﺴﮐا ﺮﭘﻮﺳ ،زاﺪﯿﺴﮐاﺮﭘ ،زﻻﺎﺗﺎﮐ ﺪﻨﻧﺎﻣ ،) 7( ، و ﺎﻫ ﻦﯾرﺎﻣﻮﮐ ﻞﺜﻣ ﯽﮑﭼﻮﮐ يﺎﻫ لﻮﮑﻟﻮﻣ ،) 8( ، ﺎﻫﺪﯿﺋﻮﻧووﻼﻓ ،) 9( ، و ﺎﻫ ﻦﯿﻣﺎﺘﯾو ،) 10،11 (، دﺮﮐ هرﺎﺷا . ﺶﻫﺎﮐ ﺎﻫ ناﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ ﻪﺑ ﯽﺘﺴﯾز ﯽﺳﺮﺘﺳد ﻪﺑ ﺮﺠﻨﻣ ﺪﻧاﻮﺗ ﯽﻣ ﺎﻘﻟا ﯽﺘﻓﺎﺑ يﺎﻫ ﺐﯿﺳآ ء يﺎﻫ ﻪﻧﻮﮔ ﻂﺳﻮﺗ هﺪﺷ لﺎﻌﻓ نﮋﯿﺴﮐا ) ROS ( دﻮﺷ ،) 10 (. ﻦﯿﻣﺎﺘﯾو E ﺑ ﮏﯾ ناﻮﻨﻋ ﻪ ،ناﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ لﻮﮑﻟﻮﻣ ﻞﯿﮑﺸﺗ زا ﺖﻌﻧﺎﻤﻣ ﻪﻠﯿﺳو ﻪﺑ ROS ، ﺳ ار ﺎﻫ لﻮﻠ ﺮﺘﺳا زا ﯽﺷﺎﻧ ﺐﯿﺳآ زا ﺖﻈﻓﺎﺤﻣ ﻮﯿﺗاﺪﯿﺴﮐا س ﺪﯾﺎﻤﻧ ﯽﻣ ،) 11 .( ﻊﻗاو رد ﻦﯿﻣﺎﺘﯾو ﻦﯾا ، ROS ﻪﺑ ار ﺪﻨﮐ ﯽﻣ ﻞﯾﺪﺒﺗ رﺮﺿ ﯽﺑ تﻻﻮﺼﺤﻣ ،) 12 .( ﯿﻣﺎﺘﯾو ﻦ E د ر لﺎﺳ 1922 ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ ياﺮﺑ يروﺮﺿ ﯽﺑﺮﭼ رد لﻮﻠﺤﻣ ﺐﯿﮐﺮﺗ شﻮﻣ ﻞﺜﻣ ﺪﯿﻟﻮﺗ ﺪﺷ ﻪﺘﺧﺎﻨﺷ . لﺎﺳ رد 1950 نآ ﺰﺗراﻮﺷ ﺰﯿﻧ رﻮﺘﮐﺎﻓ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ ار 2 ﯽﻓﺮﻌﻣ دﺮﮐ ﯿﺳ ﺖﺳﺮﻬﻓ رد و يﺎﻫ ﻢﺘﺴ راﺮﻗ ﯽﻟﻮﻠﺳ ناﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ داد ،) 13 (. ﺖﺳا هﺪﺷ ﺖﺑﺎﺛ هزوﺮﻣا ﻦﯿﻣﺎﺘﯾو ﻪﮐ E ﻖﺘﺸﻣ يﺎﻫ لﺎﮑﯾدار و ﺪﯿﭙﯿﻟ نﻮﯿﺳاﺪﯿﺴﮐاﺮﭘ زا ﺮﮕﯾد زا هﺪﺷ ﺶﻨﮐاو يﺎﻫ ﯽﻣ ﻞﻤﻋ ﻪﺑ ﺖﻌﻧﺎﻤﻣ ﻮﯿﺗاﺪﯿﺴﮐا دروآ ،) 14 ( . ﺳ ﻪﺑ ﻪﺟﻮﺗ ﺎﺑ ﺎ نﺎﻤﺘﺧ ﻦﯿﻣﺎﺘﯾو لﻮﮑﻟﻮﻣ E ، نآ ار ﻣ دﺮﮐ ﻢﯿﺴﻘﺗ ﺶﺨﺑ ود ﻪﺑ ناﻮﺗ ﯽ .) رادﻮﻤﻧ ﺷ هرﺎﻤ 1 ( ﮏﯾ ﺶﺨﺑ ياراد نآ ﻞﻣﺎﻋ هﺪﻨﻨﮐ ﻞﻤﺣ ﮏﯿﺗﺎﻣورآ ﻢﺘﺴﯿﺳ ﯽﻧاﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ يﺎﻫ ﯽﮔﮋﯾو لﻮﺌﺴﻣ ﻪﮐ ﺖﺳا ﻞﯿﺴﮐورﺪﯿﻫ ﺖﺳا فوﺮﻌﻣ نﺎﻣوﺮﮐ ﻪﺘﺴﻫ ﻪﺑ و ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ ﻦﯿﻣﺎﺘﯾو . ﺶﺨﺑ عﺎﺒﺷا ﯽﻨﺑﺮﮐورﺪﯿﻫ يﺎﻫ هﺮﯿﺠﻧز زا نآ ﺮﮕﯾد ) لوﺮﻓﻮﮐﻮﺗ ( ﺎﯾ و عﺎﺒﺷاﺮﯿﻏ ) لﻮﻧا يﺮﺗﻮﮐﻮﺗ ( ﺖﯿﻟﻼﺣ رد ﻪﮐ ﺖﺳا هﺪﺷ ﻞﯿﮑﺸﺗ نآ ﺪﻨﻨﮐ ﯽﻣ ﺶﻘﻧ يﺎﻔﯾا ﺎﻫ ﯽﺑﺮﭼ رد ،) 1 .( ﻦﯿﻣﺎﺘﯾو لﺎﻌﻓ مﺮﻓ E دراد مﺎﻧ لوﺮﻓﻮﮐﻮﺗ ﺎﻔﻟآ . ﻦﯿﻣﺎﺘﯾو E ﯿﻟد ﻪﺑ مد ﻦﺘﺷاد ﻞ ًاﺪﯾﺪﺷ ﯽﻧﻻﻮﻃ بﻮﻓورﺪﯿﻫ ﻞﯿﻟد ﻦﯿﻤﻫ ﻪﺑ و ﺖﺳا ﯽﺒﻄﻗﺮﯿﻏ ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ لﻮﻠﺤﻣﺎﻧ بآ رد ،) 13 .( دﻮﺷ ﯽﻣ ﺚﻋﺎﺑ ﯽﮔﮋﯾو ﻦﯾا و نﻮﺧ ،ﯽﺘﻓﺎﺑ نﺎﯿﻣ بآ ﻞﺜﻣ ﯽﺒﻄﻗ يﺎﻫ ﻂﯿﺤﻣ رد ﻪﮐ لوزﻮﺘﯿﺳ ﺪﺷﺎﺑ ﻪﺘﺷاﺪﻧ ﯽﻧاﺪﻨﭼ ﺶﻘﻧ . هزوﺮﻣا شﻼﺗ يﺎﻫ يدﺎﯾز رﺎﯿﺴﺑ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺖﻬﺟ رد يﺎﻫ گﻮﻟﺎﻧآ ﺎﻨﺻ ﯽﻋ بآ رد لﻮﻠﺤﻣ ﺐﯿﮐﺮﺗ ﻦﯾا دﺮﯾﺬﭘ ﯽﻣ ترﻮﺻ رد ﺰﯿﻧ ﺎﻣ و گﻮﻟﺎﻧآ زا ﺎﺘﺳار ﻦﯿﻤﻫ IRFI005 ﻢﯾدﺮﮐ هدﺎﻔﺘﺳا ﻪﮐ ﻪﺘﻓﺮﯾﺬﭘ ترﻮﺻ نآ يور ﺮﺑ ﯽﻤﮐ رﺎﯿﺴﺑ تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ ﺖﺳا ،) 4( ) هرﺎﻤﺷ رادﻮﻤﻧ 1 .( ﻤﯿﺷ لﻮﻣﺮﻓ ﯽﯾﺎﯿ 005 IRFI رد و ﺖﺳا ﯽﺒﻄﻗ ﺐﯿﮐﺮﺗ ﮏﯾ لﻮﮑﻟﻮﻣ ﻦﯾا ﻪﮐ ﺪﻫد ﯽﻣ نﺎﺸﻧ لﻮﮑﻟﻮﻣ نﻮﯿﺳﻼﯿﺘﺳاد ﺮﺛا ) 0016 IRFI ( Raxofelast ﻪﺑ ﺪﯾآ ﯽﻣ دﻮﺟو . ﺖﯿﻟﺎﻌﻓ ﯽﺳﺎﻨﺷوراد تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ زا يرﺎﯿﺴﺑ رد ﯽﻧاﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ 0016 IRFI ﺑ ﺖﺳا هﺪﯿﺳر تﺎﺒﺛا ﻪ ،) 4( . نداد نﺎﺸﻧ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﯾا فﺪﻫ ﯽﻧاﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ صاﻮﺧ 5 00 IRFI د ر ﻂﯿﺤﻣ ﯽﻟﻮﻠﺳ نوﺮﺑ و نورد ﯽﺒﻄﻗ يﺎﻫ ﺖﺳا . ﻣ ﻮ شور و دا ﺎﻫ ا يدﺎﯿﻨﺑ تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ عﻮﻧ زا ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﯾ و ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ يدﺮﺑرﺎﮐ ياﺮﺑ مﺎﺠﻧا نآ ، ﺪﯾﺎﺴﮐاﺮﭘ ورﺪﯿﻫ ﻦﻣﻮﯿﮐ ) cumene : CHP peroxide hydro ( ، ﺖﺸﮐ ﻂﯿﺤﻣ -Dulbecc ( DMEM
o’s modified Eagle’s medium) ، ﮏﯿﺗﻮﯿﺑ ﯽﺘﻧآ ﻠﻤﺟ زا ﻒﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ ﯿﺳ ﯽﻨﭘ ﻪ ﻦﯿﺴﭙﯾﺮﺗ و ﻦﯿﺴﯾﺎﻣﻮﺘﭘﺮﺘﺳا ،ﻦﯿﻠ و دازآ لﺎﮑﯾدار 2,6-di-tert-butyl-alpha-(3,5- ditert-butyl-4-oxo-2,5-cyclohexadien-1-ylidene)-p-tolyloxy (Galvinoxyl) زا ﮐﺮﺷ ﺖ Sigma ﺎﮑﯾﺮﻣآ راﺪﯾﺮﺧ ي ﺪﺷ . ﯽﮕﻧر بوﺮﭘ (DCFH2 -DA) 2',7'-dichlor-odihydrofluorescein diacetate ياﺮﺑ زا ﯽﻟﻮﻠﺳ ﻞﺧاد ﺖﻧاﺪﯿﺴﮐا ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ
Molecular Prob-esInc (Eugene) ﺪﺷ ﻪﯿﻬﺗ . تﺎﻔﺴﻓ ﻢﯾﺪﺳ يد تارﺪﯿﻫ ﺖﮐﺮﺷ زا ﮏﯾﺮﻔﺴﻓﺪﯿﺳا و Merk ﺪﯾدﺮﮔ يراﺪﯾﺮﺧ نﺎﻤﻟآ . ﺖﯿﻠﭘ ،لﻮﻠﺳ ﺖﺸﮐ ﮏﺳﻼﻓ يا هﺮﻔﺣ ﺪﻨﭼ يﺎﻫ ﺖﮐﺮﺷ زا ژﻮﻔﯾﺮﺘﻧﺎﺳ يﺎﻫ ﻪﻟﻮﻟ و Falcon يوﺎﮔ ﻦﯿﻨﺟ مﺮﺳ و كرﺎﻤﻧاد ) FBS ( زا ﺖﮐﺮﺷ GIBCO (Grand Island, NY) ﺗ ﺪﻧﺪﺷ ﻪﯿﻬ . ﺰﯿﻧﻮﯾد بآ زا ﺎﻫ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺮﮕﯾد و ﺎﻫﺮﻓﺎﺑ ﻪﯿﻬﺗ ياﺮﺑ ه زا ﻞﺻﺎﺣ ﺖﮐﺮﺷ هﺎﮕﺘﺳد MicroMed-TKA ﺪﯾدﺮﮔ هدﺎﻔﺘﺳا . يﺎﻫ لﻮﮑﻟﻮﻣ 005 IRFI ﻪﯿﻬﺗ ردﻮﭘ ترﻮﺻ ﻪﺑ و ﺎﯿﻟﺎﺘﯾا زا و ﺪﺷ يراﺪﻬﮕﻧ رﻮﻈﻨﻣ ﻪﺑ ﺎﻣد رد ي 20 -داﺮﮔ ﯽﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟرد ، زا كﻮﺘﺳا لﻮﻠﺤﻣ 005 IRFI لﻼﺣ رد DMSO ) ياﺮﺑ ﺦﯾ رﻮﻠﺑ ﻞﯿﮑﺸﺗ زا ﺖﻌﻧﺎﻤﻣ ( و ﻪﯿﻬﺗ نآ زا تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ ياﺮﺑ ﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا .) 15 (
ﯽﻟﻮﻠﺳ يﺎﻫ ﺖﺸﮐ يزﺎﺳ هدﺎﻣآ : ﻦﯾا مﺎﺠﻧا ياﺮﺑ شﻮﻣ ﯽﺘﻠﮑﺳا تﻼﻀﻋ يﺎﻫ لﻮﻠﺳ زا ﯽﺳرﺮﺑ ) 6 L ( ﻪﮐ زا American Type Culture Collection
) MD , Rockville ; 1458 CRL ( ﺪﻧدﻮﺑ هﺪﺷ ﻪﯿﻬﺗ ﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا . لﻮﻠﺳ يﺎﻫ 6 L ًﻼﺒﻗ ﺶﺠﻨﺳ ياﺮﺑ ROS هدﺎﻔﺘﺳا درﻮﻣ ،ﯽﻫﺎﮕﺸﯾﺎﻣزآ لﺪﻣ ﮏﯾ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ ،ﯽﻟﻮﻠﺳ ﻞﺧاد ﺪﻧا ﻪﺘﻓﺮﮔ راﺮﻗ ،) 16،17 .( ﺳ ﻂﺳﻮﺘﻣ يﺎﻫ ﮏﺳﻼﻓ رد ﺎﻫ لﻮﻠ ﺢﻄﺳ ﺎﺑ 2 cm 72 ﺖﺸﮐ ﻂﯿﺤﻣ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ و DMEM ، L / mmol 2 ،ﻦﯿﻣﺎﺗﻮﻠﮔ يﺎﻫ ﻞﻤﮑﻣ ml / U 100 ﯽﻨﭘ ﻦﯿﻠﯿﺳ ، ml / mg 100 ﻦﯿﺴﯾﺎﻣﻮﺘﭘﺮﺘﺳا و ﯿﻨﺟ مﺮﺳ يوﺎﮔ ﻦ ) vol / vol ( 10 ﺪﺻرد رد ياراد ﻂﯿﺤﻣ 5 ﺪﺻرد ﺪﯿﺴﮐا يد يﺎﻣد و ﻦﺑﺮﮐ 37 داﺮﮔ ﯽﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟرد ﺪﻧﺪﺷ هداد ﺖﺸﮐ . ﺲﭘ زا ﺖﺷﺬﮔ 5 زور ، ﺎﻫ لﻮﻠﺳ ﺪﺷر ﺚﻋﺎﺑ ﺎﮐ ﺶﺷﻮﭘ ﺢﻄﺳ ﻞﻣ ﺎﻫ ﺲﮐﻼﻓ ﺖﺸﮐ ﺪﺷ ، يرﻮﻃ ﻪﺑ ﻪﮐ ﮏﺳﻼﻓ ﺮﻫ ﻄﺳ ﺎﺑ ﺢ 2 cm 72 داﺪﻌﺗ يوﺎﺣ 6 10 × 6 دﻮﺑ لﻮﻠﺳ ژﺎﺳﺎﭘ ﻖﯾﺮﻃ زا و مواﺪﻣ اﻮﻨﻋ ﻪﺑ ن يﺎﻫ لﻮﻠﺳ ﺪﻧﺪﺷ يراﺪﻬﮕﻧ ﺖﺳﻼﺑﻮﯿﻣ . ﯽﺳرﺮﺑ ﯽﻧاﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ ﺮﺛا ﯽﻟﻮﻠﺳ جرﺎﺧ IRFI005 : ﯽﯾﺎﻧاﻮﺗ ﻂﺳﻮﺗ دازآ يﺎﻫ لﺎﮑﯾدار فﺬﺣ ياﺮﺑ ناﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ ﺐﯿﮐﺮﺗ دﻮﺷ ﯽﻣ ﯽﺳرﺮﺑ رﻮﺘﮐﺎﻓ ود : 1 ( يﺎﻫ لﺎﮑﯾدار فﺬﺣ ﺖﻋﺮﺳ و دازآ 2 ( ناﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ لﻮﮑﻟﻮﻣ ﺮﻫ ﻪﮐ ﯽﯾﺎﻫ لﺎﮑﯾدار داﺪﻌﺗ ﺪﻨﮐ فﺬﺣ ﺪﻧاﻮﺗ ﯽﻣ ،) 20 -18 ( . ﻪﺑ ناﻮﺗ ﯽﻣ ار ﺮﺘﻣارﺎﭘ ود ﻦﯾا دراﺪﻧﺎﺘﺳا دازآ يﺎﻫ لﺎﮑﯾدار ﻪﻠﯿﺳو ﯽﺘﻧآ تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ ياﺮﺑ ﯽﻧاﺪﯿﺴﮐا ﻞﺜﻣ -1 -Diphenyl -2,2 ( DPPH ) picrylhydrazyl radical و Galvinoxyl هزاﺪﻧا دﺮﮐ يﺮﯿﮔ ،) 20 -18 (، و ﮏﯾ زا ناﻮﺗ ﯽﻣ رﺎﮐ ﻦﯾا مﺎﺠﻧا ياﺮﺑ هﺎﮕﺘﺳد هدﺎﻔﺘﺳا ﺮﺘﻣﻮﺘﻓوﺮﺘﮑﭙﺳا دﻮﻤﻧ ،) 0 2 .( تاﺮﺛا ﯽﺳرﺮﺑ ﯽﻟﻮﻠﺳ جرﺎﺧ ﯽﻧاﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ 005 IRFI شور سﺎﺳا ﺮﺑ ﻦﯿﻘﻘﺤﻣ ﺮﯾﺎﺳ ﻂﺳﻮﺗ هﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا مﺎﺠﻧا ﯽﺘﻧآ ﺮﺛا ﻪﮐ ﺖﻓﺮﯾﺬﭘ يور ﺮﺑ ار صﺎﺧ ﺐﯿﮐﺮﺗ ﮏﯾ ﯽﻧاﺪﯿﺴﮐا ﻦﯾا يﺎﻫ لﺎﮑﯾدار ﺪﻧدﻮﺑ هدﺮﮐ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ دراﺪﻧﺎﺘﺳا دازآ ،) 23 -21 .( ،ﺶﺨﺑ ﻦﯾا رد زا مزﻻ ﺖﻈﻠﻏ ﻞﻗاﺪﺣ IRFI005 ﺑ ﻦﯿﺑ زا ياﺮ و ندﺮﺑ يﺎﻫ لﺎﮑﯾدار ﻞﻣﺎﮐ ندودز Galvinoxyl نﺎﻣز تﺪﻣ رد 10 ﺖﻓﺮﮔ راﺮﻗ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ درﻮﻣ ﻪﻘﯿﻗد . رﺎﮐ ﻦﯾا ياﺮﺑ ml 1 زا لﻮﻠﺤﻣ Galvinoxyl د ﺖﻈﻠﻏ يارا M μ 10 ﺑ ﺮﺜﮐاﺪﺣ ﺎ L μ 10 لﻮﻠﺤﻣ زا 005 IRFI ﻣ ﺎﺗ ﺪﯾدﺮﮔ طﻮﻠﺨ ﻠﻏ ﻈ يﺎﻫ ﺖ 1:2 و 1:4 ) Galvinoxyl : 005 IRFI ( ددﺮﮔ ﻪﯿﻬﺗ . ﯿﻬﺗ ﻒﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ ﺖﻈﻠﻏ هﺪﺷ ﻪ يﺎﻣد رد ، 37 ﯽﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟرد داﺮﮔ ﺑ ور ﺮ ي ml 2 ﺲﯾﺮﺗ ﺮﻓﺎﺑ ) mM 20 ، 4/ 7 = PH ( ﻪﻓﺎﺿا ﺪﺷ و PH زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ HCL ﺖﻈﻠﻏ ﺎﺑ mM 1 /0 و NaOH ﺖﻈﻠﻏ ياراد mM 1 /0 دﺪﻋ يور ﺮﺑ 8/ 6 ﻢﯿﻈﻨﺗ ﺪﯾدﺮﮔ ،) 1،24،25 (. بﺬﺟ ﻢﻤﯾﺰﮐﺎﻣ تﺪﺷ ﯽﻔﯿﻃ تاﺮﯿﯿﻐﺗ لﺎﮑﯾدار Galvinoxyl د ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ درﻮﻣ نﺎﻣز لﻮﻃ ر ، ﺎﺑ ا ﯽﺑﺬﺟ ﯽﭘﻮﮑﺳوﺮﺘﮑﭙﺳا زا هدﺎﻔﺘﺳ ) Elmer -Perkin Italia , Roma , 201 Lambda EZ ( جﻮﻣ لﻮﻃ رد و nm 430 ﯽﺳرﺮﺑ ﺪﺷ . ﯽﻟﻮﻠﺳ ﻞﺧاد ﯽﻧاﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ تاﺮﺛا ﯽﺳرﺮﺑ IRFI005 : ﯽﻟﻮﻠﺳ ﻞﺧاد ﯽﻧاﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ ﺮﺛا ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ياﺮﺑ IRFI005 زا شور DCF ﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا ،) 15،16،26 .( ﯽﮕﻧر بوﺮﭘ DA -2 DCFH درﻮﻣ شور ﻦﯾا رد هدﺎﻔﺘﺳا هدﺎﻣ ﮏﯾ ﻪﮐ ﺖﺳا ﮏﯿﻠﯿﻓورﺪﯿﻫ ﯽﯾﺎﻧاﻮﺗ ﯽﺳرﺮﺑ ياﺮﺑ لﻮﻤﻌﻣ رﻮﻃ ﻪﺑ لﻮﮑﻟﻮﻣ ﺲﻧﺎﺳرﻮﻠﻓ رﻮﻧ رﺎﺸﺘﻧا زا يﺮﯿﮔﻮﻠﺟ رد ناﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ دﻮﺷ ﯽﻣ ﻪﺘﻓﺮﮔ رﺎﮐ ﻪﺑ ،) 20،26،27 .( ﻦﯾا رد ﯽﺳرﺮﺑ اﺪﺘﺑا ﺖﻋﺎﺳ ﻢﯿﻧ تﺪﻣ ﻪﺑ هﺪﺷ هداد ﺖﺸﮐ يﺎﻫ لﻮﻠﺳ رد يﺎﻣد 37 داﺮﮔ ﯽﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟرد د ﺮﻌﻣ ر ض DA -2 DCFH ﺑ ﺖﻈﻠﻏ ﺎ µM 10 ﺘﻓﺮﮔ راﺮﻗ ﺪﻨ . ﺎﺸﻏ زا ﯽﺘﺣار ﻪﺑ لﻮﮑﻟﻮﻣ ﻦﯾا ء رﻮﺒﻋ ﯽﻟﻮﻠﺳ ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ ﺲﻧﺎﺳرﻮﻠﻓ ﺖﯿﺻﺎﺧ ﺪﻗﺎﻓ ﯽﻟو ﺪﻨﮐ ﯽﻣ ،) 26 ( . رد ﻪﺘﺷادﺮﺑ زاﺮﺘﺳا ﻢﯾﺰﻧآ ﻂﺳﻮﺗ نآ تﺎﺘﺳا هوﺮﮔ لﻮﻠﺳ ﻞﺧاد ﺑ و هﺪﺷ ﻪ 2 DCFH ددﺮﮔ ﯽﻣ ﻞﯾﺪﺒﺗ ،) 26 (. لﻮﮑﻟﻮﻣ DCFH2 ًﺎﺻﻮﺼﺨﻣ و دازآ يﺎﻫ لﺎﮑﯾدار رﻮﻀﺣ رد ROS ﻪﺑ ﻪﺑ ﻞﯾﺪﺒﺗ و هﺪﺷ هﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﺣار DCF ًاﺪﯾﺪﺷ ﻪﮐ دﻮﺷ ﯽﻣ ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ ﺲﻧﺎﺳرﻮﻠﻓ ،) 4،26 (. يزﺎﺳ ﻖﯿﻗر زا ﺲﭘ CHP رد DMSO ﺑ ﺖﺒﺴﻧ ﺎ 1 ﻪﺑ 100 ، ﻞﻣﺎﻋ ﻦﯾا ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ ءﺰﺟ ﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا لﺎﮑﯾدار هﺪﻨﻨﮐ دﺎﺠﯾا ،) 8 22،2 (. CHP زا ﯽﮑﯾ يﺎﻫ ﻪﻄﺳاو ﻊﺒﻨﻣ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ ﻪﮐ ﺖﺳا هﺪﻨﻨﮐ ﺪﯿﺴﮐا ﻞﻣاﻮﻋ ﮐا لﺎﻌﻓ ﯽﻣ راﺮﻗ هدﺎﻔﺘﺳا درﻮﻣ لﻮﻠﺳ ﻞﺧاد رد نﮋﯿﺴ دﺮﯿﮔ ،) 8 2 .( رﺎﻤﯿﺗ زا ﺪﻌﺑ ﺮﻓﺎﺑ ﺎﺑ رﺎﺑ ود ﺎﻫ لﻮﻠﺳ ، PBS ) buffered saline -phosphate ( يﺎﻣد ياراد 37 ﻪﺟرد داﺮﮔ ﯽﺘﻧﺎﺳ ﺷ و ﻮﺸﺘﺴ رد رود RPM 1200 تﺪﻣ ﻪﺑ 5 ﻪﻘﯿﻗد ًادﺪﺠﻣ و ﺪﻧﺪﯾدﺮﮔ ژﻮﻔﯾﺮﺘﻧﺎﺳ ﻮﻀﺣ رد ر M μ 5 زا 005 IRFI ﻗ ﺪﻨﺘﻓﺮﮔ راﺮ . ﺎﯾزرا زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ ﺎﻫ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﯽﺑ ﺎﮕﺘﺳد ه ﺲﻧﺎﺳرﻮﻠﻓوﺮﺘﮑﭙﺳا ) Japan , 2700 -Hitachi F ( ﮏﯾﺮﺤﺗ جﻮﻣ لﻮﻃ رد nm 498 ﺮﺸﻧ و nm 530 ترﻮﺻ ﺖﻓﺮﯾﺬﭘ . ﺶﯾاﺰﻓا ROS نﺪﺷ ﺪﯿﺴﮐا ﻪﺑ ﺮﺠﻨﻣ ﯽﻟﻮﻠﺳ ﻞﺧاد 2 DCFH و دﻮﺷ ﯽﻣ يﺎﻫ لﻮﮑﻟﻮﻣ رﻮﻀﺣ ترﻮﺻ رد 005 IRFI ﻦﯾا ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻧاﺪﯿﺴﮐا ﺪﺿ تاﺮﺛا ياراد ﻪﮐ ا ﻞﺑﺎﻗ ﺖﯿﺻﺎﺧ ﺖﺳا ﯽﺑﺎﯾزر . ﺶﻫوﮋﭘ يﺎﻫ ﻪﺘﻓﺎﯾ دازآ لﺎﮑﯾدار سﺎﺳا ﺮﺑ ﯽﺠﻨﺳ ﻒﯿﻃ ﺞﯾﺎﺘﻧ Galvinoxyl رادﻮﻤﻧ رد هرﺎﻤﺷ 2 يﺎﯿﺣا ناﺰﯿﻣ ﺮﮕﻧﺎﺸﻧ Galvinoxyl ﻒﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ ﺖﻈﻠﻏ ﺎﺑ IRFI005 لﻮﻃ رد جﻮﻣ nm 430 ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ . زا ﺪﻌﺑ 2 ﯽﻟﻮﻣ يﺎﻫ ﺖﺒﺴﻧ ﻪﻘﯿﻗد زا ﻒﻠﺘﺨﻣ IRFI005 لﺎﮑﯾدار يور ﺮﺑ Galvinoxyl
ﺎﺿا دﻮﺷ ﯽﻣ ﻪﻓ . ﺖﻈﻠﻏ 1:4 ياراد OD رد يا ﻪﺘﻓﺎﯾ ﺶﯾاﺰﻓا ﺖﻈﻠﻏ ﺎﺑ ﻪﺴﯾﺎﻘﻣ 1:2 ناﻮﺗ ندﻮﺑ ﯽﻓﺎﮐﺎﻧ ﺮﮕﻧﺎﺸﻧ ﻪﮐ ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ لﻮﮑﻟﻮﻣ ﮏﯾ 005 IRFI ندودز ياﺮﺑ 4 لﺎﮑﯾدار لﻮﮑﻟﻮﻣ ﯽﻟﺎﺣ رد ،ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ دازآ ﯽﻟﻮﻣ ﺖﻈﻠﻏ رد ﻪﮐ 1:2 ود ﺮﻫ ﺚﻋﺎﺑ ﺮﻣا ﻦﯾا و دﻮﺷ ﯽﻣ هدودز ﻂﯿﺤﻣ زا ًﻼﻣﺎﮐ لﺎﮑﯾدار ﺶﻫﺎﮐ OD ددﺮﮔ ﯽﻣ . ﺮﻫ ﻪﮐ ﺖﺳا ﺮﻣا ﻦﯾا ﺮﮕﻧﺎﯿﺑ ﻪﺘﻓﺎﯾ ﻦﯾا لﻮﮑﻟﻮﻣ IRFI005 دازآ لﺎﮑﯾدار لﻮﮑﻟﻮﻣ ود فﺬﺣ ﻪﺑ ردﺎﻗ Galvinoxyl ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ ﻂﯿﺤﻣ زا . ﯽﻟﻮﻠﺳ ﻞﺧاد ﯽﻧاﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ ﺖﯿﻟﺎﻌﻓ ناﺰﯿﻣ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ياﺮﺑ 005 IRFI ﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا ﺖﺳﻼﺑﻮﯿﻣ ﯽﻟﻮﻠﺳ ﺖﺸﮐ زا . ﻪﻘﯿﻗد ﺎﺗ 2 ﺖﺑﺎﺛ ًﺎﺒﯾﺮﻘﺗ ﺲﻧﺎﺳرﻮﻠﻓ تﺪﺷ ﯽﻟو ﺖﺳا ندوﺰﻓا CHP رد ﻪﻘﯿﻗد 2 ﺲﻧﺎﺳرﻮﻠﻓ تﺪﺷ ﻊﯾﺮﺳ ﺶﯾاﺰﻓا ﺚﻋﺎﺑ ﺪﺷ ﻪﮐ ﻦﯿﻤﻫ ﺶﯾاﺰﻓا لﺎﻌﻓ يﺎﻫ ﻪﻧﻮﮔ ﻊﯾﺮﺳ نﺪﻣآ دﻮﺟو ﻪﺑ هﺪﻨﻫد نﺎﺸﻧ ﻪﻠﯿﺳو ﻪﺑ نﮋﯿﺴﮐا CHP ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ . ﺶﺨﺑ ﻦﯾا رد ﻞﯿﻟد ﻪﺑ رد ﺎﻫ لﻮﻠﺳ رﺎﻤﯿﺗ ﻪﻘﯿﻗد 5 ﺑ ﺎ ﻈﻠﻏ ﺖ µM 5 ا ز 005 IRFI ، IRFI005 ﺑ ﺚﻋﺎ ﺮﺛا بﻮﮐﺮﺳ CHP ﮐ دﻮﺷ ﯽﻣ ﺖﯾﺎﻬﻧ رد ﻪ ﺲﻧﺎﺳرﻮﻠﻓ تﺪﺷ ﺶﯾاﺰﻓا زا يﺮﯿﮔﻮﻠﺟ DCF لﺎﺒﻧد ﻪﺑ ار دراد .) رادﻮﻤﻧ هرﺎﻤﺷ 3( تﺪﺷ رادﻮﻤﻧ رد ﯽﮕﺘﺴﮑﺷ دﺎﺠﯾا ﺲﻧﺎﺳرﻮﻠﻓ DCF ندﺮﮐ ﻪﻓﺎﺿا ﺎﺑ IRFI005 ﯽﯾﺎﻧاﻮﺗ ﺮﮕﻧﺎﯿﺑ ذﻮﻔﻧ IRFI005 ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ لﻮﻠﺳ ﻞﺧاد ﻪﺑ . هرﺎﻤﺷ رادﻮﻤﻧ 1 . A ( ﻦﯿﻣﺎﺘﯾو لﻮﮑﻟﻮﻣ E : ياراد ﺮﺳ ﺖﻤﺴﻗ رد نﺎﻣوﺮﮐ ﮏﯿﺗﺎﻣورآ ﺶﺨﺑ و ﺪﻨﻠﺑ ﯽﻨﺑﺮﮐورﺪﯿﻫ مد ،) 1 ( . B ( لﻮﮑﻟﻮﻣ 005 IRFI : ياراد ﺮﺳ ﺖﻤﺴﻗ رد نﺎﻣوﺮﮐ ﮏﯿﺗﺎﻣورآ ﺶﺨﺑ و دﻮﺧ هﺎﺗﻮﮐ ﯽﺒﻧﺎﺟ هﺮﯿﺠﻧز رد ﻞﯿﺴﮐورﺪﯿﻫ هوﺮﮔ .) 4 (
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 0 1 2 3 4Time (min)5 6 7 8 9 10 O D 4 3 0 1:4 1:2 0 5 10 15 20 25 0 3 Time (min) 5 R el a ti v e F L U هرﺎﻤﺷ رادﻮﻤﻧ 2 . دازآ لﺎﮑﯾدار فﺬﺣ ناﻮﺗ ﻪﺴﯾﺎﻘﻣ Galvinoxyl ﻂﺳﻮﺗ 005 IRFI ﻒﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ ﺖﻈﻠﻏ رد : ﻒﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ ﺖﻈﻠﻏ رﻮﻀﺣ 005 IRFI Galvinoxyl : ﺎﯿﺣا ﺚﻋﺎﺑ ء و رﻮﮐﺬﻣ لﺎﮑﯾدار ﻦﺘﻓر ﻦﯿﺑ زا ددﺮﮔ ﯽﻣ . ﺖﻈﻠﻏ 1:4 ياراد OD ﺖﻈﻠﻏ ﺎﺑ ﻪﺴﯾﺎﻘﻣ رد يا ﻪﺘﻓﺎﯾ ﺶﯾاﺰﻓا 1:2 ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ لﻮﮑﻟﻮﻣ ﮏﯾ ناﻮﺗ ندﻮﺑ ﯽﻓﺎﮐﺎﻧ ﺮﮕﻧﺎﺸﻧ ﻪﮐ 005 IRFI ندودز ياﺮﺑ 4 ﺎﺑ ﯽﻣ دازآ لﺎﮑﯾدار لﻮﮑﻟﻮﻣ ﯽﻟﺎﺣ رد ،ﺪﺷ ﯽﻟﻮﻣ ﺖﻈﻠﻏ رد ﻪﮐ 1:2 ود ﺮﻫ ﺮﺘﺸﯿﺑ ﺶﻫﺎﮐ ﺚﻋﺎﺑ ﺮﻣا ﻦﯾا و دﻮﺷ ﯽﻣ هدودز ﻂﯿﺤﻣ زا ًﻼﻣﺎﮐ لﺎﮑﯾدار OD ﺖﻈﻠﻏ ﺎﺑ ﻪﺴﯾﺎﻘﻣ رد 1:4 ددﺮﮔ ﯽﻣ . هرﺎﻤﺷ رادﻮﻤﻧ 3 . ﯽﻟﻮﻠﺳ ﻞﺧاد ﯽﻧاﺪﯿﺴﮐا ﺪﺿ تاﺮﺛا 005 IRFI : ندوﺰﻓا CHP زا ﺪﻌﺑ 2 ار ﺲﻧﺎﺳرﻮﻠﻓ تﺪﺷ ﻊﯾﺮﺳ ﺶﯾاﺰﻓا ﻪﻘﯿﻗد ﺖﺷاد ﯽﭘ رد . ﻂﺳﻮﺗ نﮋﯿﺴﮐا لﺎﻌﻓ يﺎﻫ ﻪﻧﻮﮔ ﻞﯿﮑﺸﺗ ﺮﮕﻧﺎﺸﻧ ﺲﻧﺎﺳرﻮﻠﻓ تﺪﺷ ﺶﯾاﺰﻓا ﻦﯾا CHP ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ . ندوﺰﻓا ﻪﻣادا رد M μ 5 زا 005 IRFI ) ﻪﻘﯿﻗد رد 5 ( ﺮﺛا رﺎﻬﻣ ﻪﺑ ﺮﺠﻨﻣ CHP ﺲﻧﺎﺳرﻮﻠﻓ تﺪﺷ ﺶﯾاﺰﻓا زا و هﺪﺷ DCF ﺪﻨﮐ ﯽﻣ يﺮﯿﮔﻮﻠﺟ . ﺲﻧﺎﺳرﻮﻠﻓ تﺪﺷ رادﻮﻤﻧ رد ﯽﮕﺘﺴﮑﺷ دﺎﺠﯾا DCF ﺎﺑ دﺮﮐ ﻪﻓﺎﺿا ن IRFI005 ذﻮﻔﻧ ﯽﯾﺎﻧاﻮﺗ ﺮﮕﻧﺎﯿﺑ IRFI005 ﻪﻘﯿﻗد زا ﺪﻌﺑ هﺪﺷ هﺪﻫﺎﺸﻣ ﺶﯾاﺰﻓا و ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ لﻮﻠﺳ ﻞﺧاد ﻪﺑ 5 ﺖﺳا ﯽﻧﺎﻣز تﺪﻣ ﺮﮕﻧﺎﯿﺑ ﺎﺗ ﺪﺸﮐ ﯽﻣ لﻮﻃ ﻪﮐ IRFI005 ﯽﻧاﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ ﺮﺛا ،نآ زا ﺪﻌﺑ و ﺪﻨﮐ رﺎﻬﻣ ﻞﻣﺎﮐ رﻮﻃ ﻪﺑ ار ناﺪﯿﺴﮐا لﻮﮑﻟﻮﻣ IRFI005 تﺪﺷ ندﺮﮐ ﺖﺑﺎﺛ ﺎﺑ ﺷﺎﺑ ﯽﻣ دﻮﻬﺸﻣ ﺲﻧﺎﺳرﻮﻠﻓ ﺪ.
ﺚﺤﺑ يﺮﯿﮔ ﻪﺠﯿﺘﻧ و ﻦﯿﻣﺎﺘﯾو E ﯽﺑﺮﭼ رد لﻮﻠﺤﻣ ناﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ لﻮﮑﻟﻮﻣ ﮏﯾ ﻠﻏ ﻦﯾﺮﺘﺸﯿﺑ ﻪﮐ ﺖﺳا ﻈ هﮋﯾو ﻪﺑ و ﯽﻟﻮﻠﺳ يﺎﻫﺎﺸﻏ رد نآ ﺖ ﯽﻣ هﺪﻫﺎﺸﻣ ﺎﻫ موزوﺮﮑﯿﻣ و يرﺪﻨﮐﻮﺘﯿﻣ يﺎﻫﺎﺸﻏ دﻮﺷ ،) 4،14 .( لﻮﮑﻟﻮﻣ IRFI005 ﯾ يﺎﻫ گﻮﻟﺎﻧآ زا ﯽﮑ ﯽﻋﺎﻨﺻ ﻦﯿﻣﺎﺘﯾو E ﺑ هدﻮ ﻪﮐ ندﻮﺑ ﯽﺒﻄﻗ ﻞﯿﻟد ﻪﺑ ﻂﯿﺤﻣ رد ﯽﺒﻄﻗ بآ ﻞﺜﻣ ﻂﯿﺤﻣ رد ﺪﻧاﻮﺗ ﯽﻣ و ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ لﻮﻠﺤﻣ يﺎﻫ اﻮﺧ ﯽﺑآ ﺪﺷﺎﺑ ﻪﺘﺷاد ﯽﺑﻮﺧ ﯽﻧاﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ ص ،) 4( ) رادﻮﻤﻧ هرﺎﻤﺷ 1 (. رد PH رد دﻮﺟﻮﻣ ﻞﺴﮐورﺪﯿﻫ هوﺮﮔ ﮏﯾژﻮﻟﻮﯾﺰﯿﻓ ﺖﯿﻌﻗﻮﻣ 2 ﯽﺒﻧﺎﺟ هﺮﯿﺠﻧز ﺐﯿﮐﺮﺗ ﻦﯾا رد نآ ﺖﯿﻟﻼﺣ ﺐﺟﻮﻣ ﯽﻣ ﯽﺑآ يﺎﻫ ﻂﯿﺤﻣ ددﺮﮔ .) 4( دازآ يﺎﻫ لﺎﮑﯾدار Galvinoxyl رد nm 430 ياراد ﺪﻨﺷﺎﺑ ﯽﻣ بﺬﺟ ﻢﻤﯾﺰﮐﺎﻣ ،) 20 ( . تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ زا ﻞﺻﺎﺣ ﺞﯾﺎﺘﻧ ياﺮﺑ ﯽﺑﺬﺟ ﯽﺠﻨﺳ ﻒﯿﻃ Galvinoxyl ﺪﻫد ﯽﻣ نﺎﺸﻧ ﺎﯿﺣا ء دازآ لﺎﮑﯾدار يﺎﻫ لﻮﮑﻟﻮﻣ Galvinoxyl لﻮﮑﻟﻮﻣ ﻪﺑ نآ بﺬﺟ تﺪﺷ ﻦﺘﻓر ﻦﯿﺑ زا ﺚﻋﺎﺑ ﯽﺜﻨﺧ راﺪﯾﺎﭘ يﺎﻫ رد ﺎﻫ جﻮﻣ لﻮﻃ nm 430 دﻮﺷ ﯽﻣ .) رادﻮﻤﻧ هرﺎﻤﺷ 2 ( تاﺮﯿﯿﻐﺗ و ﺪﯾﺪﺟ يﺎﻫ لﻮﮑﻟﻮﻣ نﺪﻣآ دﻮﺟو ﻪﺑ هﺪﻨﻫد نﺎﺸﻧ رﻮﮐﺬﻣ رﻮﻀﺣ رد دازآ لﺎﮑﯾدار زا راﺪﯾﺎﭘ IRFI005 ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ . ﻦﯾا ﻢﻫ ﺎﻫ هداد يﺎﯾﻮﮔ ﻦﯿﻨﭼ ﺖﻈﻠﻏ رد ﻪﮐ ﺖﺳا ﺖﯿﻌﻗاو ﻦﯾا ﻒﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ IRFI005 ﺎﯿﺣا ًﺎﻌﯾﺮﺳ دازآ لﺎﮑﯾدار ، ء دﻮﺷ ﯽﻣ ﯽﻟﻮﻣ ﺖﻈﻠﻏ رد و 1:2 ر ًﻼﻣﺎﮐ دازآ لﺎﮑﯾدا ﯽﻣ ﻦﯿﺑ زا دور . ندﻮﺑ زود ﻪﺑ ﻪﺘﺴﺑاو زا ﺰﯿﻧ ﺮﮕﯾد ﯽﺳرﺮﺑ ﮏﯾ يﺎﻫ ﻪﺘﻓﺎﯾ ﺪﻨﮐ ﯽﻣ ﺖﯾﺎﮑﺣ ﺐﯿﮐﺮﺗ ﻦﯾا ﺖﯿﻟﺎﻌﻓ ناﺰﯿﻣ يرﻮﻃ ﻪﺑ ، ﻪﮐ ﺎﺑ ﺖﻈﻠﻏ ﺶﯾاﺰﻓا IRFI005 ﺲﻧﺎﺳرﻮﻠﻓ ناﺰﯿﻣ DCF ور ﺰﯿﻧ دراﺬﮔ ﯽﻣ ﺶﻫﺎﮐ ﻪﺑ ،) 4 .( ﺮﺑ ﺖﻟﻻد ﺮﺿﺎﺣ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ يﺎﻫ ﻪﺘﻓﺎﯾ يﻻﺎﺑ ﻞﯿﺴﻧﺎﺘﭘ و ﯽﯾﺎﻧاﻮﺗ 005 IRFI لﺎﮑﯾدار فﺬﺣ ياﺮﺑ ﻫ ﻢﮐ نﺎﻣز تﺪﻣ رد لﺎﻌﻓ دازآ يﺎ ) دوﺪﺣ رد 5 ﻪﻘﯿﻗد ( و دازآ لﺎﮑﯾدار ﺮﺘﻤﮐ ﺖﻈﻠﻏ ﻦﯾا زا ﺖﺑﺎﺛ ﺖﻈﻠﻏ ﮏﯾ رﻮﻀﺣ رد ﻦﯿﻣﺎﺘﯾو ﯽﻋﺎﻨﺻ گﻮﻟﺎﻧآ E د يرﻮﻃ ﻪﺑ درا ﺖﺒﺴﻧ رد ﻪﮐ 1:2 بﺬﺟ تﺪﺷ Galvinoxyl ﺖﺒﺴﻧ ﺎﺑ ﻪﺴﯾﺎﻘﻣ رد 1:4 ﺶﻫﺎﮐ ﺪﻫد ﯽﻣ نﺎﺸﻧ .) رادﻮﻤﻧ هرﺎﻤﺷ 2 ( اﺬﻟ لﺎﻤﺘﺣا ﻪﺑ ناﻮﺗ ﯽﻣ ﮐ ﯽﻨﯿﺑ ﺶﯿﭘ ﻪﮐ دﺮ IRFI005 ﻣ ناﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ ﮏﯾ ﺪﻧاﻮﺗ ﯽ ﺑ ﺎﺑ ﻪﮐ ﯽﻨﻌﻣ ﻦﯾﺪﺑ ﺪﺷﺎﺑ ﺎﻫ لﻮﻠﺳ و ﺎﻫ ﺖﻓﺎﺑ ياﺮﺑ ﺐﺳﺎﻨﻣ ﻪ لﺎﮑﯾدار زا ﺖﺒﺴﻧ ود فﺬﺣ ياﺮﺑ ﻦﯿﻌﻣ ﺖﺒﺴﻧ ﮏﯾ ندﺮﺑ رﺎﮐ ، ﯽﻣ لﺎﻤﻋا ار دﻮﺧ ﯽﻧاﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ ﻞﻤﻋ كﺪﻧا نﺎﻣز تﺪﻣ رد ﺪﻨﮐ . ﯽﯾﺎﻧاﻮﺗ يور ﺮﺑ ﯽﺳرﺮﺑ ﮏﯾ ﯽﻃ رد IRFI005 ﮑﻟﻮﻣ ﻦﯾا ﻪﮐ ﺪﺷ ﺺﺨﺸﻣ ﺎﯿﺣا ﺖﯿﻟﺎﻌﻓ لﻮ ء رﺎﯿﺴﺑ ﯽﮔﺪﻨﻨﮐ ﺖﺳاراد ار ﺪﯿﺴﮐا ﺮﭘﻮﺳ ياﺮﺑ ﯽﺑﻮﺧ . ﻢﻫ نﺎﺸﻧ ﺎﻫ نآ ﻦﯿﻨﭼ لﻮﮑﻟﻮﻣ ﻦﯾا ﻪﮐ ﺪﻧداد ﮏﯿﻧﺎﮔرا يﺎﻫ لﺎﮑﯾدار بورﺎﺟ ﯽﯾﺎﻧاﻮﺗ ﻦﯿﻠﮑﯾﺎﺳاﺮﺘﻧآ و مﻮﯿﻨﯾﺪﯾﺮﭘ ﯽﺑ ﻞﺜﻣ راد ﯽﺑﻮﺧ ﻪﺑ ار ﯽﻣ ﺪﺷﺎﺑ .) 4( ﯽﻟﻮﻠﺳ ﻞﺧاد ﯽﻧاﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ تاﺮﺛا ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﺰﯿﻧ ﯽﻣ نﺎﺸﻧ ﻪﮐ ﺪﻫد CHP ﮏﯾ ﺐﯿﮐﺮﺗ و ﺖﺳا يﻮﻗ رﺎﯿﺴﺑ ﺖﻧاﺪﯿﺴﮐا ﺶﯾاﺰﻓا ياﺮﺑ نآ ﺮﺛا ROS ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ ﯽﻧآ ﯽﻟﻮﻠﺳ ﻞﺧاد ، اﺮﯾز ندوﺰﻓا CHP ﻪﻘﯿﻗد رد 2 تﺪﺷ ﻊﯾﺮﺳ ﺶﯾاﺰﻓا ﺚﻋﺎﺑ ﺪﺷ ﺲﻧﺎﺳرﻮﻠﻓ .) هرﺎﻤﺷ رادﻮﻤﻧ 3 ( CHP ﻞﻣاﻮﻋ زا ﯽﮑﯾ لﺎﻌﻓ يﺎﻫ ﻪﻄﺳاو ﻊﺒﻨﻣ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ ﻪﮐ ﺖﺳا هﺪﻨﻨﮐﺪﯿﺴﮐا دﺎﻔﺘﺳا درﻮﻣ لﻮﻠﺳ ﻞﺧاد رد نﮋﯿﺴﮐا دﺮﯿﮔ ﯽﻣ راﺮﻗ ه ،) 5 2 .( لﻮﮑﻟﻮﻣ 2 DCFH د ًﺎﺻﻮﺼﺨﻣ و دازآ يﺎﻫ لﺎﮑﯾدار رﻮﻀﺣ ر ROS ﻪﺑ ﻞﯾﺪﺒﺗ و هﺪﺷ هﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﺣار ﻪﺑ DCF دﻮﺷ ﯽﻣ ًاﺪﯾﺪﺷ ﻪﮐ ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ ﺲﻧﺎﺳرﻮﻠﻓ تﺪﺷ ﺶﯾاﺰﻓا ﻦﯿﻤﻫ و نﺪﺷ هدوﺰﻓا ﺮﺛا رد ﺲﻧﺎﺳرﻮﻠﻓ CHP رادﻮﻤﻧ رد هرﺎﻤﺷ 3 دﻮﺷ ﯽﻣ هﺪﯾد ﺪﯿﻟﻮﺗ ﺮﮕﻧﺎﯿﺑ ﻪﮐ ROS ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ ،) 4،26 .( ﻦﯾا ﻢﻫ ﻞﮑﺷ ﺪﻫد ﯽﻣ نﺎﺸﻧ ﻦﯿﻨﭼ ﺖﻈﻠﻏ رد ﻪﮐ μM 5 تاﺮﺛا ، ﯽﻟﻮﻠﺳ ﻞﺧاد ﯽﻧاﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ IRFI005 ﻪﮐ ﺖﺳا يرﺪﻗ ﻪﺑ ًﻼﻣﺎﮐ تاﺮﺛا ﯽﻧاﺪﯿﺴﮐا CHP ﺖﺳا هﺪﺷ رﺎﻬﻣ . ﺎﻫ ﻪﺘﻓﺎﯾ ﻦﯾا ﺮﮕﻧﺎﯿﺑ ﺐﻠﻄﻣ ﻦﯾا لﻮﮑﻟﻮﻣ ﻪﮐ ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ IRFI005 د ر ﺚﻋﺎﺑ و ﺖﺳا ﻮﯿﺘﮐا و لﺎﻌﻓ ﻞﻣﺎﮐ رﻮﻃ ﻪﺑ لﻮﻠﺳ ﻞﺧاد ﻂﯿﺤﻣ ﺮﺛا رﺎﻬﻣ تا CHP دﻮﺷ ﯽﻣ . نﻮﻣزآ رد DCF تﺪﺷ ، تﺪﺷ ﺎﺑ ﺲﻧﺎﺳرﻮﻠﻓ CHP ﺖﺳا ﺐﺳﺎﻨﺘﻣ لﻮﻠﺳ ﻞﺧاد . رد ندوﺰﻓا نﻮﻣزآ ﻦﯾا CHP زا ﺪﻌﺑ 2 ﯽﻧآ ﺶﯾاﺰﻓا ﺚﻋﺎﺑ ﻪﻘﯿﻗد ﺲﻧﺎﺳرﻮﻠﻓ تﺪﺷ ﺪﺷ ﻪﻣادا رد ﯽﻟو ندوﺰﻓا ، μM 5 زا IRFI005 ) ﻪﻘﯿﻗد رد 5( ﺮﺛا رﺎﻬﻣ ﻪﺑ ﺮﺠﻨﻣ CHP زا و هﺪﺷ ﺲﻧﺎﺳرﻮﻠﻓ تﺪﺷ ﺶﯾاﺰﻓا DCF ﺟ يﺮﯿﮔﻮﻠ دﺮﮐ . ،ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﮏﯾ ﯽﻃ رد μM 1 زا IRFI005 ﺪﺷ ﺚﻋﺎﺑ ﻮﯿﺗ لﺎﻌﻓ لﺎﮑﺷا ﺪﯿﻟﻮﺗ ﻪﮐ لﺎﯿﻠﺘﯿﭘا يﺎﻫ لﻮﻠﺳ رد تارﻮﺘﯿﺑرﺎﺑ ناﺰﯿﻣ ﺎﺗ ﺎﻫ ﺶﻧوﺮﺑ 65 ﺪﺻرد ﮐﺎﻣ رد و وﺮ ﺎﺗ يﻮﯾر يﺎﻫژﺎﻓ 62 ﺪﺻرد ﺪﻨﮐ اﺪﯿﭘ ﺶﻫﺎﮐ ،) 29 .( ﺺﺨﺸﻣ ﺰﯿﻧ ﯽﺳرﺮﺑ ﮏﯾ رد ﻠﻏ ﻪﮐ ﺪﺷ ﺖﻈ μM 500 -5 زا IRFI005 تﺪﺷ ناﺰﯿﻣ ﺲﻧﺎﺳرﻮﻠﻓ DCF ﯽﻧﺎﺴﻧا ﺪﯿﺋﻮﻔﻨﻟ يﺎﻫ لﻮﻠﺳ رد ار K-562 ﮐﺎ ﻞﺧاد ﯽﺘﻈﻓﺎﺤﻣ ﺶﻘﻧ و ﺖﺧﺎﺳ ﻒﻗﻮﺘﻣ ﯽﺘﺣ و ﺶﻫ دﻮﻤﻧ دﺎﻬﻨﺸﯿﭘ نآ ياﺮﺑ ار ﯽﻟﻮﻠﺳ .) 4( ﺎﺑ ار دازآ يﺎﻫ لﺎﮑﯾدار ،ﺎﻫ ناﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ ﯽﻠﮐ رﻮﻃ ﻪﺑ ﺪﻨﻨﮐ ﯽﻣ لﺎﻌﻓﺮﯿﻏ ﯽﻠﺻا ﻢﺴﯿﻧﺎﮑﻣ ود ،) 20،30 ( . ﻦﯿﻟوا ﺎﻘﺘﻧا ﻪﺑ ﻪﺘﺴﺑاو شور ،ﻢﺴﯿﻧﺎﮑﻣ دﻮﺷ ﯽﻣ هﺪﯿﻣﺎﻧ نژورﺪﯿﻫ ل ﻪﺑ نژورﺪﯿﻫ ﻢﺗا لﺎﻘﺘﻧا ﺎﺑ ناﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ هدﺎﻣ نآ رد ﻪﮐ دﻮﺷ ﯽﻣ ﻂﯿﺤﻣ رد نآ نﺪﺷ لﺎﻌﻓﺮﯿﻏ ﺚﻋﺎﺑ دازآ لﺎﮑﯾدار . ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ نوﺮﺘﮑﻟا ﮏﺗ لﺎﻘﺘﻧا ﻪﺑ ﻪﺘﺴﺑاو شور ،مود ﻢﺴﯿﻧﺎﮑﻣ ﻪﺑ نوﺮﺘﮑﻟا ﮏﺗ لﺎﻘﺘﻧا ﺎﺑ ناﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ هدﺎﻣ نآ رد ﻪﮐ
ار دﻮﺧ ﻪﻔﯿﻇو ،دازآ لﺎﮑﯾدار ﺪﻫد ﯽﻣ مﺎﺠﻧا . لﺎﮑﯾدار ﻞﯿﮑﺸﺗ مﺎﻧ ﻪﺑ ﺎﻫ ﺶﻨﮐاو يﺮﺳ ﮏﯾ نﺪﻣآ دﻮﺟو ﻪﺑ ﺚﻋﺎﺑ ،دازآ ﻪﮐ دﻮﺷ ﯽﻣ لﺎﮑﯾدار يا هﺮﯿﺠﻧز يﺎﻫ ﺶﻨﮐاو ﺎﻫ ﺶﻨﮐاو ﻦﯾا هﺪﺷ هداد نﺎﺸﻧ ﺮﯾز رد ﺪﻧا ﺶﻨﮐاو ﮏﯾ ﻞﻣﺎﺷ ﺐﯿﺗﺮﺗ ﻪﺑ و ﯽﻣ ﻪﻤﺗﺎﺧ ﺶﻨﮐاو ﮏﯾ و يا ﻪﻌﺳﻮﺗ ﺶﻨﮐاو ﮏﯾ ،ﺮﮔزﺎﻏآ ﺪﺷﺎﺑ ،) 1 3( : 1( * L H → L 2( * 2 O L → 2 O + * L 3( * L + OOH L H → L + * 2 O L دازآ لﺎﮑﯾدار نﺪﻣآ دﻮﺟو ﻪﺑ ) * L ( ﯽﻣ هﺮﯿﺠﻧز ﻦﯾا ﺮﮔزﺎﻏآ زا ﻪﮐ ﺪﺷﺎﺑ ﺪﯿﺳا نﻮﯿﺳاﺪﯿﺴﮐا عﺎﺒﺷا ﺮﯿﻏ بﺮﭼ يﺎﻫ ) LH ( دﻮﺷ ﯽﻣ ﻞﺻﺎﺣ ). ﺶﻨﮐاو 1 ( ﺪﻨﮐ رﺎﯿﺴﺑ ،ﺮﮔزﺎﻏآ ﺶﮐاو ﻦﯾا ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ ﻪﺑ و ﻞﯿﻟد دﺎﺠﯾا ﺎﻫﻮﺗﺮﭘ و تراﺮﺣ ﻞﺜﻣ ﯽﻠﻣاﻮﻋ دﻮﺟو دﻮﺷ ﯽﻣ و ضﻮﻋ رد ﯽﻟو ﺶﻨﮐا 2 رد ،ﺖﺳا ﻊﯾﺮﺳ ﯽﻠﯿﺧ ﯽﻟﺎﺣ ﺶﻨﮐاو ﻪﮐ 3 لﺎﮑﯾدار نآ رد و ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ ﺪﻨﮐ ﯽﻠﯿﺧ ﺰﯿﻧ ﻞﯿﺴﮐوﺮﭘ دازآ ) * 2 LO ( ﺮﯿﻏ بﺮﭼ ﺪﯿﺳا ﮏﯾ ﺎﺑ ﺐﯿﮐﺮﺗ رد عﺎﺒﺷا راﺪﯾﺎﭘ ﻞﯿﺴﮐوﺮﭘورﺪﯿﻫ ﻪﺑ ) LOOH ( لﺎﮑﯾدار ﮏﯾ و دﻮﺷ ﯽﻣ ﻞﯾﺪﺒﺗ دازآ .) 3 3، 32 ( ناﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ لﻮﮑﻟﻮﻣ ) ArOH ( ﺎﺑ ﺶﻨﮐاو ﯽﻃ دازآ لﺎﮑﯾدار ﻞﯿﺴﮐوﺮﭘ ) ﺶﻨﮐاو 4 ( لﺎﮑﯾدار ﻪﺑ ﺶﻨﮐاو هزﺎﺟا ﻦﯾا زا و ﺪﻫد ﯽﻤﻧ ار عﺎﺒﺷا ﺮﯿﻏ بﺮﭼ ﺪﯿﺳا و ﻞﯿﺴﮐوﺮﭘ ﻖﯾﺮﻃ هﺮﯿﺠﻧز يﺎﻫ ﺶﻨﮐاو ﻦﯾا ﻪﻤﺗﺎﺧ و نﺪﺷ ﻪﺘﺴﮑﺷ ﺚﻋﺎﺑ راﺪﯾﺎﭘ ﻞﯿﺴﮐوﺮﻓ لﺎﮑﯾدار و هﺪﺷ يا ) * ArO ( ﯽﻣ دﻮﺟو ﻪﺑ ار دروآ ،) 2 3 :( 4( * O Ar + OH → LOOH Ar + * 2 LO ﻓ لﺎﮑﯾدار ﺮ ﺰﯿﻧ ﻞﯿﺴﮐو ﺮﮕﯾد ﻞﯿﺴﮐوﺮﭘ يﺎﻫ لﺎﮑﯾدار ﺎﺑ ﻓﺮﯿﻏ تﻻﻮﺼﺤﻣ ﺎﺗ ﺪﻫد ﯽﻣ ﺶﻨﮐاو ـ ﻣ ﯽﻟﺎﻌ ـ ﯿﮐ ﻞﺜ ـ ار نﻮﻨ ﺟو ﻪﺑ ـ دروآ دﻮ ،) 31،34 .( ﻣ رد ـ ﮑﻟﻮ ـ ﻣﺎﺘﯾو لﻮ ـ ﻦﯿ E ﮔ ، ـ هوﺮ ﯽﺘﻧآ ﺖﯿﻟﺎﻌﻓ لﻮﺌﺴﻣ ﮏﯿﺗﺎﻣورآ ﺶﺨﺑ رد دﻮﺟﻮﻣ ﻞﯿﺴﮐورﺪﯿﻫ ﺐﯿﮐﺮﺗ رد ﺶﺨﺑ ﻦﯿﻤﻫ ﻪﮐ ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ ﯽﻧاﺪﯿﺴﮐا 005 IRFI ﺖﺳا هﺪﺷ ﻆﻔﺣ ﺰﯿﻧ ،) 1،4 ( . ﺘﻣ ﻦﯾا ﺖﯿﻟﻮﺑﺎ Raxofelast رد هﺪﻨﻨﮐ بورﺎﺟ و ﺎﻫﺪﯿﭙﯿﻟ نﻮﯿﺳاﺪﯿﺴﮐاﺮﭘ ﻊﻧﺎﻣ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ نﺪﺑ دﻮﺷ ﯽﻣ ﻪﺘﺧﺎﻨﺷ نﮋﯿﺴﮐا لﺎﻌﻓ يﺎﻫ ﻪﻧﻮﮔ . ﻞﯿﺴﮐورﺪﯿﻫ هوﺮﮔ نآ ﺚﻋﺎﺑ دازآ لﺎﮑﯾدار لﻮﮑﻟﻮﻣ ﻪﺑ نژورﺪﯿﻫ ﮏﯾ نداد ﺎﺑ ددﺮﮔ ﯽﻣ نآ ءﺎﯿﺣا ،) 1،4،12 .( ﺶﻨﮐاو ﺖﻋﺮﺳ 005 IRFI ﺎﺑ ﺮﺑاﺮﺑ ﻞﯿﺴﮐوﺮﭘ لﺎﮑﯾدار 1 -S 1 -M 6 10 × 8 /1 ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ رد ، ﯽﻟﺎﺣ ﻦﯿﻣﺎﺘﯾو ﺶﻨﮐاو ﺖﻋﺮﺳ ﻪﮐ E ﺮﺑاﺮﺑ 1 -S 1 -M 6 10 × 1/ 1 ﺖﺳا ،) 5 3 .( ﺪﻧﻮﯿﭘ ﮏﯿﮑﻔﺗ ﯽﭙﻟﺎﺘﻧآ ﻪﺑ ﺪﻧاﻮﺗ ﯽﻣ ﺮﻣا ﻦﯾا H -O ) Bond Dissociation Enthalpy : BDE ( ﺪﺷﺎﺑ طﻮﺑﺮﻣ يرﻮﻃ ﻪﺑ ، ﻦﯿﺑ ﻒﯿﻌﺿ ﺪﻧﻮﯿﭘ ﻪﮐ H -O ﮏﯾ رد ناﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ لﻮﮑﻟﻮﻣ ) BDE ﺮﺗ ﻦﯿﯾﺎﭘ ( ﺶﯾاﺰﻓا ﺚﻋﺎﺑ ﺖﻋﺮﺳ ﺪﺷ ﺪﻫاﻮﺧ دازآ لﺎﮑﯾدار لﻮﮑﻟﻮﻣ ﮏﯾ ﺎﺑ ﺶﻨﮐاو ،) 1 3 .( ﻪﺑ ﻪﺟﻮﺗ ﺎﺑ ﻦﯾا ﺎﻫ ﻪﺘﻔﮔ دﻮﻤﻧ نﺎﯿﺑ ناﻮﺘﺑ لﺎﻤﺘﺣا ﻪﺑ ﻪﮐ BDE لﻮﮑﻟﻮﻣ 005 IRFI زا ﺮﺗ ﻦﯿﯾﺎﭘ ﺪﯾﺎﺑ BDE لﻮﮑﻟﻮﻣ ﻦﯿﻣﺎﺘﯾو E ﺎﺑ BDE ﺎﺑ ﺮﺑاﺮﺑ mol / Kcal 77 ﺪﺷﺎﺑ ،) 30 (، ﺎﺗ ﻦﯿﻣﺎﺘﯾو ﻪﺑ ﺖﺒﺴﻧ ﺮﺗﻻﺎﺑ ﯽﺘﻋﺮﺳ زا E ﺎﺑ ﺶﻨﮐاو ياﺮﺑ ار لﻮﮑﻟﻮﻣ ﺪﺷﺎﺑ رادرﻮﺧﺮﺑ دازآ لﺎﮑﯾد . ﺑ ﺞﯾﺎﺘﻧ ﻪ ﺐﯿﮐﺮﺗ ﻪﮐ ﺪﻨﻫد ﯽﻣ نﺎﺸﻧ هﺪﻣآ ﺖﺳد 005 IRFI ، جرﺎﺧ و ﻞﺧاد رد دازآ يﺎﻫ لﺎﮑﯾدار رﺎﻬﻣ ﺚﻋﺎﺑ ﯽﺑﻮﺧ ﻪﺑ و هﺪﺷ لﻮﻠﺳ رﺎﯿﺴﺑ ناﺪﯿﺴﮐا ﯽﺘﻧآ ﮏﯾ ﯽﺒﻄﻗ يﺎﻫ ﻂﯿﺤﻣ رد ﯽﻣ رﻮﺒﻋ لﻮﻠﺳ يﺎﺸﻏ زا ﯽﺘﺣار ﻪﺑ ﻪﮐ ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ لﺎﻌﻓ و يﻮﻗ زود ﻪﺑ ﻪﺘﺴﺑاو نآ ﺖﯿﻟﺎﻌﻓ و ﺪﻨﮐ ﺖﺳا . يراﺰﮕﺳﺎﭙﺳ رد نﺎﯾﺎﭘ ﯽﻣﻼﺳا دازآ هﺎﮕﺸﻧاد ﯽﺸﻫوﮋﭘ ﺖﻧوﺎﻌﻣ زا ﺪﺣاو ﻦﯾا ﻪﻨﯾﺰﻫ ﻦﯿﻣﺎﺗ ﺖﻬﺟ رد بﺎﻨﺑ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ و ﺮﮑﺸﺗ لﺎﻤﮐ ﻢﯾراد ار ﯽﻧادرﺪﻗ . References
1.Rezk BM, Haenen GRMM, van der Vijgh WJF, Bast A. The extraordinary antioxidant activity of vitamin E phosphate. Biochimica et Biophysica Acta 2004; 1683: 16-21. 2.Sano T, Umeda F, Hashimoto T, Nawata H, Utsumi H. Oxidative stress measurement by in vivo electron spin resonance spectros-copy in rats with streptozotocin-induced diabetes. Diabetologia 1998; 41: 1355-60. 3.Heliövaara M, Knekt P, Aho K. Seruman-tioxidant and risk of rheumatoid arthritis. Ann Rheum Dis 1994; 53: 51-3.
4.Campo GM, Ceccarelli S, Squadrito F,
Altavilla D, Dorigotti L, Caputi AP. Rax-ofelast (IRFI 016): A New Hydrophilic Vitamin E-Like Antioxidant Agent. Cardi-ovas Drug Rev 1997; 15:157-73.
5.Niki E, Noguchi N, Tsuchihashi H, Gotoh N. Interaction among vitamin C, vitamin E, and β-carotene. Am J Clin Nutr 1995; 62: 1322S–6S.
6.Ames BN, Shigensaga MK, Hagen TM-.Oxidants, antioxidants, and thedegenerat-ive diseases of aging. Proc Natl Acad Sci USA 1993; 90: 7915-22.
7.Yu BP. Cellular defenses against dam-agefrom reactive oxygen species. Physiol Rev1994; 74: 139-62.
8.Morabito G, Trombetta D, Brajendra KS, Ashok KP, Virinder SP, Naccari C, et al. Antioxidant properties of 4-methylcou-marins in in vitro cell-free systems, Bioch-imie 2010; 92: 1101-7.
9.Villano D, Fernandez-Pachon MS, Moya ML, Troncoso AM, Garcia-Parrilla MC. Radical scavenging ability of polyphenolic compounds towards DPPH free radical. Talanta 2007; 71: 230-5.
10.Chen X, Rhian MT, Jeong BP, Ernesto LS. Antioxidant effects of vitamins C and E are associated with altered activation of vascular NADPH oxidase and superoxide dismutase in stroke-prone SHR. Hypert-ension 2001; 38:606-11.
11.Yue D, Yan L, Luo H, Xu X, Jin X. Eff-ect of Vitamin E supplementation on semen quality and the testicular cell membranal and mitochondrial antioxidant abilities in Aohan fine-wool sheep. Anim Reprod Sci 2010; 118: 217-22.
12.Aryaeian N, Djalali M, Shahram F, Jaza-yeri S, Chamari M, Nazari SA. Beta-carot-ene, vitamin E, MDA, glutathione reductase and arylesterase activity levels in patients with active rheumatoid arthritis. Iran J Publ Health 2011; 40:102-9.
13.Brigelius-Flohe´ R, Traber MG. Vitamin E: function and metabolism. J Fed Am Soc Exp Biol 1999; 13:1145-55.
14.Ghayour-Mobarhan M, Sahebkar AH, Starkey B, Livingstone C, Wang T, Lamb D, et al. An investigation of the relationship between serum vitamin E status and coro-nary risk factors in dyslipidaemic patients. Iranian. J Bas Med Sci 2008; 10: 206-15. 15.Barzegar A. Proton-coupled electron-transfer mechanism for the radical scave-nging activity of cardiovascular drug dipyr-idamole. PLoS ONE 2012; 7:e39660. 16.Riboulet-Chavey A, Pierron A, Durand I, Murdaca J, Giudicelli J, Obberghen EV. Methylglyoxal impairs the insulin signaling pathways independently of the formation of intracellular reactive oxygen species. Diab-etes 2006; 55: 1289-99.
17.Pedersen JZ, Oliveira C, Incerpi S, Ku-mar V, Fiore AM. Antioxidant activity of 4-methylcoumarins. J Pharm Pharmacol 2007; 59: 1721-8.
18.Shi H, Noguchi N, Niki E. Galvinoxyl method for standardizing electron andpro-ton donation activity. Method Enzymol 2001; 335: 157-66.
19.Butkovic V, Klasinc L, Bors W. Kinetic study of flavonoid reactions with stable radicals. J Agric Food Chem 2004; 52: 2816-20.
20.Niki E. Assessment of Antioxidant Ca-pacity in vitro and in vivo. Free Rad Biol Med 2010; 49: 503-15.
21.Von Gadow A, Joubert E, Hansmann C. Comparison of the antioxidant activity of aspalathin with that of other plant phenols of Rooibos tea (Aspalathuslinearis), α-toco-pherol, BHT, and BHA. J Agric Food Ch-em 1997; 45: 632-8.
22.Barzegar A, Pedersen JZ, Incerpi S, M-oosavi-Movahedi AA, Saso L, The mech-anism of antioxidant activity of IRFI005 as a synthetic hydrophilic analogue of vitamin E. Biochimie 2011; 93: 1880-8.
23.Hatano T, Kagawa H, Yasuhara T, Ok-uda T. Two new flavonoids and other cons-tituents in licorice root: their relative astir-ngency and radical scavenging effects. Ch-em Pharm Bull 1988; 36: 2090-7.
24.Clarck JB, Greenbaum AL, Slater TF. Effects of Tetrazolium Salts on Oxidative Phosphorylation in Rat-Liver Mitochondria. Biochem.J. 1965; 94: 651-654.
25.Altavilla D, Deodato B, Campo GM, Arlotta M, Miano M, Squadrito G, et al. IRFI 042, a novel dual vitamin E-like anti-oxidant, inhibits activation ofnuclear factor-kB and reduces the inflammatory response in myocardial ischaemia–reperfusion injury. Cardiovascular Research 2000; 47: 515– 528.
26.Wang H, Joseph JA. Quantifying cellu-lar oxidative stress by dichlorofluorescein assay using micro plate reader, Free Radic. Biol. Med. 1999; 27: 612-616.
27.Adom KK, Liu RH. Rapid peroxyl rad-ical scavenging capacity (PSC) assay for a-ssessing both hydrophilic and lipophilic an-tioxidants. J. Agric. Food Chem. 2005; 53: 6572-6580.
28.Ayala A, Parrado J, Bougria M, Macha-do A. Effect of oxidative stress,produced by cumene hydro peroxide, on the various ste-ps of proteinsynthesis, J. Biol. Chem. 1996; 271: 23105-23110.
29.Mattoli S, Mezzetti M, Allegra L, Braga PC.
Dihydro-hydroxy-trimethyl-benzofura-nylacetic acid inhibits lipid peroxidation an-d lysosomal enzyme release in bronchial epithelialcells and macrophages. Ital J Che-sr Dis 1991;45:78-80.
30.Wright JS, Johnson ER, Di Labio GA. Predicting the activity of phenolic antio-xidants: theoretical method, analysis of sub-stituent effects, and application to major fa-milies of antioxidants, J. Am. Chem. Soc. 2001; 123:1173-1183.
31.Szymusiak H, Zieliński R. Bonddissoc-iationenthalpy of phenolic antioxidants. Po-l. J. Food Nutr. Sci. 2003; 12(53): 129-135. 32.Wolf G. The Discovery of the Antioxi-dant Function of Vitamin E: the Contrib-ution of Henry A. Mattill. American
Soc-iety for Nutritional Sciences. J. Nutr. 2005; 135: 363-366.
33.Cummings MJ, Mattill HA. The auto-oxidation of fats withreference to their des-tructive effect on vitamin E. J. Nutr. 1931; 3: 421-432.
34.Liebler DC. The role of metabolism in the antioxidantfunction of vitamin E. Crit. Rev. Toxicol. 1993; 23, 147-169.
35.Iuliano L, Pedersen JZ, Camastra C, Be-llo V, Ceccarelli S, Violi F. Protection of low density lipoprotein oxidation by the an-tioxidant agent IRFI005, a newsynthetic hy-drophilic vitamin E analogue, Free Radic. Biol. Med. 1999; 26:858-868.
Evaluating the function of IRFI005 on removing intra and
extracellular free radicals
Ghojaie M1*, Barzegar A2, Asadzadeh R3
(Recived: December 9, 2013 Accepted: February 26, 2014)
Abstract
Introduction: Antioxidants are molecules
that inhibit the action of free radicals and vitamin E is one of the most important anti-oxidant compounds. This vitamin is insol-uble in water and this feature limits its app-lication in polar media. At present, many studies are performing to find water-soluble analogues of this compound. In this study, a polar and synthetic analogue of vitamin E (IRFI005) was used to survey expected properties of vitamin E in polar media.
Materials & Methods: Evaluation of extra-cellular antioxidant activity of IRFI005 was performed spectrophotometrically at 430 nm and using the galvinoxyl free radical with molar concentrations, 1:2 and 1:4 of IRFI005: Galvinoxyl. Intra-cellular antio-xidant an effect of 5 µM of IRFI005 was also studied using the DCFH2-DA colored
probe and Cumene hydroperoxide method.
Findings: IRIF005 inhibited oxidant
active-ty in the inside and outside media under st-udy. Galvinoxyl had lower optical density (OD) at the ratio 1:2 and was completely re-moved from the media. Each IRFI005 mo-lecule was able to remove two free radi-cal molecules. It also suppressed Cumene hy-droperoxide effect inside the cells and inh-ibited the increase of fluorescence int-ensity.
Discussion & Conclusion: The findings su-ggest that IRFI005 is a powerful, dose-de-pendent and active antioxidant in polar me-dia and could inhibit oxidant molecules in the inside and outside of cells.
Keywords: Free radicals, antioxidant, vita-min E, IRFI005
1. Dept of Biology, Faculty of Basic Sciences, Islamic Azad University, Bonab, Iran 2.Dept of Biology, Basic Sciences Research Center, Tabriz University, Tabriz, Iran 3.Dept of Biology, Faculty of Basic Sciences, Islamic Azad University, Uremia, Iran * (Corresponding author)
