153
یبایدر
تارییغت
نایب
نژ
نینژولتیو
رد
دبک
و
نادمخت
یهام
دیفس
یایرد
رزخ
(Rutilus frisii Kutum)
ف اب ههجاوم رد
ورتساوتی
ژ
ن
یاه
نیئتسینج
و
لورتسوتیساتب
دواد
یئاضردمحم
* d.mrezaei@malayeru.ac.ir هورگ ،تلایش هدکشناد عبانم یعیبط و طیحم ،تسیز هاگشناد ،ریلام ،ریلام ناریا تاغل یدیلک : نج ،نیئتسی ساتب ،لورتسوتی و ،نینژولتی ب نای نژ ، یهام دیفس نینژولتیو پ شی ئتورپ هدام نی رد هک تسا مخت هدرز اه تظلغ ی امسلاپ رد لااب ی هام ی غلاب هدام و رد هب خساپ اه نژورتسا ی لوت دبک رد نادمخت دی م ی ددرگ ( یجان و ،ناراکمه 1393 ). و نژ نینژولتی هام دبک رد ی و هدام و رن نچمه نی هام نادمخت رد ی ضرعم رد نتفرگ رارق اب کرت تابی نژورتسا ی م لاعف ی ( ددرگ Folmar et al., 1996 .) اذل زا نینژولتیو یم ناوت هب ناونع کی صخاش یتسیز رایسب دیفم تهج صیخشت روضح تابیکرت هبش ینومروه رد طیحم یبآ هدافتسا دومن ( Sumpter and Jobling, 1995 .) نج نیئتسی 1 ، کی بیکرت هبش نژورتسا ی عض ،فی اب شیازفا لاعف تی زنآ می زاتامورآ م ی دناوت رجنم هب لوت دی ای ازفا شی زبآ رد هدرز حطس نای دوش (Cederroth et al., 2012) . لورتسوتیساتب ، د رگی بیکرت یهایگ زین لد هب لی راتخاس تهابش ی اب اهدیئورتسا یم دناوت رد دنیارف لوت دی لثم دیامن داجیا للاخا ( Orrego et al., 2010 .) شیازفا ینارگن اه زا ااسم لئ احم طی ابآ ی ، هاب ار تااهجوت ااسح رازابا زا هدافتسا تمس رات و ااخ رات ( صخااش یتسیز ) اب تیفرظ شیپ ینیب تارثا مهرب هدننز یاه دداغ 1 Genistein نورد زیر زکرمتم هدرک تسا . رب نیا اسا ، لولاس رازبا ی و لوکلوم ی دج دی ار ناققحم هب ناکم هعلاطم مسی ااه ی لاصا ی نومروه درکلمع یاه دیلوت یالثم یاعیبط و مهراب هداننز یاه ینورد ریظن نژورتسا یاه یانوریب ردااق یام دنزااس (Meucci and Arukwe, 2005
.) جیار نیرت شور یاراب شجنس نینژولتیو شور ازایلا ( ELISAs2 ) هدواب هاک هاب لیلد توافت شور راک ازایلا رد هاگاشیامزآ یااه ،فالتخم لاوامعم جیاااتن لااباق هااسیاقم یامن دنااشاب . کااینکت یاااه یلوکلوم ظن ری ب نای نژ ، یکی ااه شور زا ی ار جای زوراما ی تسا اقم رد هک هسی اه شور اب ی زنآ یمی دودحم تی راتمک رتلااب تقد و ی ( دنراد
Jensen and Ankley, 2006
.) یهام فس دی ( R. frisii Kutum هنوگ زا ) اه ی و چوکدور داصتقا ی رد یای رزخ تسا هک یط هام یاه دنفسا و نیدرورف تهج لیمکت دنیارف دیلوت یلثم دراو هناخدور یاه یهتنم هب یایرد رزخ یم دوش ( ،یکلملادبع 1385 .) رد یط نیا تدم نیدلوم اب تابیکرت و هدنیلاآ یاه یفلتخم زا هلمج نژورتساوتیف اه هجاوم دنهاوخ دش . فده قیقحت رضاح یسررب یگنوگچ رثا ود کرت بی نج نیئتسی و ساتب لورتسوتی م رب نازی ب نای یبسن و نژ نینژولتی رد 2 Enzyme-linked Immune-sorbent Assays
154 سنج هدام یهام فس دی هناخدور هب رجاهم یم دشاب . داوم و شور راک دادعت 49 ددع دلوم هدام یهام دیفس ( R. frisii Kutum ) م اب نیگنای نزو 15 ± 680 مرگ ش هناخدور زا دوری ص دی و زا سپ 48 راگزاس تعاس ی رد کنات اه ی 300 ل یرتی هب ضرعم رد ازجم روط هس نج حطس نیئتسی و هس حطس ساتب لورتسوتی تظلغ اب اه ی ( 500 ، 50 و 10 رب مرگونان ل رتی س( ) امگی ردلآ جی -)ناملآ رارق .دنتفرگ سپ زا 21 زور گ رارق ضرعم رد ،یری ت ره زا رامی هب روط فداصت ی اب اعر تی ناوق لوصا نی امح تی ح زا تاناوی امزآ یهاگشی باختنا و زا هنومن اهنآ دبک و نادمخت تفاب یرادرب روص ت تفرگ . جارختسا RNA ن دروم زای زا تفاب ،اه اب هدافتسا زا ارت ی لوز ا اب بوسر و لوناپورپوزی ارش تحت طی راع ی زا RNase تروص تفرگ . تیفیک و تیمک RNA هب شور ونان پارد ( nm 280 / 260 زروفورتکلا و ) رب ور ی لژ زوراگآ 5 / 1 دصرد زرا یبای دش ،ناراکمه و نومارآ( 1393 ) . سپ زا فذح گدولآ ی لامتحا ی DNA طسوت ت رامی DNase ( Thermoscientific, USA Kit, DNase 1 )، هتشر cDNA رب لمعلاروتسد اسا تیک )نپاژ( اراکات هتخاس .دش تهج حارط ی یاهرگزاغآ یصاصتخا لودج( 1 ) هب روظنم سرتسد ی زرا و یبای و نژ نینژولتی اه هنومن رد ی و دبک لاوت زا نادمخت ی اه ی ریاس یهام نا : ( EU930850 ) Rutilus rutilus ، ( AB331884 ) Cyprinus carpio ، ( EF190987 ) Catla catla ، ( DQ061948 ) Rutilus rutilus طسوت رن م رازفا AlleleID ( Niazi et al., 2014 ) هدافتسا و ات ئ دی BLAST اپ رد هاگی تاعلاطا ی NCBI .تفرگ تروص لودج 1 : تسرهف ارپ یاهرمی حارط ی و نژ هدش نینژولتی
Table 1: List of designed primer for vitellogenin gene.
Primer name Primer sequences (5-3) Tm PCR product size (bp)
Rfc-F GAAGTGCGTCGTATCTTGCCAACAG 62/9 218 Rfc-R ATCACAGCAAAGGTCTGGAGAGCAA 63/4 شور Real-time PCR اب زا هدافتسا SYBRgreen ارب )نپاژ ،اراکات( ی سررب ی ب نای و نژ نینژولتی اب مجح اهن شنکاو یی 20 م رتیلورکی ( هد م ورکی ل رتی زنآ می Gold Taq ، ک رفاب تی ، 2 -0 م رلاومورکی زا ره رگزاغآ و 20 مارگونان cDNA ) ارش .دش هدافتسا طی لماش شنکاو 95 تناس هجرد ی دارگ لوا هی تدم هب 30 ناث هی و 40 ،هخرچ 94 تناس هجرد ی تدم هب دارگ 15 ناث ،هی امد ی لاصتا 60 تناس هجرد ی تدم هب دارگ 20 ناث هی امد و ی طسب زنآ می 72 تدم هب هجرد 20 ناث هی اتن ..دش هتفرگ رظن رد جی مک تروص هب هدمآ تسدب ی س لکی ( هناتسآ Ct ) هب شور یفاپ لانآ و زی نتبم ی هدزاب رب ی شنکاو PCR لومرف قبط لیذ تفرگ ماجنا ( Pfaffl, 2001 ) . Etarget نامدنار : Real-time PCR ب نای ،فده نژ Eref : نامدنار Real-time PCR ب نای سنرفر نژ ( β actin ) رد اپ نای لامرن ندوب داد ه اه نومزآ اب ANOVA سررب ی اقم و هسی م نیگنای رازفا مرن رد SPSS 17 شور هب LSD .تفرگ تروص نکناد و تظلغ رد دناوت یم نیئتسینج هک داد ناشن جیاتن 500 رد رزخ یایرد دیفس یهام هدام نیدلوم رد رتیل رب مرگونان نژ نایب شیازفا ببس اه هورگ ریاس اب هسیاقم نینژولتیو لکش( دوش دبک تفاب رد 1 فلتخم حوطس هک یلاحرد .) لکش( دادن ناشن دهاش هورگ اب ار یتوافت لورتسوتیساتب 2 .)
155 لکش 1 هعطق : ریثکت هدش نژ نینژولتیو رد دبک یهام دیفس رد ضرعم حوطس فلتخم لورتسوتیساتب و نیئتسینج
Figure 1: Multiplied vitellogenin gene in the liver of Kutum that exposed to different levels of β-sitosterol and Genistein. لکش 2 : ب نای بسن ی و نژ نینژولتی رد دبک یهام دیفس هدام رد ضرعم تظلغ یاه فلتخم نیئتسینج و لورتسوتیساتب مرگونان( رب رتیل ) سپ زا 21 زور رد ضرعم رارق یریگ لقادح دوجو مدع . کی ور رب هباشم فرح ی نوتس اه (a < b < c) ناشن نعم فلاتخا دوجو هدنهد ی راد ب نی نوتس ( تسا اه 05 / 0 P< .)
Figure 2: Relative expression of the vitellogenin gene in Kutum liver after 21 days exposed to different levels of β-sitosterol and Genistein (ng / L). The similar letter on the columns (a <b <c) indicates a significant difference between the treatment (P <0.05). لکااش اااب قباااطم 3 ضرااعمرد نااایهام ناداامخت تاافاب رد نیئتسینج 500 تظلغ اب هسیاقم رد 10 راتیل راب مرگونان رد ناایهام هاک یترواص رد .داش هدهاشم نژ نایب شیازفا هیلک لورتسوتیساتب ضرعم و رگیداکیاب یافلاتخا ااهرامیت ( دندادن ناشن دهاش هورگ 05 / 0 p> لکش( .) 3 هاب هجوت اب .) سا رب و جیاتن یاجورخ یااه هداد ا Real-time PCR ، رد یرتاشیب ناایب تدش یاراد دبک تفاب رد نینژولتیو نژ .داشاب یم نادمخت تفاب اب هسیاقم رد نایا هاعلاطم یاراب نیلوا راب ثات ری کرت ود بی نومروه هبش ی گ یهاای راب حطاس ب نای و نژ ولتی ژ نین رد دلوم نی هداام هاام ی فاس دی رد یاای رزخ یاسررب داش . ناایب نژ نینژوالتیو طاسوت نژورتاسا میظنت یم ،ددرگ ورتسا ژ ن اب ذوفن هب نورد هتاسه یلولاس ی ک ونور روتکاف یسی کشت لی هک هداد رجنم هب لاعف نداش واح نژ ی نژورتاسا خاساپ راصانع ی (EREs) تن رد و هاجی تاایلاعف نژ و نینژواالتی اام ی دوااش ( Fu et al., 2006 ) . b b b b b b a 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 10 50 500 10 50 500 دهاش لورتسوتیساتب نیئتسینج دبک رد نینژولتیو نایب ح طس ات ب لورتس وت یس n g /l 10 نج ن یئ تس ی n g /l 10 ات ب لورتس وت یس n g /l 50 نج ن یئ تس ی n g /l 50 ات ب لورتس وت یس n g /l 500 نج ن یئ تس ی n g /l 500 ها ش د 100 200
156 لکش 3 : ب نای بسن ی و نژ نینژولتی هام نادمخت رد ی فس دی اه تظلغ ضرعم رد هدام ی نج فلتخم نیئتسی ساتب و لورتسوتی رب مرگونان( ل رتی زا سپ ) 21 گ رارق ضرعم رد زور یری لقادح دوجو مدع . کی ور رب هباشم فرح ی نوتس اه (a < b < c) ناشن فلاتخا دوجو هدنهد نعم ی ب راد نی نوتس ( تسا اه 05 / 0 P< .)
Figure 3: Relative expression of the vitellogenin gene in Kutum ovary after 21 days exposed to different levels of β-sitosterol and Genistein (ng / L). The similar letter on the columns (a <b <c) indicates a significant difference between the treatment (P <0.05). نیئتسینج زا تابیکرت وزیا ولاف ین هتخانش هداش رد ایواس هدوب هک نایهام رد ضرعم نآ ، لااب حطس یی و زا نینژولتی ار ام ناشن دبک تفاب رد ی ( دانهد Kausch et al., 2008 .) نیئتسینج و لورتسوتیساتب هتسب هب عون تفاب اای هدانریگ ینوژورتسا و نینچمه حطس نژورتاسا یانورد یام داناوت شقن تسینوگآ ای یتنآ تسینوگ هتاشاد اشاب ن د ( Morito et al., 2001 هاام دابک هنومن رد .) ی ام راظن هاب ی داسر نج نیئتسی ازافا اب شی ب حطاس ناای باسن ی و نینژوالتی راثا نوگآ یتسی نج تارثا .دشاب هداد ناشن ار نیئتسی درکلمع رب لوت دای هانوگ رد لاثم اام یه اکادام ( Kiparissis et al., 2003 ،) لزاق لاآ ( Bennetau-Pelissero et al., 2001 ) و یهااام دیفااس یااایرد رزااخ ( یئاااضردمحم و ،ناراااکمه 1395 ب ) نای هاام رد .تاسا هداش ی فاس دی نیئتاسینج و لورتسوتیساتب ببس رییغت لوت دراکلمع دای ،لاثم شیازافا تیلاعف یزاتامورآ و نومروه لویدارتسا دیدرگ ، ا نی شیازفا جراااخ زا لااصف داایلوت لااثم لاعف هااب تاای نوگآ کیتااسی نج نیئتسی لاح رد دش هداد تبسن ی هک نیدلوم رد ضرعم ساتب ی لورتاااسوت یااانچ ن دااانور ی درگن هدهااااشم دااای ( یئاضردمحم و ،ناراکمه 1395 ). یخرب نیاققحم ااقلا هدرز یزااس رد ناایهام رد ضراعم باسپ یاه هناخراک بوچ ذغاک شرازگ داندومن ( Orrego et al., 2010 انعم فلاتخا دوجو مدع .) ی راد رد نیدالوم هدام ساتب ضرعم رد لورتسوتی اب رد دهااش هورگ ناایب نژ نینژولتیو ، م ی شان دناوت ی ا هانوگ فلاتخا زا ی و اای دواجو ریاس کرت تابی رد باسپ هناخراک ذغاک یزاس ( Orrego et al., 2010 اهروتکاف و ) ی د یرگی ظن ری عوان و سنج تافاب دشاب ( Cleveland, 2014 .) قبط اتن جی حطس نایب باسن ی و نژ نینژولتی دبک تفاب رد رد اقم هسی نادامخت تفاب اب زا یرتلااب دوب . نیا راما ار یام ناوات هاب عوراش هدرز یزااس یلخاد تحت ریثات رامیت نیئتسینج تبسن داد . هکارچ نایب هدش رد نیدلوم رد ضراعم نیئتاسینج ماجح هدرز و هاب بسانت رطق کمخت شیازفا یام دابای ( Yousefi et al., 2014 .) تفاب اج دبک هاگی لصا ی لوت دی هام رد هدرز نای ام ی .دشاب رد هام ات ی ا یناری نون ضرعم رد لای ن لانف زای نژ و نیلتی دبک اقم رد هسی اس اب ری اه تفاب نایب یرتلااب تشاد ( یدیشمج و ،ناراکمه 1392 ) . رد اپ نای اتن قبط جی ا زا لصاح نی سررب ی ام ی ب ناوات ناای لصا لحم هک اج نآ زا ،درک ی تخاس و نینژولتی ثات تحت ری کرت تااابی نژورتااسا ی اانورد ی دارتااسا( لوی رد داابک تاافاب ) هام نای یم داشاب ، کرت رواضح تاابی ف ینژورتاساوتی ظن رای ab ab ab ab b ab a 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 10 50 500 10 50 500 دهاش لورتسوتیساتب نیئتسینج ن ادمخت رد نینژو لت یو ن ای ب حطس
157 نج نیئتسی یم دناوت گ اقلا اب هدنری ااه ی نژورتاسا ی نورد لولس ی ازفا ببس شی ب نای بسن ی هام رد روکذام نژ ناای رد ضرعم تظلغ یاه ا لااب نی کرت بی .دوش رکشت و ینادردق : قیقحت امح اب رضاح تی لام ی امح تی لام ی لام هاگشناد ری و شهوژپ تنواعم ی ( هاگشناد نآ 336 -1 -5 / 84 ماجنا هب ) سر دی دب هک نی سو هلی هدنسیون بتارم رکشت و ردق یناد شیوخ ار ملاعا یم دراد . عبانم م ،.ح ،دنمحرف ،.ا ،نومارآ یفقاوری تمعن و .ر.ع ، هلا ی ،.ع.م ، 1393 . ب نای و ةدننکدک نژ نینژولتی رد لزق دبک لاآ ی گنر نی نامک (Oncorhynchus mykiss) ثأت تحت ری هناخراک باسپ اه ی ا ذغاک ناری . هیرشن ش تلای ، 67 ( 2 :) 163 -149 . DOI: 10.22059/JFISHERIES.2014.51644 ،یدیشمج ک ،.ش سابل ،ی قداص ،.ر.م ی و .م ،هداز ینادزی تاداس ،ی ،.ع.م 1392 . ریثات نون لی رب لنف غت تاریی ب نای نژ اه ی و نینژولتی سولپانوز و ادی رد تفاب اه ی هامسات هلضع و ششبآ ،لاحط ،دبک ی ا یناری (Acipenser persicus) ش نونف و مولع . ،تلای 2 ( 2 :) 10 -1 . ،.ش ،یکلملادبع 1385 ریااخذ تاراییغت دانور یسررب . تلایاش یملع هلجم .)ناریا( رزخ یایرد دیفس یهاام هرامش ،مهدزناپ لااس ،نارایا 2 ناتسبات ، 1385 ، تاحفص 87 ات 99 . DOI: 10.22092/ISFJ.2006.113985 ئاضردمحم ی زاجم ،.د ، ی ما یری هلا تمعن ،.ب ، ی ، مودخم ،.ع.م ی مشاه و .چ ، ی ،.دمص ، 1395 . رثا ف نژورتساوتی یاه نج نیئتسی ساتب و لورتسوتی رب خرب ی صخاش اه ی لوت رد رثوم دی لثم هام ی فس دی رد یای رزخ
(Rutilus frisii Kutum)
. هیرشن ش تلای ، 69 ( 4 :) 461 -452 . DOI: 10.22059/jfisheries.2017.63863 ،.ط ،یجان نیسح هداز ،یفاحص ه . رافص و م،ی . 1393 . یسررب تارثا ینژورتساوتیف هنوباب هراصع ( Foeniculum vulgare ) سر و دشر رب یگدی سووا تی یاه یماروگ یهام هس لاخ (Trichogaster trichopterus) ملع هلجم . ی ش تلای ا ناری . 23 ( 1 :) 95 -85 . . 7.110 10.22092 isfj. 201 DOI: 110165 Bennetau-Pelissero, C., Breton, B.B.,
Bennetau, B., Corraze, G., Le Menn, F.,
Davail-Cuisset, B., Helou, C. and
Kaushik, S.J., 2001. Effect of
genistein-enriched diets on the endocrine process of gametogenesis and on reproduction efficiency of the rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). General and Comparative Endocrinology, 121(2):173– 187. DOI:10.1006/gcen.2000.7585
Cederroth, C.R., Zimmermann, C. and Nef, S., 2012. Soy, phytoestrogens and their
impact on reproductive health, "Review". Molecular and Cellular Endocrinology, 355:192–200.DOI: 10.1016/j.mce. 2011.05.049
Cleveland, BM., 2014. In vitro and in vivo
effects of phytoestrogens on protein turnover in rainbow trout (Oncorhynchus
mykiss) white muscle. Comparative Biochemistry and Physiology Part C: Toxicology and Pharmacology, 165: 9-16. DOI:10.1016/j.cbpc.2014.05.003
Folmar, L.C., Denslow, N.D., Rao, V., Chow, M., Crain, D.A., Enblom, J., Marcino, J. and Guillette, L.J., 1996.
Vitellogenin induction and reduced serum testosterone concentrations in feral male carp (Cyprinus carpio) captured near a major metropolitan sewage treatment plant. Aquatic Toxicology, 73:1–10. DOI:10.
1016/ j.aquatox.2005.03.021
158
Environmental Health
Perspectives, 104(10): 1096–1101. PMID: 8930552
Fu, K.Y., Chen, C.Y. and Chang, W., 2006.
Application of a yeast estrogen screen in non-biomarker species (Varicorhinus
barbatulus) with two estrogen receptor
subtypes to assess xenoestrogens. Toxicology in Vitro, 21:604 – 612. DOI:10.1016/j.tiv.2006.12.003
Jensen, K.M. and Ankley, GT., 2006.
Evaluation of a commercial kit for measuring vitellogenin in the fathead minnow (Pimephales promelas).
Ecotoxicology and Environmental Safty, 64:101:105.
DOI:10.1016/j.ecoenv.2006.02.011
Kausch, U., Alberti, M., Haindl, S., Budczies, J. and Hock, B., 2008.
Biomarkers for exposure to estrogenic compounds: gene expression analysis in zebrafish (Danio rerio). Environmental
Toxicology, 23:15–24.
DOI:10.1002/tox.20306
Kiparissis, Y., Balch, G.C., Metcalfe, T.L. and Metcalfe, C.D., 2003. Effects of the
Isoflavones Genistein and Equol on the Gonadal Development of Japanese Medaka (Oryzias latipes). Environmental Health Perspectives, 111 (9):1158–1163. PMID: 12842767
Meucci, V. and Arukwe, A., 2005. Detection
of vitellogenin and zona radiata protein expressions in surface mucus of immature juvenile Atlantic salmon (Salmo salar) exposed to waterborne nonylphenol.
Morito, K., Hirose, T., Kinjo, J. and
Hirakawa, T., 2001. Interaction of
phytoestrogens with estrogen receptors alpha and beta. Biological and Pharmaceutical Bulletin, 24:351–356. DOI:10.1248/bpb.24.351
Niazi, A., Ramezani, A. and Dinari, A., 2014. GSTF1 Gene Expression Analysis in
Cultivated Wheat Plants under Salinity and ABA Treatments. Molecular Biology Research Communications, 3(1): 9-19. PMID: 27843973
Orrego, R., Guchardi, J., Krause, R. and Holdway, D., 2010. Estrogenic and
anti-estrogenic effects of wood extractives present in pulp and paper mill effluents on rainbow trout. Aquatic Toxicology, 99:160–167.
DOI:10.1016/j.aquatox.2010.04.016
Pfaffl, M.W., 2001. A new mathematical
model for relative quantification in
real-time RT–PCR. Nucleic Acids
Research, 29(9):e45.
Sumpter, J.P. and Jobling, S., 1995.
Vitellogenesis as a biomarker for estrogenic contamination of the aquatic environment. Environmental Health Perspectives, 103 (7):173–178. PMID: 8593867
Yousefi Jourdehi, A., Sudagar, M.,
Bahmani, M., Hosseini, SA., Dehghani,
A.A. and Yazdani, M.A., 2014.
Comparative study of dietary soy phytoestrogens genistein and equol effects on growth parameters and ovarian development in farmed female beluga sturgeon, Huso huso. Fish Physiology and Biochemistry, 40: 117-128.
Identification of vitellogenin gene expression patterns in liver and ovary of Rutilus frisii
Kutum exposed to genistein and β-sitosterol
Mohammadrezaei D.*
*
d.mrezaei@malayeru.ac.ir
Department of Fisheries, Faculty of Natural Resources and Environmental, Malayer University, Malayer, I.R. Iran
Abstract:
The vitellogenin gene expression can be altered by some estrogenic plant compounds like Genistein and β-sitosterol. Therefore, the measurement of vitellogenin gene expression can be used as an indicator to determine their effect on reproductive performance of aquatic animals. In order to evaluate the effects of genistein and β-sitosterol on the expression of vitellogenin gene in the liver and ovary of Rutilus frisii Kutum, the fish were separately exposed to 3 levels of genistein and beta-sitosterol (500, 50 and 10 ng/L). After 21 days, the RNA extracted and expression of vitellogenin gene in both the liver and ovary was investigated by Real-time PCR. The results showed the level of vitellogenin gene expression in fish exposed to genistein was higher in liver than control and β-sitosterol treatment. This difference was not observed in the ovarian tissue. Because the main site of vitellogenin synthesis expressed liver and it was controlled by endogenous estrogen (E2), so, it seems phytoesterogenic
compound such as genistein has been able to increase the relative expression of this gene in fish Exposed to 500 ng/L.
Keyword: Genistein, β-sitosterol, Vitellogenin, Gene expression, Rutilus frisii Kutum
*
Corresponding author
