• No results found

Population genetic structure analysis of the freshwater crayfish (Astacus leptodactylus) in different region inferred from mtDNA control region sequencing

N/A
N/A
Protected

Academic year: 2021

Share "Population genetic structure analysis of the freshwater crayfish (Astacus leptodactylus) in different region inferred from mtDNA control region sequencing"

Copied!
17
0
0

Loading.... (view fulltext now)

Full text

(1)

119

نیریش بآ یوگیم هاش تیعمج یکیتنژ راتخاس یسررب

(Astacus leptodactylus)

فیدر زا هدافتسا اب فلتخم قطانم

لرتنک هقطنم یبای

DNA

ییایردنکوتیم

قلخ شوخ اضردیجم

1 *

یرظن داجس ،

2 mkhoshkholgh2012@gmail.com * 1 نلایگ هاگشناد یعیبط عبانم هدکشناد ،ناریا ، یتسپ قودنص 1144 2 -یرهطم دیهش یبآدرس نایهام داژن حلاصا و کیتنژ تاقیقحت زکرم ، مولع تاقیقحت هسسوم ت نامزاس ،روشک یتلایش شزومآو تاقیقح یزرواشک ، ،جوسای ناریا :تفایرد خیرات رهم 1394 :شریذپ خیرات نیدرورف 1395 هدیکچ هعلاطم رد رضاح کيتنژ راتخاس تيعمج نیريش بآ یوگيم هاش (Astacus leptodactylus) ، هيحان زا هدافتسا اب یلرتنک ییایردنکوتيم ( D-loop ) و شور یلاوت یبای DNA دروم یسررب .تفرگ رارق هب نيمه روظنم دادعت 132 زا وگيم هاش هنومن فلتخم قطانم و رزخ یایرد دس هچایرد لاس رد سرا 1390 ج .دیدرگ یروآ عم سپس تيمک DNA هنومن اه شور هب رتموتفورتكپسا زروفورتكلا قیرط زا نآ تيفيک و ی زراگآ لژ و گنر اب یزيمآ ا مورب مویديت ا دی .دش نييعت عومجم رد هنومن رد -،فلتخم قطانم یاه 38 پيتولپاه و ییاسانش عونت پيتولپاه ی و یديتوئلکون اب ربارب بيترت هب 049 / 0 ± 811 / 0 و 0038 / 0 ± 0127 / 0 دش یريگ هزادنا . م رادق D اميجات یفرط یب نومزآ رد 120 / 3 یاک عبرم نومزآ نيگنايم و 25 / 78 = χ2 ب زين دمآ تسد . رادقم D هنومن نيب رد هدمآ تسدب .دشاب باختنا راشف ندوب لداعتم هدنهد ناشن تسا نكمم اه ،رگید فرط زا جیاتن یفنم نومزآ تيعمج یخیرات شنکارپ و شرتسگ اه ( Fs Fu's ) هدننک ديیات گنیدنپراه صخاش نينچمه و شرتسگ تيعمج اه .دوب هجوت اب جیاتن هب نومزآ زیامت یاه FST قيقد نومزآ ، یلوكلوم سنایراو زيلانآ و اراتسآ قطانم رد و ناشیورد هايس هناخدور ،رزخ یایرد دورفج ینعم فلاتخا ( دنداد ناشن قطانم ریاس اب ار یراد 001 / 0 P < ) . نينچمه هک دیدرگ صخشم هنومن قطانم رد هورگ،یرادرب یاه م زیامت نیريش بآ یوگيم هاش زا ی د دوجو درا ، یروطب هک هنومن اه و ناشیورد هايس هناخدور ی دورفج هيحان و اراتسآ هورگ یكيتنژ زیامتم یاه .دنهد یم ناشن ار هنوگ نیا زا یلک روطب هتفای یم قيقحت نیا یاه یارب یرثوم شقن دناوت .دیامن ءافیا نیريش بآ یوگيم هاش یكيتنژ دوبهب و ریاخذ ییاسانش تاملک یدیلک : نیریش بآ یوگیم هاش ، Astacus leptodactylus ، DNA ییایردنکوتیم ، رد ی رزخ یا ، سرا دس هچایرد * لوئسم هدنسیون

(2)

120 همدقم ،هدش ماجنا تاعلاطم ساسا رب بآ يوگيم هاش هداوناخ هس هك دراد دوجو ايند رد نيريش اهنآ نيب رد هداوناخ Astacidae و تسا يبرغ يايسآ هقطنم يموب ناريا رد زين هنوگ يوگيم هاش نيريش بآ Astacus leptodactylus نيا هب قلعتم هداوناخ دشاب يم (Stucki, 1999; Chiesa et al., 2011) . هب هجوت اب هزورما شزرا يلااب يياذغ يزبآ ناروناج زين اهنآ فرصم شيازفا هدومن اديپ هك تسا يا هژيو هاگياج نيريش بآ يوگيم هاش نايم نيا رد دراد و با يتايصوصخ نتشاد شزرا ،نازرا يياذغ ميژر هلمج زا تيمها زا ايند رد بسانم يدنسپرازاب و لااب يداصتقا تسا رادروخرب يصاخ يراجت و يداصتقا ( Karimpour et al., 2011; Harlioğlu, 2008 ) . صخاش زا يکي ناونعب يکيتنژ عونت هزورما تيعضو ياه متسيسوكا کيژولوكا يم راکب يبآ ياه ههار زا يکي .دور يا تيعمج کيتنژ تاعلاطم نايزبآ يکيتنژ راتخاس يسررب اه هنوگ نورد تلاوحت يياسانش و هدوب تيعمج راتخاس و يا ِ يلوکلوم ياهرگناشن زا هدافتسا اب DNA و يا هتسه زاين زا يردنكوتيم حيحص تيريدم لامعا رد يساسا ياه هرهب يم يرادرب دشاب (Pourkazemi et al., 2012) . يسررب ياه DNA ( ييايردنكوتيم mtDNA ) ياهدربراك يددعتم يسانش تسيز رد ار نايزبآ زا هلمج نييعت ،يتيعمج نيب و نورد تارييغت يسررب ،دارفا نيب تارييغت هنوگ نورد تارييغت يکيمونوسكات يسررب حوطس رگيد و يا اه سنج دننام يدنب هقبط اد هتش (Billington and

Hebert, 1995; Liua and Cordes, 2004; Brown, 2008) . هك يروطب تاعلاطم رد تيعمج کيتنژ تخس ناتسوپ ، نژ ياه ريظن 16S rRNA لرتنك هيحان و DNA ييايردنكوتيم دنا هتفرگ رارق هدافتسا دروم رايسب (

(Tong et al., 2000; Schubart et al., 2000; Haye

et al., 2002 . نيققحم زا لاس 1980 ات دنا هدومن شلات ب زا هدافتسا ا شور فلتخم ياه هنوگ يکيتنژ راتخاس فلتخم ياه تخس هلمج زا ناتسوپ ار نيريش بآ يوگيم هاش دنيامن يسررب . ،لاثم ناونع هب نيئتورپ زروفورتکلا ساسا رب هيلوا تاعلاطم تفرگ تروص تيعمج نيب رد ار ينيياپ حوطس اهنت هك .دنداد ناشن يياپورا نيريش بآ يوگيم هاش ياه رد لاس -هتشذگ ياه هعسوت و يروآ نف تفرشيپ اب شور ياه لوم يلوک ، شور ريظن يفلتخم ياه DNA يردنكوتيم ( Grandjean et al., 2000 ،) RAPD ( Schulz , 1999, 2004;Gouin et al., 2001 ،) AFLP (Fetzner and Crandall, 1999) و هراوهامزير (Gouin et al., 2002; Gross et al., 2013) د تيعمج تاعلاطم ر هاش ياه نيريش بآ يوگيم هدش هتفرگ راك هب دنا . ناريا رد زين يکيتنژ تاعلاطم زا يخرب هنوگ اه ي تسوپ تخس نا نونكات تسا هتفريذپ تروص ( يياباب ، 1381 ؛ يناوضر ييلاك ليگ و ناراکمه ، 1380 ؛ ناراکمه و يدنواهن ، 1384 ؛ و دنمهوکش ناراکمه ، 1390 .) م فيصوت يارب شور زا يتسياب تيعمج راتخاس بسان ياه و ددعتم رگناشن نژ و اه .دوش هتفرگ هرهب فلتخم ياه رب ،ساسا نيمه قيقحت نيا ماجنا زا فده زيامت و يياسانش يکيتنژ تيعمج يلامتحا ياه هعلاطم دروم قطانم اب فيدر شور زا هدافتسا يباي DNA ييايردنكوتيم و نييعت رعم و يکيتنژ عونت نازيم زيامت تهج يلوکلوم رگناشن يف اهنآ م ي .دشاب شور و داوم اه هنومن یروآ عمج اه اه هنومن هيهت روظنم هب نيدلوم ديص بآ يوگيم هاش نيريش ، ييايفارغج فلتخم طاقن رد لماش و يلزنا بلاات 4 يزكرم شخب و برغ و رزخ يايرد هب يهتنم هناخدور نينچمه و رزخ يايرد بونج سرا دس هچايرد لاس رد 1390 ماجنا هلت زا هدافتسا اب تفرگ ( لودج 1 لکش ، 1 ). هب بيسآ زا يريگولج يارب هنومن اه زا تفاب يمك رادقم ، دش ادج کربنا طسوت وگيم هاش لوا دنب لوا ياپ هيحان و سپس لوناتا لکلا رد 96 .ديدرگ يرادهگن دصرد هنومن اه نژ هاگشيامزآ هب يلوکلوم تاشيامزآ ماجنا يارب کيت نلايگ هاگشناد لقتنم ندش .د

(3)

121 لودج 1 یبای یلاوت شور رد اه هنومن دادعت و یرادرب هنومن قطانم : رد هاگتسیا هرامش هشقن هاگتسیا مان ییایفارغج ضرع و لوط دادعت 1 رزخ يايرد -اراتسآ 49 و هجرد 5 5 هقيقد لوط و يقرش 38 و هـــجرد 8 هقيقد ضرع يلامش 20 2 رزخ يايرد رهشايك 49 و هجرد 42 هقيقد لوط و يقرش 7 3 و هـــجرد 33 هقيقد ضرع يلامش 20 3 يلزنا بلاات 49 و هجرد 20 هقيقد لوط و يقرش 7 3 و هـــجرد 26 هقيقد ضرع يلامش 20 4 دورفج هناخدور 49 و هجرد 12 هقيقد لوط و يقرش 7 3 و هـــجرد 9 2 هقيقد ضرع يلامش 20 5 ناخدور هلوسام هناخدور 49 و هجرد 18 هقيقد لوط و يقرش 7 3 و هـــجرد 10 هقيقد ضرع يلامش 14 6 ناشيورد هايس هناخدور 49 و هجرد 17 هقيقد لوط و يقرش 7 3 و هـــجرد 17 هقيقد ضرع يلامش 18 7 سرا دس هچايرد 45 و هجرد 2 هقيقد لوط و يقرش 38 و هـــجرد 38 هقيقد ضرع يلامش 20 عومجم 132 لکش 1 هنومن قطانم : بلاات ،رزخ یایرد رد نیریش بآ یوگیم هاش یرادرب و یلزنا سرا دس هچایرد لودج رد تایئزج( 1 )تسا هدش هدروآ .

(4)

122 یلوکلوم تاشیامزآ نيا رد يسررب لك جارختسا يارب DNA يمونژ زا شور لنف – مرفورلك -لکلا ليمآوزيا ( ديدرگ هدافتسا Hillis and Moritz,1990 .) همادا رد ك يسررب تهج تيفي DNA زروفورتکلا شور زا هدش جارختسا يقفا (Pourkazemi et al, 2012) زراگآ لژ يور رب ( 8 / 0 دصرد ) نازيم و ديمورب مويديتا بيكرت سناسرولف 1 هليسوب هدش بذج DNA دش هدافتسا . نينچمه تيمك نييعت DNA هنومن اه کمك هب رتموتفورتکپسا هاگتسد ي پاردونان( 1000 ) و يريگ هزادنا ديدرگ تبث . هريجنز شنكاو مجح رد زارميلپ يا 20 رتيلورکيم :لماش dNTPs ، 10 رميارپ ؛رلاوم يليم ، کي رتيلورکيم ( 10 )لوموکيپ ؛ DNA ، 100 ؛مرگونان ، PCR رفاب ، 5 / 2 رتيلورکيم تظلغ اب x 10 ميزينم ديرلك ؛ 50 رلاوم يليم و تاصخشم و ييامد هخرچ طيارش .تفرگ ماجنا رطقم بآ اد رلکياسومرت هاگتسد هب هدش هد (Eppendorf, Germany) هريجنز شنكاو يارب يلپ يا بيترت هب زارم : ادج هلحرم يزاس 94 تدم هب دارگيتناس هجرد 5 هقيقد ، زا فده هب اهرميارپ لاصتا هلحرم 51 هب دارگيتناس هجرد تدم 30 رميارپ طسب هلحرم ،هيناث 72 ،دارگيتناس هجرد 10 هقيقد يارب 25 لودج( ديدرگ يزاس هنيهب هخرچ 2 .) لرتنك هيحان زا يصاصتخا ياهرميارپ DNA يلاوت زا ييايردنكوتيم هعطق هقلح D 2 بآ يوگيم هاش نيريش نژ کناب رد NCBI دمآ تسدب ه کمك هب سپس و رازفا مرن Gunrunner 5.0.47 يلاوت .ديدرگ يحارط ياهرميارپ هعطق هدش يحارط هقلح D لماش رميارپ 1 : 5’-AAGAACCAG CTAGAATAAAATCTT-3’ و رميارپ 2 : 5'-GATCCA AGAACATCCTTTACGACA-3' .دندوب لحارم ماجنا زا دعب PCR ، لاوصحم ت هدـمآ تـسدب لژ رد زراگآ 8 / 0 صلاـخ نيياـپ شوج هطقن اب دصرد هـب و يزاـس من تكرش هدنيا ABI ناملآ رد لاـسرا يلاوـت نيـيعت يارب 1Ethidium bromide 2 Displacement-loop دنديدرگ . بيترت نيا هب رد هك ادتبا DNA ميقتسم روط هب هکت رد درادناتسا شور قبط هدش بوذ ياه (Kretz and o’Brein, 1993) اب 35 S سپـس دش ماجنا يلاوـت يباـي اـب تيك زا هدافتسا

cyclist Taq DNA

هارمه هب رـميارپ 1 د قاحلا يامد ر 51 يتناس هجرد دارـگ اـب هاگتـسد ABI

Prism Model 377 (Applied Biosystems, USA)

ماــجنا تفريذــپ . راــك هــمادا رد يلاوــت ياــه DNA لژ رد يلپ هدش تشرساو ديمآ ليركا 6 هروا و دصرد 7 رلاوم لـح ندش .د تياهن رد زين هنومن اه زا سپ تيبثت لژ کـشخ و اه هشيش ينيس يور رب ندش يا ، هعشا مليف ضرعم رد X هـب .دنتفرگ رارق زور دنچ تدم لیلحت و هیزجت یرامآ يا رد اه هداد زيلانآ يارب يددعتم ياهرازفا مرن زا يسررب ن هك بيترت نيا هب .ديدرگ هدافتسا پيتولپاه هـب طوـبرم ياه هعطق هـقلح D DNA مرـن زا هدافتـسا اـب ييايردـنكوتيم عوــنت .دــنديدرگ صخــشم يراــمآ ياــهرازفا پيتولپاــه ي و يديتوئلكون تيعمج صوصخم صخاـش زا هدافتـسا اـب اـه Nei و Tajima ( 1981 هزادــنا ) يرــيگ ندــش لــصاوف .د نيــب يــکيتنژ پــيتولپاه يرتمراــپود شور ساــسا رــب اــه Kimura (PHYLIP 3.695; Felsenstein, 2013) .ديدرگ هبساحم ماـجنا يارب نوـمزآ ياـه Fu’s FS (Fu, 1997) و D اميجات (Tajima, 1989) رازـفا مرـن هتسب زا يراــمآ DnaSP v5 اــب 10000 رارــکت يــسررب تــهج گ تــيعمج يخيراــت شنكارــپ و شرتــس اــه دــش هدافتــسا

(Librado and Rozas, 2009)

نيدـپراه صخاـش . ( Harpending, 1994 زياــمت تــهج قــيقد نوــمزآ و ) تــيعمج اــه

(Raymond and Rousset 1995)

زــين ب هليسو يرامآ رازفا مرن هتسب Arlequin 3.0 دـمآ تـسدب ( Excoffier et al., 2005 ).

(5)

123 لودج 2 روآرب : ینیشناج یوگلا بیکرت لامتحا رثکادح د لرتنک هقطنم یدیتوئلکون mtDNA نیریش بآ یوگیم هاش دیتوئلکون A T C G A -12 / 6 98 / 2 15 / 16 T 32 / 4 -56 / 14 65 / 3 C 17 / 6 01 / 12 -86 / 2 G 09 / 18 2 / 6 98 / 2 -يلاقتنا ينيشناج لامتحا نازيم 1 و تسا هدش صخشم يگنر ياه هناخ اب دعا هيقب لماش دا ينيشناج لامتحا Transversion . ( Transition رييغت : ياج هب نيديميريپ زاب کي اي و رگيد نيروپ زاب کي ياج هب نيروپ زاب کي رگيد نيديميريپ زاب کي و Transversion نيروپ زاب کي ينيشناج : 2 ياج هب نيديميريپ زاب کي 3 دشاب يم ). نيــنچمه لــك کرــن transition/transversion ( R اــب ) شور زا هدافتسا Tamura ( ناراکمه و 2013 هدافتـسا اب ) ب و ريز لومرف زا کمك ه رن م رازفا MEGA 6 :دمآ تسدب R = [A*G*k1 + T*C*k2]/[(A+G)*(T+C)] لومرف رد k1 : ينيشناج لامتحا نازيم و نيروپ زاب k2 : ينيشناج لامتحا نازيم .دشاب يم نيديميريپ زاب همانرب يرامآ MEGA 6 باعشنا هلصاف سيرتام داجيا يارب ، نيب يلاوت پيتولپاه راتخاس يوگلا .دش هتفرگ راك هب اه يلوکلوم سنايراو زا هدافتسا اب ييايفارغج (AMOVA) ديدرگ دروآرب . تيعمج راتخاس يلصا هيضرف زين هليسوب نومزآ ياك عبرم 4 و اب 1000 رارکت راب رارق زيلانآ دروم .تفرگ جیاتن يسررب تهج يرامآ ياه ، يلاوت ياه لرتنك هقطنم هعطق mtDNA زا هدافتسا اب نيريش بآ يوگيم هاش رازفا مرن Clustal W 2 زارتمه 5 دندش و رد عومجم 68 هاگياج م يلاوت همه رد ريغت اهزاب ينيشناج همه .ديدرگ هدهاشم اه 1Transitional substitutions 2 Purine 3 Pyrimidine 4Chi-square analyses 5 Align زا قاحلا اي فذح هنوگ چيه و دندوب يلاقتنا عون 6 هدهاشم .دشن هنومن نيب رد قطانم نيريش بآ يوگيم هاش ياه فلتخم هنومن يرادرب عومجم رد 38 پيتولپاه بيكرت ديدرگ هدهاشم لودج( 4 ). رد پيتولپاه فلتخم ياه رتشيب و ديدرگ صخشم يديتوئلكون هاگياج نيدنچ شهج لماش هدش هدهاشم تارييغت يلاقتنا ياه 7 ( C ↔ T ) دندوب . وئلكون تبسن نيگنايم نينچمه لوط رد يديت يلاوت ابيرقت اه 42 : 58 % ≈ (A+T) : (G+C) ناشن و دوب هدنهد ندوب بلاغ ( نيندآ ياهزاب تبسن A ( نيميت و ) T ) لوط رد يرارکت ياهديتوئلكون تروص هب هك دشاب يم يلاوت ياه دندش صخشم . يوگلا يبيكرت لامتحا رثكادح لرتنك هقطنم يديتوئلكون نيريش بآ يوگيم هاش رد نم لودج رد يرادرب هنومن قطا 2 و تسا هدش هدروآ ره يديتوئلكون ينيشناج لامتحا نازيم لودج اب قباطم شور ساسا رب زاب Tamura ( ناراکمه و 2013 ) هبساحم ديدرگ . يسررب نيا رد يناوارف نيگنايم نينچمه زاب يديتوئلكون ياه A ، T ، C و G بيترت هب 305 / 0 ، 291 / 0 ، 206 / 0 و 198 / 0 تسدب .دمآ نومزآ يفرط يب Tajima يلاوت يارب لرتنك هقطنم mtDNA نيريش بآ يوگيم هاش شور قبط Tajima (1989) نازيم D ار 365 / 2 ( داد ناشن ار 05 / 0 > P ) لودج( 3 .) ياه پيتولپاه هسياقم اب هنومن بآ يوگيم هاش ياه نيريش دش صخشم ، کي پيتولپاه پيتولپاه ( A ) نيب رد اهنآ تروصب م کرتش .دوب دادعت نيرتشيب نيا پيتولپاه ( 10 هنومن رد )ددع رزخ يايرد هقطنم ياه و اراتسآ ياراد بيترت هب هك ديدرگ هدهاشم ناشيورد هايس هناخدور 5 و 4 دندوب ردان پيتولپاه . هناخدور دورفج هب هلوسام و ياراد بيترت 7 و 8 بيترت هب دادعت نيا زا هك پيتولپاه 4 و 3 پيتولپاه .دندوب ردان دادعت 2 کرتشم پيتولپاه J و J1 زين رزخ يايرد يبونج قطانم ياه هنومن نيب رد ، .ديدرگ صخشم 6 Insertion/Deletion 7 Transitions

(6)

124 لودج 3 یفرط یب نومزآ : Tajima یلاوت یارب لرتنک هقطنم mtDNA M S ps Θ π D 68 214 675 / 0 286 / 0 215 / 0 120 / 3 M : هاگياج دادعت ؛اه S هاگياج دادعت : قرفتم ياه 1 ؛ ps : S/m ، Θ : ps/a1 ؛ π : يديتوئلكون عونت لودج 4 پیتولپاه عیزوت : لرتنک هقطنم یاه mtDNA نیریش بآ یوگیم هاش فلتخم قطانم رد رز خ - ار ات سآ رز خ -ره شای ک ی لز نا ب لاا ت دور فج هنا خ دور هل وسام هنا خ دور ن اخ دور ن اش یو رد ه ای س هچ ایر د س را قطانم پیتولپاه هرامش 3 10 8 2 3 2 5 A 1 1 3 4 0 0 0 1 A1 2 1 2 A2 3 2 1 A3 4 1 A4 5 1 1 1 A5 6 1 2 1 9 1 B 7 1 1 1 B1 8 1 B2 9 1 B3 10 1 4 1 C 11 1 C1 12 1 1 C2 13 1 11 1 D 14 1 2 D1 15 1 D2 16 1 D3 17 1 D4 18 1 E 19 1 F 20 G 21 G1 22 G2 23 G3 24 H 25 1 H1 26 1 H2 27 7 I 28 9 1 J 29 1 1 J1 30 1 K 31 1 K1 32 1 K2 33 1 L 34 1 L1 35 1 M 36 2 P 37 1 P1 38 1 Segregating sites

(7)

125 دادعت 9 ياه هنومن رد پيتولپاه و يلزنا بلاات دس هچايرد سرا دش هدهاشم پيتولپاه .دن B رد هنومن نيب ياه ،ناشيورد هايس هناخدور پيتولپاه D رد هنومن نيب ياه و دورفج هناخدور پيتولپاه J رد هنومن نيب ياه هقطنم اراتسآ ، تشيب دادعت نير دنتشاد ار . نينچمه پيتولپاه A3 هنومن نيب ياه رزخ هقطنم و يلزنا بلاات -رهشايك کرتشم دوب . لودج رد 5 پيتولپاه ياه هنومن قطانم ياه تروصب جياتن ،لماك يپيتولپاه عونت (h) يديتوئلكون عونت و (π) لرتنك هقطنم DNA يردنكوتيم هاش نيريش بآ يوگيم هارمه هب زآ جياتن نوم ياه D و Fs .تسا هدش هدروآ اب لودج هب هجوت 5 هك ددرگ صخشم عونت نيگنايم يپيتولپاه و يديتوئلكون اب ربارب بيترت هب اه هنومن لك رد 049 / 0 ± 811 / 0 و 0038 / 0 ± 0127 / 0 .دوب نينچمه هب طوبرم يپيتولپاه عونت نيرتشيب هقطنم اراتسآ رادقم و 036 / 0 ± 896 / 0 ب دمآ تسد يرتشيب . يديتوئلكون عونت ن ن نيمه هب طوبرم زين هك دوب هيحا رادقم 0021 / 0 ± 0198 / 0 تشاد . هنماد يپيتولپاه عونت نيب قطانم لك رد 01 / 0 ± 738 / 0 ات يلزنا بلاات رد 036 / 0 ± 896 / 0 رد هقطنم اراتسآ لودج( دوب ريغتم 6 .) جياتن نومزآ Fs زجب هلوسام هناخدور ينعم دندوب راد يلو نومزآ اه ي D ينعم راد دندوبن . نينچمه پيتولپاه نيب شنكارپ اب ردان ياه تيعمج يخيرات اه يطابترا ن هدهاشم ش د . اه هداد زيلانآ رضاح يسررب رد ينعم حطس رادقم يراد يناوارف فلاتخا و ياك عبرم پيتولپاه لرتنك هيحان ياه mtDNA هورگ دوجو زا يفلتخم ياه هاش بآ يوگيم نيريش طانم رد ار .دنك يم دييات يرادرب هنومن ق رب هولاع ،نيا يناوارف هك دنداد ناشن جياتن پيتولپاه ياه هنومن ي نيريش بآ يوگيم هاش هايس هناخدور ،اراتسآ هقطنم ،ناشيورد دورفج هنومن رياس اب ، ياه وگيم هاش قطانم زا ،سرا ،رهشايك زا ناخدور هلوسام هناخدور و يلزنا بلاات لاتخا يرامآ رظن ينعم ف ( دراد يراد 0001 / 0 > p و ) شور اب ياك عبرم زيلانآ Mont-Carlo نيا ديئات نمض ناشن هلئسم اد يناوارف فلاتخا قطانم نيا تيعمج هك د پيتولپاه هنومن رگيد اب يدايز ي رگنايب هك دراد اه دوجو تيعمج يم زيامتم ياه يناوارف فلاتخا نيرتشيب .دشاب پيتولپاه هنومن ي طنم ياه يايرد يبونج هيحان رد اراتسآ هق اب رزخ هچايرد ( سرا 0001 / 0 > p ، 43 / 156 = 2 χ و ) هنومن رد نآ زا دعب ياه هنومن اب ناشيورد هايس هناخدور ياه هچايرد ينعم فلاتخا يرامآ رظن زا هك دوب سرا يراد ( تشاد 0001 / 0 > p ، 52 / 154 = 2 χ فلاتخا نيرتمك .) يناوارف پيتولپاه ي زين هنومن نيب و يلزنا بلاات قطانم ياه هچايرد ( سرا 1859 / 0 > p ، 1 / 13 = 2 χ و ) نآ زا دعب نيب هنومن يلزنا بلاات قطانم ياه ، ( رهشايك 1766 / 0 > p ، 86 / 19 = 2 χ ديدرگ هدهاشم ) لودج( 6 .) نومزآ جياتن AMOVA لودج رد 7 ، ناشن دهد يم هك ينعم فلاتخا راد ي ( 001 / 0 > p ) رد هنومن ياه هاش نيريش بآ يوگيم رتشيب رد قطانم هنومن يرادرب دوجو .دراد جياتن نينچمه يسررب نا زا يخرب رد هك داد ناشن هظحلام لباق يکيتنژ عونت قطانم و دراد دوجو يا نيا هب بيترت نيريش بآ يوگيم هاش دوجو زا تيعمج دنچ ب تسا رادروخرب فلتخم يروط هك رادقم 25 / 71 % سنايراو ومن نيب هن اه ي ( قطانم 001 / 0 > p )، 07 / 9 % نيب سنايراو هنومن و اه نورد تيعمج اه ( 0285 / 0 = p و ) 68 / 19 زين % تيعمج نيب رد اه دمآ تسدب ( 001 / 0 > P ) هك دوخ هاش يکيتنژ عونت رتشيب هك تسا هلئسم نيا هدنهد ناشن -نيريش بآ يوگيم رد تسا قطانم نيب لودج( 7 ). صخاش يسررب جياتن زيامت ( FST ) شور ساسا رب يرتمراپود Kimura (Felsenstein, 2013) داد ناشن هك هنومن نيب ياه نيريش بآ يوگيم هاش زا 7 فلتخم هقطنم يلوبق لباق يکيتنژ عونت دوجو دراد هچنانچ هنومن نيب رد -قطانم زا يخرب ياه ، ينعم فلاتخا يرامآ رظن زا يراد ( ديدرگ هدهاشم 001 / 0 > P ، 2416 / 0 = FST رد و ) ينعم فلاتخا زين دراوم زا يضعب ديدرگن هدهاشم يراد لودج( 8 ).

(8)

126 لودج 5 : یپیتولپاه عونت S.D) ± ( h یدیتوئلکون عونت و S.D) ± ( π نومزآ ، یاه D و امیجات Fu’s FS گنیدپراه صخاش و قطانم دادعت پیتولپاه π h Fu’s FS نومزآ D امیجات صخاش گنیدپراه ( r ) رزخ يايرد -اراتسآ 10 0021 / 0 ± 0198 / 0 036 / 0 ± 896 / 0 * 579 / 4 -7211 / 0 -04281 / 0 رزخ يايرد رهشايك 8 0034 / 0 ± 0092 / 0 052 / 0 ± 749 / 0 * 680 / 1 -5408 / 0 -01464 / 0 يلزنا بلاات 9 0089 / 0 ± 0099 / 0 01 / 0 ± 738 / 0 743 / 0 -8634 / 0 -01037 / 0 دورفج هناخدور 7 005 / 0 ± 0154 / 0 092 / 0 ± 836 / 0 * 637 / 5 -6211 / 0 -0088 / 0 هناخدور ناخدور هلوسام 8 002 / 0 ± 0127 / 0 06 / 0 ± 822 / 0 * 405 / 3 -1468 / 0 0198 / 0 ناشيورد هايس هناخدور 9 0078 / 0 ± 0122 / 0 068 / 0 ± 865 / 0 * 989 / 3 -9877 / 0 -* 00732 / 0 دس هچايرد سرا 9 001 / 0 ± 0102 / 0 08 / 0 ± 773 / 0 * 501 / 0 -5303 / 0 -01977 / 0 عمج 38 0038 / 0 ± 0127 / 0 049 / 0 ± 811 / 0 * نومزآ رد ياه D و اميجات Fu’s FS .تسا هدش هداد ناشن هراتس تملاع اب ندوب راد ينعم نيدپراه صخاش و لودج 6 نیب رد یاک عبرم یرامآ هسیاقم : هاش نیریش بآ یوگیم ناکم هنومن فلتخم یاه یرادرب قطانم اراتس آ رهش ایک ب لاا ت یل زنا هنا خ دو ر دو رفج ه ناخ دو ر هل وس ام ها یس ن اشیو رد رزخ يايرد رهشايك 2 / 149 ( 0000 / 0 ) -يلزنا بلاات 7 / 113 ( 0000 / 0 ) 86 / 19 ( 1766 / 0 ) دورفج هناخدور 47 / 98 ( 0000 / 0 ) 6 / 43 ( 0576 / 0 ) 64 / 25 ( 0542 / 0 ) هلوسام هناخدور ناخدور 34 / 86 ( 0000 / 0 ) 22 / 38 ( 0084 / 0 ) 08 / 21 ( 0450 / 0 ) 52 / 131 ( 0000 / 0 ) ناشيورد هايس هناخدور 2 / 138 ( 0000 / 0 ) 69 / 87 ( 0000 / 0 ) 62 / 89 ( 0000 / 0 ) 27 / 96 ( 0000 / 0 ) 2 / 94 ( 0000 / 0 ) -هچايرد سرا 43 / 156 ( 0000 / 0 ) 33 / 15 ( 0549 / 0 ) 1 / 13 ( 1859 / 0 ) 47 / 87 ( 0000 / 0 ) 53 / 29 ( 0026 / 0 ) 52 / 154 ( 0000 / 0 ) * ينعم حطس زتنارپ نورد اد .تسا هدش هداد ناشن ير لودج 7 : نومزآ جیاتن AMOVA هنومن نیب هاش یاه نیریش بآ یوگیم تارییغت عبنم یدازآ هجرد تارییغت دصرد FST P تيعمج نيب اه 6 68 / 19 1784 / 0 001 / 0 > هنومن نيب تيعمج نورد ،اه اه 6 07 / 9 07563 / 0 0285 / 0 هنومن رد اه 131 25 / 71 2416 / 0 001 >

(9)

127 لودج 8 صخاش هسیاقم رادقم : FST و قیقد نومزآ * نیب رد هنومن یاه نیریش بآ یوگیم هاش فلتخم قطانم رد هقطنم ارات سآ ره شای ک ی لز نا ب لا ات دو رف ج هن اخ دو ر هلوسام هن اخ دو ر ن اخ دو ر ن اش یو رد های س هچ ای رد س را رزخ يايرد رهشايك 194 / 0 . -+ -+ -يلزنا بلاات 127 / 0 045 / 0 . + -+ -+ دورفج هناخدور 235 / 0 184 / 0 212 / 0 . + + + ناخدور هلوسام هناخدور 228 / 0 082 / 0 015 / 0 201 / 0 . + -+ ناشيورد هايس هناخدور 189 / 0 230 / 0 193 / 0 199 / 0 216 / 0 . + -هچايرد سرا 267 / 0 061 / 0 048 / 0 244 / 0 083 / 0 190 / 0 . * تملاع ياه -= مزآ ود رد ندوبن راد ينعم نو FST . قيقد نومزآ و + = ينعم ندوبن راد FST ينعم و ،.قيقد نومزآ ندوب راد + = ينعم ندوب راد FST ينعم و و قيقد نومزآ ندوبن راد + = ينعم نومزآ ود رد ندوب راد FST يم ناشن ار قيقد نومزآ و .دهد نينچمه جياتن زيامت صخاش FST و قيقد نومزآ ناشن اد د ن د هك د رزخ يايرد يبونج لحاوس زا اراتسآ هقطنم ر ، و ناشيورد هايس هناخدور دورفج هنومن رگيد اب ياه هاش -نيريش بآ يوگيم ،سرا ،رهشايك قطانم زا و يلزنا بلاات ينعم فلاتخا يرامآ رظن زا ناخدور هلوسام هناخدور يراد دراد ( 001 / 0 > p ). جياتن آ نومز AMOVA داد ناشن زين هنومن نيب هك ،اراتسآ هقطنم ياه و ناشيورد هايس هناخدور دورفج ينعم فلاتخا دراد دوجو يراد ( 001 / 0 > p ) دعب . حيحصت بيرض ماجنا زا Bonferroni ( 002 / 0 = p ) زين ينعم قطانم نيب دوجوم تافلاتخا زا يضعب يلو دندوبن راد هنومن نيب فلاتخا ،اراتسآ قطانم ياه هايس هناخدور و ناشيورد دورفج ينعم دنام يقاب راد ( 05 / 0 > p نيب . زا دعب و لبق قطانم رياس نومزآ Bonferroni چيه هنوگ ديدرگن هدهاشم يفلاتخا لودج( 9 .) دوش يم صخشم لودج هب هجوت اب هنماد FST هنومن ياه نيريش بآ يوگيم هاش ، زا 015 / 0 و يلزنا بلاات نيب ات ناخدور هلوسام هناخدور 267 / 0 هنومن نيب ياه هقطنم رزخ و اراتسآ هچايرد سرا ريغتم تسا فلاتخا نيرتشيب . FST هنومن نيب فلتخم قطانم مامت رد اراتسآ هقطنم ياه و هچايرد سرا رادقم اب 267 / 0 لودج( دمآ تسدب 9 .) رد ،عومجم يلاوت يسررب ياه هتفاي يباي لرتنك هيحان DNA يردنكوتيم هاش نيريش بآ يوگيم ساسا رب جياتن نومزآ AMOVA نينچمه و زيامت صخاش FST قيقد نومزآ و يم هك داد ناشن تفرگ رظن رد ار فلتخم تيعمج هس ناوت تيعمج لماش هك ،اراتسآ هقطنم ياه هناخدور دورفج و ناشيورد هايس هناخدور يم شاب ن .د ثحب یریگ هجیتن و ناهج طاقن رثكا رد نايزبآ رياخذ شهاك هدش بجوم ات تيريدم تهج نيققحم نييعت و هعلاطم هب رياخذ راتخاس هنوگ يکيتنژ شزرا اب ياه و دنروآ يور هدش تابثا يبوخب هك هطبار تلايش تيريدم و نايزبآ تيعمج کيتنژ رايسب .دنراد رگيدکي اب يکيدزن يفرط زا هدمع زا يکي نيرت توافت تخانش ،تيعمج کيتنژ رد لئاسم نيب اه ايفارغج هدودحم رد قطانم ياهتيعمج اهنآ شنكارپ يي يم هك تسا ميمصت رد دناوت يريگ زا يتلايش تيريدم ياه هرهب هلمج دروم يکيتنژ عونت زا تظافح و رادياپ يرادرب دنريگ رارق هدافتسا اذل . تيمها هب هجوت اب عوضوم نيا بآ يوگيم هاش مهم هنوگ يکيتنژ عونت يسررب هب هعلاطم .تخادرپ روشك فلتخم قطانم رد نيريش تن جيا قيقحت نيا لرتنك هقطنم هك داد ناشن DNA رادروخرب ييلااب عونت زا يردنكوتيم هدوب هس دوجو و

(10)

128 هقطنم لماش تيعمج اراتسآ و ناشيورد هايس هناخدور ، دورفج ديامن يم تابثا . هب ناوت يم بلطم نيا دييات رد رثوم شقن هقلح D .درك ديكات فلتخم تاعلاطم رد اب هتفاي هب هجوت م ياه ،نيققح هقلح D زا يتمسق ناونع هب يم يفرعم لرتنك هيحان دننامه زاغآ هقطنم زا هك دوش نيگنس هتشر يزاس (OH) هتسويپ يلاوت ات و عورش يياهتنا (TAS1) تمسق نيا هفيظو رب هولاع .دراد همادا اه شهج هليسوب تسار و پچ يحاون و يلوط ياه ينيشناج ياه ت تعرس هب يزاب رييغ يم دنباي (Clayton, 1991) هب اما . شهج عيزوت لااب قاحلا و فذح ليلد لرتنك هقطنم رد اه يم هنوگ نيب رد دناوت تاعلاطم هزورما .دباي رييغت اه هدرتسگ يلاوت زا يا لرتنك هقطنم يباي رد يزبآ نا رشتنم تسا هدش

(Baric et al., 2005; Nazari et al., 2013;

Khoshkholgh et al., 2011; Wang et al., 2014

.) تايرظن ربانب نيققحم ، يلاوت ساسا رب هك يتاعلاطم يباي لرتنك هقطنم يم تروص دريذپ ، راتخاس يکيتنژوليف هنوگ ياه تيعمج يکيتنژ راتخاس نينچمه و مهب کيدزن ياه يم مولعم ار نايزبآ فلتخم دزاس (Avise, 1994) رد و زين هعلاطم نيا زا هيحان نيا DNA دنكوتيم ير لباق عونت هظحلام .داد ناشن ار يا فلتخم تاقيقحت رد زا يخرب رد هنوگ وگيم ريظن ناتسوپ تخس ياه راتخاس دوجو يکيتنژ تيعمج ياهروتكاف هلمج زا يددعتم ليلاد و شرازگ مسيناکم ،يطيحم راتخاس نيا هيجوت يارب يراتفر ياه ناونع هديدرگ تسا

(Aubert and Lightner 2000;

Garcia Machado et al., 2001)

. پيتولپاه دادعت يسررب نيا رد هك يياه دندش هدهاشم لوکلوم زا تمسق نيا رد يلکشدنچ يلااب حوطس زا ناشن mtDNA .دراد نينچمه يلاوت شور اب يسررب نيا رد لرتنك هقطنم يباي DNA دادعت يردنكوتيم 38 پيتولپاه ظن ناققحم رگيد اب هسياقم رد هك ديدرگ صخشم ري Chu ( ناراکمه و 2003 يوگيم يسررب رد ) يزوم 2 اب هك زا هدافتسا 4 رگشرب ميزنآ 15 دندروآ تسدب پيتولپاه 1

Termination association sequence

2 Fenneropenaeus merguiensis هعلاطم هب تبسن و هدوب رتشيب Valles-Jimenez و ( ناراکمه 2006 تيعمج يسررب اب هك ) يوگيم ياه ديفس 3 زا هدافتسا اب 4 ميزنآ 48 دندروآ تسدب پيتولپاه ، .دوب رتمك طم رد رد يپيتولپاه عونت نيگنايم رضاح هعلا يربب يوگيم هب تبسن و هدوب لااب نيريش بآ يوگيم هاش 4 اب هك شور PCR-RFLP و زا هدافتسا 5 ددع رگشرب ميزنآ 537 / 0 ( دوب هدمآ تسدب Klinbunga et al., 1998 ،) يسررب رد نينچمه .دوب رتشيب هنوگ يور رب رگيد ياه زا هدافتسا اب يربب يوگيم 11 ياهنژ و ميزنآ COI–COII لوکلوم mtDNA يهباشم يپيتولپاه عونت ، 864 / 0 و 855 / 0 ( Klinbunga et al., 1999 دمآ تسدب ) . يسررب نيا جياتن نينچمه هنومن هك داد ناشن رد هك يياه هناخدور اه هنومن اب هسياقم رد ،دندوب هدش ديص ييايرد ياه هظحلام لباق يکيتنژ عونت زا هنوگ نيا ا .دنرادروخرب ي داد ناشن نيئتورپ زروفورتکلا زا هدافتسا اب هيلوا تاعلاطم رگيد اب هسياقم رد نيريش بآ زارد نچرخ هنوگ هك هنوگ ياه وگيم هاش نيياپ يتيسوگيزورته زا رادروخرب يرت ( تسا Crandall, 1997 .) ،بلطم نيا دوجو اب عونت هداد ياه رد يميازولآ هاش نيريش بآ يوگيم 5 ت نيققحم طسو تسا هدش شرازگ يفلتخم

Fevolden and Hessen

,1989; Agerberg ,1990; Fevolden et al., 1994)

.) ،لاثم ناونع هب Agerberg ( لاس رد 1990 راهچ رد ) زا يسررب دروم تيعمج هاش نيريش بآ يوگيم و دئوس رد نيا درکن هدهاشم ار يصخشم لباق يکيتنژ يعونت ناتسهل يلاح رد هك تسا Fevolden و Hessen ( لاس رد 1989 ) و Fevolden ( ناراکمه و 1994 ينعم فلاتخا ) زا ار يراد تيعمج رد يکيتنژ رظن ژورن ياه هنوگ نيا رد شرازگ و تشاد ناعذا دن تيعمج لاامتحا هك دئوس زا يژورن ياه هدش هدروآ و دنا تلع رثا ار ثحب دروم يکيتنژ فلاتخا راذگناينب 6 ژ شنار و ومن ناونع يکيتن ند .د 3Litopenaeus vannamei 4 P. monodon 5 A. astacus 6 Founder

(11)

129 زا هدافتسا اب يسررب نيا رد هدمآ تسدب يکيتنژ هلصاف يلاوت يباي ا ينعم فلاتخ تيعمج نيب ار يراد دروم ياه يسررب .داد ناشن نينچمه هداد يسررب نيا ياه هتفاي اب ياه Schulz ( لاس رد 2000 صخشم و تشاد يناوخمه ) درگ ي د تيعمج هب ييايفارغج رظن زا هك يياه رگيدکي دنتسه رتکيدزن ، .دنراد يرتدايز يکيتنژ تهابش نيا اب هك حيضوت هقطنم يراگزاس تسا نکمم دادجا ييادج اي يا .دشاب هتشاد يرثوم شقن هطبار نيا رد ،هطبار نيمه رد Agerberg ( 1990 عونت ميازوللا شور زا هدافتسا اب ) هنوگ هس يکيتنژ وزاب يوگيم هاش ،نيريش بآ يوگيم هاش کيراب 1 امنهار يوگيم و 2 داد رارق يسررب دروم ار و زا 21 هدافتسا دروم ميزنآ ، دادعت 15 ميزنآ ار عونت هعلاطم يارب بسانم هنوگ هس نيب يکيتنژوليفو يکيتنژ نتسناد د . هعلاطم رد نينچمه رگيد يا Alaranta ناراکمه و ( 2006 يکيتنژ عونت ) نيريش بآ يوگيم هاش هس رد ار ،دئوس روشك ينوتسا و دنلانف يلاوت زا هدافتسا اب هيحان يباي ITS1 يسررب دروم دنداد ناشن و تيعمج هقطنم ياه هريخذ و لدابت ليلدب دنلانف قطانم يزاس ب فلتخم ا رگيدکي شادن يفلاتخا دنت و يل زا تيعمج ود 5 تيعمج فلاتخا دئوس دنتشاد هيحان تياهن رد و ITS1 ناونع هب يارب رگناشن کي لاطم تاع هنوگ و هنوگ نيا هباشم ياه .ديدرگ يفرعم تاقيقحت يرتشيب هلمج زا ،تيعمج هزادنا نژ حطس رد يکيتنژ عونت و تسيز طيحم تيفيك ياه يم فلتخم تيدودحم يبايزرا هب دناوت يتسيز طيحم ياه تيعمج يکيتنژ کيکفت رانك رد يکيتنژ شنار اي ياه فلتخم ، ايفارغج راتخاس ندومن صخشم يارب يي تيعمج ه يا نيريش بآ زارد نچرخ .ديامن کمك صخاش زيامت FST و قيقد نومزآ ، نينچمه نومزآ شن ينژورته فتم ينژ يناوارف فلاتخا هك داد نا رد يتوا تيعمج يسررب نيا رد .دراد دوجو يسررب دروم ياه ينعم يتيعمج راتخاس هنومن همه نيب رد يراد رد اه هناخدور اه صخشم رزخ يايرد و هداد جياتن .ديدرگ ياه 1 A. leptodactylus 2 Pacifastacus leniusculus يلاوت لرتنك هقطنم يباي DNA لقادح دوجو يردنكوتيم هناخدور تيعمج هس هك دومن صخشم ار يکيتنژ هورگ هس و ناشيورد هايس دورفج زا يدايز فلاتخا اراتسآ هيحان و يلع .دنداد ناشن يکيتنژ رظن مغر هلصاف ييايفارغج کيدزن تيعمج هايس هناخدور ريظن فلتخم ياه و ناشيورد دورفج ينعم فلاتخا .دنداد ناشن دوخ زا ار يراد يلاح رد نيا هنومن هك تسا دايز هلصاف اب سرا ياه زا هنومن رگيد ياه قطانم ، اد يکيتنژ تهابش تش يرامآ رظن زا و فلاتخا ينعم يراد ديدرگن صخشم و هلئسم نيا صخشم دنمزاين ءاشنم ندومن آ تاعلاطم رد هقطنم نيا يکيتنژ هدني يم .دشاب هب هجوت اب صخاش زيامت FST تيعمج رتشيب رظن زا اه فلاتخا يرامآ ينعم جياتن نيا .دنداد ناشن ار يراد يم رد دناوت همانرب دروم رياخذ يزاسزاب کيژتارتسا تيريدم يزير .دريگ رارق هدافتسا ،نيا رب هولاع هناخدور تيعمج ود دادعت د رهشايك هيحان و ناخدور هلوسام فلاتخا رزخ يايرد ر تيعمج رگيد اب هسياقم رد يمك يکيتنژ ناشن دوخ زا اه دنداد . هنومن نيب فلاتخا ليلاد هلمج زا رگيد اب اراتسآ ياه يم قطانم هك دومن هراشا هلئسم نيا هب ناوت طيارش مك قطانم نداد حيجرت نينچمه و رزخ يايرد يطيحم بصم و ايرد قمع اوج و يورلا هرود رد اه يم ين دناوت رد ار نيريش بآ يوگيم هاش يکيتنژ راتخاس دنلب اب تدم تحت تيعمج هزادنا تاناسون رانك رد ينژ يناوارف رد رييغت دهد رارق ريثات ( Cristescu et al., 2005 ). ياه هتفاي نيا قيقحت ياهرگناشن هك داد ناشن mtDNA تيعمج يکيتنژ عونت هعلاطم يارب يبسانم رازبا هنوگ ياه شاب يم نيريش بآ يوگيم هاش ن تيعمج يخرب هچرگا .د اه دوخ زا يکيتنژ تهابش زورب طلاتخا زا ناشن و دنداد تيعمج اد اه تش تيعمج . ياه رد اراتسآ هقطنم يايرد رزخ يكاح تيعمج رگيد زا هورگ نيا ندوب ادج زا اه دوب . تيعمج هکنيا ليلدب روشك لامش رد رتشيب يعيبط ياه هب دراد دوجو يعطق روط يمن ناوت فلاتخا دومن ناونع هنوگ نيا يدادجا يلکشدنچ هب طوبرم دوجوم يکيتنژ هدوب هچايرد هب هنوگ نيا يفرعم ريثات تحت اي سرا هدوب .تسا هدنيآ تاعلاطم رد يکيتنژ عونت هسياقم عرازم رد

(12)

130 هچايرد ،يشرورپ ياه زا هدش يزاس هريخذ نيا هنوگ اي و ط رياخذ اب هسياقم اب ريظن هياسمه ياهروشك يعيب يم هيكرت و ناجيابرذآ يکيتنژ عماج هعلاطم هب دناوت تيعمج هدافتسا نينچمه .ديامن کمك وگيم هاش هنوگ ياه هنومن زا شور رگيد يريگراکب نينچمه و يميدق ياه ياه ريظن يکيتنژ عونت تاعلاطم هراوهامزير اه 1 و 2SNP و يسررب رضاح هعلاطم اب هسياقم ت ياه يلماکت و يکيتنژ عون يم ليهست ار يکيتنژ فلاتخا .دزاس ینادردق و رکشت بوصم دك اب قيقحت نيا يلام تيامح 89004480 طسوت روشك نارگشهوژپ زا تيامح قودنص و تفريذپ تروص يم مزلا دوخ رب ناگدنسيون تيامح تهج هب دنناد ياه .دنيامن ينادردق و رکشت قيقحت نيا يلام و ييارجا ه زا نينچم هك يناسك هيلك قيقحت نيا ماجنا لوط رد عمج رد صوصخب هنومن يروآ ،دندومن کمك اه ينادردق يم .دوش عبانم .م ،ییاباب 1381 . يلوکلوم يسررب 3 يايرد يوگيم هنوگ زا هدافتسا اب سراف جيلخ و نامع mtDNA شور هب RFLPs دازآ هاگشناد ،يکشزپماد يارتكد همان ناياپ . ملاسا ،جرك دحاو ي 75 .هحفص ،ییلاک لیگ یناوضر ،یمظاکروپ و ع.س ،ییاباب ،.س ، 1380 . زبس يربب يوگيم تيعمج يلوکلوم يسررب (Penaeus semisulcatus) جيلخ و نامع يايرد رد دحاو ريز نژ زا هدافتسا اب سراف 1 زاديسكا موركوتيس (COІ) شور هب RFLP .ناريا تلايش يملع هلجم . ( 2 ) 10 ، 19 -15 . دنمهوکش ، م ،. نینرقلاوذ ، ح ،. ییوللا ، ف ،. دنمغورف ، ع و . .فلا یراوس ، 1390 . يکيتنژ عونت يسررب ديفس يوگيم ( Metapenaeus affinis ) لحاوس رد 1 Microsatellite

2 Single Nucleotide Polymorphism زا هدافتسا اب )ناتسزوخ ناتسا( سراف جيلخ هراوهامزير ياهرگناشن يا . ناريا تلايش يملع هلجم . ( 3 ) 20 ، 45 -54 . .ر ،یدنواهن ،ییلاک لیگ یناوضر ، و غ ،یقوثو ،.س .ب ،یمظاک 1384 . نژ عونت يسررب 18s rRNA رد بكرم يهام تيعمج (Sepia pharaonis) يايرد شور زا هدافتسا اب سراف جيلخ و نامع PCR-RFLP . ناريا تلايش يملع هلجم . ( 2 ) 14 ، 168 -157 .

Agerberg A., 1990. Genetic variation in three species of freshwater crayfish, Astacus

astacus L., Astacus leptodactylus Aesch.

and Pacifastacus leniusculus (Dana), revealed by isozyme electrophoresis. Hereditas, 113, 101-108.

Alaranta, A., Henttonen, P., Jussila, J., Kokko, H., Prestegaard, T., Edsman, L., and Malmekyto, M., 2006. Genetic differences among noble crayfish (Astacus astacus) stocks in Finland, Sweden and Estonia based on the ITS1 region. Bulletin Francais de la Peche et de la Pisciculture, 965-975.

Aubert, H, and Lightner, DV., 2000. Identification of genetic populations of the Pacific blue shrimp Penaeus stylirostris of the Gulf of California, Mexico. Marine Biology 137:875–885.

Avise, J.C., 1994. Molecular Markers, Natural History, and Evolution. Chapman and Hall, New York, NY. 511 pp.

Baric, S., Hollrigl A., Fureder L. and Dalla Via J., 2005. Mitochondrial and

microsatellite analyses of

Austropotamobius pallipes populations in

(13)

131

South Tyrol (Italy) and Tyrol (Austria). Bulletin Francais dela Peˆche et de la Pisciculture, 376–377, 599–612.

Billington, N and Strange, R. M., 1995. Mitochondrial DNA Analysis Confirms the Existence of a Genetically Divergent Walleye Population in Northeastern Mississippi. Transactions of the American Fisheries Society 5, 770–776.

Brown, K.H., 2008. Fish mitochondrial genomics: sequence, inheritance and functional variation. Journal of Fish Biology 72, 355–374.

Chu, K. H., Li, C. P., Tam, Y. K., and Lavery, S., 2003. Application of mitochondrial control region in population genetic studies of the shrimp Penaeus. Molecular Ecology 3, 120–122.

Chiesa, S., Scalici, M., Negrini, R., Gibertini, G. and Marzano, F.N., 2011. Fine-scale genetic structure, phylogeny and systematic of threatened crayfish species complex.Molecular phylogenetics and evolution, 61 (1): 1–11

Clayton, D.A., 1991. Replication and transcription of vertebrate mitochondrial DNA. Annual Review of Cell Biology. 7: 453-478.

Crandall, K.A., 1997. Genetic variation within and among crayfish species. Freshwater crayfish, 11, 135-145.

Cristescu, MEA and Hebert, PDN., 2005. The ‘Crustacean Seas’ an evolutionary perspective on the Ponto-Caspian

peracarids. Canadian Journal of Fisheries and Aquatic Sciences, 62, 505–517.

Excoffier, L., Laval, G., and Schneider, S., 2005. Arlequin Ver. 3.0: an integrated software package for population genetics data analysis. Evolution Bioinformatics, 1: 47–50.

Fetzner, J.W., Crandall, K.A., 1999. Genetic variability within and among populations of the golden crayfish (Orconectes luteus): a comparison using amplified fragment length polymorphism (AFLPs) and mitochondrial 16s gene sequences. Freshwater Crayfish, 12, 396-412.

Fevolden, S.E., and Hessen, D.O., 1989. Morphological and genetic differences among recently founded populations of noble crayfish (Astacus astacus). Hereditas, 110, 149-158.

Fevolden, S.E., Taugbøl, T., and Skurdal, J., 1994. Allozymic variation among populations of noble crayfish, Astacus

astacus L., in southern Norway: implications for management. Aquaculture and Fisheries Management, 25, 927-935. Felsenstein, J., 2013. PHYLIP (Phylogeny

Inference Package) version 3.695. Distributed by the author. Department of Genome Sciences, University of Washington, Seattle.

Fu, Y. X., 1997. Statistical tests of neutrality of mutations against population growth, hitchhiking, and background selection. Gene 147:915–925.

(14)

132 Gouin, N., Grandjean, F., Bouchon, D.,

Reynolds, J.D., and Souty-Grosset, C., 2001. Population genetic structure of the endangered freshwater crayfish

Austropotamobius pallipes, assessed using

RAPD markers. Heredity, 87, 80-87. Gouin, N., Souty-Grosset, C., Ropiquet, A.,

and Grandjean, F., 2002. High dispersal ability of Austropotamobius pallipes

revealed by microsatellite markers in a French brook. Bulletin France Pêche Piscic., 367, 681-689.

Garcia-Machado, E, Robainas, A, Espinosa, G, Oliva, M, Pa´ez, J, Verdecia, N, and Monnerot, M., 2001. Allozyme and mitochondrial DNA variation in Cuban populations of the shrimp Farfantepenaeus

notialis (Crustacea: Decapoda).Marine Biology 138:701–707.

Grandjean, F., Harris, D.J., Souty-Grosset, C., and Crandall, K.A., 2000. Systematics of the European endangered crayfish species Austropotamobius pallipes

(Decapoda:Astacidae). Journal of Crustacean Biology, 20 (3), 522-529. Gross, R., Ko ˜iv, S., P. K. Prestegaard, T.,

Jussila, J., Paaver, T., Geist, J., Kokko, H., Karjalainen, A., and Edsman, L., 2013. Microsatellite markers reveal clear geographic structuring among threatened noble crayfish (Astacus astacus)

populations in Northern and Central Europe. Conservation genetic. DOI 10.1007/s10592-013-0476-9

Haye, P. A., Tam, Y. K., and Kornfield, I., 2002. Molecular phylogenetics of mole crabs (Hippidae: Emerita). Journal of Crustacean Biology 22, 903–915.

Harlioğlu, M.M., 2008. The harvest of the freshwater crayfish Astacus leptodactylus Eschscholtz in Turkey: harvest history, impact of crayfish plague, and present distribution of harvested populations. Aquaculture International 16: 351-360.9145-7.

Harpending, H.C., 1994. Signature of ancient population growth in a low-resolution mitochondrial DNA mismatch distribution. Human Biology, 66, 591–600.

Hillis, D and Moritz, M. C., 1990. Molecular taxonomic. Sinauer associate, Inc. Publishers. Massachusetts.

Karimpour., M., Harlioğlu, M.M. , and Aksu, Ö. 2011. Status of freshwater crayfish (Astacus leptodactylus) in Iran. Knowledge and Management of Aquatic Ecosystems (2011) 401, 18.

Khoshkholgh, MR., Pourkazmi, M., Nazari, S., Azizzadeh, L., 2011. Genetic diversity in the Persian sturgeon (Acipenser persicus) in the south Caspian Sea based on mitochondrial DNA sequence analysis. Caspian Journal of Environmental Sciences 9(2), 27-36.

Klinbunga, S, Penman, DJ, McAndrew, BJ, and Tassanakajon A.,1999. Mitochondrial DNA diversity in three populations of the

(15)

133

Giant Tiger Shrimp Penaeus monodon. Marine Biotechnology 1:113–121

Klinbunga, S, Penman, DJ, McAndrew, BJ, Tassanakajon, A, and Jarayabhand, P., 1998. Genetic variation, populations differentiation, gene flow of the giant tiger shrimp (Penaeus monodon) inferred from mtDNA-RFLP data. In: Flegel TW (ed) Advances in shrimp biotechnology. National Center for Genetic Engineering and Biotechnology, Bangkok.

Kretz, K.A., and O’Brien, J. S., 1993. Direct sequencing of polymerase chain reaction products from low melting temperature agarose. Methods in Enzymology 218:72– 79.

Librado, P. and Rozas, J., 2009. DnaSP v5: A software for comprehensive analysis of DNA polymorphism data. Bioinformatics 25: 1451-1452.

Liua, Z.J. and Cordes. J.F., 2004. DNA marker technologies and their applications in aquaculture genetics. Aquaculture 238, 1 –37.

Nazari, S., Pourkazemi, M., Khoshkholgh, MR. and Azizzadeh, L., 2013. Population structure and variation in Persian sturgeon (Acipenser percicus) from the Caspian Sea as determind from mitochondrial DNA sequences of the control region. Progress in Biological Sciences, 3(2), 67-80.

Nei, M and Tajima, M., 1981. Molecular evolutionary genetics. New York, NY: Columbia University Press.

Pourkazemi, M., Nazari, S., Khoshkholgh, MR. and Azizzadeh, L., 2012. Genetic Relationships among Populations of the Persian sturgeon, Acipenser percicus, in the south Caspian Sea Detected by Mitochondrial DNA–Restriction Fragment Length Polymorphisms.. Caspian Journal of Environmental Sciences 10(2), 215-226. Raymond, M. and Rousset, F., 1995. An

exact test for population differentiation. Evolution 49, 1280-1283.

Schubart, C.D., Neigel, J.E. and Felder, D.L., 2000. Use of mitochondrialb16S rRNA gene for phylogenetic and population studies of Crustacea. Crustacea 12, 817– 830.

Schulz, R., and Sypke, J. 1999. Freshwater crayfish populations Astacus astacus (L.) in Northeast Brandenburg (Germany): Analysis of Genetic Structure using RAPD-PCR. Freshwater Crayfish, 12, 387-395. Schulz, R., 2000. Status of the noble crayfish

Astacus astacus (L.) in Germany: monitoring protocol and the use of RAPD markers to assess the genetic structure of populations. Bulletin France Pêche Piscic., 356, 123-138.

Schulz, H.K., Smietana, P and Schulz, R., 2004. Assessment of DNA variation of Noble crayfish (Astacus astacus) in Germany and Poland using Inter-Simple Sequence Repeats (ISSRs). Bulletin France Péche.piscis, 372-373: 387-399.

(16)

134 Stucki, T.P., 1999. Life cycle and life history

of Astacus leptodactylus in Chatzensec Lake (Zurich) and Lake Ageri in Switzerland. Freshwater Crayfish, 12, 430– 448.

Tajima, F., 1989. Statistical methods to test for nucleotide mutation hypothesis by DNA polymorphism. Genetics 123:585-595. Tamura, K., Stecher, G., Peterson, D.,

Filipski, A., and Kumar, S., 2013. MEGA6: Molecular Evolutionary Genetics Analysis Version 6.0. Molecular Biology and Evolution 30: 2725-2729.

Tong, J. G., Chan, T. Y., and Chu, K. H., 2000. A preliminary phylogenetic analysis of Metapenaeopsis (Decapoda: Penaeidae) based on mitochondrial DNA sequences of selected species from the Indo-West Pacific. Journal of Crustacean Biology 20, 543–551.

Valles-Jimenez, R., Gaffney, P. M. and Perez-Enriquez, R., 2006. RFLP analysis of the mtDNA control region in white shrimp (Litopenaeus vannamei) populations from the eastern Pacific. Marine Biology, 148 ,( 4), 867.

Wang, J., Yang, M, Sun, C Yang, Z Cui, In K Jang, and L Song., 2014. The genetic diversity and differentiation of shrimp

Fenneropenaeus chinensis in the Yellow

Sea revealed by polymorphism in control region of mitochondrial DNA. International Scientific Journal 11: 309-318.

(17)

Population genetic structure analysis of the freshwater crayfish

(Astacus leptodactylus)

in different region inferred from mtDNA

control region sequencing

Majidreza Khoshkholgh1*, Sajad Nazari 2

*mkhoshkholgh2012@gmail.com

1- Faculty of Natural Resources, University of Guilan, P.O. Box 1144 Sowmehsara, Iran

2- Cold-water Fishes Genetic and Breeding Research Center, Iranian Fisheries Research

Institute

,

Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Yasouj, Iran

Received: September 2015 Accepted:March 2016

Keywords: freshwater crayfish, Astacus leptodactylus, mtDNA, Caspian Sea, Aras River Abstract

In this study population genetic structure of freshwater crayfish (Astacus leptodactylus) in Iran was investigated using direct sequencing of mtDNA control region. A total of 132 samples were collected from the different locations. The quality and quantity of total DNA were determined by agarose gel electrophoresis ethidium bromide staining and spectrophotometery, respectively. The results showed that 38 haplotypes were observed between samples in sequencing analyses. The haplotype diversity (h) and nucleotide diversity (π) were 0.811±0.049 and 0.0127±0.0038 sequencing techniques, respectively. Tajima’s D and chi-square (χ2) values were 3.120 and 78.25, respectively. The significant positive D value for the samples might suggest balancing selection. Significantly negative Fu's Fs values and significantly positive Harpending test values were taken as evidence of a population expansion.The results of FST ,Exact test and analysis of molecular variance (AMOVA)

demonstrated that samples between Siahdarvishan River , Jafrood River and Astara region in the southwest Caspian sea statistically are significant in sequencing techniques (P<0.0001).Therefore three distinct groups were identified. These results showed that haplotype distributions in different locations were significant and populations of Siahdarvishan River and Astara region statistically were significant (P < 0.0001). These results suggests that the unique genetic structure of Siahdarvishan River, Jafrood River and Astara region represent a highly valuable genetic resource and provide useful information for identifying populations and genetic improvemnet.

* Corresponding author

References

Related documents

Pats faktas, kad griežtai centralizuoto valdymo aplinkoje buvo pasirinkta plėtoti dvi plano alternatyvas, rodo skirtingas tuometinio architektūros ir miesto planavimo lauko

It is reported in the Hadith (Hadith No 953, Hadith Sahih Bukhari, Book of Eid Festivals, Vol 2): Anas bin Malik narrated: “ The Messenger of Allah (pbuh) never proceeded for Salat

In order to compare the interoperable to non-interoperable approach for creating a machining cloud manufacturing service, two activity-based models are defined, illustrating

Today, there are large volumes of digitized data due to the ubiquity of the internet and the overwhelming success of cloud computing. Corporations as well as billions of

Implementation Teams Determined Business Unit Config/ Funding Teams Charged Staffing Teams Charged Recommendations Provided by: • Comp Process Improve Team • Funding Team

In Chapter 7, variation in breast cancer incidence by spatial measure, dietary pattern, diet cost and weight status will be explored... Chapter 7: Geography of dietary patterns and

Kim (2013) we employ the modern portfolio theory proposed by Markowitz (1952) to give an optimal foreign exchange allocation for each tourist hotel company's

Abstract—This paper discusses novel approaches to improve energy efficiency of different optical access technologies, including time division multiplexing passive