Prolactin
For use on the IMMULITE
®and IMMULITE
®1000 systems
IMMULITE
®/IMMULITE
®1000 Prolactin
English
Intended Use: For in vitro diagnostic use with the IMMULITE and IMMULITE 1000 Analyzers — for the quantitative
measurement of prolactin in serum, as an aid in the diagnosis and treatment of pituitary disorders.
Catalog Number: LKPR1 (100 tests), LKPR5 (500 tests)
Test Code: PRL Color: Dark Blue CDC Analyte Identifier Code: 4915 CDC Test System Identifier Code: 10159 CLIA Complexity Category: Moderate
Summary and Explanation
Human prolactin is a polypeptide hormone of the anterior pituitary with a molecular mass of about 22,800. It plays an essential role in the secretion of milk and has the ability to suppress gonadal function. The very existence of prolactin as a substance distinct from human growth hormone was established only in 1970. Since that time, determination of prolactin has become an important tool in the investigation of amenorrhea, galactorrhea and hypothalamic-pituitary disorders.As a reference range for circulating prolactin, the literature suggests concentrations up to approximately 20 ng/mL. Values are distinctly elevated at birth but decline to adult levels in less than three months.
Women are reported to have slightly higher mean levels than men, with a slight rise at puberty — apparently estrogen related — and a corresponding fall at menopause. During pregnancy, the prolactin level climbs steadily to ten or twenty times its former value, then drops back down to normal after delivery — within three weeks in nonnursing mothers. In those who breast-feed, the decline to normal is more gradual because of the prompt and dramatic surges in prolactin release induced by suckling. Women taking oral contraceptives or under estrogen treatment may have prolactin levels higher than normal.
In assessing the significance of moderate elevations, it is important to keep in mind that prolactin is a stress hormone. Not only surgery, but events no more distressing than venipuncture or a clinical interview have been reported to occasion a transient rise. Moreover, the release of prolactin is inherently episodic, and day-to-day fluctuations with CVs as high as 30% have been encountered. Finally, there is a sleep-related diurnal variation: prolactin levels increase during sleep and reach their lowest a few hours after waking. The advice sometimes given to draw samples "between nine and noon" is based on the assumption that subjects observe reasonably normal waking hours.
Principle of the Procedure
IMMULITE/IMMULITE 1000 Prolactin is a solid-phase, two-site chemiluminescent immunometric assay.Incubation Cycles: 1 × 30 minutes.
Specimen Collection
The use of an ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples. Hemolyzed samples may indicate mistreatment of a specimen before receipt by the laboratory; hence the results should be interpreted with caution.EDTA plasma should not be used as a sample type.
Centrifuging serum samples before a complete clot forms may result in the presence of fibrin. To prevent erroneous results due to the presence of fibrin, ensure that complete clot formation has taken place prior to centrifugation of samples. Some samples, particularly those from patients receiving anticoagulant therapy, may require increased clotting time.
Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE/IMMULITE 1000 Prolactin has not been tested with all possible variations of tube types. Consult the section on
Alternate Sample Types for details on tubes that have been tested.
Volume Required: 25 µL serum. (Sample cup must contain at least 100 µL more than the total volume required.) Storage: 7 days at 2–8°C or 3 months at –20°C.
Warnings and Precautions
For in vitro diagnostic use.Reagents: Store at 2–8°C. Dispose of in accordance with applicable laws. Follow universal precautions, and handle all components as if capable of
transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C.
Sodium azide, at concentrations less than 0.1 g/dL, has been added as a
preservative. On disposal, flush with large volumes of water to prevent the buildup of potentially explosive metal azides in lead and copper plumbing.
Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert.)
Water: Use distilled or deionized water.
Materials Supplied
Components are a matched set. The barcode labels are needed for the assay. Prolactin Test Units (LPR1)
Each barcode-labeled unit contains one bead coated with monoclonal murine anti-prolactin antibody. Stable at 2–8°C until expiration date.
LKPR1: 100 units. LKPR5: 500 units. Allow the Test Unit bags to come to room temperature before opening. Open by cutting along the top edge, leaving the ziplock ridge intact. Reseal the bags to protect from moisture.
Prolactin Reagent Wedge (LPR2) With barcode. 7.5 mL mL alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to polyclonal goat anti-prolactin antibody in buffer, with preservative. Store capped and
refrigerated: stable at 2–8°C until expiration date. Recommended usage is within 30 days after opening when stored as indicated.
LKPR1: 1 wedge. LKPR5: 5 wedges. Prolactin Adjustors (LPRL, LPRH) Two vials (Low and High), of lyophilized human prolactin in a serum/buffer matrix. Reconstitute each vial with 2.0 mL distilled or deionized water. Mix by gentle swirling or inversion until the lyophilized material is fully dissolved. Aliquot and freeze. Stable at –20°C for 60 days after reconstitution. LKPR1: 1 set. LKPR5: 2 sets.
Kit Components
Supplied Separately
Prolactin Sample Diluent (LPRZ) For the manual dilution of patient samples. 25 mL of a prolactin-free serum/buffer matrix, with preservative. Stable at 2–8°C for 30 days or for 6 months (aliquotted) at –20°C.LSUBX: Chemiluminescent Substrate LPWS2: Probe Wash Module LKPM : Probe Cleaning Kit
LCHx-y: Sample Cup Holders (barcoded) LSCP: Sample Cups (disposable) LSCC: Sample Cup Caps (optional) CON6: Tri-level, multi-constituent control Also Required
Sample transfer pipets, distilled or deionized water, controls.
Assay Procedure
Note that for optimal performance, it is important to perform all routine
maintenance procedures as defined in the IMMULITE or IMMULITE 1000 Operator's Manual.
See the IMMULITE or IMMULITE 1000 Operator's Manual for: preparation, setup, dilutions, adjustment, assay and quality control procedures.
Visually inspect each Test Unit for the presence of a bead before loading it onto the system.
Recommended Adjustment Interval: 4 weeks.
Quality Control Samples: Use controls or sample pools with at least two levels (low and high) of prolactin.
Expected Values
Based on its relationship to DPC's Coat-A-Count Prolactin IRMA, the assay can be expected to have the following preliminary reference range for men.
Group n Median 95% Range
6.2 ng/mL 2.5 – 17
Adult Males 19
131 mIU/L 53 – 360
A study17 performed with IMMULITE Prolactin yielded the following reference range for women.
Group n Median 95% Range
9.4 ng/mL 1.9 – 25
Adult Females 115
199 mIU/L 40 – 530
As summarized in DPC's technical report ZB157,17 in a study which followed normal ovulating women on a daily basis throughout one complete cycle, somewhat higher values were obtained—an outcome consistent with the increasingly stressful sample collection process entailed by the study design.
A cross-sectional study of pediatric fertility values performed with IMMULITE Prolactin at a "wellness" clinic in the southwestern United States yielded the following results.
Prolactin, ng/mL
Group Age (yr) n Median Central 95%
Females Cord 28 380 200 – 675 0.1 – 0.5 28 15 1 – 140 0.6 – 9 55 11 2 – 43 Males Cord 27 295 150 – 565 0.1 – 0.5 36 19 4 – 65 0.6 – 9 55 8 0.6 – 29 Combined Cord 55 340 160 – 665 0.1 – 0.5 64 117 2 – 125 0.6 – 9 110 9 1 – 40 Prolactin, mIU/L Group Age (yr) n Median Central 95% Females Cord 28 8,056 4,240 – 14,310 0.1 – 0.5 28 318 21 – 2,968 0.6 – 9 55 233 42 – 912 Males Cord 27 6,254 3,180 – 11,978 0.1 – 0.5 36 403 85 – 1,378 0.6 – 9 55 170 13 – 615 Combined Cord 55 7,208 3,392 – 14,098 0.1 – 0.5 64 2,480 42 – 2,650 0.6 – 9 110 191 21 – 848
Consider these limits as guidelines only. Each laboratory should establish its own reference ranges.
Limitation
Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all
immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in
combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings.
Performance Data
See Tables and Graphs for data
representative of the assay's performance.
Results are expressed in ng/mL. (Unless otherwise noted, all were generated on serum samples collected in tubes without gel barriers or clot-promoting additives.) Conversion Factor:
ng/mL × 21.2 → mIU/L
Calibration Range: Up to 150 ng/mL (3,180 mIU/L) [WHO 3rd IS 84/500].
Analytical Sensitivity: 0.5 ng/mL (11 mIU/L).
High-dose Hook Effect: None up to 22,000 ng/mL.
Intraassay Precision (Within-Run): Statistics were calculated for samples from the results of 20 replicates in a single run. (See “Intraassay Precision” table.) Interassay Precision (Run-to-Run): Statistics were calculated for samples assayed in 26 different runs. (See “Interassay Precision” table.)
Linearity: Samples were assayed under various dilutions. (See "Linearity" table for representative data.)
Recovery: Samples spiked 1 to 19 with three prolactin solutions (129, 270 and 610 ng/mL) were assayed. (See "Recovery" table for representative data.) Specificity: The antibody is highly specific for prolactin. (See "Specificity" table.) Bilirubin: Presence of bilirubin in concentrations up to 200 mg/L has no effect on results, within the precision of the assay.
Hemolysis: Presence of packed red blood cells in concentrations up to 30 µL/mL has no effect on results, within the precision of the assay.
Alternate Sample Type: To assess the effect of alternate sample types, blood was collected from 36 volunteers into plain, heparinized and Becton Dickinson SST® vacutainer tubes. Equal volumes of the matched samples were spiked with various concentrations of prolactin, to obtain values throughout the calibration range of the assay, and then assayed by the IMMULITE Prolactin procedure.
(Heparin) = 0.97 (Serum) + 0.24 ng/mL r = 0.98 (SST) = 0.93 (Plain Tubes) + 0.39 ng/mL r = 0.96 Means: 12.1 ng/mL (Serum) 12.0 ng/mL (Heparin) 11.7 ng/mL (SST)
EDTA: Because EDTA would have a significant effect on results, it should not be used as an anticoagulant.
Method Comparison: The assay was compared to DPC's IMMULITE 2000
Prolactin on 148 samples. (Concentration range: approximately 1 to 125 ng/mL. See graph.) By linear regression:
(IML) = 0.98 (IML 2000) + 1.97 ng/mL r = 0.988 Means: 45 ng/mL (IMMULITE) 44 ng/mL (IMMULITE 2000)
References
1) Cowden E, et al. Laboratory assessment of prolactin status. Ann Clin Biochem
1979;16:113–21. 2) Cowden E, et al. Tests of prolactin secretion. Lancet 1979;1155–8. 3) Djursing H. Short- and long-term fluctuations in plasma prolactin concentration in normal subjects. Acta Endocrinol 1981; 97:1–6. 4) Greer ME, et al. Prevalence of
hyperprolactinemia in anovulatory women. Obstet Gynecol 1980;56:65–9. 5) Harrington RA, et al. Metoclopramide: an updated review. Drugs 1983;25:451–94. 6) Healy DL, et al. Pituitary autonomy in hyperprolactinemia secondary amenorrhea: results of hypothalamic-pituitary testing. J Clin Endocrinol Metab 1977;44:809–18. 7) Kleinberg DL, Noel GL, Frantz AG. Galactorrhea: a study of 235 cases. N Engl J Med 1977;296:589–600. 8) Knuth UA, Friesen HG. Prolactin and pregnancy. Curr Top Exp Endocrinol 1983;4:69–96. 9) Maxson WS, Hammond CB. Hyperprolactinemia. Contemp Ob/Gyn 1982 Jan;19(1):49–63, 19:67–83. 10) Pepperell RJ. Prolactin and reproduction. Fertil Steril 1981;35:267–74. 11) Babson, AL. The IMMULITE Automated Immunoassay System. J Clin Immunoassay 1991;14:83-8. 12) Thorner MO. Prolactin: clinical physiology and management of hyperprolactinemia. In: Martini L, Besser GM, et al, editors. Clinical endocrinology. New York: Academic Press, 1977;319–61. 13) Tolis G, Franks S. Physiology and pathology of prolactin secretion. In: Tolis G, et al, editors. Clinical endocrinology: a pathophysiological approach. New York: Raven Press, 1979;291–317. 14) Tolis G, et al. Aspects of prolactin pathophysiology. Periodicum Biologorum 1983;85 Suppl 1:29–36. 15) Yen SSC. Neuroendocrine regulation of
gonadotropin and prolactin secretion in women: disorders in reproduction. In: Vaitukaitis J, editor. Clinical reproductive endocrinology. New York: Elsevier Biomedical, 1982;137–76. 16) Zacur HA. Use of the human prolactin immunoassay. J Clin Immunoassay 1983 Spring;6(1):63–67. 17) Vankrieken L. IMMULITE reproductive hormone assays: multicenter reference range data. Los Angeles: Diagnostic Products Corporation, 2000. Document No. ZB157-D.
Technical Assistance
In the United States, contact DPC's Technical Services department. Tel: 800.372.1782 or 973.927.2828 Fax: 973.927.4101. Outside the United States, contact your National Distributor.Manufactured by EURO/DPC Ltd. under a Quality System registered to ISO 13485:2003.
Tables and Graphs
Intraassay Precision (ng/mL) Mean1 SD2 CV3 1 8.0 0.54 6.8% 2 16.3 1.00 6.1% 3 36.6 2.07 5.7% Interassay Precision (ng/mL) Mean1 SD2 CV3 1 14.1 1.36 9.6% 2 22.2 2.10 9.5% 3 51.0 3.26 6.4% Linearity (ng/mL)Dilution1 Observed2 Expected3 %O/E4
1 8 in 85 30.3 — — 4 in 8 15.1 15.1 100% 2 in 8 6.6 7.6 87% 1 in 8 3.5 3.8 92% 2 8 in 8 39.9 — — 4 in 8 21.3 20.0 107% 2 in 8 10.3 10.0 103% 1 in 8 4.3 5.0 86% 3 8 in 8 139.3 — — 4 in 8 72.6 69.7 104% 2 in 8 36.8 34.8 106% 1 in 8 20.7 17.4 119% Recovery (ng/mL)
Solution1 Observed2 Expected3 %O/E4
1 — 16.6 — — A 24.3 22.2 110% B 29.6 29.3 101% C 45.0 46.3 97% 2 — 18.9 — — A 26.3 24.4 108% B 34.1 31.5 108% C 58.6 48.5 121% 3 — 37.1 — — A 42.4 41.7 102% B 51.9 48.8 106% C 76.5 65.8 116% Specificity
Compound1 Addedng/mL2 Apparentng/mL 3 reactivity% Cross-4
FSH 1,000 ND ND HCG 35,000 ND ND HGH 1,000 ND ND HPL 200,000 ND ND LH 500 ND ND TSH 1,000 ND ND ND: not detectable.5 Method Comparison IMMULITE 2000 Prolactin, ng/mL 0 30 60 90 120 150 IM MULITE Prolactin 0 30 60 90 120 150 (IML) = 0.98 (IML 2000) + 1.97 ng/mL r = 0.988
Deutsch. Intraassay Precision: 1Mittelwert, 2S
(Standardbereich), 3CV (Variationskoeffizient).
(Standardbereich), 3CV (Variationskoeffizient).
Linearity: 1Verdünnung, 2Beobachten (B), 3Erwarten (E), 4% B/E, 58 in 8. Recovery: 1Lösung, 2Beobachten (B), 3Erwarten (E), 4%
B/E. Specificity: 1Verbindung, 2zugesetzte
Menge, 3 Ausgewiesene Konzentration, 4%
Kreuzreaktivität, 5NN: Nicht nachweisbar.
Method Comparison: Prolactin: Prolaktin.
Español. Intraassay Precision: 1Media, 2DS, 3CV. Interassay Precision: 1Media, 2DS, 3CV.
Linearity: 1Dilución, 2Observado (O), 3Esperado
(E), 4%O/E, 58 en 8. Recovery: 1Solución, 2Observado (O), 3Esperado (E), 4%O/E.
Specificity: 1Compuesto, 2Cantidad añadida, 3Concentración aparente, 4% Reacción cruzada, 5ND: no detectable. Method Comparison:
Prolactin: Prolactina.
Français. Intrraassay Precision: 1Moyenne, 2SD, 3CV. Interassay Precision: 1Moyenne, 2SD, 3CV. Linearity: 1Dilution, 2Observé (O), 3Attendu (A), 4%O/A, 58 dans 8. Recovery: 1Solution, 2Observé (O), 3Attendu (A), 4%O/A.
Specificity: 1Composé, 2ajouté, 3 Concentration
apparente, 4Réaction croisée%. 5ND: non
détectable. Method Comparison: Prolactin: Prolactine.
Italiano. intraassay Precision: 1Media, 2SD
(Deviazione Standard), 3CV (Coefficiente di
Variazione). Interassay Precision: 1Media, 2SD
(Deviazione Standard), 3CV (Coefficiente di
Variazione). Linearity: 1Diluizione, 2Osservato
(O), 3Atteso (A), 4%O/A, 58 in 8. Recovery: 1Soluzione, 2Osservato (O), 3Atteso (A), 4%O/A.
Specificity: 1Composto, 2quantità aggiunta, 3
Concentrazione apparente, 4Percentuale di
Crossreattività, 5ND: non determinabile. Method
Comparison: Prolactin: Prolattina.
Português. Intraassay Precision: 1Média, 2Desvio padrão, 3Coeficiente de variação.
Interassay Precision: 1Média, 2Desvio padrão, 3Coeficiente de variação. Linearity: 1Diluição, 2Observado (O), 3Esperado (E), 4%O/E, 58 em 8.
Recovery: 1Solução, 2Observado (O), 3Esperado (E), 4%O/E. Specificity: 1Composto, 2Quantidade adicionada, 3Apparent
Concentration, 4Percentagem de reacção
cruzada, 5ND: não detectável. Method
Comparison: Prolactin: Prolactina.
Deutsch
Prolaktin
Anwendung: Zur in vitro-Diagnostik unter Verwendung der IMMULITE und IMMULITE 1000 Systeme – zur quantitativen Messung von Prolaktin im Serum, zur Untersuchung und Therapiekontrolle von pituitären Störungen.
Artikelnummern:
LKPR1 (100 Tests), LKPR5 (500 Tests) Testcode: PRL Farbe: dunkelblau
Klinische Relevanz
Humanes Prolaktin ist ein Polypeptid-Hormon der vorderen Hypophyse mit einem Molekulargewicht von ca. 22 800. Es ist von essentieller Wichtigkeit für die Produktion von Muttermilch und kann gonadale Funktionen unterdrücken. Die genaue Definition von Prolaktin, als eine vom menschlichen Wachstumhormon zu unterscheidende Substanz, gelang erst 1970. Seit diesem Zeitpunkt, wurde die Bestimmung von Prolaktin eine wichtige Methode in der Diagnostik der
Amenorrhoe, Galactorrhoe und Hypothalamus-, bzw.
Hypophysendysfunktionen. Als Referenzwertebereich für zirkulierendes Prolaktin werden in der Literatur Konzentrationen bis annähernd 20 ng/ml angegeben. Die Prolaktinspiegel sind zum Zeitpunkt der Geburt deutlich erhöht, sinken aber auf normale Erwachsenenwerte in weniger als 3 Monaten.
Für Frauen werden geringfügig höhere Durchschnittswerte angegeben, mit einem leichten Anstieg während der Pubertät und ein entsprechender Abfall nach der Menopause, als für Männer. Während der Schwangerschaft steigen die
Prolaktinwerte beständig bis zum 10- oder 20-fachen der Ausgangswerte an. Nach der Geburt fallen die Werte für nicht stillende Mütter innerhalb 3 Wochen auf ein normales Niveau. Bei stillenden Müttern ist der Rückgang auf normale Werte verzögert, da das Saugen des Kindes zu einem schnellen und dramatischen Anstieg der
Prolaktinfreisetzung führt. Frauen die Kontrazeptiva einnehmen bzw. unter Östrogenbehandlung stehen, weisen ebenfalls erhöhte Prolaktinspiegel auf. In der Beurteilung geringfügiger
Konzentrationsanstiege sollte immer berücksichtigt werden, daß Prolaktin ein Streßhormon ist.
Nicht allein das Stillen sondern auch geringfügige Eingriffe wie Blutentnahme oder eine Anamnesebefragung, sind als Ursache für kurzfristige
worden. Überdies ist die Freisetzung von Prolaktin von Natur aus episodisch. Von Tag zu Tag wurden Fluktuationen mit Variationskoeffizienten höher als 30% beobachtet. Schließlich gibt es
schlafabhängige tägliche Variationen: Die Prolaktinkonzentrationen steigen während des Schlafes und erreichen ihre
niedrigsten Werte wenige Stunden nach dem Aufwachen. Die Empfehlung Proben zwischen 9,00 und 12,00 Uhr zu entnehmen, beruht auf der Annahme „normaler“ Aufwachzeiten.
Methodik
IMMULITE/IMMULITE 1000 Prolaktin ist ein Festphasen, Zwei-phasen
Chemilumineszenz immunometrischer Assay.
Inkubationszyklen: 1 × 30 minuten.
Probengewinnung
Der Einsatz einer Ultrazentrifuge wird zur Klärung von lipämischen Proben empfohlen.
Bei hämolysierten Proben besteht die Möglichkeit einer unsachgemäßen Handhabung vor Eintreffen im Labor, daher sind die Ergebnisse zurückhaltend zu interpretieren.
EDTA-Plasma ist als Probenart nicht geeignet.
Die Zentrifugation der Serumproben vor dem völligen Abschluss der Gerinnung kann zu Fibringerinnseln führen. Um fehlerhaften Analysenergebnissen infolge von Gerinnseln vorzubeugen, ist sicherzustellen, dass die Gerinnung vor der Zentrifugation der Proben vollständig abgeschlossen ist. Insbesondere Proben von Patienten unter Antikoagulantien-therapie können eine verlängerte Gerinnungszeit aufweisen.
Blutentnahmeröhrchen von verschiedenen Herstellern können differierende Werte verursachen. Dies hängt von den verwendeten Materialien und Additiven (Gel oder physische Trennbarrieren, Gerinnungsaktivatoren und /oder Antikoagulantien) ab.
IMMULITE/IMMULITE 1000 Prolaktin sind nicht mit allen möglichen
Röhrchenvariationen ausgetestet worden. Details der getesteten Röhrchenarten sind
dem Kapitel "Alternative Probenarten" zu entnehmen.
Erforderliche Menge: 25 µl Serum. (Inhalt der Probenschale muss
mindestens 100 µl über der erforderlichen Gesamtmenge liegen.)
Lagerung: 7 Tage bei 2–8°C oder 3 Monate bei –20°C.
Hinweise und
Vorsichtsmaßnahmen
Zur In-vitro-Diagnostik.Reagenzien: Bei 2–8°C lagern. Unter Einhaltung der geltenden gesetzlichen Vorschriften entsorgen.
Die generell geltenden
Vorsichtsmaßnahmen sind einzuhalten und alle Komponenten als potenziell infektiös zu behandeln. Alle aus menschlichem Blut gewonnenen Materialien wurden auf Syphilis, Antikörper gegen HIV-1 und HIV-2, Hepatitis-B-Oberflächenantigen und Hepatitis-C-Antikörper untersucht und negativ befundet.
Bestimmten Komponenten wurde Natriumazid (<0,1 g/dl) hinzugefügt. Um die Bildung von explosiven Metallaziden in Blei- und Kupferrohren zu verhindern, sollten die Reagenzien nur zusammen mit großen Wassermengen in die Kanalisation gespült werden.
Chemilumineszenz-Substrat: Kontamination und direkte
Sonneneinstrahlung vermeiden (Siehe Packungsbeilage).
Wasser: Destilliertes oder deionisiertes Wasser verwenden.
Im Lieferumfang enthalten
Die Komponenten sind aufeinander abgestimmt. Die Barcode-Aufkleber werden für den Assay benötigt. Prolaktin Testeinheiten (LPR1) Jede mit Barcode-Etikette versehene Einheit enthält eine mit beschichtet mit Prolaktin-Antikörpern (monoklonal, Maus). beschichtete Kugel. Bei 2–8°C bis zum Ablaufdatum haltbar.LKPR1: 100 Testeinheiten. LKPR5: 500 Testeinheiten.
Verpackte Testeinheiten vor dem Öffnen stehen lassen, bis sie Zimmertemperatur erreicht haben. Oben entlang der Kante aufschneiden, ohne den Plastikverschluss zu beschädigen. Verpackungen wieder dicht verschließen, damit der Inhalt trocken bleibt.
Prolaktin - Reagenzbehälter (LPR2) Mit Barcode. 7,5 ml mit alkalischer Phospatase konjugierter Anti-Prolaktin-Antikörper (polyklonal, Ziege) im Puffer (mit Konservierungsmittel). Verschlossen und gekühlt aufbewahren: Bei 2–8°C bis zum Ablaufdatum haltbar. Bei
entsprechender Lagerung beträgt die empfohlene Aufbrauchsfrist nach dem Öffnen 30 Tage.
LKPR1: 1 Behälter. LKPR5: 5 Behälter. Prolaktin Kalibratoren (LPRL, LPRH) Zwei Fläschchen jeweils mit lyophilisiertem humanem Prolaktin in einer Serum-/Puffer-Matrix. Fläschchen mit je 2,0 ml destilliertem oder deionisiertem Wasser rekonstituieren. Zum Mischen leicht schwenken oder umdrehen, bis das lyophilisierte Material vollständig aufgelöst ist. Aliquotieren und einfrieren. Nach Rekonstituierung 60 Tage bei –20°C haltbar.
LKPR1: 1 Set. LKPR5: 2 Sets.
Separat erhältliche
Testsystem-Komponenten
Prolaktin–Verdünnungspuffer (LPRZ) Zum manuellen Verdünnen der Patientenproben. 25 ml einer
prolaktinfreien Serum-/Puffermatrix (mit Konservierungsmittel). 30 Tage nach dem Öffnen bei 2–8°C haltbar oder 6 Monate bei –20°C (aliquotiert).
LSUBX: Chemilumineszenz-Substratmodul
LPWS2: Waschmodul LKPM: Reinigungsmodul LCHx-y: Halterungen für die Probenschalen (mit Barcodierung) LSCP: Probenschalen (Einwegartikel) LSCC: Verschlüsse für die Probenschalen (optional)
CON6: 3 Konzentrationen, Multikontrolle Ebenfalls benötigt:
Transferpipetten für die Proben;
destilliertes bzw. deionisiertes Wasser; Kontrollen.
Testdurchführung
Für eine optimale Funktion des Gerätes ist unbedingt zu beachten, dass die
Wartungen, wie im IMMULITE oder IMMULITE 1000-Handbuch beschrieben, regelmäßig durchgeführt werden. Das Handbuch für das IMMULITE bzw. IMMULITE 1000 enthält die Anweisungen für: Vorbereitung, Geräteeinstellungen, Verdünnungen, Kalibrierung,
Testdurchführung und Qualitätskontrollen. Überprüfen Sie jedes Testeinheit auf das Vorhandensein der Polystyrol-Kugel vor dem Einsetzen in das Gerät.
Empfohlenes Kalibrationsintervall: 4 Wochen.
Proben zur Qualitätskontrolle: Kontrollen oder Seren mit Prolaktin in zumindest zwei Konzentrationen (niedrige und hohe) verwenden.
Referenzwerte
Basierend auf der Korrelation zum DPC Coat-A-Count Prolaktin, sind für den Assay folgende Referenzwerte für Männer in ng/ml und in mIU/l zu erwarten.
Gruppe n Median 95%-Bereich
6,2 ng/ml 2,5 – 17
Männer 19
131 mIU/l 53 – 360
In einer Studie17 wurden mit dem IMMULITE- Prolaktin Assay folgende Referenzwerte für Frauen ermittelt.
Gruppe n Median 95%-Bereich
9,4 ng/ml 1,9 – 25
Frauen 115
199 mIU/l 40 – 530
In einer Multicenter Studie der DPC, dargestellt im DPC Technical Report ZB157,17 wurden etwas höhere Werte beobachtet. Bei dieser Studie wurde eine tägliche Blutabnahme durchgeführt und der Stress einer täglichen Blutentnahme, die durch das Studiendesign notwendig ist, kann zu erhöhten Werten führen. Für eine altersabhängige Studie wurde in einer "Wellness"-Klinik im Südwesten der
USA mit Hilfe des IMMULITE-Prolaktin folgende Werte ermittelt.
Prolaktin, ng/ml Gruppe (Jahre)Alter n Median
95%-Bereich Frauen Schnur 28 380 200 – 675 0,1 – 0,5 28 15 1 – 140 0,6 – 9 55 11 2 – 43 Männer Schnur 27 295 150 – 565 0,1 – 0,5 36 19 4 – 65 0,6 – 9 55 8 0,6 – 29 Kombiniert Schnur 55 340 160 – 665 0,1 – 0,5 64 117 2 – 125 0,6 – 9 110 9 1 – 40 Prolaktin, mIU/l Gruppe (Jahre)Alter n Median 95%-Bereich
Frauen Schnur 28 8 056 4 240 – 14 310 0,1 – 0,5 28 318 21 – 2 968 0,6 – 9 55 233 42 – 912 Männer Schnur 27 6 254 3 180 – 11 978 0,1 – 0,5 36 403 85 – 1 378 0,6 – 9 55 170 13 – 615 Kombiniert Schnur 55 7 208 3 392 – 14 098 0,1 – 0,5 64 2 480 42 – 2 650 0,6 – 9 110 191 21 – 848
Betrachten Sie diese Grenzwerte nur als
Richtlinien. Jedes Labor sollte eigene
Referenzbereiche ermitteln.
Grenzen der Methode
Heterophile Antikörper in Humanseren können mit Immunglobulinen aus den Assaykomponenten reagieren und Interferenzerscheinungen innerhalb des in vitro Immunoassays verursachen. (Clin. Chem. 1988:34:27-33) Proben von Patienten, die häufig mit Tier- bzw. Tierserumprodukten zu tun haben, können die erwähnten Interferenzen verursachen und zu anomalen Resultaten führen. Die verwendeten Reagenzien sind so konzipiert, dass das Risiko einer
Interferenz mit den zu messenden Proben minimiert ist. Dennoch können potentiell Interaktionen zwischen seltenen Seren und den Testkomponenten auftreten. Zu
diagnostischen Zwecken sollten die mit dem Assay erhaltenen Ergebnisse immer in Kombination mit der klinischen Untersuchung, der Patientenanamnese und anderen Befunden gesehen werden.
Leistungsdaten
Repräsentative Daten zum Test entnehmen Sie bitte den Tabellen und graphischen Darstellungen im englischen Teil dieser Anleitung. Die Ergebnisse sind in ng/ml angegeben. (Sofern nicht anders angegeben, wurden hierfür Serumproben in Röhrchen ohne Geltrennung und Gerinnungshilfen eingesetzt.) Umrechnungsfaktor: ng/ml × 21,2 → mIU/l Messbereich: bis 150 ng/ml (3 180 mIU/l) [WHO 3rd IS 84/500]. Analytische Sensitivität: 0,5 ng/ml (11 mIU/l).
High-Dose-Hook-Effekt: Keiner bis zu 22 000 ng/ml.
Präzision im einzelnen Testansatz (intraassay): Statisik aus einem einzelnen Testansatz mit 20 Einzelmessungen (Siehe Tabelle “Intraassay Precision“). Präzision zwischen Testansätzen (interassay): Statistik aus 26 verschiedenen Testansätzen. (Siehe Tabelle “Interassay Precision“). Linearität: Proben wurden in
verschiedenen Verdünnungen getestet. (Repräsentative Daten entnehmen Sie bitte der Tabelle “Linearity“.)
Wiederfindung: Die getesteten Proben waren mit drei (129, 270 und 610 ng/ml) Prolaktin -Lösungen 1:19 versetzt. (Siehe Tabelle ”Recovery”.)
Spezifität: Der Assay ist hochspezifisch für Prolaktin. (Siehe Tabelle ”Specificity”.) Bilirubin: Bilirubin hat in Konzentrationen bis zu 200 mg/l keinen Einfluss auf die Ergebnisse, der größer als die Impräzision des Assays selbst ist.
Hämolyse: Erythrozytenkonzentrate haben in Konzentrationen bis zu 30 µl/ml keinen Einfluss auf die Messung, der größer als die Impräzision des Assays selbst ist.
Alternativer Probentyp: Um die Auswirkungen von verschiedenen
Probenarten zu untersuchen, wurde Blut von 36 Freiwilligen in Röhrchen ohne Additiva, in Heparin- und Becton Dickinson SST® Vacutainer-Rörchen gesammelt. Gleiche Volumina der jeweiligen Proben wurden mit verschiedenen Konzentrationen an Prolaktin versetzt, um Werte im gesamten Kalibrationsbereich zu erhalten, und die Proben anschließend mit dem IMMULITE Assay für Prolaktin gemessen.
(Heparin) = 0,97 (Serum) + 0,24 ng/ml r = 0,98 (SST) = 0,93 (einfachen Röhrchen) + 0,39 ng/ml r = 0,96 Mittelwerte: 12,1 ng/ml (Serum) 12,0 ng/ml (Heparin) 11,7 ng/ml (SST)
EDTA: EDTA würde die Resultate erheblich verfälschen und sollte daher nicht als Antikoagulans verwerdet werden. Methodenvergleich: Der Assay wurde auf der Basis von 148 Patientenproben mit dem IMMULITE 2000 Prolaktin Assay der DPC verglichen.
(Konzentrationsbereich: ca. 1 bis 125 ng/ml Siehe Grafik.). Durch lineare Regression: (IML) = 0,98 (IML 2000) + 1,97 ng/ml r = 0,988 Mittelwert: 45 ng/ml (IMMULITE) 44 ng/ml (IMMULITE 2000)
Anwendungsberatung
Bei Rückfragen wenden Sie sich bitte an Ihre DPC Niederlassung.
Hergestellt von Euro/DPC Ltd. unter dem Qualitätssystem ISO 13485:2003.
Español
Prolactina
Utilidad del análisis: Para su uso en el diagnóstico in vitro con los analizadores IMMULITE e IMMULITE 1000 – para la medición cuantitativa de prolactina en suero, como una ayuda en el diagnóstico y tratamiento de las afecciones pituitarias. Números de Catálogo: LKPR1 (100 tests), LKPR5 (500 tests)
Código del Test: PRL Color: Azul oscuro
Resumen y Explicación
del Test
La prolactina humana es una hormona polipeptídica de la pituitaria anterior con un peso molecular de 22 800 daltons. Juega un papel esencial en la secreción de la leche y tiene la habilidad de suprimir la función gonadal. La existencia de la prolactina como una sustancia distinta de la hormona de crecimiento humana fue demostrada en 1970. Desde esa fecha, la determinación de prolactina se ha convertido en una herramienta importante en la investigación de la amenorrea, la galactorrea y las enfermedades hipotalámico -pituitarias. Como rango de normalidad de la prolactina sérica, las publicaciones sugieren concentraciones hasta aproximadamente 20 ng/ml. Los niveles de prolactina son elevados en el nacimiento y van cayendo hasta los niveles adultos en menos de tres meses. Las mujeres tienen unos niveles significativamente superiores que los varones, con una elevación en la pubertad — aparentemente relacionada con los estrógenos — y una drástica caída en la menopausia. Durante el embarazo, el nivel de prolactina se eleva entre diez y veinte veces su valor, volviendo a caer por debajo de la normalidad después del parto — en un periodo de tres semanas en mujeres que no dan el pecho. En las que dan el pecho, la caída a los valores normales es más gradual porque la succión induce a la liberación de prolactina. Las mujeres tomando anticonceptivos orales o bajo terapia estrogénica pueden tener niveles de prolactina por encima de lo normal. Debe tenerse en cuenta el significado de un incremento moderado, ya que la prolactina es una hormona de estrés, elevándose transitoriamente, no solo en procesos quirúrgicos, sino también en circunstancias menos traumáticas como la venipunción o las pruebas clínicas. Además, la secreción de prolactina es pulsátil, habiéndose encontrado fluctuaciones diarias con CVs superiores al 30%. Finalmente, hay una variación diurna relacionada con el sueño: los niveles de prolactina se incrementan
durante el sueño y alcanzan su valor más bajo unas horas después de despertarse. La advertencia de tomar las muestras entre las nueve y las doce del mediodía se debe a que se asume que los individuos hace tiempo que están despiertos.
Principio del análisis
IMMULITE/IMMULITE 1000 Prolactina es un ensayo inmunométrico con dos sitios de unión, quimioluminiscente en fase sólida.
Ciclos de incubación: 1 × 30 minutos.
Recogida de la muestra
Se recomienda el uso de unaultracentrífuga para aclarar las muestras lipémicas.
Las muestras hemolizadas podrían indicar una mala manipulación de la muestra antes de ser recibida por el laboratorio; en este caso, los resultados deben
interpretarse con precaución.
El plasma con EDTA no deberia ser usado como muestra.
La centrifugacion de las muestras de suero antes de que se forme el coagulo puede ocasionar la presencia de fibrina. Para evitar resultados erroneos debidos a la presencia de fibrina, asegurarse que se ha formado el coagulo completamente antes de centrifugar las muestras. Algunas muestras, particularmente aquellas de pacientes sometidos a terapia anticoagulante, pueden requerir mayor tiempo de coagulacion.
Los tubos para recoger sangre de distintos fabricantes pueden producir valores diferentes, dependiendo del material del tubo y de los aditivos, incluyendo barreras de gel o barreras físicas, activadores de la coagulación y/o anticoagulantes. El Prolactina
IMMULITE/IMMULITE 1000 no ha sido analizado con todos los distintos tipos de tubos. Para obtener detalles sobre los tipos tubos que se han analizado, consulte la sección de Tipos de Muestras Alternativos.
Volumen requerido: 25 µl suero. (El recipiente de la muestre debe contener, como mínimo, 100 µl más que el volumen total requerido).
Conservación: 7 días a 2–8°C, o 3 meses a –20°C.
Advertencias y Precauciones
Para uso diagnóstico in vitro.Reactivos: Mantener a 2–8°C. Desechar de acuerdo con las normas aplicables. Siga las precauciones universales y manipule todos los componentes como si fueran capaces de transmitir agentes infecciosos. Los materiales derivados de sangre humana han sido analizados y son negativos para sífilis; para anticuerpos frente al HIV 1 y 2; para el antígeno de superficie de hepatitis B y para los anticuerpos de hepatitis C. Se ha usado Azida sódica, en concentraciones menores de 0,1 g/dl, como conservante. Para su eliminación, lavar con grandes cantidades de agua para evitar la constitución de residuos de azidas metálicas, potencialmente explosivas, en las cañerías de cobre y plomo.
Substrato quimioluminiscente: Evitar la contaminación y exposición a la luz directa del sol. (Ver el prospecto). Agua: Usar agua destilada o desionizada.
Materiales Suministrados
Los componentes representan un juego completo. Las etiquetas incluidas en la caja son necesarias para el ensayo. Unidades de análisis de Prolactina (LPR1)Cada unidad etiquetada con código de barras contiene una bola recubierta de recubiertas con anticuerpo monoclonal murino anti-prolactina. Estable a 2–8°C hasta la fecha de caducidad.
LKPR1: 100 unidades. LKPR5: 500 unidades.
Espere a que las bolsas de las unidades de análisis alcancen la temperatura ambiente antes de abrirlas. Ábralas cortando por el extremo superior, dejando el borde del cierre de cremallera intacto. Vuelva a cerrar las bolsas
herméticamente para protegerlas de la humedad.
Vial de reactivo de Prolactina (LPR2) Con códigos de barras. 7,5 ml de fosfatasa alcalina (de intestino de ternera), conjugada con anticuerpo policlonal de cabra anti-prolactina, en solución tampón, con conservante. Guardar tapado y refrigerado: estable a 2–8°C hasta la fecha de caducidad. Se recomienda utilizarlo antes de que pasen 30 días después de abrirlo cuando se guarda según lo indicado.
LKPR1: 1 vial. LKPR5: 5 viales. Ajustadores de Prolactina (LPRL, LPRH)
Dos viales (bajo y alto) de prolactina humana liofilizada en una matriz de suero/solución tampón. Reconstituya cada vial con 2,0 ml de agua destilada o desionizada. Mezcle por agitación o inversión suave hasta que se haya disuelto completamente el material liofilizado. Alicuote y congele. Estable a –20°C durante 60 días tras su reconstitución.
LKPR1: 1 juego. LKPR5: 2 juegos.
Componentes del kit que se
suministran por separado
Diluyente de Prolactina (LPRZ) Para la dilución manual de muestras de pacientes. 25 ml de una matriz de suero, libre de prolactina, en solución tampón, con conservante. Estable a 2–8°C durante 30 días después de abrirse, o hasta 6 meses (alicuotados) a –20°C. LSUBX: Substrato quimioluminiscente LPWS2: Lavado de sondaLKPM: Kit de limpieza de sonda LCHx-y: Soportes de recipientes de muestras (con códigos de barras) LSCP: Recipientes de muestras (desechables)
LSCC: Tapas para los recipientes de muestras (opcionales)
CON6: control multiconstituyente de tres niveles
También necesario
Pipetas de transferencia de muestras; agua destilada o desionizada; controles.
Ensayo
Aviso: para obtener el funcionamiento óptimo, es importante realizar todos los procedimientos del mantenimiento general
según lo definido en el manual del operador de IMMULITE o IMMULITE 1000.
Ver el Manual del Operador del IMMULITE o IMMULITE 1000 para: preparación, procesamiento, diluciones, ajuste, procedimientos de ensayo y control de calidad.
Inspeccionar visulamente cada unidad de rección para asegurarse de que hay una bola antes de introducirla en el Sistema. Intervalo de ajuste recomendado: 4 semanas.
Muestras de Control de Calidad: Utilizar controles o pooles de sueros con al menos dos niveles diferentes de prolactina (bajo y alto).
Valores Esperados
Basado en su relación con el kit Coat-A-Count Prolactina IRMA de DPC, se puede esperar que el ensayo tenga el siguiente intervalo preliminar de referencia para los hombres.
Grupo n Mediana Central 95%
6,2 ng/ml 2,5 – 17
Hombres 19
131 mIU/l 53 – 360
Un estudio17 realizado con IMMULITE Prolactina dio el siguiente intervalo de referencia para las mujeres.
Grupo n Mediana Central 95%
9,4 ng/ml 1,9 – 25
Mujeres 115
199 mIU/l 40 – 530
Como se resume en el informe técnico de DPC ZB157,17 en un estudio que siguió diariamente a mujeres normales que ovulan durante un ciclo completo, se obtuvieron valores algo mayores, un resultado que es coherente con el cada vez más estresante procedimiento de recogida de muestras implicado por el diseño del estudio.
Los siguientes resultados se obtuvieron en un estudio representativo de valores de fertilidad pediátrica realizado con IMMULITE Prolactina en una clínica en el sudoeste de los Estados Unidos.
Prolactina, ng/ml Grupo (años)Edad n Mediana Central95% Mujeres Cordón 28 380 200 – 675 0,1 – 0,5 28 15 1 – 140 0,6 – 9 55 11 2 – 43 Hombres Cordón 27 295 150 – 565 0,1 – 0,5 36 19 4 – 65 0,6 – 9 55 8 0,6 – 29 Combinado Cordón 55 340 160 – 665 0,1 – 0,5 64 117 2 – 125 0,6 – 9 110 9 1 – 40 Prolactina, mIU/l Grupo (años)Edad n Mediana Central95%
Mujeres Cordón 28 8 056 4 240 – 14 310 0,1 – 0,5 28 318 21 – 2 968 0,6 – 9 55 233 42 – 912 Hombres Cordón 27 6 254 3 180 – 11 978 0,1 – 0,5 36 403 85 – 1 378 0,6 – 9 55 170 13 – 615 Combinado Cordón 55 7 208 3 392 – 14 098 0,1 – 0,5 64 2 480 42 – 2 650 0,6 – 9 110 191 21 – 848
Estos límites han de considerarse sólo como una guía. Cada Laboratorio deberá establecer sus propios rangos de referencia.
Limitación
Los anticuerpos heterofílicos en el suero humano pueden reaccionar con las inmunoglobulinas de los componentes del ensayo provocando interferencias con los inmunoanálisis in vitro. [Ver Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Las muestras de los pacientes que frecuentemente están expuestos a animales o a productos séricos animales pueden presentar este tipo de interferencia que potencialmente
ocasione un resultado anómalo. Estos reactivos han sido formulados para minimizar el riesgo de interferencia, no obstante, pueden darse interacciones anómalas entre sueros conflictivos y los componentes del ensayo. Con fines de diagnóstico, los resultados obtenidos con este ensayo siempre deben ser usados en combinación con el examen clínico, la historia médica del paciente y cualquier otro dato clínico relevante.
Características Analíticas
Para ver resultados representativos de las cualidades del ensayo ver las tablas y los gráficos. Los resultados se expresan en ng/ml. (A no ser que se indique lo contrario, todos los resultados fueron generados en muestras de suero recogidas en tubos sin geles o activadores de la coagulación). Factor de Conversión: ng/ml × 21,2 → mIU/l Intervalo de calibración: Hasta 150 ng/ml (3 180 mIU/l). [WHO 3º IS 84/500]. Sensibilidad: 0,5 ng/ml (11 mIU/l). Efecto de gancho a altas dosis: Ninguno hasta 22 000 ng/ml.Precisión intraensayo (dentro de una tanda): Se han calculado datos
estadísticos para las muestras a partir de los resultados de 20 replicados en una sola tanda. (Ver la tabla de "Intraassay Precision").
Precisión entre ensayos (de una tanda a otra): Se han calculado datos
estadísticos para las muestras analizadas en 26 tomas distintas. (Ver la tabla de “Interassay Precision”).
Linealidad: Las muestras fueron analizadas en varias diluciones. (Ver la tabla de “Linearity” para resultados representativos.)
Recuperación: Se analizaron muestras sobrecargadas 1 en 19 con tres
soluciones (129, 270 y 610 ng/ml). (Ver la tabla de “Recovery” para resultados representativos.)
Especificidad: El ensayo es altamente específico para prolactina (Ver la tabla de “Specificity”).
Bilirrubina: La presencia de bilirrubina, en concentraciones hasta 200 mg/l, no tienen ningún efecto sobre los resultados en términos de precisión.
Hemolisis: La presencia de eritrocitos hasta concentraciones de 30 µl/ml no tiene efecto en los resultados, en lo concerniente a la precisión del ensayo. Tipo de Muestra Alternativa: para evaluar el efecto de los diferentes tipos de muestras alternativos, se recogió sangre de 36 voluntarios en tubos normales, tubos con Heparina y tubos vacutainer SST® de Becton Dickinson. Volúmenes iguales de las diferentes muestras fueron sobrecargadas con diferentes
concentraciones de Prolactina, con la finalidad de cubrir todo el rango de calibración del ensayo, y procesadas con el procedimiento Prolactina IMMULITE.
(Heparina) = 0,97 (Suero) + 0,24 ng/ml r = 0,98 (SST) = 0,93 (tubos simples) + 0,39 ng/ml r = 0,96 Medias: 12,1 ng/ml (Suero) 12,0 ng/ml (Heparina) 11,7 ng/ml (SST)
EDTA: Como EDTA tendría un efecto significativo en los resultados, no debe usarse como anticoagulante.
Comparación del Método: El ensayo fue comparado con el IMMULITE 2000 Prolactina de DPC en 148 muestras de pacientes. (Rango de Concentración: aproximadamente 1 a 125 ng/ml. Ver el gráfico.) Por regresión linear:
(IML) = 0,98 (IML 2000) + 1,97 ng/ml r = 0,988 Medias: 45 ng/ml (IMMULITE) 44 ng/ml (IMMULITE 2000)
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IMMULITE Prolactine
Domaine d'utilisation : Dosage quantitatif de la prolactine dans le sérum. Ce test est réservé à un usage in vitro avec l'Analyseur IMMULITE et de IMMULITE 1000 et constitue une aide au diagnostic et au traitement des divers troubles hypophysaires.Ce réactif est enregistré auprès de l'AFSSAPS.
Référence catalogue :
LKPR1 (100 tests), LKPR5 (500 tests) Code produit : PRL.
Code couleur : bleu foncé.
Introduction
La prolactine humaine est une hormone polypeptidique sécrétée par
l'antéhypophyse, d'un poids moléculaire de 22 800 Daltons. Elle joue un rôle essentiel dans la sécrétion du lait et a le pouvoir suppresseur sur les fonctions gonadiques. La prolactine a été reconnue comme hormone distincte de l'hormone de croissance dans les années 1970. Depuis le dosage de la prolactine est devenu un outil important dans la détermination des causes d'aménorrhées, de galactorrhées et des désordres de l'axe hypothalamo-hypophysaire.
Dans la littérature, les valeurs normales de la prolactine circulante vont jusqu'à des concentrations maximales de 20 ng/ml. Les concentrations en prolactine sont élevées à la naissance mais diminuent très vite, en moins de trois mois, jusqu'aux valeurs trouvées chez l'adulte.
Les femmes ont, en moyenne, des valeurs légèrement plus élevées que les hommes. Une légère augmentation de ces valeurs est observée chez la femme à la puberté, apparemment liée aux œstrogènes et une diminution à la ménopause. Pendant la grossesse, le taux de prolactine augmente progressivement pour atteindre 10 à 20 fois sa valeur de base, puis rechute, dans les trois semaines après l'accouchement, vers une valeur normale chez les femmes qui n'allaitent pas. Par contre chez les femmes qui allaitent, la baisse du taux de
prolactine est beaucoup plus étalée dans le temps du fait des sécrétions ponctuelles de prolactine induites par les allaitements. Les femmes qui utilisent des contraceptifs oraux ou sous thérapie oestrogénique peuvent avoir des taux de prolactine plus élevés que la normale.
Il est important de ne pas oublier que la prolactine est une hormone du stress, ce qui explique certaines élévations modérées. Des élévations transitoires de l'hormone ont été rapportées non seulement dans un contexte chirurgical mais également par le stress du
prélèvement sanguin. De plus la libération de l'hormone est proprement épisodique, avec des fluctuations d'un jour à l'autre allant parfois jusqu'à 30%. D'autre part, il existe un rythme circadien dans la sécrétion de prolactine : le taux de l'hormone augmente pendant le sommeil et atteint son niveau le plus bas quelques heures après le réveil Le conseil donné parfois de prélever les échantillons entre 9 heures du matin et midi se base sur l'hypothèse que les patients ont des heures de réveil régulières.
Principe du test
IMMULITE/IMMULITE 1000 Prolactine est un dosage chimiluminescent
immunométrique, en deux étapes, en phase solide.
Cycles d'incubation : 1 × 30 minutes.
Recueil des échantillons
Il est recommandé de clarifier les échantillons hyperlipémiques par ultracentrifugation.Des échantillons hémolysés peuvent être révélateurs d'une préparation inadéquate du prélèvement avant son envoi au laboratoire ; il faudra donc interpréter les résultats avec prudence.
Les echantillons ne doivent pas etre des plasmas EDTA.
La centrifugation des échantillons sériques avant la formation complète du caillot peut entraîner la présence de fibrine. Pour éviter les résultats erronés dûs à la présence de fibrine, s'assurer de la formation complète du caillot avant de centrifuger les échantillons. Certains échantillons, en particulier ceux provenant de patients sous anti-coagulants, peuvent
nécessiter un temps plus long pour la formation du caillot.
Des tubes pour prélèvements sanguins provenant de fabricants différents peuvent donner des résultats différents, selon les matériaux et additifs utilisés, y compris gels ou barrières physiques, activateurs de la coagulation et/ou anticoagulants. Le coffret Prolactine IMMULITE/IMMULITE 1000 n'a pas été testé sur tous les types de tubes possibles. Veuillez consulter le chapitre intitulé Autres Types
d'Échantillons pour plus de
renseignements sur les tubes qui ont été évalués.
Volume nécessaire : 25 µl sérum. (Le godet échantillon doit pouvoir contenir au moins 100 µl de plus que le volume total nécessaire.)
Conservation : 7 jours à +2°C/+8°C ou 3 mois à –20°C.
Précautions d'emploi
Réservé à un usage diagnostique in vitro Réactifs : conserver les réactifs à +2/ +8 °C. Eliminer les déchets conformément à la réglementation en vigueur.
Respecter les précautions d'emploi et manipuler tous les composants du coffret comme des produits potentiellement infectieux. Les réactifs dérivés de produits humains et utilisés dans ce coffret ont subi un test sérologique pour la Syphilis et des tests de dépistage pour les anticorps anti-VIH1 et 2, anti-HCV et pour l'antigène de surface de l'hépatite B, qui se sont tous avérés négatifs.
De l'azide de sodium à des concentrations inférieures à 0,1 g/dl a été ajouté comme conservateur ; lors de l'élimination, l'évacuer avec de grandes quantités d'eau pour éviter une accumulation d'azides métalliques explosifs dans les canalisations.
Substrat chimiluminescent : éviter la contamination et l'exposition directe au soleil. (Voir notice).
Eau : utiliser de l'eau distillée ou désionisée.
Matériel fourni
Les composants de la trousse ne peuvent être utilisés que conjointement. Les
étiquettes à l'intérieur du coffret sont nécessaires au dosage.
Tests unitaires Prolactine (LPR1) Avec code-barre. Chaque unité contient une bille revêtue d'un anticorps
monoclonal murin anti-prolactine. Stable à +2°C/+8°C jusqu'à la date de péremption. LKPR1: 100 unités. LKPR5: 500 unités. Porter les sachets à température ambiante avant d'ouvrir. Ouvrir le sachet avec des ciseaux en préservant le dispositif de fermeture. Refermer les sachets pour les protéger de l'humidité.
Cartouche à Réactif Prolactine (LPR2) Avec code-barres. 7,5 ml d'un anticorps polyclonal de chèvre anti-prolactine marqué à la phosphatase alcaline dans un tampon, avec conservateur. Conserver bouché et réfrigéré : stable à +2°C/+8°C jusqu'à la date de péremption. A utiliser de préférence dans les 30 jours qui suivent l'ouverture, si les recommandations de stockage sont respectées.
LKPR1: 1 cartouche. LKPR5: 5 cartouches.
Ajusteurs Prolactine (LPRL, LPRH) 2 flacons d'ajusteurs (« haut » et « bas ») de prolactine humaine lyophilisée dans une matrice sérum/tampon. Reconstituer chaque flacon avec 2,0 ml d'eau distillée ou désionisée. Mélanger en imprimant un léger mouvement circulaire ou en retournant délicatement jusqu'à complète dissolution de la substance lyophilisée. Aliquoter et congeler. Stable à –20°C pendant 60 jours après reconstitution. LKPR1: 1 jeu. LKPR5: 2 jeux.
Composants du coffret fournis
séparément
Diluant échantillon Prolactine (LPRZ) Pour la dilution manuelle des échantillons de patient. 25 ml de matrice tampon/ sérum sans prolactine avec conservateur. Stable à +2°C/+8°C pendant 30 jours après ouverture ou 6 mois (aliquoté) à –20°C.
LSUBX : Substrat chimiluminescent LPWSM : Solution de lavage
LKPM : Coffret de décontamination de l'aiguille de prélèvement
LCHx-y : Supports pour godets échantillons (avec code-barre)
LSCP : Godets échantillons (à usage unique)
LSCC : Bouchons pour godets échantillons (optionnel)
CON6 : Contrôle multiparamétrique à trois niveaux
Egalement requis
Pipettes pour le transfert des échantillons ; eau distillée ou désionisée ; contrôles.
Protocole de dosage
Noter que pour des performances optimales, il est important de réaliser toutes les procédures de maintenance de routine selon les instructions du Manuel d'Utilisation de l'IMMULITE ou de l'IMMULITE 1000.
Voir le manuel d'utilisation de l'IMMULITE ou de l'IMMULITE 1000 pour la
préparation, le démarrage du système, les ajustements, le dosage et les procédures de contrôle de qualité.
Vérifier visuellement que chaque Unité-Test contient bien une bille avant de la charger dans l'automate.
Intervalle d'ajustement recommandé : 4 semaines.
Echantillons pour le contrôle de qualité : Utiliser des contrôles ou des pools de sérums avec au moins deux niveaux de concentration (faible ou élevé) de prolactine.
Valeurs de référence
Compte tenu de sa relation avec le test Coat-A-Count Prolactine IRMA de DPC, le test doit avoir les mêmes valeurs attendues pour les hommes.
Groupe n Médiane Domaine à95%
6,2 ng/ml 2,5 – 17
Hommes 19
131 mUI/l 53 – 360
Une étude17 réalisée avec le test IMMULITE Prolactine a donné les valeurs de référence suivantes pour les femmes.
Groupe n Médiane Domaine à95%
9,4 ng/ml 1,9 – 25
Femmes 115
Comme rapporté dans le bulletin technique de DPC ZB15717 (IMMULITE et Fertilité : Valeurs de référence), dans une étude suivant des femmes au cours d'un cycle ovulatoire complet, le protocole de l'étude a créé un stress qui augmentant avec le nombre de prélèvements amenait à observer des valeurs plus élevées. Une étude en pédiatrie sur les valeurs de fertilité, réalisée avec le test IMMULITE Prolactine dans une clinique du sud ouest des Etats-Unis, a donné les résultats suivants.
Prolactine, ng/ml Groupe
Âge
(année) n Médiane Centré à 95%
Filles Cordon 28 380 200 – 675 0,1 – 0,5 28 15 1 – 140 0,6 – 9 55 11 2 – 43 Garçons Cordon 27 295 150 – 565 0,1 – 0,5 36 19 4 – 65 0,6 – 9 55 8 0,6 – 29 Total Cordon 55 340 160 – 665 0,1 – 0,5 64 117 2 – 125 0,6 – 9 110 9 1 – 40 Prolactine, mUI/l Groupe (année)Âge n Médiane Centré à 95% Filles Cordon 28 8 056 4 240 – 14 310 0,1 – 0,5 28 318 21 – 2 968 0,6 – 9 55 233 42 – 912 Garçons Cordon 27 6 254 3 180 – 11 978 0,1 – 0,5 36 403 85 – 1 378 0,6 – 9 55 170 13 – 615 Total Cordon 55 7 208 3 392 – 14 098 0,1 – 0,5 64 2 480 42 – 2 650 0,6 – 9 110 191 21 – 848
Utiliser ces valeurs à titre indicatif uniquement. Chaque laboratoire devrait établir ses propres valeurs de référence.
Limites
Les anticorps hétérophiles du sérum humain peuvent réagir avec les immunoglobulines faisant partie des composants du coffret et interférer avec les immunodosages in vitro. [Voir Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a
problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Les échantillons provenant de patients fréquemment exposés aux animaux ou aux produits sériques d'origine animale peuvent présenter ce type d'interférence pouvant potentiellement donner un résultat anormal. Ces réactifs ont été mis au point afin de minimiser le risque d'interférence, cependant des interactions potentielles entre des sérums rares et les composants du test peuvent se produire. Dans un but diagnostique, les résultats obtenus avec ce dosage doivent toujours être utilisés en association avec un examen clinique, l'histoire médicale du patient et d'autres résultats.
Performances du test
Consulter les tableaux et graphiques pour obtenir les données représentatives des performances du test. Les résultats sont donnés en ng/ml. (En l'absence de précision supplémentaire, tous les résultats ont été obtenus sur des échantillons sériques prélevés sur tubes sans gel, ni activateur de la coagulation). Facteur de conversion :
ng/ml × 21,2 → mUI/l
Domaine de mesure : jusqu'à 150 ng/ml (3 180 mUI/l) [WHO 3rd IS 84/500]. Sensibilité analytique : 0,5 ng/ml (11 mUI/l).
Effet-crochet : aucun jusqu'à 22 000 ng/ml.
Précision intra-essai : les valeurs ont été établies pour chacun des échantillons à partir de 20 doublets dosés au cours d'une même série. (Voir le tableau « Intraassay Precision ».)
Précision inter-essais : les valeurs ont été établies pour chacun des échantillons dosés dans 26 séries différentes. (Voir le tableau « Interassay Precision ».) Linéarité : les échantillons ont été testés avec des taux de dilution variés. (Voir le tableau « Linearity » pour des données représentatives.)
Récupération: les échantillons testés ont été chargés dans un rapport de 1 à 19 avec trois solutions (129, 270 et 610 ng/ml). (Voir le tableau « Recovery » pour des données représentatives.)
Spécificité : le test est hautement spécifique de la Prolactine (Voir le tableau « Specificity ».)
Bilirubine : La présence de bilirubine ne présente aucun effet sur les résultats ni sur la précision du dosage si la concentration ne dépasse pas 200 mg/l. Hémolyse : La présence d'agrégat d'hématies jusqu'à une concentration de 30 µl/ml, n'a aucun effet sur les résultats quant à la précision du dosage. Autres types d'échantillons: pour estimer l'effet de l'utilisation de différents type d'échantillons, 36 volontaires ont été prélevés sur tubes secs, héparinés et sur tubes vacutainer SST® Becton Dickinson. Des volumes égaux de ces différents échantillons ont été mélangés avec plusieurs concentrations d' Prolactine pour obtenir des valeurs à l'intérieur du domaine de mesure du test puis dosés avec le protocole l'IMMULITE Prolactine.
(Hépariné) = 0,97 (Sérum) + 0,24 ng/ml r = 0,98 (SST) = 0,93 (tubes ordinaires) + 0,39 ng/ml r = 0,96 Moyennes : 12,1 ng/ml (Sérum) 12,0 ng/ml (Hépariné) 11,7 ng/ml (SST)
EDTA: L'EDTA étant susceptible d'avoir un impact significatif sur les résultats, il ne devrait pas être utilisé comme anti-coagulant.
Comparaison de méthodes : le test a été comparé au test IMMULITE 2000 Prolactine de DPC sur 148 échantillons (intervalle de concentrations : 1 à 125 ng/ml. Voir graphique.) Par régression linéaire : (IML) = 0,98 (IML 2000) + 1,97 ng/ml r = 0,988 Moyennes : 45 ng/ml (IMMULITE) 44 ng/ml (IMMULITE 2000)
Assistance technique
En France distribué par DPC France 90 bd National 92257 La Garenne-Colombes.
Fabriqué par EURO/DPC Ltd. dans le cadre d'un Système Qualité enregistré sous
ISO 13485:2003.
Italiano
Prolattina
Uso: Ad uso diagnostico in vitro con gli Analizzatori IMMULITE ed IMMULITE 1000 — per la misurazione quantitativa della prolattina nel siero quale ausilio nella determinazione e nel trattamento di disturbi ipofisari.
Codice: LKPR1 (100 test), LKPR5 (500 test)
Codice del Test: PRL Colore: Blu Scuro
Riassunto e Spiegazione del
Test
La prolattina umana è un ormone polipeptidico dell'ipofisi anteriore con una massa molecolare di circa 22 800. Gioca un ruolo essenziale nella secrezione del latte ed ha la capacità di sopprimere la funzione delle gonadi. L'esistenza della prolattina come sostanza distinta dall'ormone della crescita è stata stabilita solo nel 1970. Da quel momento, il dosaggio della prolattina è diventato uno strumento importante nell'indagine dell'amenorrea, galactorrea e dei disturbi ipotalamico-ipofisari.
Come range di riferimento per la prolattina in circolo, la letteratura suggerisce concentrazioni fino a circa 20 ng/mL. I valori sono elevati in maniera netta alla nascita, ma declinano a livelli da adulti dopo tre mesi.
Le donne risultano avere livelli medi leggermente più elevati degli uomini, con un lieve innalzamento intorno alla pubertà – apparentemente legato agli estrogeni – ed una corrispondente caduta durante la menopausa. Durante la gravidanza, i livelli di prolattina salgono in maniera notevole da 10 a 20 volte il valore iniziale, quindi scendono a valori normali dopo il parto – entro tre settimane nelle donne che non allattano. Per coloro che allattano, il declino verso valori normali è più graduale a causa del pronto e repentino rilascio indotto dall'allattamento. Le donne che fanno uso di contraccettivi o sono sottoposte a terapia estrogenica possono avere livelli di prolattina più elevati del normale.
Stabilendo la significatività di moderati innalzamenti, è importante tenere presente che la prolattina è un'ormone indotto da situazioni di stress. Non solo la chirurgia, ma eventi fonte di minore stress quali un prelievo o un colloquio clinico hanno fatto registrare un innalzamento momentaneo. Inoltre, è stato riscontrato che il rilascio della prolattina è episodico, e che possono verificarsi fluttuazioni di giorno in giorno con CV del 30%. Infine, esiste una variazione diurna legata al sonno: i livelli di prolattina si innalzano durante il sonno e raggiungono i livelli più bassi poche ore dopo il risveglio. L'avviso di prelevare campioni “tra le nove e mezzogiono” si basa sulla considerazione che i pazienti osservino un ciclo normale di veglia e sonno.
Principio del procedimento
IMMULITE/IMMULITE 1000 Prolattina è un dosaggio immunometrico in chemiluminescenza in fase solida a doppio sito.Cicli d'incubazione: 1 × 30 minuti.
Raccolta del Campione
Si consiglia l'utilizzo di un'ultracentrifuga per schiarire i campioni lipemici. I campioni emolizzati posson indicare il trattamento non idoneo del campione prima dell'arrivo al laboratorio; per questo motivo, i risultati devono essereinterpretati con prudenza.
I campioni di plasma EDTA non devono essere utilizzati.
La centrifugazione dei campioni del siero prima che la coagulazione sia completa può produrre fibrina. Per evitare risultati errati dovuti alla presenza di fibrina, assicurarsi che il processo di coagulazione sia completo prima di centrifugare i campioni. Alcuni campioni, in modo particolare quelli di pazienti sottoposti a terapia con anticoagulanti, possono richiedere tempi di coagulazione più lunghi.
Provette per il prelievo di sangue di produttori diversi possono dare valori differenti, a seconda dei materiali e degli additivi usati, incluso gel o barriere fisiche, attivatori di coaguli e/o anticoagulanti. L'IMMULITE/IMMULITE 1000 Prolattina non é stato verificato con tutte le possibili
variazioni di tipi di provette. Consultare la sezione riguardante Campioni Alternativi per dettagli sulle provette testate. Volume richiesto: 25 µL di siero. (Il porta campioni deve contenere almeno 100 µL più del volume totale richiesto). Conservazione: 7 giorni a 2–8°C o 3 mesi a –20°C.
Avvertenze e Precauzioni
Per uso diagnostico in vitro.Reagenti: Conservare i reagenti a 2–8°C. Eliminare in conformità alle leggi pertinenti.
Seguire le precauzioni generali e manipolare tutti i componenti come se fossero potenzialmente infetti. I materiali derivati dal sangue umano sono stati testati con esito negativo per la sifilide, gli anticorpi anti-HIV 1 e 2, l'Antigene di Superficie dell'Epatite B e gli anticorpi Anti-Epatite C.
E' stata aggiunta Sodio Azide a concentrazioni inferiori a 0,1 g/dL come conservante. Al momento
dell'eliminazione, irrorare con molta acqua per evitare la formazione di azidi
metalliche potenzialmente esplosive nelle tubature di piombo e di rame.
Substrato Chemiluminescente: Evitare la contaminazione e l'esposizione alla luce solare diretta. (Vedi metodica.)
Acqua: Utilizzare solo acqua distillata o deionizzata.
Materiali Forniti
I componenti costituiscono un unico set. Le etichette all'interno della confezione sono necessarie per eseguire i dosaggi. Test Unit Prolattina (LPR1)
Ogni test unit con codice a barre contiene una sferetta coattata con un anticorpo monoclonale murino anti-prolattina. Stabile a 2–8°C fino alla data di scadenza. LKPR1: 100 unit. LKPR5: 500 unit. Le buste delle test unit devono essere portate a temperatura ambiente prima di aprire. Aprire tagliando lungo il bordo superiore, lasciando intatta la chiusura ermetica. Risigillare le buste per proteggere le sferette dall'umidità.
Porta Reagente Prolattina (LPR2) Con codice a barre. 7,5 mL di fosfatasi alcalina (intestino di vitello) coniugata con un anticorpo policlonale di capra anti-prolattina in tampone, con conservanti. Conservare nel frigorifero con il coperchio: stabile a 2–8°C fino alla data di scadenza. Si consiglia di utilizzare il prodotto entro 30 giorni dall'apertura se conservato nella maniera indicata.
LKPR1: 1 Porta Reagente. LKPR5: 5 Porta Reagenti.
Calibratori Prolattina (LPRL, LPRH) Due flaconi (Basso ed Alto), ciascuno con prolattina umana liofila in una matrice di siero/tampone Ricostituire ogni fiala con 2,0 mL di acqua distillata o deionizzata. Mescolare agitando delicatamente o invertendo la miscela finchè il materiale liofilizzato sia completamente dissolto. Aliquotare e congelare. Stabile a –20°C per 60 giorni dopo la ricostituzione. LKPR1: 1 set. LKPR5: 2 set.
Componenti dei kit forniti
separatamente
Diluente della Prolattina (LPRZ) Per la diluzione dei campioni dei pazienti. 25 mL di matrice siero/tampone priva di prolattina, con conservanti. Stabile a 2–8°C per 30 giorni dopo l'apertura, o per 6 mesi (aliquotato) a –20°C.
LSUBX: Substrato Chemiluminescente LPWS2: Tampone di Lavaggio dell'Ago LKPM: Kit di Pulizia dell'Ago
LCHx-y: Tubi Porta Campioni (con codice a barre)
LSCP: Porta Campioni (monouso) LSCC: Coperchi per Porta Campioni (opzionali)
CON6: 3 livelli, controllo multicostituito Materiali richiesti
Pipette per la dispensazione dei campioni; acqua distillata o deionizzata; controlli.
Procedura del Dosaggio
Attenzione: per avere prestazioni ottimali, è importante effettuare le procedure di manutenzione di routine cosiccome definito nel Manuale dell'Operatore IMMULITE o IMMULITE 1000.Vedi il Manuale dell'Operatore IMMULITE o IMMULITE 1000 per: preparazione,
setup, diluizione, calibrazione, dosaggio e controllo di qualità.
Controllate ogni test unit verificando la presenza della sferetta prima di caricarla sullo strumento.
Intervallo di Calibrazione Consigliato: 4 settimane.
Controllo di Qualità: Utilizzare controlli o pool di sieri con almeno due livelli (alto e basso) di prolattina.
Valori Attesi
Data l'affinità con la Prolattina Coat-A-Count IRMA della DPC ci si attende che il dosaggio abbia gli stessi range di riferimento in ng/mL e mIU/L. Range di riferimento preliminare per gli uomini:
Gruppo n Mediana Centrale 95%
6,2 ng/mL 2,5 – 17
Uomini 19
131 mIU/L 53 – 360
Uno studio17 effettuato con il kit IMMULITE Prolattina ha prodotto i seguenti risultati. Range di riferimento per le donne:
Gruppo n Mediana Centrale 95%
9,4 ng/mL 1,9 – 25
Donne 115
199 mIU/l 40 – 530
Come riassunto nel Technical Report della DPC codice ZB157,17 in uno studio effettuato su donne con ciclo ovulatorio normale su base giornaliera e per un intero ciclo ovulatorio, sono stati ottenuti risultati più elevati a causa di un processo di prelievo dei campioni ad elevato stress. Uno studio inter-disciplinare su valori di fertilità pediatrica effettuato con il kit Prolattina IMMULITE presso una Clinica nel Sud-Ovest degli Stati Uniti ha prodotto i seguenti risultati.
