E
v a
l
u a
t
i
o n
o
f
a
L
o
w
-C
o s
t
C
o
m
p
a r
t
m
e n
t
a
l
i
z e
d B
a
g
M
P N
M
e
t
h
o
d f
o r
t
h
e
D
e
t
e c
t
io n
a n
d
Q
u a n
t
i f
i c a
t
i
o n
o
f E
.c o
l i i
n
F
e c a
l
l y
C
o n
t
a
m
i
n a
t
e
d
D
r
i
n
k i
n
g
W
a
t
e r
K
ath
e ri
n eA
P
ie r s o n
A
te c
h
nic a
l
r ep
o rt
s ub m it t
ed
t
ot
h
ef
a c ul
t
y
of
t
h
eU
niv e r s
i
t y
of N
o rt
h C
a r ol in a a
t
C h
ap
el
H
i l l i
np
a rti
al fu
l fi
l
l m
e nt
of
th
e r eq
ui
r em
e nt
sf
o rth
ed
eg
r e e of
M
a st
e r of S
ci
e n c ein
P
ub
l
i
cH
e alt
h i
nt
h
eD
ep
a rt
m
e nt
of
E
n vi
r o nm
e nt
al Sc
i
e n c e s a nd
E
ng
i
n e e ri
ng
.C
h
ap
el
H
i l l
2 0
10
A
p p
r o v ed b y
:M
a rk D
.So
b
s ey
,P
h
.D
L i
s aM
.Ca s a n o v a
,Ph
.D
.A b
st
ract
F
e c al l
y
c o nt
am i
n at
ed d
rin
k i
ng
w
at
e r c o nt
ri b
ut
e st
o1
.8 m i l l i
o nd ia r r
h
e al d i
s e a s ed
e ath
s e v e ry y
e a r .T
h
e r eis c u r r e n
t
l
y
n o si
m
p
l
e, af f
o rd
ab l
e, r e ad i l
y
a v ai la
b l
em
et
h
od f
o rp
e op
l
et
ot
e st
t
h
eq
u al i
t
y
of
t
h
ei
rdr
i
nk i
ng
w
at
e rw i
th
o ut
h
a vi
ng
a c c e s st
o ala
b
o r at
o ry
,m
ak in
g
t
e sti
ng i
n a c c e s si b l
ef
o rm
a ny p
e op
l
ew h
o a r e u n c e rt
ai
n ab
o ut t
h
eq
u al i
t
y
of
th
ei
rd
rin
k i
n
g
w
at
e r.T h
e re
i
s a n e ed f
o r aq
u a nt
i
t
at
iv e
te
st
f
o rf
e c al
c o nt
am
i
na
t
i
o ni
nd
ri
nk in
g
w
at
e rt
h
at
i
sl
ow
-c o s
t
, c a nb
e u s ed
o uts
i d
e ala
b
o r at
o ry
, a nd
g i
v e s r e s ult
s c om
p
a r ab
l
et
oc u r r e n
t
l
y
a c c ep
t
ed
sta n
d
a rd m
et
h
od
s.T
h
ep
u rp
o s e of
th i
sw
o rk w
a st
o e v al
u at
e a n o v el
lo
w
-c o s
t
M
o st
P
r ob
ab le
N
um b
e r(
M
P
N
)
a s s ay
in
a c om
p
a rt
m
e nt
al i
z ed
p
la s
t
i
cb
ag
f
o rt
h
ee n u
m
e r at
i
o n of
E
c ol
i
i
nd
ri
nk i
ng
w
at
e rT
e st
w
at
e r sw
e r e n at
u r al
s u rf
a c ew
at
e r sw i
t
h
a n
d w i
th
o ut t
h
e ad d i
t
io n
of
p
ri m
a ry
s ew
ag
e ef f lu e n
t
.L
a u ry
l
T
r>
'
p
t
o s eB
r ot
h w i
t
h X
-g
lu c u r o n
i d
e, a chr o
m
og
e nic
s ub
st
r at
e sp
e ci f
i cf
o rE
c ol
i
,w
a s ad d
ed
t
o10 0 m
L
of
t
e st
w
at
e ri
n a5
-c om
p
a rtm
e nt
b
ag
.R
ep
l ic a
t
e s am
p
l
e sw
e r ei
n c ub
at
ed f
o r2 4
-
4 8 h
o u r s at
2 7
°C
,3
7
°
C
, a nd
4 4
.5
°C
.F
o r c om
p
a ri
s o nt
o a st
a nd
a rd m
eth
od
, s am
p
l
e sw
e r e a n al y
z ed
u s
in
g
b
ot
h
t
h
ep l
a st
ic
b
ag
a nd
th
eI D E
X
X
C
ol i l
e rt
®
Q
u a nt
i
-T
r ay
2
0
0
0
.R
e s ul
t
s ob
t
ai
n ed
f
r om
e xp
e ri m
e nt
s u si
ng
M
o rg
a nC
r e ek
n at
u r al
s u rf
a c ew
at
e r sh
ow
ed
t
h
at
at
i
n c ub
at
i
o nt
em
p
e r at
u r e s of
3
7
°C
o r4
4
.5
°
C fo r
2
4 h
o u r s of i
n c ub
at
i
o n, n o si
g
ni f
i c a nt
d i f f
e r e n c e si
nE
c ol
i
c o n c e ntr a
t
io n
s
w
e r ef
o u nd b
et
w
e e nt
h
e c om
p
a rt
m
e nt
ali
z ed b
ag t
e sts
(
C
B T
)
a nd
t
h
eQ
u a nt
i
-T
r a
y
(Q
T
) (p
=
0
.3 5 0 1
a nd
p
=
0
.
4 1
5 5
f
o r3 7
°C
an
d
4 4
.5
°C
, r e sp
e ct
iv e
l y
)
.A
t
an
i
n
cu
b
at
i
o nt
em
p
e r at
u r e of 2
7
°C fo r
4
8 h
o u r si
n c ub
at
i
o n ,t
h
e r ew
a sn
o si g
n
i f
i c a nt
d i f f
e r e n c ei
nE
c ol
i
c o n c e nt
r at
io n s
b
etw
e e nt
h
eC B T
a nd
th
eQ
T
(p
=
0
.3
12 5
)
T h
e s er e s u
l
t
s s ug g
e st
t
h
at t
h
eCB T
g i
v e s r e s ult
s c om
p
a r ab l
et
o a st
a nd
a rd m
et
h
od f
o rt
h
ed
et
e ct
io n
of
£
c oli
in
d
ri
nk i
ng
w
at
e r, a nd
c a np
ot
e nt
i
al l
y
b
ei
n c ub
at
ed
at
n o nt
em
p
e r at
u r e s.T
h
e c om
p
a rt
m
e nt
al i
z ed b
ag
t
e st
i
s ap
ot
e nti
al l
ow
-c o s
t
alt
e r n at
i
v et
os
t
a nd
a rd d
rin
k i
ng
w
ate r
q
u al i
t
y
te s
t
sf
o rl
ow
T
A
B L E
O
F C
O
N T E N T
S
1
.IN
T
R O D U C
T I
O N
1
1
.1
O
b j e c t i v e s
3
1
.2
E
x p e r i
m
e n t a l
D
e s i g n
3
2
.R E V I
E
W
O F T H E L I T E R
A
T U R E
5
2
.1
C
h a r a c t e r i s i t i c s o f a n
I
d e a l
I
n d i c a t o r
O
r g a n i s
m
5
2
.2
C
u r r e n t
M
e t h o d s f o r
D
e t e c t in g
E
.c o l i in
W
a t e r
7
2
3
C
r i t e r i a f o r a
M
e t h o d
S
u it a
b le
fo r
U
s
e inL
o
w
-R
e s o u
rc e
Se t t i n g s
9
2
.3
.1
S
am
p l
eV
ol
um
e1 1
2
.3
.2
Q
u a nt
i f
i c at
i
o nM
et
h
od
13
2
.3
.3
N
e ed f
o rE
le c
t
ri
cit
y
1
3
2
.3
.4
N
e ed f
o rS
up p
l
em
e nta
l
E q
ui
p
m
e nt
1 4
2
.3 5
N
um b
e r of St
ep
sR
eq
ui
r ed
1 4
2
.3
.6
P
o rt
ab i l i
t
y
,R
ob
u stn e s s
, a nd C
om
p
a ct
n e s s1 5
2
.3
.7
R
e ad i l
y D
et
e ct
ab le
E
ndp
oi
nt
1 5
2
.3
.8
R
ap
i d i
t
y
of
R
e s ult
s1 6
2
.3
.9
R
a ng
e of
R
e s ult
s16
2
.3
.1
0 C h
r om
og
e n v s.F l
u o r og
e n17
2
.3
.1 1 Se n s
i
t
iv
i
t
y
18
2
.3
.1
2 S
p
e ci f
i cit
y
18
2
.3
.1 3 P
r e cis
io n
19
2
.3
1 4
W
o rk
s at
A m b i
e nt
T
em
p
e r at
i u "2
.3
.15 C
o st
2 0
2
.4
Su
m m
a r y
2
1
3
.M
A T E R I A
L S
A
N D
M
E T H
O
D
S
2
2
C
o l l e c t
io n
an d
P
r e p a r a t
io n o
fT
e s t
W
a t
e rs
3
1
S
e
w
a g e
2
2
3
.1
.1
U
niv e r s
i
t
y
L
ak
e2 2
3
.1
2
M
o rg
a nC
r e ek
2 3
3
.2
P
r e p a r a t i o n o f
T
e s t
W
a t e r s
2 3
3
.3
C
o
m
p a r i s o n o f
C
a n d i d a t e
M
e d i a
F
o r
m
u l a t i o n s u s in g t h e
M
u l
tip
l e
F
e r
m
e n t a
ti o n
T
u b e
T
e s t
2 4
3
.4
N
a s c o
Co
m
p a r t
m
e n t a l i z e d
B
a g
T
e s t
:E
f f e c t o f
X
-g l u c
C
o n c e n t r a t i o n o n
E
c o l i
D
e t e c t i o n
2
7
3
.5
I D E
X
X
C
o l i l e r t
®
Q
u a n t i t r a y
2 0 0
0
2
9
3
.6
I
s o l a t i o n A N D
P
u r i f i c a t i o n O F
P
r e s u
m
p t i v e
£
c o i /
I
s o l a t e s
3 0
3
.7
E
n t e r o t u b e
™
I I
3
1
3
.8
D
a t a
A
n a l y s i s
3
1
4
.R
E
S U L T
S
3
3
4
.1
M
e d ia
C
o
m
p a r
is o n
in
M
u
l t i p le
T
u
b eF
e r
m
e n
t at
i on
A
s sa
ys
3 3
4
.2
X
-
g l u c
C
h r o
m
o g e n
C
o n c e n t r a t i o n i n
L T B
M
e d i u
m
a n d
E
.c o l i
D
e t e c t i o n
3
8
4
.2
.1
E
f
f
e ct
of i
n c ub
at
i
o nte
m
p
e r at
u r e o n c o n c e nt
r ati
o n s of
E
c ol
i p
r od
u c ed
u si
ng
v a ry i
ng
c o n c e nt
r at
io n s o
f
t
h
eX
4
.2
.2
E
f f
e ct
of i
n c ub
at
i
o nt
i
m
e o n c o n c e ntr a
t
io n s o
f
E
. c ol
i
d
et
e ct
ed
u si
ng
v a ry
i
ng
c o n c e nt
r at
i
o n s of
t
h
eX
-g
lu c
c
h
r om
og
e ni
nL T B
m
ed i
um
4
8
4
.2 3
C
om b i
n ed
ef f
e ct
of
i
n c ub
at
i
o nt
i
m
e a nd i
n c ub
ati
o nt
em
p
e r atu r e
o n c o n c e n
tr a
t
i
o n s oi
E
c ol
i p
r odu c e
d
u si
ng
v a ry
i
ng
c o n c e n
t
r ati
o n s of
t
h
eX
-g l
u c chr o
m
og
e nin
L T B m
ed i
um
4
8
4
.3
I
n c u b a t i o n
T
e
m
p e r a t u r e
5
0
4
.4
B
io c h
em
ic a l
I
d en t i f ic a t i o n o f
E
c o
l iI
s o l a t
es
O
b
ta
in e dF R O
M
C
B
T
s B Y
St r e a k
P
l a t i n g a n d
E
n t e r o t u b e
^ ' ^I I T
e s t s
5 8
5
.D I SC U S
S I
O N
6 3
5
.1
M
e d i a
C
o
m
p a r i s o n
6 3
5
.2
C
o n c e n t r a t i o n o f t h e
X
-
g l u c
C
h r o
m
o g e n i n t h e
M
e d ia
6 4
5
.3
I
n c u b a t i o n
T
e
m
p e r a t u r e a n d
T
i
m
e
6 5
5
.4
S
e n s i t i v i t y
,S
p e c i f i c i t y
,a n d
P
r e c i s io n
6 6
5
.5
T
h e
C
B T
in
L
o
w
-
R
e s o u r c e
Se t t i n g s
6 9
6
.S U
M M
A
R
Y
A
N D C O N C
L
U SI
O N S
7 5
6
.1
M
e d i a
7 5
6
.2
C
o n c e n t r a t i o n o f
X
-
g l u c i n t h e
M
e d i a a n d
In c u b a t i o n
T
i
m
e
7 5
6
.3
I
n c u b a t i o n
T
e
m
p e r a t u r e
7 6
6
.4
I
s o l a t i o n a n d
B
i o c h e
m
i c a l
I
d e n t i f i c a t i o n o f
B
a c t e r i a f r o
m
C
B T
s
7 7
A P P E N
D I
X
7 9
L I S
T
O F
T A
B L
E
S
T
ab l
e1
C
om
p
a ri
s o n of C
u r r e nt
E
c o/
/ D
ri
nk i
ng
W
at
e rT
e st
s,b
y C
ri
te r
i
o n1 1
T
ab l
e2
S
um
m
a ry
of
P
r ep
a r at
i
o n of
M
ed i
a,B y C
o n c e nt
r at
i
o n s of X
-g
l
u c2 7
T
ab l
e3
C
om m
o nP
o si
t
i
v eC
om
p
a rt
m
e nt
C
om b i
n at
i
o n s2 9
T
ab l
e4
S
um m
a ry
of
T
ri p
l
e-S
tr e a
k
P
r o c ed
u r ef
o rC
ul
t
u ri
ng E
c ol
i
3 1
T
ab l
e5
M
ed i
aC
om
p
a ri
s o nR
e s ul
ts :
M
e a n s,M
ed i
a n s, a nd 9 5 % C I
s of L
T B
/X
-g l
u c,E
C /X
-g l
u c, a nd C
ol
i
l
e rt
at I
n
c ub
at
i
o nT
im
e s of
2 4
an
d
4 8
h
o u r s3 3
T
ab l
e6
.E
c ol
i
M
P
N /
1 0 0
m
L in
I X
a nd
0
.5 X
X
-g l
u ci
nL T B
, a nd C
ol i l
e rt
Q
T
s4 0
T
ab l
e7
.E
c ol
i
M
P N /
1
0 0 m
L
i
n0
.5 X
X
-g
l
u ci
nL T B
,0
.3
X X
-g
l
u ci
nL T B
, a nd
C
ol i l
e rt
i
nQ
T
s, at
I
n c ub
at
i
o nT
em p
e r atu r e s o
f 4
4
.5
°C
,3 7
°C
, a nd 2
7
°C
,a n
d
I
n c ub
ati
o nT
i
m
e s of 2
4
a nd
4 8
h
o u r s4 3
T
ab l
e8
.P V
al
u e sf
o rC
om
p
a ri
s o n s of
M
ed i
a nC
o n c e ntr a
t
i
o n s of £
■c o
l
i
M
P
N
/ 1 0 0
m
L i
nL T
B w i
t
h 0
.5
X
X
-g l
u c,i
nL T B
M
ed i
um w
i
t
h
0
.3X X
-g l
u c, a nd i
nC
ol i l
e rt
Q
T
,A
c c o rd i
ng
t
oI
n c ub
at
i
o nT
em p
e r at
u r e so
f 4 4
.5
°C
,3 7
°C
, a nd 2 7
°C
, a nd I
n c ub
at
i
o nT i m
e s of 2
4
a nd
4
8 h
o u r s4 9
T
ab l
e9
.S
um
m
a ry
of
M
ed i
a n s,
M
e a n s, a nd 9 5 % C
o nf
id
e n c eI
nt
e r v al
sf
r om
t
h
eM
o rg
a nC
r e ek
E
xp
e ri m
e nt
s,b
y T
ri
al N
um b
e r,f
o rC
B T
s a nd
Q
T
s,A
c c o rd
i
ng
t
oI
n c ub
at
i
o nT
em
p
e r at
u r e(
4 4
.5
°C
,3
7
°C
, a nd
2 7
' 'C
)
5 1
T
ab l
e1
0
.S
t
r e ak
P
l
ate
R
e s ul
t
s o nC h
r om
og
e ni
cE
c ol
i
A
g
a rM
ed i
um f
o rP
r e s um
p
t
i
v eE
c ol
i P
o si
t
i
v e a nd N
eg
at
i
v eB
ag
C
om
p
a rt
m
e nt
s aft
e r2
4 H
o vi r s of
I
n c ub
at
i
o n5 9
T
ab l
e1 1
.S
t
r e ak Pl
ate
R
e s ul
t
s o nC h
r om
og
e ni
cE
c ol
i
A
g
a rM
ed i
um f
o rH
ou
rs of I
n
c ub
ati
on
5 9
T
ab l
e12
Su
m
m
a ry
S
ta
t
i
st
ic s
f
o rE
. c ol
i
D
et
e ct
i
o ni
nPr e s u
m p
t
i
v eP
o sit
iv e
a n
d N
eg
ati
v eC B T
C
om
p
a rtm
e nt
sb
y
Str e a
k
P l
at
in
g
o nt
o aC
h
r om
og
e ni
cE
c ol
i A g
a rM
ed iu
m
59
T
ab
l
e13
E
nt
e r otu
b
e^ ' ^I I R
e s ult
sf
o rP
r e s um
p
t
i
v eE
c ol
i I
s ol
at
e sfr o
m
C
olo r
-p
o sit
i
v eC
om
p
a rt
m
e nt
s of C B T
s c o nt
ain
i
ng
M
o rg
a nC
r e ek
N
at
u r al Su r
fa c e
W
at
e r6
1
L I
S
T
O
F F I
G
U
R
E
S
F i g
u r e1
M
et
h
od
of
p
o u ri
ng l i q
ui d
i
nt
ot
h
eC B T
2 8
F
i
g
u r e2
.M
et
h
od
of
s e al i
ng t
h
eC
B T
2 9
F i g
u r e3
.C
om
p
a r at
i
v ed
et
e ct
i
o n of
E
c ol
i
b
y
d
i
f
f
e r e nt
m
ed
i
ai
n aM
T
F
t
e st
(
b
a r s=
9 5
%
C
o nf
id
e n c eI
nt
e r v al
s)
34
F
i
g
u r e4
.B
o xp
l
ot
:C
om
p
a ri
s o n of
E
c ol
i
d
et
e ct
i
o nb
y
d i f f
e r e nt
m
ed i
af
o ri
n c ub
at
i
o nt
i m
e s of 2
4
a nd
4 8
h
o u r s3 6
F
i
g
u r e5
.I X
,0
.5 X
,0
.3 X
, a nd O
.I X
c o n c e nt
r at
i
o n s of
t
h
eX
-g
l
u cc
h
r om
og
e ni
nL T B m
ed i
um i
nt
h
eC B T f
o rm
at
39
F
i
g
u r e6
.M
e a nE
c ol
i
c o n c e nt
r at
i
o n s(
a nd
9 5
%
C
I
s)
d
et
e ct
ed i
ns
p
i k
ed
s u rf
a c ew
at
e rb
y L T B
w i
th
I
X
a nd
0
.5X
X
-g
l
u cc o n c e n
t
r at
i
o n s a nd b
y
C
ol i l
e rt
Q
T
s af
t
e r2 4
a nd
4
8 h
o u r si
n c ub
at
i
o n at
4 4
.5
' '
C
4
1
F i
g
u r e7
.B
o xp
l
ot
of
o v e r al l E
c ol
i
c o n c e nt
r at
i
o n si
n sp
i k
ed
t
e st
w
at
e ra s
d
ete c
t
ed
i
nC
B T
sw
i
t
h
L T B h
a vi
ng
t
w
od i f f
e r e nt
X
-g
l
u cc o n c e n
t
r at
i
o n s a nd i
nQ
u a nt
i
t
r ay
sw i
th C
ol i l
e rt
m
ed i
um
, a c r o s s al l
i
n c ub
at
i
o nt
em
p
e r at
u r e s of
4 4 5
' 'C
,3
7
°
C
, a nd
2 7
°
C
, a nd b
ot
h
i
n c ub
at
i
o np
e ri
od
s of
2 4
a nd
4
8 h
o u r s4 4
F i
g
u r e8
M
e a s u r ed E
c ol
i
c o n c e nt
r at
i
o n si
n sp
i k
ed
t
e st
w
at
e r a sm
e a s u r ed by
t
h
eC B T
t
e st
u si
ng
L T
B
w i
th
t
w
od i f f
e r e nt
X
-g
l
u c c o n c e ntr a
t
i
o n s a nd b
y
C
ol i l
e rt
Q
T
, at t
h
r e ei
n c ub
at
i
o nF i g
u r e9
.M
e a nE
c ol i
M
P
N
/ 1 0 0
m
L
an
d 9 5
%
c o nf
id
e n c ei
n t
e r v al
sf
o r1
1
M
o rg
a nC
r e ek
t
ri
al
s at
i
n c ub
ati
o nt
em p
e r at
u r e s of
4 4
.5
°
C
,3
7
°C
, a nd
I
T
C
.(
I
n c ub
at
i
o nt
i m
e sw
e r e2 4
h
o u r sf
o rt
h
e4 4
.5
°
C
a n
d
3
7
°C
t
em
p
e r at
u r e s a nd
4
8 h
o u r sf
o rth
e2 7
°C
t
em p
e r at
u r e)
5 2
F i
g
u r e1
0
.B
o xp
l
ot
of
E
c ol
i
c o n c e nt
r at
i
o n si
n n at
u r al
s u rf
a c ew
at
e ra s
d
et
e ct
ed
at
d i ff
e r e nt
i
n c ub
at
i
o nt
em
p
e r at
u r e s of 4 4
.5
,3 7
a n
d 2 7
°C b
y t
h
eC B
T
u si
ng
L
T B
/X
-G
l
u c a nd b
y
C
ol i l
e rt
Q
T
,e x c
l
ud i
ng
e xt
r em
e v al
u e s5 3
F
i
g
u r e1 1
B
o xp
l
ot
of
E
c ol
i
c o n c e nt
r at
i
o n sd
et
e ct
ed i
n n at
u r al
s u rf
a c ew
at
e rb
y
t
h
eC B
T w i
t
h
L T B
a nd 0
.3X X
-
G l
u c at
i
n c ub
at
i
o nt
em
p
e r at
u r e s of
4 4
.5
,3 7
a nd 2
7
°C
5 4
F
i g
u r e1 2
.L
i
n e a r r eg
r e s si
o n of
£
. c ol
i
M
P
N /
1
0 0 m
L
i
n n at
u r al
s u rf
a c ew
at
e ri
nL T B
w i
t
h
0
.3
X X
-g
l
u cC
B T
s c om
p
a r ed
t
oC
ol
i
l
e rt
Q
T
sa c r o s s a
l l
th
r e ei
n c ub
at
i
o nt
em p
e r at
u r e s of
4 4
.5
,3 7
, a nd
2
7
"C
,e x c
l
ud i
ng
e xt
r em
e v al
u e s5 5
F i g
u r e1
3
L
i
n e a r r eg
r e s si
o n of
t
h
e s ub
s et
of E
c ol
i
M
P
N /
1
0 0 m
L
l
e s sth
a n2
0 0
i
n n at
u r al
s u rf
a c ew
at
e ri
nL T B w i
t
h 0 3X X
-g
l
u cC
B T
sc o
m
p
a r ed
t
oC
ol i l
e rt
Q
T
s a c r o s s al l
t
h
r e ei
n c ub
at
i
o nt
em
p
e r at
u r e so
f 4 4 5
,3 7
, a nd 2 7
°1
.I
nt
r od
u ct
i
o nO
v e r8 8
0 m
i l l i
o np
e op l
ew
o rl d w i d
el
a ck
a c c e s st
o s af
ed
rin
k
i
ng
w
at
e r s o u r c e s,p
ut t
i
ng
t
h
em
at
ri
sk f
o rw
at
e r-b
o r n ei l l
n e s s e s, e s
p
e ci
al l
y
d i
a r rh
e al d i
s e a s e(W
H
O
/U
N
I
C
E
F
,2
0
10
)
.F
e c al l
y
c o nt
am i
n at
ed d
ri
nk
i
ng w
at
e ri
sth
el
a rg
e st
c o nt
ri
b
ut
o rt
ot
h
e1 8
m
i
l l
i
o nd
e at
h
sp
e ry
e a rf
r om
d i
a r rh
e al
d
i
s e a s e.T h
em
aj
o ri
t
y
of
t
h
e s ed
e at
h
s o c c u ri
n
ch i l d
r e n u nd
e rfi
v ey
e a r s of
ag
eb
e c a u s eth
ey
a r e e sp
e ci
al l
y
s u s c ep t
i b l
et
ot
h
e ef f
e ct
so
f d i
a r rh
e al d i
s e a s e.I
nd
e v el
op
i
ng
c o u nt
ri
e sl
a ck
of i
nf
r a st
r u ct
u r em
e a n sm
a ny p
e op
l
em
u st
d
ri
nk w
at
e rf
r om
u np
r ot
e ct
ed
,p
ot
e nt
i
al l
y p
ol l
ut
ed
s o u r c e s(
B
r ow
n et
al.
,2 0 0 8
;
C
u rti
s a nd C
aim
c r o s s,2
0 0 3
;
W
H O 2 0 0 4
)
.O
n e of
t
h
e ai m
s of
t
h
eM
i l l
e nn
i
um
D
e v el
op
m
e nt
G
o al
s, a s s et
f
o rt
h b y
th
eU
ni
t
ed N
at
i
o n si
n2
0 0 0
,i
st
oh
al
v eby
2
0
1
5
t
h
en u
m b
e r of
p
e op
l
ew i
t
h
o ut
a c c e s st
o s af
ed
ri
nk i
ng
w
at
e r, a nd
i
nP
r e si d
e nt
O b
am
a 's
i
n a ug
u r al
sp
e e ch h
ep
l
ed
g
ed
t
ot
h
ep
e op
l
e of
p
o o r n at
i
o n st
ow
o rk
al
o ng
si
d
et
h
em
t
o "l
et
c
l
e a nw
at
e rf l
ow
"(
U N
,2 0 02
;
O b
am
a,2
0 0 9
)
.I
n o rd
e rt
o r e a ch
t
h
e s eg
o al
s,it
i
s n e c e s s a ry
t
oi d
e nt
i
fy
w
h
e r ed
ri
nk i
ng
w
at
e ri
su n s a
f
eb
ef
o r ew
o rk
c a nb
ed
o n et
oi m
p
r o v ei
t
.D
et
e cti
o n of
E
s ch
e ri
ch
i
a c ol
i
i
st
h
em
o st
w i d
el
y
a c c ep
t
ed m
et
h
od f
o rm
e a s u ri
ng
t
h
em i
c r ob i
al q
u al i
t
y
of d
ri
nk i
ng
w
at
e rt
h
at
i
s at
r
i
sk f
o rf
e c al
c o nt
am i
n at
i
o nT h
ei
nd i
c at
o r o rg
a ni
sm
E
c ol
i
i
st
h
e st
a nd
a rd i
nd i
c at
o r of
f
e c al
c o nt
am
i
n ati
o ni
nd
ri
nk i
ng w
at
e r, e nd
o r s ed b
y
th
eU
S E P
A
a nd
t
h
eW
H
O
, a nd h
a sb
e e n sh
ow
nt
ob
e a s s o ci
at
ed w it
h d i
a r rh
e al d i
s e a s e ri
sk
(
M
o e et
al
.,1
9 9
1
)
.H
ow
e v e r,c u r r e n
tl
y
ap p
r o v ed m
eth
od
sf
o rth
e e n um
e r at
i
o n of E
c ol
i
i
nd
ri
nk i
ng
w
at
e r s am
p
l
e sr e
q
ui
r eth
e u s e of
sp
e ci
al i
z ed
eq
ui
p
m
e nt,
i
n cl
ud i
ng
a n el
e ct
ri
c al l
y p
ow
e r ed i
n c ub
at
o r, a nd
M
a ny
a r e a s of
t
h
ew
orl
d
t h
at
l
a ck
a c c e s st
oi
m
p
r o v ed
d
ri
nk i
ng
w
at
e r s o u r c e s arelo c a
t
ed i
n r em
ot
e r u r al
r eg
i
o n sw
h
e r el it
t
le
i
sk
n ow
n ab
o ut t
h
eq
u al i
t
y
of
s o u r c e sh
o u s eh
ol
d
s u s ef
o rdr
i
nk
in
g
w
at
e r.I
n s u ch l
ow
-r e s o u r c e s e
t t
in
g
s,
w h
i
ch
m
ay
al
s ob
ev e r
y
is o
l
at
ed
, a c c e s si b
l
em
et
h
od
sf
o rd
et
e rm i
nin
g
t
h
eq
u
al i
t
y
of dr
in
k i
ng
w
at
e r s o u r c e sa r e
l
a ck i
ng
.S
ta n
d
a rd
m
et
h
od
s u s ed
t
om
o ni
t
o rm
i
c r ob
i
al
w
ate r
q
u al it
y f
o r r eg
ul
at
o ry
c o
m
p
l ia n c e
in
d
e v el
op
ed
c o u ntr
i
e sm
ay
b
e e xt
r em
el
y
d i f fi
c ul
t to
u s ei
nt
h
e s et
y p
e s of
s e
t t
in
g
sF
o
r e x am p l
e,t
h
eU S
E P A
p
r o c ed
u r e sf
o rm i
c r ob i
al
a n al y
si
s of w
at
e r s am
p
le s
s
ta
t
et
h
at t
h
e s am
p l
em
u st
b
ek
ep
t
b
etw
e e n1
-4
°C
d
u ri
ng
t
r a n si
t
a nd
sh
o ul d b
e a n al
y
z ed
a ss o o n a s
p
o s si b l
e aft
e r c ol
l
e ct
io n
a nd
n ot
m
o r eth
a n3
0
h
o u r sp
o st
-c o
l le c
t
i
o n(
U S
E P A
,2
0
0 2
)
.I
t
i
sd i f fi
c ult t
o a ch i
e v eth i
sin
l
ow
-r e s o u r c e s e
t t
i
ng
s a nd
th
eq
u al it
y
of
a n al
y
sis o
f
a s a
m
p
l
et
h
at
d
o e s n ot
f
ol l
ow
th
e s eg
ui d
el
in e s
w i l l b
e c om
p
r om is e
d
.T
h
e r ef
o r e,
t
h
e r eis a n e e
d f
o r alo
w
-c o st
,
p
o rt
ab le
, si m
p
l
em
et
h
od
t
h
at
d
o e s n ot
r e
q
ui
r e a ni
n c ub
at
o r a nd
c a nb
ep
e rf
o rm
ed
o n- si
t
e,
t
ode
t
e rm
i
n et
h
em ic r o
b
i
al q
u al i
t
y
of
d
ri
nk i
ng w
at
e ri
nl
ow
-r e s o u -r c e s e
t
t
in
g
s.T h
ep
u rp
o s e of
th i
s st
ud
y
w
a st
o e v alu a
t
e an o v e
l
c om
p
a rt
m
e nt
al
i
z ed b
ag
t
e st(
C
B T
)
m
et
h
od f
o rq
u a nt
i f y i
ng E
c ol
i i
ndr
in
k i
ng
w
at
e rs a
m
p
l
e s.T h i
s n ew
t
e st
u s e s al
a u ry
l
tr
y p
t
o s eb
r oth
(
L T B
)
m
ed i
um w i
th
t
h
e ad d i
t
i
o n of 5
-b
r om
o-4
-c
h lo r o
-3
-in
d
ol
y
l
-b
e
t
a-D
-g l
u c u r o ni
c a ci d
(
X
-g l
u c)
, a nd
c om p
a r e sth
em
et
h
od
a
g
ain s
t
ag
ol
d
st
a nd
a rd
q
u a nt
i fi
c at
io n
m
et
h
od
,
I D E
X X C
ol i l
e rt
®
Q
u a nt
i
tr a
y 2 0 0 0
(Q
T
)
,t
o a s s e s sth
e ef f
e ct
i
v e n e s s of
t
h i
s n ew m
et
h
od f
o r u s ei
nl
ow
-r e s o u -r c e s e
t t
in
g
s c om
p
a r ed
1
.1 O b
j
e ct
i
v e si
.T
o c om
p
a r ed
i
f f
e r e nt
c ol i
f
o rm
m
ed i
a s up p l
em
e nte
d w i
th
X
-g l
u c a sw
el
l
a s
t
h
e c o n c e nt
r at
i
o n of X
-G l
u ci
nt
h
em
ed ia
f
o r op
t
i m
um d
ete c
ti
o n of E
c ol
i
i
nf
e c al l y
c o
nt
am i
n at
ed w
at
e r s am p l
e si i
T
o c om
p
a r e a n ew lo
w
-c o s
t
m
et
h
od f
o rth
eq
u a nt
i f
i c ati
o n of Z
c ol
i
i
nd
rin
k i
ng w
ate r s o u r c e s
t
o aU S
E P A
-a
p p
r o v ed
g
ol d
st
a nd
a rd m
et
h
od
,I D
E X X
C
ol
i
l
e rt
®
Q
u a nt
it
r ay
2 0
0
0
.i i
i
T
o sta
t
i
sti
c al l y
c om
p
a r et
h
e n um b
e r s of
£
■c o
l
i d
ete c
te
d b y
t
h
eC B T
c o
m
p
a r ed
to
t
h
eQ
T
iv
.T
o st
ati
st
i
c al l
y
c om
p
a r et
h
e n um b
e r s oi
E
c ol
i
d
et
e ct
ed b
y t
h
eC B T
c o
m
p
a r ed
to
t
h
eQ
T
at
t
h
r e ei
n c ub
at i
o nt
em
p
e r atu r e s
,2 7
,3 7
, a nd
4 4 5
°
C
.V
T
o a s s e s st
h
e ap p
r op
ri
at
e n e s s of
t
h
eC
B T
m
et
h
od f
o r u s ei
nl
ow
-r e s o u -r c e s e
t t
i
ng
s c om
p
a r ed
t
ot
h
e ot
h
e r c u r r e ntl
y
a v ai
la
b le
m
eth
od
s.1
.2
E
xp
e ri m
e nt
al D
e si g
nA
s afi
r st
st
ep
i
nt
h
ed
e v elo
p
m
e nt
a nd
e v al
u ati
o n of
a n ew C B
T
m
et
h
od
f
o rd
ete c
ti
ng
E
c ol
i
in
w
at
e r,i
t
w
a s n e c e s s a ry t
od
et
e rm in e
w h i
ch
of
t
w
ow
i d
el
y
u s ed
c o
l i fo r
m m
ed i
a,l
a u r>
'
l
tr
y p
t
o s eb
r oth
(
L T B
)
a nd
E C
m
ed i
um
,w h
e n s up p
le
m
e nt
ed w it
h
t
h
e ch
r om
og
e ni
cB
et
a-g l
u c u r o ni d
eX
-g
lu c
,w
a sm
o st
ef f
e ct
iv e
f
o rt
h
e c ult
u r e oi
E
. c ol
i
.I
nth
e s e c om p
a ri
s o n s,b
ot
h m
ed ia
w
e r e e v al
u at
ed
o nth
eb
a sis o
f w h i
ch m
ed i
um w
a sm
o st
s
i m i la r
t
oth
eC
ol i l
e rt
, a c ol i f
o rm m
ed iu
m w i
t
h
th
efl
u o r og
e ni
cB
et
a-g l
u c u r o ni d
es u
b
st
r at
e sM
U G
,t
od
et
e ct
E
c ol
i
in
w
at
e r s am
p
l
e sin
m
o st
p
r ob
ab le n u
m b
e r a s s ay
s.I
nc o
l
o r ch
an
g
ep
rodu
c ed b
y
h
y
d
r ol
y
si
s of
t
h
eX
-g l
u c ch
r om
og
enu
si
ng
th
em
i
ni
m
um
e
ff
e ct
i
v e c o n c e ntr a
t
i
o n of i
t
,d i f f
e r e nt
c o n c e nt
r at
i
o n s(
I
X
(
0
.3 7
14 g
/
L
)
,0
5
X
(
0
.1
8 5 7
g
/
L
)
,0
.3
X
(
O
.I l
14 g
/
L
)
,
O
.I X
(
0
.0 3
7 1 4 g
/L
))
of X
-g
l
u cw
e r e e v al
u at
ed
o nt
h
eb
a si
s of
E
c o
l
i q
u a nt
i f
i c ati
o nin
th
eC B T
c om
p
a r ed
t
o r e s ul
t
s ob
t
ain e
d b
y
C
ol i l
e rt
Q
T
a s ag
ol d
s
t
a nd
a rd
.T
h
e e xp
e ri
m
e nt
sw
e r ei
nt
e nd
ed
t
od
et
e rm
i
n ew
h i
ch
X
-g l
u c c o n c e nt
r at
i
o np
r od
u c ed b
ot
h m
a xi m
um E
c ol
i
c o n c e nt
r at
i
o n s a sw
el l
a s e a si l y
r e ad
ab l
e c olo r c
h
a ng
er e s u
l
t
si
nt
h
eC B T i
n o rd
e rt
oi d
e nt
i f
y t
h
em i
ni
m
um
ef f
e ct
iv e a n
d
t
h
e r ef
o r eth
em
o st
c o st
-e
f f
e ct
iv e
c o n c e ntr a
t
io n
r eq
ui
r ed
.I
n o rd
e rt
od
ete r
m
in e
i f
th
eC
B T
w
o ul d
p
e rf
o rm
ef f
e ct
iv e
l
y
u nd
e r c o nd i
ti
o n se x
p
e ct
ed i
nt
h
efi
el d
u si
ng
am b i
e nt t
em
p
e r at
u r ei
n c ub
at
io n
,m
eth
od
p
e rf
o rm
a n c ew
a sc o
m
p
a r ed
t
ot
h
eC
ol i l
e rt
Q
T
st
a nd
a rd f
o rE
c ol
i q
u a nt
i fi
c at
io n
at
in c u
b
at
io n
te
m
p
e r at
u r e so
f 4 4
.5
' 'C
,3
7
°C
a nd 2 7
°C
a nd i
n c ub
at
i
o nt
i m
e s of 2 4
a nd
4
8 h
o u r s u sin
g
n atu r a
l
s u rf
a c ew
at
e r s am
p
le s a n
d
s am
p
le s s
p
i k
ed w i
t
h
p
ri m
a ry
s ew
ag
e ef fl
u e nt
B
e c a u s e n o n -st
a nd
a rd
m
ed i
a a nd in c u
b
at
i
o n c on
d i
ti
o n sw
e r eb
ein
g
c o n si d
e r ed f
o rth
eC
B T
f
o rE
c ol
i
q
u a nti
fi
c at
i
o ni
nw
at
e r,i
t
w
a s of i
nt
e r e st to
de
t
e rm
i
n ei f
t
h
e r at
e of
b i
o ch
em
i
c al l y
-c o n
fi
rm
ed
E
c oli
p
r e s e n c ei
n c olo r
-p
o sit
i
v eC B T
ch
am b
e r sw
a s c om
p
a r ab l
et
ot
h
at
of
fl
u o r e s c e n c e-p
o sit
i
v ew
el ls
i
nt
h
eC
ol i l
e rt
Q
T
t
e st
.T h
ep
r e s e n c e of E
c ol
i
in
p
o si
t
iv e
c o
m
p
a rt
m
e nt
s of
t
h
eC B T
w
a sd
et
e rm in e
d b i
o ch
em
i
c al l
y
u si
ng
t
h
eE
nt
e r ot
ub
e^ "^11
t
e st
a n
d
t
h
e r e s ul
ts
w
e r e u s ed
t
o c al
c ula
t
et
h
e s e n si
ti
vi
t
y
a nd
sp
e ci f
i ci
t y
of
t
h
eC B
T
f
o rE
c ol
i
de
t
e ct
i
o n .B
a s ed
o nth
e r e s ult
s of
t
h
e s em
et
h
od
op
t
i m
i
z at
i
o n a nd
c om
p
a ri
s o n st
ud
i
e s a nd
as e
t
of
ad d i
t
io n a
l
p
r e-d
et
e rm i
n ed
c rit
e ri
ath
e ap p
r op
ri
at
e n e s s of
t
h
eC B T m
eth
od w
a s2
.R
e vi
ew
of
t
h
eL i
t
e r at
u re
F
e c al
c o nta
m
i
n at
i
o n of
d
ri
nk
i
ng
w
at
e ri
st
h
em
ai
n c a u s e of d i
a r rh
e al i l l
n e s si
nl
ow
-r e s o u -r c e s e
t t
i
ng
s.M
a ny
of
t
h
e s e c a s e s of i l l
n e s s c o ul d b
e a v oi d
ed i f
t
h
e r e e xi
st
ed
al
ow
-c o s
t
t
e st t
od
et
e rm i
n et
h
eq
u al i
t y
of d
ri
nk i
ng w
at
e rt
h
at
c o ul d b
ep
e rf
o rm
ed b
y
b
ot
h
t
e ch
ni
c al
a nd
n o n -t
e ch
ni
c al
u s e r s.
I
f
s u ch
at
e st
w
e r e a v ai l
ab l
et
o af
am i l
y
o r c om m
u ni
t
y
i
n al
ow
-r e s o u -r c e s e
tt
i
ng
,t
h
ey
w
o ul d b
ei
nf
o rm
ed
of
w
h
et
h
e rt
h
ei
r c u r r e nt
d
ri
nk i
ng w
ate r
s o u r c e
i
s s af
e, o rw h
et
h
e rt
h
ey
sh
o ul d
s e ek
ot
h
e r s o u r c e s of d
ri
nk i
ng
w
at
e r o r u s ed i
si
nf
e ct
i
o nt
r e at
m
e nt
b
ef
o r e c on
s um
p
t
i
o n .T h
e s am
ei
st
r u ef
o r si
t
u at
i
o n sf
ol l
ow i
ng
n a
t
u r al d i
s a ste r s
i
nw h i
ch w
at
e ri
nf
r a str u c
t
u r em
ay
b
ei m
p
ai
r ed
a nd
t
h
u sd
ri
nk i
ng
w
at
e rq
u al i
t
y
m
ay
b
e c om
p
r om i
s ed
.C
u r r e nt
m
et
h
od
s a r e n ot
ap
p
r op
ri
at
ef
o rl
ow
-r e s o u -r c e
s e
t t
i
ng
s;
h
ow
e v e r,t
h
e c om
p
a rt
m
e nt
al i
z ed b
ag
t
e st
(
C
B
T
)
of f
e r s a n al
t
e r n at
i
v eto
t
h
e r e st
t
h
at
e n ab l
ei
ts u s a
g
ei
nt
h
e s e s et
t
i
ng
s.2
.1
C h
a r a ct
e ri
st i
c s of
a nI
d
e al I
nd i
c at
o rO
rg
a ni
sm
I
nd
et
e rm
i
ni
ng
t
h
em i
c r ob i
al
q
u al i
t
y
of d
ri
nk i
ng
w
at
e r,i
t
i
s n ot
i d
e al
t
o at t
em
p
t t
od i
r e ct
l
y
e n um
e r at
et
h
e n um b
e r of
p
at
h
og
e n sp
r e s e nt
i
nt
h
ew
at
e r.T
h i
sw
o ul d
p
o s e ah
e al
t
h
ri
sk
t
ot
h
e e n um
e r ato r
,w
o ul d b
em
o r et
i m
e-c o n s u
m i
ng
a nd
c o st
l
y
, a nd w
o ul d
n ot
b
e a s a c c u r ate
b
e c a u s et
h
e ab
s e n c e of
o n ep
at
h
og
e nd
o e s n ot
r ep
r e s e nt t
h
e ab
s e n c e of
o
