Free T3
IMMULITE
®2000 Free T3
English
Intended Use: For in vitro diagnostic use
with the IMMULITE® 2000 Systems
Analyzers — for the quantitative
measurement of free T3 in serum, as an aid in the clinical assessment of thyroid status.
Catalog Numbers:
L2KF32 (200 tests) L2KF33M (3000 tests) L2KF36 (600 tests) L2KF36M (6000 tests)
Test Code: FT3 Color: Aqua
Summary and Explanation
Under normal physiological conditions triiodothyronine (T3) represents approximately 5 percent of the thyroid hormone in plasma. Although present in lower concentration than thyroxine (T4), T3 has greater metabolic activity, faster turnover and a larger volume of
distribution. It is produced largely through extrathyroidal conversion of T4. Like T4, it circulates almost entirely bound to the carrier proteins TBG, pre-albumin and albumin. Free T3 constitutes only about 0.25% of the total T3 in circulation.
Measurement of total T3 by immunoassay has a number of well-established uses. In the presence of elevated free or total T4, total T3 measurements help confirm a hyperthyroidism diagnosis. Abnormal elevation of total T3 may also occur when the total T4 concentration is normal — a condition known as "T3 toxicosis".
For the most part, free T3 levels correlate closely with total T3 levels. Total T3, however, depends not only on thyroid status and the peripheral conversion of T4 to T3, but also on the concentration of thyroid hormone-binding proteins. Free T3, on the other hand, is largely
unaffected by variations in these carrier proteins. Thus, the TBG elevations typical of pregnancy, oral contraceptive use, and estrogen therapy effects an increase in the total T3 level while leaving the free T3 concentration basically unchanged. The free T3 concentration typically reflects a patient's actual thyroid status more reliably than the total T3 concentration.
Principle of the Procedure
Competitive, analog-based immunoassay.25,26
Incubation Cycles: 2 × 30 minutes
Specimen Collection
Because EDTA would affect results, it should not be used as an anticoagulant. Lipemic or grossly contaminated samples may give erroneous results. The use of an ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples.
Hemolyzed samples may indicate
mistreatment of a specimen before receipt by the laboratory; hence the results should be interpreted with caution.
Centrifuging serum samples before a complete clot forms may result in the presence of fibrin. To prevent erroneous results due to the presence of fibrin, ensure that complete clot formation has taken place prior to centrifugation of samples. Some samples, particularly those from patients receiving
anticoagulant therapy, may require increased clotting time.
Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE 2000 Free T3 has not been tested with all possible variations of tube types.
Volume Required: 100 µL serum
Storage: 2 days at 2–8°C, or 2 months at –20°C.
Warnings and Precautions
For in vitro diagnostic use.
Reagents: Store at 2–8°C. Dispose of in accordance with applicable laws.
Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C.
Sodium azide, at concentrations less than 0.1 g/dL, has been added as a
preservative. On disposal, flush with large volumes of water to prevent the buildup of potentially explosive metal azides in lead and copper plumbing.
Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert.)
Water: Use distilled or deionized water.
Materials Supplied
Components are a matched set. Labels on the inside box are needed for the assay. Free T3 Bead Pack (L2F312)
With barcode. 200 beads, coated with monoclonal murine anti-T3. Stable at 2–8°C until expiration date.
L2KF32: 1 pack L2KF33M: 15 packs L2KF36: 3 packs L2KF36M: 30 packs Free T3 Reagent Wedge (L2F3A2) With barcode, containing three liquid reagents, 10.5 mL, 10.5 mL and 11.5 mL respectively, ready to use. The first and second reagents consist of ligand-labeled T3 analog in buffer, with preservative. The third reagent consists of alkaline
phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to anti-ligand in buffer, with preservative. Stable at 2–8°C until expiration date.
L2KF32: 1 wedge L2KF33M: 15 wedges L2KF36: 3 wedges L2KF36M: 30 wedges Before use, tear off the top of the label at the perforations, without damaging the barcode. Remove the foil seal from the top of wedge; snap the sliding cover down into the ramps on the reagent lid.
Free T3 Adjustors (LF3L, LF3H)
2 vials (Low and High), of lyophilized free T3 in processed human serum, with preservative. Reconstitute each vial with 4.0 mL distilled or deionized water. Stable at 2–8°C for 30 days after reconstitution, or for 6 months (aliquotted) at –20°C.
L2KF32: 1 set L2KF33M: 3 sets L2KF36: 2 sets L2KF36M: 4 sets
Before making an adjustment, place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes so that the barcodes can be read by the on-board reader.
Kit Components Supplied
Separately
L2SUBM: Chemiluminescent Substrate L2PWSM: Probe Wash
L2KPM: Probe Cleaning Kit
LRXT: Reaction Tubes (disposable) Also Required
Distilled or deionized water; test tubes; controls
Assay Procedure
Note that for optimal performance, it is important to perform all routine
maintenance procedures as defined in the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual.
See the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual for preparation, setup, adjustment, assay and quality control procedures.
Recommended Adjustment Interval: 2 weeks
Quality Control Samples: Follow government regulations or accreditation requirements for quality control frequency. Use controls or serum pools with at least two levels (low and high) of free T3. Siemens Healthcare Diagnostics recommends the use of commercially available quality control materials with at least 2 levels (low and high). A satisfactory level of performance is achieved when the analyte values obtained are within the Acceptable Control Range for the system, or within an established range determined by an appropriate internal laboratory quality control scheme.
Expected Values
A reference range study for
IMMULITE 2000 Free T3 was performed on 212 apparently healthy adults yielding a central 95% range of 1.8–4.2 pg/mL for euthyroid adults.
Consider these limits as guidelines only. Each laboratory should establish its own reference ranges.
Limitations
The free T3 assay serves primarily as a confirmatory test for hyperthyroidism and is of very limited value in the context of hypothyroidism. There may be some overlap between the euthyroid and hyperthyroid ranges.
The interpretation of free T3 results is complicated by a variety of drugs which can affect the binding of T3 to the thyroid hormone carrier proteins.
In severe nonthyroidal illness, the assessment of thyroid status becomes especially difficult. Since some patients in this category may suffer from concomitant primary hypothyroidism or from a
compensatory secondary hypothyroidism, TSH immunoassay has been
recommended as a confirmatory test in this context.
In rare conditions associated with extreme variations in the albumin-binding capacity — such as familial dysalbuminemic hyperthyroxinemia (FDH) — direct free thyroid hormone assays may yield misleading results.
Circulating autoantibodies to T3, and hormone-binding inhibitors, may interfere with the assay.2,3,12
Heparin has been reported to have both
in vivo and in vitro effects on free thyroid
hormones.8 Hence, samples should not be
collected during or soon after the administration of this anticoagulant. Since dilution shifts the equilibrium between free and protein-bound T3, the assay cannot be expected to maintain linearity under dilution. Accordingly, no attempt should be made to dilute samples with high free T3 results. In particular, any sample with a result greater than the upper limit of the assay's calibration range should simply be reported as such.
Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all
immunoassays. Clin Chem 1988:34: 27-33.] Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential
interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in
combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings.
Performance Data
See Tables and Graphs for data
representative of the assay's performance.
Results are expressed in pg/mL. (Unless otherwise noted, all were generated on serum samples collected in tubes without gel barriers or clot-promoting additives.) Conversion Factor: pg/mL × 1.536 pmol/L Calibration Range: 1.0–40 pg/mL (1.5–61 pmol/L)
The assay is traceable to an internal standard manufactured using qualified materials and measurement procedures. Analytical Sensitivity: 1.0 pg/mL (1.5 pmol/L)
Precision: Samples were assayed in duplicate over the course of 20 days, two runs per day, for a total of 40 runs and 80 replicates. (See "Precision" table.) Specificity: The antibody is highly specific for free T3. (See "Specificity" table.) Effect of TBG: The assay's zero calibrator was spiked with T3-stripped TBG resin (20, 40 and 80 µg/mL) and assayed. The results showed no
interference. (See "Effect of TBG" table.) Effect of Albumin: Samples spiked with charcoal-absorbed human serum albumin (10, 20 and 50 mg/mL) were assayed. (See "Effect of Albumin" table.)
Effect of Nonesterified Fatty Acids (NEFA): Samples spiked with oleic acid (2.5 and 5.0 mmol/L) were assayed. Results show no significant effect at 2.5 mmol/L, but decreased values at the higher level. (See "Effect of Nonesterified Fatty Acids" table. Increased levels of NEFA may be encountered in late pregnancy and in heparin therapy.) Other Compounds: Results for samples assayed after spiking with phenylbutazone (10, 100 and 1000 µg/dL), or phenytoin (5, 10, 25, and 50 µg/mL), or salicylate (10, 25, 50 and 100 mg/dL) showed no effect from these compounds. (See "Effect of Phenylbutazone", "Effect of Phenytoin" and "Effect of Salicylate" tables.)
Bilirubin: Presence of bilirubin in concentrations up to 200 mg/L has no effect on results, within the precision of the assay.
Hemolysis: Presence of hemoglobin in concentrations up to 384 mg/dL has no effect on results, within the precision of the assay.
Lipemia: Highly lipemic samples may interfere with the assay. (See “Effect of Lipemia” table.)
Method Comparison: The assay was compared to IMMULITE Free T3 on 105 samples. (Concentration range:
approximately 1 to 14 pg/mL.) By linear regression: (IML 2000) = 1.05 (IML) + 0.41 pg/mL r = 0.977 Means: 3.5 pg/mL (IMMULITE 2000) 3.0 pg/mL (IMMULITE)
References
1) Albertini A, Ekins RP, editors. Free hormones in blood. Amsterdam: Elsevier Biomedical Press, 1982. 2) Beck-Peccoz P, Romelli PB, et al. Free T4 and free T3 measurement in patients with anti-iodothyronine autoantibodies. In: Albertini A, Ekins RP, editors. Free hormones in blood. Amsterdam: Elsevier Biomedical Press, 1982: 231-8. 3) Bhagat CI, et al. Interference in radioimmunoassay of total serum thyroxin and free thyroxin due to thyroxin-binding
autoantibodies. Clin Chem 1983;29:1324-5. 4) Borst GC, Eil C, Burman KD. Euthyroid hyperthyroxinemia; a review. Ann Intern Med 1983;98:366-78. 5) Burger AG, Lambert MJ, Cullen M. Pharmacological influence on free thyroid hormones. In: Albertini A, Ekins RP, editors. Free hormones in blood. Amsterdam:
Elsevier Biomedical Press, 1982: 303-14. 6) Caroyan P, et al. Assessment and clinical significance of free thyroid hormone
radioimmunoassays. In: Ekins RP, et al, editors. Free thyroid hormones. Amsterdam: Excerpta Medica, 1979: 181-93. 7) Carayon P, et al. Free thyroid hormones in euthyroidism: evaluation of normal ranges in various physiological
conditions. In: Albertini A, Ekins RP, editors. Free hormones in blood. Amsterdam: Elsevier Biomedical Press, 1982: 179-85. 8) Diagnostic Products Corporation. Coat-A-Count Free T4, package insert (PITKF4). 9) Ekins RP. Methods for the measurement of free thyroid hormones. In: Ekins RP, editor. Free thyroid hormones. Amsterdam: Excerpta Medica, 1979:72-106. 10) Ekins RP. The radioimmunoassay of free thyroid hormones in blood. In: Albertini A, Ekins RP, editors. Free hormones in blood.
Amsterdam: Elsevier Biomedical Press, 1982: 73-90. 11) Ellis SM, Ekins RP. The
radioimmunoassay of serum free
triiodothyronine and thyroxine. In: Pasternak CA, editor. Radioimmunoassay in clinical
biochemistry. London: Heyden, 1975: 187-94. 12) John R. Autoantibodies to thyroxine and interference with free thyroxine assay. Clin Chem 1983;29:581-2. 13) Larsen PR. The use of serum T3 measurements by
radioimmunoassay in the diagnosis of thyroid disease. In: Abraham GE, editor. Radioassay systems in clinical endocrinology. New York: Marcel Dekker, 1981: 117-29. 14) Parlow ME, Oddie TH, Fisher DA. Evaluation of serum triiodothyronine and adjusted triiodothyronine (free triiodothyronine index) in pregnancy. Clin Chem 1977;23:490-2. 15) Lin T, Nankin HR. Direct measurement of free thyroxine in patients with T3-toxicosis. Horm Metab Res
1980;12:611-4. 16) Mardell R, Gerson M. A method of assessing serum triiodothyronine concentrations that is independent of subject's age and variations in concentrations of binding proteins in serum. Clin Chem 1978;24:1792-6. 17) Pennisi F, Romelli PB, Vancheri L.
Measurement of free thyroid hormones in serum by column adsorption chromatography and radioimmunoassay. In: Albertini A, Ekins RP, editors. Free hormones in blood. Amsterdam: Elsevier Biomedical Press, 1982: 107-12. 18) Roux F, et al. Clinical merits in the radioimmunoassay of free serum tetraiodothyronine (FT4) and free serum triiodothyronine (FT3). Int J Nuclear Med Biol 1980;7:386-90. 19) Salmon D, et al. Chemical hyperthyroidism: serum triiodothyronine levels in clinically euthyroid individuals treated with levothyroxine. Arch Intern Med 1982;142:571-3. 20) Sawin CT, Chopra D, et al. The free triiodothyronine (T3) index. Ann Intern Med 1978;88:474-7. 21) Siegel L, McDonald LJ, Robin NI. Estimation of free triiodothyronine in serum: a new method and its clinical relevance. Clin Chem 1978;24:1891-4. 22) Smals AGH, Ross AH, Kloppenborg PWC. Dichotomy between serum free triiodothyronine and free thyroxine concentrations in familial
thyroxine-binding globulin deficiency. J Clin Endocrinol Metab 1981;53:917-22. 23) Walfish PG. Thyroid physiology and pathology. In: Collu R,
Ducharme JR, Guyda H, editors. Pediatric endocrinology. New York: Raven Press, 1981: 357-431. 24) Weeke J, et al. A longitudinal study of serum TSH, and total and free iodothyronines during normal pregnancy. Acta Endocrinol 1982;101:531-7. 25) Witherspoon LR, El Shami AS, et al. Chemically blocked analog assays for free thyronines. Clin Chem 1988;34:9-16 and 17-23. 26) Diagnostic Products Corporation. Albumin-related artifacts in free thyroid hormone assays. Los Angeles, 1987 (Document number: ZJ026).
Technical Assistance
For technical assistance, contact your National Distributor.
www.siemens.com/diagnostics
The Quality System of Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. is certified to ISO 13485:2003.
Tables and Graphs
Precision (pg/mL) Within-Run1 Total2 Mean3 SD4 CV5 SD CV 1 2.5 0.21 8.4% 0.25 10% 2 3.2 0.29 9.1% 0.30 9.4% 3 3.8 0.34 9.0% 0.38 10% 4 4.2 0.24 5.7% 0.34 8.1% 5 5.7 0.31 5.4% 0.40 7.0% 6 6.5 0.38 5.9% 0.48 7.4% 7 13 0.56 4.3% 0.70 5.4%
Dansk. 1I samme kørsel, 2Total, 3Middelværdi,
4Standardafvigelse, 5Varianskoefficient.
Eesti. 1Mõõtmisseeria sisene, 2Seeriate
vaheline, 3Keskmised väärtused,
4Standardhälve, 5Variatsioonikoefitsent.
Latviski. 1Sērijas robežās, 2Kopā, 3Vidējā
vērtība, 4SD, 5Variāciju koeficients.
Lietuviškai. 1Vieno tyrimo metu, 2Bendrai,
3Vidurkiai, 4SD, 5CV. Norsk. 1Innen serien,
2Total, 3Middel, 4SD, 5CV. Svenska. 1Inom
körning, 2Totalt, 3Medel, 4SD, 5CV.
Effect of Albumin (pg/mL) Albumin (mg/mL Added)1 Unspiked2 10 20 50 1 2.0 1.8 1.9 2.4 2 2.0 2.3 2.0 1.7 3 2.9 2.9 2.9 3.0 4 3.0 3.0 3.5 3.1 5 3.0 3.1 3.4 3.0 6 3.8 3.9 4.1 3.8
Dansk. 1Albumin, 2Uden tilsætning. Eesti.
1Albumiin, 2Rikastamata. Latviski. 1Albumīns,
2Nav pievienots. Lietuviškai. 1Albuminas,
2Neatskiestas. Norsk. 1Albumin, 2Ikke spiket.
Svenska. 1Albumin, 2Utan tillsats.
Method Comparison
(IML 2000) = 1.05 (IML) + 0.41 pg/mL r = 0.977
English. Free T3
Dansk. Frit T3. Eesti. Vaba-T3. Latviski.
Brīvais T3. Lietuviškai. Laisvas T3. Norsk. Fritt T3. Svenska. Fritt T3. Effect of TBG (pg/mL) TBG Added1 (µg/mL) Binding2 (%B/B 0) 0 100% 20 92% 40 95% 80 90%
Dansk. 1Tilsat TBG, 2Binding. Eesti. 1Lisatud
TBG, 2Sidumine. Latviski. 1Pievienots TBG,
2Saistīšanās. Lietuviškai. 1Pridėta TSG,
2Susijungimas. Norsk. 1Tilsatt TBG, 2Binding.
Effect of Nonesterified Fatty Acids (pg/mL)
Oleic Acid (mmol/L Added)1
Unspiked2 2.5 5.0 1 2.1 2.6 1.3 2 2.4 2.9 1.7 3 2.8 2.9 1.5 4 2.9 2.7 1.6 5 3.0 3.2 1.9 6 3.5 3.8 2.4
Dansk. 1Oleinsyre, 2Uden tilsætning.
Eesti. 1Oleiinhape, 2Rikastamata.
Latviski. 1Oleīnskābe, 2Nav pievienota.
Lietuviškai. 1Oleino rūgštis, 2Nepridėta.
Norsk. 1Oleinsyre, 2Ikke spiket.
Svenska. 1Oljesyra, 2Utan tillsats.
Effect of Phenylbutazone (pg/mL) Phenylbutazone (µg/dL Added)1 Unspiked2 10 100 1000 1 2.2 2.0 2.3 2.5 2 2.5 2.4 2.7 2.8 3 2.6 2.6 2.8 2.6 4 3.1 3.3 3.2 3.2 5 3.3 3.3 3.3 3.2 6 3.6 3.4 3.2 3.7
Dansk. 1Fenylbutazon, 2Uden tilsætning.
Eesti. 1Fenüülbutasoon, 2Rikastamata.
Latviski. 1Fenibutazons, 2Nav pievienots.
Lietuviškai. 1Fenilbutazonas, 2Nepridėta.
Norsk. 1Fenylbutazon, 2Ikke spiket.
Svenska. 1Fenylbutazon, 2Utan tillsats.
Effect of Salicylate (pg/mL) Salicylate (mg/dL Added)1 Unspiked2 10 25 50 100 1 2.2 2.9 2.7 2.9 2.8 2 2.7 2.9 3.0 2.6 2.3 3 2.8 2.6 2.4 2.5 2.6 4 3.6 3.2 4.1 3.8 3.0 5 4.0 3.7 3.9 3.7 3.5 6 4.0 4.5 4.3 4.1 3.7 7 4.2 4.5 4.2 4.0 3.3 8 4.4 3.7 4.0 3.3 3.5 9 6.9 8.0 7.7 7.6 6.7 10 9.7 9.4 9.3 8.7 8.8 11 12.4 12.2 12.0 11.0 10.8 12 16 15 15 15 14
Dansk. 1Salicylat, 2Uden tilsætning. Eesti.
1Salitsüül, 2Rikastamata. Latviski. 1Salicilāti,
2Nav pievienoti. Lietuviškai. 1Salicilatas,
2Nepridėta. Norsk. 1Salisylat, 2Ikke spiket.
Svenska. 1Salicylat, 2Utan tillsats.
Effect of Phenytoin (pg/mL) Phenytoin (µg/mL Added)1 Unspiked2 5 10 25 50 1 2.5 2.5 2.6 2.5 2.8 2 2.9 2.6 2.5 2.6 2.7 3 3.0 2.9 2.5 2.7 2.7 4 3.0 2.9 2.9 3.2 3.1 5 6.4 6.8 6.9 7.2 7.1 6 7.7 7.6 7.5 7.0 7.6
Dansk. 1Phenytoin, 2Uden tilsætning. Eesti.
1Fenütoiin, 2Rikastamata. Latviski. 1Fenitoīns,
2Nav pievienots. Lietuviškai. 1Fenitoinas,
2Nepridėta. Norsk. 1Fenytoin, 2Ike spiket.
Effect of Lipemia
Triglycerides
Added1
mg/dL Observed2 Expected3 %O/E4
1 — 2.0 250 2.1 2.0 105% 500 2.1 1.9 111% 1000 1.8 1.9 95% 2000 1.7 1.8 94% 3000 1.6 1.7 94% 2 — 2.1 250 1.8 2.1 86% 500 2.1 2.1 100% 1000 1.9 2.0 95% 2000 1.9 1.9 100% 3000 2.1 1.8 117% 3 — 2.6 250 2.4 2.6 92% 500 2.3 2.6 88% 1000 2.4 2.5 96% 2000 1.7 2.4 71% 3000 1.4 2.2 64% 4 — 2.7 250 2.7 2.7 100% 500 2.3 2.7 85% 1000 2.5 2.6 96% 2000 2.2 2.5 88% 3000 2.3 2.3 100% 5 — 2.9 250 2.8 2.9 97% 500 2.6 2.8 93% 1000 2.3 2.8 82% 2000 2.3 2.6 88% 3000 1.9 2.5 76% 6 — 3.3 250 2.8 3.3 85% 500 3.3 3.2 103% 1000 2.7 3.1 87% 2000 2.6 3.0 87% 3000 2.4 2.8 86%
Dansk. 1Tilsat triglycerider, 2Observeret,
3Forventet, 4%Obs./Forv. Eesti. 1Lisatud kogus
triglütseriide, 2Täheldatud (T), 3Oodatud (O),
4%T/O. Latviski. 1Pievienoti triglicerīdi,
2Novērots (N), 3Gaidīts (G), 4%N/G. Lietuviškai.
1Pridėta trigliceridų, 2Nustatyta (N), 3Tikėtasi (T),
4%N/T. Norsk. 1Tilsatt Triglycerider, 2Observert
(O), 3Forventet (E), 4% O/E.
Svenska. 1Triglycerider tillagt, 2Observerat (O),
3Förväntat (E), 4%O/E.
Specificity
Compound1 Addedpg/mL 2 reactivity% Cross-3
L-Thyroxine (T4) 50,000 ND D-Thyroxine 50,000 ND Triiodothyroacetic acid 5000 0.073% Tetraiodothyroacetic acid 200,000 ND Diiodo-L-tyrosine 10,000,000 ND Methimazole 10,000,000 0.00002% 5,5'-Diphenylhydantoin 10,000,000 ND Phenylbutazone 10,000,000 ND 6-n-Propyl-2-thiouracil 10,000,000 ND Triido-L-tyrosine 10,000,000 0.00002% ND: Not detectable4
Dansk. 1Stof, 2Tilsat, 3% Krydsreaktivitet, 4UD:
Under detektionsgrænsen. Eesti. 1Substants,
2Lisatud kogus, 3% Ristmõju, 4MM:
Mittemääratav. Latviski. 1Savienojums,
2Pievienotais daudzums, 3% krusteniskā
reaktivitāte, 4NN: nav nosakāms.
Lietuviškai. 1Mišinys, 2Pridėtas kiekis,
3% Kryžminis reaktyvumas, 4ND:
neišmatuojama. Norsk. 1Substans, 2Tilsatt
mengde, 3% Kryssreaktivitet, 4ND: Not
Detectable / ikke påvisbart. Svenska.
1Substans, 2Tillsatt mängd, 3% Korsreaktivitet,
4ND: Not Detectable/ej detekterbart.
Dansk
IMMULITE 2000 Frit T3
Anvendelsesområde: Til brug ved in vitro diagnostik på IMMULITE
2000-systemernes analyseinstrumenter til kvantitativ måling af frit T3 i serum som hjælp ved klinisk vurdering af
thyreoideastatus. Katalognumre:
L2KF32 (200 test) L2KF33M (3000 test) L2KF36 (600 test) L2KF36M (6000 test)
Baggrund og forklaring
Under normale fysiologiske forhold udgør triiodthyronin (T3) ca. 5% af
thyreoideahormonerne i plasma. Selvom T3 findes i en lavere koncentration end thyroxin (T4), er T3 karakteriseret ved større metabolisk aktivitet, hurtigere omsætning og større udbredelse i
organismen. T3 produceres hovedsageligt ved dejodering af T4 uden for thyreoidea. Ligesom det er tilfældet med T4, findes T3 i serum næsten udelukkende bundet til bindingsproteinerne TBG, præ-albumin og albumin. Frit T3 udgør kun omkring 0,25% af den totale T3-koncentration i serum. Der findes en række veletablerede anvendelsesområder for bestemmelse af total T3 ved brug af immunoanalyse. Ved tilstedeværelse af et forhøjet frit eller total T4-niveau kan måling af total T3 hjælpe med at bekræfte diagnosen
hyperthyreoidisme. Der kan også
forekomme en abnorm stigning i total T3-niveauet, mens den totale
T4-koncentration er normal. Denne tilstand kaldes "T3-toksikose".
For det meste udviser niveauet af frit T3 en tæt korrelation med niveauet af total T3. Total T3-koncentrationen afhænger imidlertid ikke kun af thyreoideastatus og den perifere omdannelse af T4 til T3, men også af koncentrationen af
thyreoideahormonbindende proteiner. Derimod er frit T3 stort set upåvirket af ændringer i disse bindingsproteiner. De stigninger i TBG-niveauet, der typisk ses ved graviditet, ved brug af oral
kontraception og ved østrogenbehandling forårsager således en stigning i total T3-koncentrationen, mens koncentrationen af frit T3 forbliver stort set uændret.
Koncentrationen af frit T3 giver typisk et mere troværdigt billede af en patients aktuelle thyreoideastatus end
koncentrationen af total T3.
Analyseprincip
Kompetitiv, analogbaseret immunoanalyse.25,26
Inkubationstid (cykler): 2 × 30 minutter
Prøveopsamling
Eftersom EDTA påvirker resultaterne, bør der ikke anvendes prøverør med denne antikoagulant.
Lipæmiske eller meget forurenede prøver kan give fejlagtige resultater. Det
anbefales at ultracentrifugere for at oprense lipæmiske prøver.
Hæmolyserede prøver kan tyde på, at disse ikke er blevet behandlet korrekt før ankomst til laboratoriet, og derfor bør analyseresultaterne tolkes med forsigtighed.
Centrifugering af serumprøver før
fuldstændig koagulation kan resultere i, at der vil være fibrin til stede i prøven. For at undgå fejlagtige analyseresultater på grund af tilstedeværelse af fibrin skal fuldstændig koagulation være indtrådt før centrifugering af prøverne. For nogle typer prøver, især fra patienter i behandling med antikoagulantia, kan en forlænget
koagulationstid være påkrævet.
Blodprøverør fra forskellige producenter kan give forskellige resultater, afhængigt af materiale og tilsætning til røret, herunder gel- eller fysisk barriere, koagulationsfremmende middel og/eller antikoagulantia. IMMULITE 2000 Frit T3 er ikke blevet testet med alle tilgængelige variationer af prøverør.
Prøvevolumen: 100 µl serum Opbevaring: 2 dage ved 2–8°C eller 2 måneder ved –20°C.
Advarsler og forholdsregler
Til brug ved in vitro diagnostik. Reagens: Opbevares ved 2–8°C. Bortskaffes i henhold til gældende lovgivning.
Følg generelle forholdsregler, og sørg for, at alle komponenter behandles som potentielle smittekilder. Anvendt kildemateriale fra humant blod blev
analyseret og viste sig at være ikke-reaktivt for syfilis, for antistoffer mod HIV 1 og 2, for hepatitis B overfladeantigen og for
antistoffer mod hepatitis C.
Natriumazid < 0,1 g/dl er tilsat som konserveringsmiddel. Ved kassation af reagens efterskylles med store mængder vand for at undgå ophobning af potentielt eksplosive metalazider i bly- og
kobberafløbsrør.
Substrat til kemiluminescens: Undgå kontaminering og eksponering for direkte sollys. (Se indlægsseddel.)
Vand: Brug destilleret eller ionbyttet vand.
Medfølgende materiale
Komponenterne er dele af et
sammenhængende sæt. De medfølgende stregkodeetiketter skal bruges ved
analysering.
Kuglebeholder Frit T3 (L2F312)
Med stregkodemærkning til identifikation. 200 kugler, coatede med monoklonalt museantistof rettet mod T3. Stabil ved 2–8°C indtil udløbsdato.
L2KF32: 1 beholder L2KF33M: 15 beholdere L2KF36: 3 beholdere L2KF36M: 30 beholdere
Reagensbeholder Frit T3 (L2F3A2) Med stregkodemærkning til identifikation. Beholder med tre flydende reagenser, henholdsvis 10,5 ml, 10,5 ml og 11,5 ml (klar til brug). Første og andet reagens indeholder ligandmærket T3 analog i buffer tilsat konserveringsmiddel. Det tredje reagens består af alkalisk fosfatase (udvundet fra kalvetarm) konjugeret til anti-ligand i buffer tilsat
konserveringsmiddel. Stabil ved 2–8°C indtil udløbsdato.
L2KF32: 1 beholder L2KF33M: 15 beholdere L2KF36: 3 beholdere L2KF36M: 30 beholdere
Før brug trækkes den øverste del af etiketten af ved perforeringen uden at beskadige stregkoden. Fjern
beskyttelsesfolien fra toppen af
reagensbeholderen. Tryk skydelåget ned i skinnen på reagensbeholderen.
Justeringsopløsninger Frit T3 (LF3L, LF3H)
2 flasker (lav og høj) med frysetørret frit T3 i behandlet humant serum, tilsat konserveringsmiddel. Indholdet i hver flaske skal genopløses med 4,0 ml destilleret eller ionbyttet vand, tilsat konserveringsmiddel. Flaskernes indhold er stabilt ved 2–8°C i 30 dage efter genopløsning eller i 6 måneder (udportioneret) ved –20°C. L2KF32: 1 sæt L2KF33M: 3 sæt L2KF36: 2 sæt L2KF36M: 4 sæt
Før justeringsopløsningerne køres, sættes 2 af de medfølgende stregkodeetiketter (henholdsvis ”Low” og ”High”) på prøverør, således at stregkoderne kan læses af stregkodelæseren i instrumentet.
Materiale som bestilles separat
L2SUBM: Substrat til kemiluminescens L2PWSM: Vaskeopløsning
L2KPM: Rengøringssæt LRXT: Prøvekopper (engangs) Derudover kræves
Destilleret eller ionbyttet vand, prøverør, kontroller
Fremgangsmåde
Bemærk: For at udstyret skal fungere optimalt, er det vigtigt at gennemføre al rutinemæssig vedligeholdelse som beskrevet i brugermanualen til IMMULITE 2000-systemerne.
Se brugermanualen til IMMULITE 2000-systemerne for forberedelse, opsætning, justering, analyse og kvalitetskontrol. Anbefalet justeringsinterval: 2 uger Prøver til kvalitetskontrol: Følg offentlige bestemmelser eller
godkendelseskrav for kvalitetskontrollens hyppighed.
Brug kommercielt tilgængelige kontroller eller egne kontroller med mindst to frit T3-niveauer (høj og lav).
Siemens Healthcare Diagnostics anbefaler, at der anvendes kommercielt tilgængelige kvalitetskontrolmaterialer på mindst 2 niveauer (lavt og højt). Et tilfredsstillende præstationsniveau opnås, når de opnåede analytværdier ligger inden for det acceptable kontrolinterval for systemet eller inden for jeres interval, som er fastsat af en passende intern
kvalitetskontrolordning på laboratoriet.
Forventede værdier
Der blev udført et studie for at fastlægge referenceområdet for IMMULITE 2000 Frit T3, omfattende 212 tilsyneladende raske voksne. Det viste et centralt 95%-område på 1,8–4,2 pg/ml for euthyreoide voksne. Ovenstående værdier skal kun betragtes som vejledende. Hvert laboratorium bør fastlægge sine egne referenceområder.
Begrænsninger
Frit T3-metoden skal primært anvendes som en konfirmatorisk test for
hyperthyreoidisme og har kun meget begrænset værdi i forbindelse med hypothyreoidisme. Der kan være et vist overlap mellem det euthyreoide og hyperthyreoide område.
Tolkningen af frit T3-resultater
vanskeliggøres af en række præparater, der kan påvirke T3’s binding til
thyreoideahormon-bindingsproteinerne. Vurderingen af thyreoideastatus er specielt vanskelig ved alvorlige ikke-thyreoidealidelser. Eftersom nogle
patienter i denne kategori muligvis lider af en samtidig primær hypothyreoidisme eller af en kompensatorisk sekundær
hypothyreoidisme, er TSH-immunoanalyse blevet anbefalet som konfirmatorisk test i denne sammenhæng.
Ved sjældne tilstande, der involverer meget store ændringer i den
albuminbindende kapacitet – som f.eks. familiær dysalbuminæmisk
hyperthyroxinæmi (FDH) – kan direkte måling af frit thyreoideahormon give misvisende resultater.
Autoantistoffer mod T3 i blod samt hormonbindingshæmmere kan interferere med metoden.2,3,12
Heparin har vist sig at have både in vivo og in vitro effekt på frie
thyreoideahormoner.8 Derfor skal prøver ikke tages under eller umiddelbart efter indgift af denne antikoagulant.
Da fortynding forskyder ligevægten mellem frit og proteinbundet T3, kan metoden ikke forventes at fastholde linearitet under fortynding. Derfor bør man ikke forsøge at fortynde prøver med et højt frit T3-resultat. Det gælder således, at alle prøver med et resultat, der er over den øvre grænse for metodens
kalibreringsområde, blot rapporteres som sådant.
Heterofile antistoffer i humant serum kan reagere med de immunglobuliner, som indgår i metodens komponenter, og derigennem forårsage interferens med
in vitro immunoanalyser. [Se Boscato LM,
Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Prøver fra patienter, som regelmæssigt eksponeres for dyr eller
serumprodukter fra dyr, kan udvise denne type af interferens, der muligvis kan medføre et afvigende resultat.
Reagenserne er formuleret på en sådan måde, at interferensrisikoen er minimeret. Der er dog mulighed for interaktioner mellem sjældne serumtyper og metodens komponenter. Til diagnostiske formål bør analyseresultater, der er opnået med denne metode, altid bruges sammen med andre kliniske undersøgelser, patientens anamnese og andre fund.
Præstationsdata
Se afsnittet ”Tabeller og figurer” for data, der er repræsentative for metodens præstationsevne. Resultaterne angives i pg/ml. (Medmindre andet oplyses, stammer alle resultater fra serumprøver opsamlet i prøverør uden gel-barriere eller koagulationsfremmende tilsætningsstoffer.) Omregningsfaktor: pg/ml × 1,536 pmol/l Kalibreringsområde: 1,0–40 pg/ml (1,5–61 pmol/l)
Metoden kan spores til en intern standard, der er fremstillet ved brug af
gennemprøvede materialer og måleprocedurer.
Analytisk følsomhed: 1,0 pg/ml (1,5 pmol/l)
Præcision: Prøver blev analyseret i dobbeltbestemmelse i løbet af 20 dage, to kørsler pr. dag. I alt blev der udført 40 kørsler og 80 bestemmelser. (Se tabellen “Præcision”.)
Specificitet: Antistoffet har en høj specificitet for frit T3. (Se tabellen “Specificitet”.)
Effekten af TBG: Metodens nul-kalibrator blev tilsat T3-fri TBG-resin (20, 40 og 80 µg/ml) og analyseret. Resultaterne viste ingen interferens. Se tabellen “Effekten af TBG”.)
Effekten af albumin: Prøver tilsat 3 forskellige opløsninger med kulrenset humant serum-albumin (10, 20 og 50 mg/ml) blev analyseret. Se tabellen “Effekten af Albumin”.)
Effekten af ikke-esterificerede fedtsyrer (NEFA): Prøver tilsat oleinsyre
(2,5 og 5,0 mmol/l) blev analyseret. Resultaterne viser ingen signifikant effekt ved 2,5 mmol/l, men reducerede værdier ved det højere niveau. (Se tabellen “Effekten af ikke-esterificerede fedtsyrer”.) Forhøjede niveauer af NEFA kan optræde sent i graviditeten og i forbindelse med heparinbehandling.
Andre stoffer: Resultater af prøver, der blev analyseret efter tilsætning af
fenylbutazon (10, 100 og 1000 µg/dl), eller phenytoin (5, 10, 25 og 50 µg/ml) eller salicylat (10, 25, 50 og 100 mg/dl), viste ingen effekt af disse stoffer. (Se tabellerne “Effekten af fenylbutazon”, “Effekten af phenytoin” og “Effekten af salicylat”.) Bilirubin: Tilstedeværelse af bilirubin i koncentrationer op til 200 mg/l har ingen effekt på resultater inden for metodens præcision.
Hæmolyse: Tilstedeværelse af hæmoglobin i koncentrationer op til 384 mg/dl har ingen effekt på resultater inden for metodens præcision.
Lipæmi: Meget lipæmiske prøver kan interferere med metoden. (Se tabellen “Effekten af Lipæmi”.)
Metodesammenligning: Metoden blev sammenlignet med IMMULITE Frit T3 ved analysering af 105 prøver.
(Koncentrationsområde: cirka 1 til 14 pg/ml. Se figur.) Ved lineær regression: (IML 2000) = 1,05 (IML) + 0,41 pg/ml r = 0,977 Middelværdier: 3,5 pg/ml (IMMULITE 2000) 3,0 pg/ml (IMMULITE)
Teknisk support
Kontakt den nationale distributør for teknisk support.
www.siemens.com/diagnostics
Kvalitetssystemet for Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. er registreret ifølge ISO 13485:2003.
Eesti
IMMULITE 2000 Vaba T3
Kasutamisotstarve: in vitro diagnostikaks IMMULITE 2000 süsteemide
analüsaatoritel vabaT3 kvantitatiivseks määramiseks vereseerumis, aidates nii kaasa kilpnäärme seisundi kliinilisele hindamisele.
Kataloogi number:
L2KF32 (200 testi) L2KF33M (3000 testi) L2KF36 (600 testi) L2KF36M (6000 testi)
Testi kood: FT3 Värv: akvamariinsinine
Kokkuvõte ja selgitus
Füsioloogilistes tingimustes moodustab trijoodtüroniini (T3) hulk umbes 5% kilpnäärmehormoonidest vereplasmas. Kuigi selle kontsentratsioon on madalam kui türoksiinil (T4), omab T3 suuremat mõju ainevahetusele, kiiremat
poolestusaega ning suuremat ringlevat kogust organismis. T3 tekib põhiliselt T4 kilpnäärmevälise konversiooni teel. Nagu T4, ringleb ka T3 peaaegu eranditult seotuna proteiinide kandja, kilpnäärme siduva valguga (TBG), prealbumiinide ja albumiinidega. VabaT3 moodustab ainult ligikaudu 0,25% tsirkuleerivast T3-st. T3 koguhulga mõõtmiseks
immuunanalüüsi meetodil on mitmeid väljakujunenud rakendusi. Vaba või kogu T4 suurenenud näidu korral aitab kogu T3 mõõtmine kinnitada kilpnäärme ületalitluse diagnoosi. Normist kõrvalekalduva kogu T3 näidu suurenemine võib esineda ka juhul, kui kogu T4 kontsentratsioon on normväärtuste piires – seisund, mida tuntakse nime all T3 toksikoos. Enamikel juhtudel on vaba T3 hulk lähedases korrelatsioonis kogu T3
kontsentratsiooniga. Kogu T3 ei sõltu siiski ainult kilpnäärme seisundist ja T4
perifeersest konversioonist T3-ks, vaid ka kilpnäärme hormoone siduvate valkude kontsentratsioonist. Nende kandurvalkude variatsioonid ei mõjuta seevastu vaba T3 peaaegu üldse. Seega, rasedusaegselt tüüpiline TBG tõus, suukaudsete
rasestumisvastaste vahendite kasutamine ja hormoonasendusravi põhjustavad kogu T3 kontsentratsiooni tõusu, jättes samal
ajal vaba T3 kontsentratsiooni peaaegu muutmata.
Vaba T3 kontsentratsioon näitab tavaliselt patsiendi tegelikku kilpnäärme seisundit usaldusväärsemalt kui kogu T3
kontsentratsioon.
Protseduuri põhimõte
Konkureeriv, analoog-põhinev immuunanalüüs.25,26 Inkubatsioonitsüklid: 2 × 30 minutitProovimaterjali kogumine
Kuna EDTA mõjutaks proovi tulemusi, ei tohiks seda antikoagulandina kasutada. Lipeemilised või tugevalt saastatud proovid võivad anda ekslikke tulemusi. Lipeemiliste proovide selgitamiseks on soovitatav kasutada ultratsentrifuugimist. Hemolüüsunud proovimaterjalid võivad osutada proovide valele käitlemisele enne nende laboratooriumisse saabumist, seetõttu peaks nende tulemusi tõlgendama ettevaatlikult.
Seerumproovide tsentrifuugimine enne hüübe täieliku moodustumist võib
põhjustada fibriini teket. Et vältida valesid tulemusi fibriini olemasolu tõttu,
kontrollige, et enne tsentrifuugimist oleks veri täielikult hüübinud. Teatud proovid, eriti patsientidelt, kes saavad
antikoagulantravi, võivad hüübimiseks vajada pikemat aega.
Vere kogumiseks kasutatavad katsutid erinevatelt tootjatelt võivad mõjutada analüüsitulemusi, sõltuvalt valmistamisel kasutatud materjalidest ja lisanditest, mille hulka kuuluvad geeli- või füüsilised
barjäärid, hüübimisaktivaatorid ja/või antikoagulandid. IMMULITE 2000 vaba T3 ei ole testitud kõigi võimalike
katsutitüüpidega.
Vajalik kogus: 100 µL seerumit
Säilitamine: 2 päeva temperatuuril 2–8°C või 2 kuud temperatuuril –20°C.
Hoiatused ja ettevaatusabinõud
In vitro diagnostiliseks kasutamiseks.
Reagendid: säilitada temperatuuril 2–8°C. Utiliseerimine peab toimuma vastavalt kehtivatele seadustele.
Jälgige universaalseid ettevaatusabinõu- sid. Kõikidesse patsiendiproovidesse tuleb suhtuda kui potentsiaalselt infitseeritud materjalidesse. Inimverest pärinevaid ja antud testikomplektis kasutatavaid komponente on testitud süüfilise, HIV 1 ja HIV 2 antikehade, B-hepatiidi
pinnaantigeeni ja C-hepatiidi antikehade suhtes ning kõik need uuringud on osutunud negatiivseteks.
Konservandina on lisatud naatriumasiidi kontsentratsiooniga vähem kui 0,1 g/dL. Reagendi utiliseerimisel tuleb seda uhta suure hulga veega, et ära hoida
potentsiaalselt plahvatusohtlike
metallasiidide kogunemist pliist või vasest kanalisatsioonitorustikku.
Kemiluminestsents substraat: vältige saastumist ning kokkupuudet otsese päikesevalgusega. (Vt. pakendi infoleht.) Vesi: kasutage destilleeritud või
deioniseeritud vett.
Tarnitavad komponendid
Kõik komponendid moodustavad kokku sobiva komplekti. Karbis olevad triipkoodid on vajalikud konkreetse testkomplekti jaoks.
Vaba T3 kuulide konteiner (L2F312) Konteiner on varustatud triipkoodiga ja sisaldab 200 kuuli, mille pind on kaetud monoklonaalse anti-T3-ga (hiire päritolu). Stabiilne temperatuuril 2–8°C kuni säilivusaja lõpuni.
L2KF32: 1 konteiner L2KF33M: 15 konteinerit L2KF36: 3 konteinerit L2KF36M: 30 konteinerit
Vaba T3 reagendi konteiner (L2F3A2) Konteiner on varustatud triipkoodiga ja sisaldab kolmes osas vedelreagenti, vastavalt 10,5 mL, 10,5 mL ja 11,5 mL, valmis kasutuseks. Esimene ja teine osa reagendist sisaldavad ligandiga
märgistatud T3 analoogi puhvris, koos konservandiga. Kolmas reagent sisaldab aluselise fosfataasiga (veise soole päritoluga) konjugeeritud anti-ligand puhvris, koos konservandiga. Stabiilne temperatuuril 2–8°C kuni säilivusaja lõpuni.
L2KF32: 1 konteiner L2KF33M: 15 konteinerit L2KF36: 3 konteinerit L2KF36M: 30 konteinerit
Enne reagendi konteineri esmakordset kasutuselevõtmist ja analüsaatorisse asetamist, rebige ära konteineri kaant hoidev kaitsekile ilma reagendi konteineril olevat triipkoodi kahjustamata. Seejärel eemaldage fooliumist kate reagendi konteineri ülaosal asuvate avauste kohalt. Fikseerige reagendi konteineri kaas selleks ettenähtud soontesse ja
veenduge, et kaas liigub avauste kohal vabalt.
Vaba T3 kalibraator (LF3L, LF3H) Kaks viaali (madala ja kõrge
kontsentratsiooniga), lüofiliseeritud vaba T3 (töödeldud inimseerumis), koos konservandiga. Valmistage lahus, lisades mõlemasse viaali 4,0 mL destilleeritud või deioniseeritud vett. Kalibraatorlahus on stabiilne temperatuuril 2–8°C 30 päeva pärast lahuse valmistamist või 6 kuud (osadeks jaotatuna) temperatuuril –20°C
L2KF32: 1 komplekt L2KF33M: 3 komplekti L2KF36: 2 komplekti L2KF36M: 4 komplekti
Enne kalibratsiooni teostamist kinnitage katsutitele vastavad triipkoodid
(sisalduvad komplektis) nii, et neid oleks võimalik lugeda IMMULITE 2000
triipkoodilugejaga.
Eraldi tarnitavad komplekti
komponendid
L2SUBM: kemiluminestsents substraat L2PWSM: pipeti otsiku pesulahus L2KPM: pipeti puhastuskomplekt LRXT: reaktsioonikatsutid (ühekordseks kasutamiseks)
Samuti on vajalikud
destilleeritud või deioniseeritud vesi, testi tuubid, kontrollmaterjal
Määramise protseduur
Optimaalse kasutamise tagamiseks on väga oluline täita kõik rutiinsed
hooldusprotseduurid, nii nagu näeb ette IMMULITE 2000 süsteemide
kasutusjuhend.
Tutvuge IMMULITE 2000 süsteemide kasutusjuhendiga töö ettevalmistuse, seadistamise, kalibreerimise ja analüüsi teostamise ning kvaliteedikontrolli protseduuride teostamisel.
Soovitatav kalibreerimise intervall: 2 nädalat
Kvaliteedikontrolli proovid:
Kvaliteedikontrolli sageduse määramisel järgige valitsuse määruseid või
akrediteerimisnõudeid.
Kasutage vähemalt kahte erineva sisaldusega (madala ja kõrge kontsentratsiooniga) vaba T3 kontrollmaterjale või seerumeid.
Siemens Healthcare Diagnostics soovitab kasutada müügilolevaid vähemalt
2 kontsentratsiooniga (madal ja kõrge) kvaliteedikontrollimaterjale. Rahuldavaks tulemuseks loetakse seda, kui saadud analüüdi väärtused jäävad süsteemi vastuvõetava kontrollvahemiku või vastava laboratooriumi sisese
kvaliteedikontrollisüsteemi sätestatud vahemiku piiresse.
Oodatavad väärtused
IMMULITE 2000 vaba T3
referentsväärtuse uuring viidi läbi 212 eeldatavalt hea tervise juures oleva inimesega, andes 95%-l tulemuse vahemikus 1,8–4,2 pg/mL mis tähistab täiskasvanul kilpnäärme normfunktsiooni. Nimetatud referentsväärtustesse tuleb suhtuda kui orienteeruvatesse juhistesse. Iga laboratoorium peaks välja töötama omad referentsväärtused.
Piirangud
Vaba T3 analüüsi kasutatakse põhiliselt kinnitava testina kilpnäärme ületalitluse diagnoosimisel, samas on vaba T3 väga piiratud ulatuses kasutatav kilpnäärme alatalitluse uurimisel. Vaba T3
kontsentratsioonide vahemikud võivad kilpnäärme normaalse funktsiooni ja ületalitluse korral kohati kattuda.
Vaba T3 analüüsitulemuste tõlgendamise muudab keeruliseks paljude ravimite kasutamine, mis võib mõjutada T3 sidumist kilpnäärme hormoone kandvate valkudega.
Kilpnäärmega mitteseotud raske haiguse korral osutub kilpnäärme seisundi hindamine eriti keeruliseks. Kuna mõned antud rühma kuuluvad patsiendid võivad kannatada kaasneva kilpnäärme
primaarse alatalitluse või kompensatoorse sekundaarse alatalitluse all, siis on selles olukorras soovitatav kinnitava uuringuna TSH immuunanalüüs.
Harvaesinevate seisundite korral, mis on seotud albumiini sidumise võime
äärmuslike kõrvalekalletega, näiteks pärilik düsalbumineemiline
hüpertüreoksineemia (FDH, ingl.k. familial
dysalbuminemic hyperthyroxinemia),
võivad vabade kilpnäärmehormoonide otsesed uuringud anda eksitavaid tulemusi.
Analüüsi võivad mõjutada ringlevad T3 autoantikehad ja hormoone siduvad inhibiitorid.2,3,12
On avaldatud, et hepariinil on nii in vivo kui in vitro mõju vabadele
kilpnäärmehormoonidele.8 Sellest lähtuvalt ei tohiks võtta proove hepariini tarvitamise ajal või vahetult peale selle tarvitamist. Kuna lahjendamine muudab tasakaalu vaba ja valguga seotud T3 vahel, ei saa analüüs säilitada lahjenduse lineaarsust. Seetõttu ei tohiks üritada lahjendada kõrge vaba T3 kontsentratsiooniga patsiendiproove. Iga proov kõrgema näiduga kui analüüsi
kalibreerimisvahemiku ülemine piir tulekski sellise tulemusena kirja panna.
Inimese seerumis leiduvad heterofiilsed antikehad võivad reageerida analüüsi komponentideks olevate
immuunoglobuliinidega, mõjutades in vitro immuunanalüüse. [Vt Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: 27-33.] Proovide analüüsimine nendelt patsientidelt, kes puutuvad pidevalt kokku loomade või loomade
seerumiproduktidega, võib esineda seda tüüpi mõju ja analüüs võib anda
ebatäpseid tulemusi. Kuigi reagendid on välja töötatud selliselt, et vähendada heterofiilsete antikehade mõju riski, võivad siiski harvadel juhtudel seerumi ja
testikomponentide vahel ilmneda koostoimed. Diagnostilistel eesmärkidel tuleb analüüsi tulemusi vaadelda alati koos kliinilise läbivaatuse, patsiendi anamneesi ja teiste leidudega.
Analüütiline iseloomustus
Andmed, mis on tüüpilised konkreetsele analüüsimeetodile, on toodud allpool olevates tabelites ja graafikutel. Kõik tulemused on väljendatud ühikutes pg/mL. (Kui ei ole märgitud teisiti, siis on kõik tulemused saadud seerumiproove analüüsides, mis on võetud ilma
geelibarjäärita või hüübimisaktivaatoriteta katsutitesse.)
Konversioonifaktor: pg/mL × 1,536 pmol/L
Kalibreerimisvahemik: 1,0–40 pg/mL (1,5–61 pmol/L)
Test on jälgitav kvalifitseeritud materjalide ja mõõtmisprotseduuridega toodetud sisestandardi järgi.
Analüütiline tundlikkus: 1,0 pg/mL (1,5 pmol/L)
Hajuvus: proove mõõdeti korduvalt duplikaatides 20 päeva jooksul, kaks korda päevas, kokku 40 katsutit ja 80 replikaati (Vt. tabelit "Precision".)
Spetsiifilisus: kasutatavad antikehad on väga spetsiifilised vaba T3 suhtes. (Vt. tabelit "Specificity".)
TBG mõju: selle analüüsi null-kalibraator rikastati TBG resiiniga, millest oli eraldatud T3 (20, 40 ja 80 µg/mL) ja seda analüüsiti. Tulemused ei näidanud mingeid häireid. (Vt. tabelit "Effect of TBG".)
Albumiini mõju: analüüsiti söefiltriga puhastatud inimvere seerumi albumiini (10, 20 ja 50 mg/mL). (Vt. tabelit "Effect of Albumin")
Mitteesterifitseeritud rasvhapete (NEFA, ingl.k. Nonesterified Fatty
Acids) mõju: analüüsiti oleiinhappega (2,5 ja 5,0 mmol/L) rikastatud proove. Analüüsiti ei esinenud mingit olulist nihet 2,5 mmol/L juures, analüüsitulemused aga vähenesid kõrgemate kontsentratsioonide korral. (Vt tabelit "Effect of Nonesterified Fatty Acids". NEFA suurenenud hulk võib esineda raseduse hilisstaadiumis ja hepariinteraapia korral.)
Teised substantsid: pärast proovide rikastamist fenüülbutasooniga (10, 100 ja 1000 µg/dL), fenütoiini (5, 10, 25, ja 50 µg/mL) või salitsüüliga (10, 25, 50 ja 100 mg/dL) näitasid analüüsitulemused, et nimetatud ained ei avaldanud tulemustele mingit mõju. (Vt tabeleid "Effect of Phenylbutazone", "Effect of Phenytoin" ja "Effect of Salicylate".)
Bilirubiin: bilirubiini olemasolu kontsentratsioonis kuni 200 mg/L ei avalda analüüsitulemustele mingisugust mõju analüüsi täpsusastmest lähtuvalt. Hemolüüs: hemoglobiini esinemine kontsentratsioonis kuni 384 mg/dL ei avalda analüüsitulemustele mingit mõju analüüsi täpsusastmest lähtuvalt. Lipeemia: tugevalt lipeemilised proovid võivad mõjutada analüüsitulemusi. (Vt tabelit "Effect of Lipemia".)
Meetodite võrdlus: meetodit võrreldi IMMULITE vaba T3 meetodiga, analüüsides 105 proovi. (Kontsentratsioonide vahemik: orienteeruvalt 1 kuni 14 pg/mL.) Lineaarne regressioon: (IML 2000) = 1,05 (IML) + 0,41 pg/mL r = 0,977 Keskmised väärtused: 3,5 pg/mL (IMMULITE 2000) 3,0 pg/mL (IMMULITE)
Klienditugi
Tehnilise abi saamiseks, võtke ühendust oma müügiesindusega.
www.siemens.com/diagnostics
Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. kvaliteedisüsteem omab sertifitseeritud ISO 13485:2003.
Latviski
IMMULITE 2000 Brīvais T3
Pielietojums: Paredzēts lietošanai in vitro diagnostikā ar IMMULITE 2000 sistēmu analizatoriem. Izmanto brīvā T3
kvantitatīvai noteikšanai serumā, kā papildus izmeklējumu tireoīdā statusa novērtēšanai.
Kataloga numuri:
L2KF32 (200 testi) L2KF33M (3000 testi) L2KF36 (600 testi) L2KF36M (6000 testi)
Testa kods: FT3 Krāsu kods: Zilganzaļš
Apraksts un klīniskā nozīme
Normālos fizioloģiskos apstākļos
trijodtironīns (T3) sastāda aptuveni 5% no vairogdziedzera hormoniem serumā. Lai arī tā koncentrācija plazmā ir zemāka
nekā tiroksīnam (T4), tomēr tam piemīt lielāka metaboliskā aktivitāte, ātrāka darbība un lielāks sadalījuma tilpums. Tas veidojas lielākoties ekstratireoidālas konversijas ceļā no T4. Līdzīgi kā T4, tas asinīs cirkulē gvk. saistītā veidā ar TBG, prealbumīnu un albumīnu. Brīvais T3 sastāda tikai aptuveni 0,25% no kopējā T3 cirkulējošā daudzuma.
Kopējā T3 imūnķīmiskiem mērījumiem ir vispāratzīta lietderība. Paaugstināta brīvā vai kopējā T4 gadījumā, kopējā T3 mērījumi palīdz apstiprināt
hipertireoīdisma diagnozi. Patoloģisku kopējā T3 pieaugumu novēro arī tad, ja kopējā T4 koncentrācija ir normāla – šāds stāvoklis tiek dēvēts par „T3 toksikozi”. Brīvā T3 hormona līmenis lielākoties korelē ar kopējā T3 līmeni. Tomēr kopējā T3 līmenis ir atkarīgs ne tikai no tireoīdā statusa un T4 perifērā metabolisma, bet arī no tireoīdu hormonus saistošo proteīnu koncentrācijas. Brīvo T3 nesējproteīnu koncentrācijas variācijas būtiski
neietekmē. Tādējādi TBG pieaugums, kas ir raksturīgs grūtniecībai, orālo
kontraceptīvu lietošanai un estrogēnu terapijai izraisa kopējā T3 līmeņa
pieaugumu, kamēr brīvā T3 koncentrācija būtībā nemainās.
Brīvā T3 koncentrācija tipiski atspoguļo pacienta aktuālo tireoīdo statusu daudz atbilstošāk nekā kopējā T3 koncentrācija.
Procedūras princips
Konkurējošā analoga tipa imūnfermentatīvā metode.25,26
Inkubācijas cikli: 2 × 30 minūtes
Izmeklējamais materiāls
Tā kā EDTA var ietekmēt rezultātus, to nevajadzētu lietot par antikoagulantu. Lipēmiski vai stipri kontaminēti paraugi var dot kļūdainus rezultātus. Acīmredzami lipēmiskiem paraugiem ir ieteicama ultracentrifugēšana.
Hemolizēti paraugi var norādīt uz nekorektu apiešanos ar paraugiem pirmslaboratorijas posmā, tāpēc rezultāti jāinterpretē piesardzīgi.
Paraugu centrifugēšana pirms pilnīgas sarecēšanas var būt cēlonis fibrīna klātbūtnei paraugā, kas savukārt var radīt kļūdainus rezultātus. Lai no tā izvairītos, paraugus centrifugē tikai pēc pilnīgas asins parauga sarecēšanas. Atsevišķiem paraugiem var būt garāks recēšanas laiks, it īpaši savāktajiem no pacientiem, kas saņēmuši antikoagulantu terapiju. Dažādu ražotāju paraugu stobriņi var dot dažādus rezultātus atkarībā no to
materiāla un klātpievienotajām vielām, ieskaitot gelus vai fiziskās barjeras, reces veicinātājus un/vai antikoagulantus. IMMULITE 2000 brīvā T3 tests nav pārbaudīts izmantojot visu iespējamo tipu stobriņus.
Nepieciešamais parauga tilpums: 100 µL seruma
Uzglabāšana: 2 dienas 2–8°C vai 2 mēnešus –20°C.
Brīdinājumi un piesardzības
pasākumi
Tikai in vitro diagnostikai.
Reaģenti: Uzglabāt 2–8°C. Utilizēt atbilstoši spēkā esošajiem noteikumiem. Strādājot ar reaģentiem, ievērot vispārējos piesardzības pasākumus, rīkoties ar tiem kā ar potenciāli infekciozu materiālu. No cilvēka asinīm iegūtie izejmateriāli ir rūpīgi testēti un apstiprināti kā nereaktīvi uz sifilisa izraisītāju, antivielām pret HIV 1 un HIV 2, uz hepatīta B virsmas antigēnu un antivielām pret hepatītu C.
Atsevišķi komponenti kā konservantu var saturēt nātrija azīdu (mazāk nekā
0,1 g/dL). Mazgājot, skalot ar lielu ūdens daudzumu, lai novērstu potenciāli
eksplozīvo metālu azīdu veidošanos svina un vara cauruļvadu sistēmās.
Hemiluminiscentais substrāts: Izvairīties no piesārņošanas un tiešas saules gaismas iedarbības. (Skatīt ieliktni.)
Ūdens: Izmantot destilētu vai dejonizētu ūdeni.
Testa komplekts
Komplektā ietilpstošie komponenti ir savstarpēji saskaņoti. Svītrkodi satur informāciju par testu.
Brīvā T3 lodīšu paka (L2F312) Ar svītrkodu. 200 lodītes pārklātas ar monoklonālajām peļu anti-T3 antivielām. Stabilas 2–8°C līdz derīguma termiņa beigām.
L2KF32: 1 paka L2KF33M: 15 pakas
L2KF36: 3 pakas L2KF36M: 30 pakas Brīvā T3 reaģentu konteiners (L2F3A2) Ar svītrkodu, satur trīs šķidrus reaģentus – attiecīgi 10,5 mL, 10,5 mL un 11,5 mL, gatavs lietošanai. Pirmais un otrais reaģenti satur ar ligandiem saistītu T3 analogu bufersistēmā, ar konservantu. Trešais reaģents satur sārmaino fosfatāzi (teļa zarnu) konjugētu bufersistēmā ar anti-ligandu antivielām, ar konservantu. Stabils 2–8°C līdz derīguma termiņa beigām.
L2KF32: 1 konteiners L2KF33M: 15 konteineri L2KF36: 3 konteineri L2KF36M: 30 konteineri
Pirms lietošanas noņemt aizsargfoliju no atverēm konteinera virspusē. Pievienot slīdošo vāciņu konteineram tā, lai tas brīvi atvērtos un aizvērtos.
Brīvā T3 kalibratori (LF3L, LF3H)
2 pudelītes (Low un High) liofilēta brīvā T3 uz apstrādāta cilvēka seruma bāzes, ar konservantu. Katras pudelītes saturu izšķīdināt pievienojot 4,0 mL destilēta vai dejonizēta ūdens. Stabili 2–8°C 30 dienas pēc izšķīdināšanas vai 6 mēnešus
(alikvotas) –20°C.
L2KF32: 1 komplekts L2KF33M: 3 komplekti L2KF36: 2 komplekti L2KF36M: 4 komplekti
Pirms kalibrēšanas stobrus, kuros iepilda kalibratorus, marķē ar komplektā
esošajām svītrkodu uzlīmēm tā, lai varētu nolasīt svītrkodu.
Testa veikšanai nepieciešamie
materiāli, kas nav iekļauti
komplektā
L2SUBM: Hemiluminiscentais substrāts L2PWSM: Pipetes-zondes mazgāšanas šķīdums
L2KPM: Pipetes-zondes tīrīšanas šķīdums
LRXT: Reakcijas kivetes (vienreiz lietojamās)
Vēl nepieciešams
destilēts vai dejonizēts ūdens, teststobri, kontroles
Testēšanas procedūra
Lai optimāli veiktu testēšanu, svarīgi ir visas ikdienas ekspluatācijas procedūras izdarīt kā aprakstīts IMMULITE 2000 sistēmu lietotāja rokasgrāmatā.
Skatīt IMMULITE 2000 sistēmu lietotāja rokasgrāmatu, kur aprakstītas paraugu sagatavošanas, testu uzstādīšanas, kalibrēšanas, testēšanas un kvalitātes kontroles procedūras.
Ieteicamais piekalibrēšanas intervāls: 2 nedēļas
Kvalitātes kontroles paraugi: Kvalitātes kontroles biežumam ievērojiet valsts noteikumus vai akreditācijas prasības. Izmantot vismaz divu līmeņu (low un high) brīvā T3 kontroles vai seruma pulus. Siemens Healthcare Diagnostics iesaka izmantot tirgū pieejamus kvalitātes
kontroles materiālus ar vismaz 2 līmeņiem (zemu un augstu). Pietiekams veiktspējas līmenis ir sasniegts, kad iegūtās analīta vērtības iekļaujas sistēmas Pieļaujamajā Kontroles Diapazonā, vai noteiktajā diapazonā, ko nosaka attiecīga
laboratorijas iekšējās kvalitātes kontroles shēma.
Sagaidāmās vērtības
IMMULITE 2000 brīvā T3 testa references robežas tika noteiktas izmantojot 212 praktiski veselus pieaugušos, sniedzot centrālo 95% diapazonu 1,8–4,2 pg/mL eutireoīdiem pieaugušajiem.
Dotās vērtības uzskatāmas par
vispārīgiem ieteikumiem. Katrā konkrētā
laboratorijā jāievieš savas references robežas.
Ierobežojumi
Brīvā T3 noteikšanas tests galvenokārt izmantojams kā hipertireoīdismu apstiprinošs tests un tā izmantošana hipotireoīdisma kontekstā ir visai
ierobežota. Šajā gadījumā var būt zināma eutireoīdu un hipertireoīdu diapazonu pārklāšanās.
Brīvā T3 testa rezultātu interpretācija ir sarežģīta gadījumos, kad lietoto medikamentu ietekmē izmainās T3 saistīšanās ar tireoīdu hormonu nesējproteīniem.
Tireoidālo statusu īpaši grūti ir novērtēt smagu netireoidālu saslimšanu gadījumos. Tā kā šādi pacienti paralēli var ciest no primāra hipotireoīdisma vai kompensatora sekundāra hipotireoīdisma, ieteicams veikt TSH imūnķīmisku noteikšanu, lai
apstiprinātu testa rezultātus.
Gadījumos, kad stipri izmainīta albumīnu saistīšanas kapacitāte, piemēram, iedzimtas disalbuminēmiskās
hipertiroksinēmijas gadījumā, tiešā brīvo vairogdziedzera hormonu noteikšanas var dot kļūdainus rezultātus.
Cirkulējošās autoantivielas pret T3 un hormonu saistīšanas inhibitori var traucējoši ietekmēt testa rezultātus.2,3,12 Heparīns ietekmē brīvo tireoīdo hormonu koncentrāciju gan in vitro, gan in vivo.8
Tādēļ paraugus nedrīkst noņemt antikoagulanta ievadīšanas laikā vai īsi pēc tam.
Tā kā paraugu atšķaidīšana izraisa brīvā un saistītā T3 līdzsvara nobīdi, veicot atšķaidīšanu tests nevar saglabāt linearitāti. Respektīvi, nav pieļaujama paraugu atšķaidīšana, kuros ir augsts brīvā T3 rezultāts. Tātad rezultāti, kuru vērtības pārsniedz augšējo kalibrācijas robežu, kā tādi arī jāziņo.
Cilvēka seruma heterofīlās antivielas var reaģēt ar testa komponentos iekļautajiem imunoglobulīniem, traucējot imunoloģisko reakciju norisi in vitro. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Pacientu paraugi, kas bijuši pakļauti dzīvnieku produktu vai dzīvnieku seruma produktu iedarbībai, demonstrē šīs mijiedarbības veidu radot viltus rezultātus. Šiem reaģentiem ir jānodrošina minimāls interferences risks, tomēr ir iespējama mijiedarbība starp tīru serumu un testa komponentiem.
Diagnostiskiem nolūkiem testa rezultāti jāizmanto saistībā ar citu testu rezultātiem, pacienta klīnisko anamnēzi un citu
attiecīgu informāciju.
Veiktspējas dati
Zemāk dotajās tabulās un grafikos
apkopoti testa veiktspējas dati. Rezultāti ir izteikti pg/mL. (Ja nav īpaši atzīmēts, visi rezultāti iegūti testējot seruma paraugus, kas savākti stobros bez gela barjeras un recēšanas veicinātāju piedevām.)
Konversācijas koeficients: pg/mL 1,536 pmol/L
Kalibrācijas diapazons: 1,0–40 pg/mL (1,5–61 pmol/L)
Tests ir izsekojams līdz iekšējam standartam, kas izgatavots izmantojot atbilstošus materiālus un mērīšanas metodes.
Analītiskais jutīgums: 1,0 pg/mL (1,5 pmol/L)
Precizitāte: Paraugi tika testēti
dubultatkārtojumā 20 dienu laikā, 2 sērijas dienā, pavisam kopā 40 sērijās un 80 atkārtojumos. (Skatīt tabulu "Precision".) Specifiskums: Antivielas augsti
specifiskas attiecībā uz brīvo T3. (Skatīt tabulu "Specificity".)
TBG ietekme: Testa nulles kalibratoram tika pievienots T3 saturošs TBG
komplekss (20, 40 un 80 μg/mL) un tika veikta testēšana. Ietekme uz testa
rezultātiem netika novērota. (Skatīt tabulu "Effect of TBG".)
Albumīna ietekme: Paraugiem tika pievienots uz kokogles adsorbēts cilvēka seruma albumīns (10, 20 un 50 mg/mL), un tika veikta testēšana. (Skatīt tabulu "Effect of Albumin".)
Neesterificēto taukskābju ietekme: Tika testēti paraugi, kuriem bija pievienota oleīnskābe (2,5 un 5,0 mmol/L). Rezultāti neuzrādīja būtisku ietekmi 2,5 mmol/L koncentrācijas gadījumā, bet uzrādīja vērtību pazemināšanos augstākās koncentrācijas gadījumā. (Skatīt tabulu "Effect of Nonesterified Fatty Acids". Paaugstināts neesterificēto taukskābju līmenis ir novērojams grūtniecības vēlīnās fāzes un heparīna terapijas laikā.)
Citi komponenti: Rezultāti paraugos, kuri testēti pēc fenilbutazona
(10, 100 un 1000 μg/dL) vai fenitoīna (5, 10, 25 un 50 μg/mL) vai salicilātu (10, 25, 50 un 100 mg/dL) pievienošanas, neuzrādīja šo komponentu ietekmi uz testa rezultātiem. (Skatīt tabulas "Effect of Phenylbutazone", "Effect of Phenytoin" and "Effect of Salicylate".)
Bilirubīns: Bilirubīns koncentrācijā līdz 200 mg/L testa rezultātus, ieskaitot precizitāti neietekmē.
Hemolīze: Hemoglobulīns koncentrācijā līdz 384 mg/dL testa rezultātus, ieskaitot precizitāti, neietekmē.
Lipēmija: Izteikti lipēmiski paraugi var ietekmēt testa rezultātus. (Skatīt tabulu "Effect of Lipemia".)
Metožu salīdzinājums: Tests tika salīdzināts ar IMMULITE brīvā T3 testu, izmantojot 105 paraugus. (Koncentrāciju diapazons: aptuveni no 1 līdz 14 pg/mL.) Lineārās regresijas vienādojums:
(IML 2000) = 1,05 (IML) + 0,41 pg/mL r = 0,977 Vidējās vērtības: 3,5 pg/mL (IMMULITE 2000) 3,0 pg/mL (IMMULITE)
Tehniskais atbalsts
Tehnisku jautājumu risināšanai kontaktēties ar vietējo izplatītāju.
www.siemens.com/diagnostics
Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. kvalitātes sistēmai ir ISO 13485:2003 sertifikāts.
Lietuviškai
IMMULITE 2000 Laisvas T3
Paskirtis: diagnostiniam naudojimui
in vitro su IMMULITE 2000 Sistemų
analizatoriais — kiekybiniam laivo T3 matavimui serume, kaip pagalbinė klinikinio skydliaukės būklės įvertinimo priemonė.
Katalogo numeriai:
L2KF32 (200 testų) L2KF33M (3000 testų) L2KF36 (600 testų) L2KF36M (6000 testų)
Tyrimo kodas: FT3 Spalva: žalsvai melsva
Santrauka ir paaiškinimai
Esant normaliai fiziologinei būklei trijodtironinas (T3) sudaro maždaug 5 procentus skydliaukės hormonų
plazmoje. Nors T3 koncentracija mažesnė nei tiroksino, tačiau metabolinis
aktyvumas didesnis, apykaita greitesnė bei didesnis pasiskirstymas.
T3 daugiausiai gaminamas
ekstratireoidinės konversijos iš T4 būdu. Kaip ir T4, jis cirkuliuoja surištas su pernešančiais baltymais (tiroksiną
surišančiais globulinais (TSG), pre-albuminais ir pre-albuminais. Laisvas T3 sudaro apie 0,25% viso cirkuliuojančio T3. Bendro T3 matavimo imunofermentinis tyrimas naudojamas keliems
diagnostiniams tikslams. Esant padidėjusiam laisvam ar bendram T4, bendro T3 matavimas padeda patvirtinti hipertireoidizmo diagnozę. Nenormalus bendro T3 padidėjimas gali būti ir esant normaliai bendro T4 koncentracijai. Tokia būklė yra žinoma kaip “T3 toksikozė”. Didžiąja dalimi laisvo T3 lygiai artimai koreliuoja su bendro T3 lygiais. Tačiau bendras T3 priklauso ne tik nuo skydliaukės būklės ir periferinės konversijos iš T4 į T3, bet ir nuo
skydliaukės hormonus surišančių baltymų koncentracijos. Iš kitos pusės, laisvas T3 daugiausiai nėra paveiktas šių
pernešančių baltymų pokyčių. Taigi
tipiškasTSG padidėjimas nėštumo, oralinių kontraceptikų vartojimo ir estrogenų terapijos metu turi poveikį bendro T3 padidėjimui, kai tuo tarpu laisvo T3 koncentracija iš esmės nesikeičia. Laisvo T3 koncentracija tipiškai labiau atspindi paciento skydliaukės būklę nei bendro T3 koncentracija.
Atlikimo metodika
Konkurentinis, analogu pagrįstas imunofermentinis tyrimas.25,26 Inkubacijos ciklai: 2 × 30 minučių
Mėginio paėmimas
Kadangi EDTA gali paveikti rezultatus, ji neturėtų būti naudojama kaip
antikoaguliantas.
Lipeminiai ar labai užteršti mėginiai gali duoti klaidingus rezultatus. Lipeminių mėginių išvalymui rekomenduojama naudoti ultracentrifugavimą.
Hemolizuoti mėginiai gali rodyti netinkamą mėginio paėmimą ir paruošimą prieš jam patenkant į laboratoriją; taigi, rezultatai turi būti interpretuojami atsargiai.
Galimas fibrino atsiradimas, jei mėginiai centrifuguojami jiems pilnai nesukrešėjus. Norint išvengti klaidingų rezultatų,
įsitikinkite, kad įvyko pilnas sukrešėjimas dar prieš centrifugavimą. Kai kuriems mėginiams, ypač pacientų, naudojančių antikoaguliantus, reikalingas ilgesnis krešėjimo laikas.
Naudojant skirtingų gamintojų kraujo paėmimo mėgintuvėlius, galimi skirtingi rezultatai, priklausomai nuo medžiagų ir priedų, įskaitant gelio ar fizines pertvaras, krešėjimo skatintojus ir/arba
antikoaguliantus. IMMULITE 2000 Laisvo T3 nebuvo patikrintas su visais galimais mėgintuvėlių tipais.
Reikalingas kiekis: 100 µl serumo Saugojimas: 2 dienos 2–8°C ar 2 mėnesiai užšaldžius iki –20°C.
Perspėjimai ir atsargumo
priemonės
in vitro diagnostiniam naudojimui.
Reagentai: saugoti 2–8°C. Utilizuoti vadovaujantis galiojančiais įstatymais. Laikykitės darbo saugos taisyklių ir elkitės su visais komponentais kaip su
medžiagomis, galinčiomis perduoti infekcinius agentus. Medžiagos, paimtos iš žmogaus kraujo, patikrintos, nustatoma, kad jos nereaktyvios sifiliui, ŽIV 1 ir 2 antikūnams, hepatito B paviršiniam antigenui ir hepatito C antikūnams. Mažiau nei 0,1 g/dl koncentracijos natrio azidas buvo pridėtas kaip konservantas. Utilizuojant, nuplauti dideliu vandens kiekiu, kad apsisaugoti nuo potencialiai sprogių metalo azidų susikaupimo švininiuose ir variniuose vamzdžiuose. Chemiluminescencinis substratas: saugoti nuo užteršimo ir tiesioginių saulės spindulių. (Žr. Aprašymą.)
Vanduo: naudoti distiliuotą ar dejonizuotą vandenį.
Pateikiamos priemonės
Komponentai sudaro vientisą rinkinį. Lipdukai pakuotės viduje reikalingi tyrimų atlikimui.
