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1. About this document
El presente trabajo tiene como objetivo verificar si la materia prima Nafazolina clorhidrato cumple con las especificaciones de los ensayos de calidad fisicoquímica establecidos por la Farmacopea de los Estados Unidos (USP37)8.
El análisis fisicoquímico se inició con el ensayo de descripción indicada en la tabla 1, su resultado fue conforme, teniendo como especificación polvo cristalino blanco. Es inodoro y tiene un sabor amargo. Funde a una temperatura de aproximadamente 255ºC, con descomposición (Anexo 2); este ensayo aplica una descripción cualitativa, comprobando distintas características como apariencia, color, forma, tamaño, etc. Respecto a la temperatura de fusión, se define como los puntos de temperatura entre los cuales se detecta la primera fase líquida hasta la temperatura en la cual no hay fase solida aparente, y sobre la descomposición que se observa a la temperatura de 255ºC se evidencia con un oscurecimiento del material, carbonización, burbujeo u otro incidente. 8, 14
En el ensayo de solubilidad, el resultado fue conforme, tal como se muestra en la tabla 2, siendo su especificación fácilmente soluble en agua y en alcohol; muy poco insoluble en cloroformo; prácticamente insoluble en éter; el término miscible se refiere a una sustancia que produce una mezcla homogénea al mezclarse en cualquier proporción con el disolvente designado; la cantidad de muestra como del disolvente se basó en la tabla de Solubilidad (Anexo 1).8
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El ensayo de identificación ayuda a discriminar entre compuestos parecidos o de estructura relacionada que pueden formar parte de la muestra, en este ensayo se utilizaron tres métodos, mostrándose en la tabla 3 obteniendo la conformidad en los tres. 14
El primer método realizado fue Absorción en el Infrarrojo (IR), el cual proporciona una evidencia más concluyente de la identidad de la sustancia, como resultado se observa que en las gráficas tanto la muestra como el estándar primario coinciden con los picos, siendo conforme este ensayo (Anexo 3) . IR es una técnica que proporciona información acerca de las vibraciones en las moléculas de una muestra. El equipo que realiza la medición es el espectrofotómetro infrarrojo que consta de una fuente que produce el rayo infrarrojo, un detector y una serie de espejos fijos y móviles que guían el rayo hasta un contenedor donde se encuentra la muestra a analizar, al interaccionar la radiación con la muestra, parte de ella es absorbida provocando vibraciones a nivel molecular, dando como resultado un gráfico (espectro infrarrojo), donde se observan picos de absorción que representan un tipo de vibración en determinados enlaces atómicos en una muestra, siendo además determinada a una frecuencia especificada. Esta técnica es muy útil, pues constituye una evidencia para la identidad del compuesto que es comparado con los picos de un espectro puro. 8, 15, 16
El siguiente método fue Absorción en el Ultravioleta (UV), teniendo como resultado una diferencia de absortividades de 2,7% (Anexo5) el cual cumple con la especificación de las absortividades de la solución estándar y la solución muestra no difieren en más de 3,0%. El UV es un poderoso instrumento en una variedad de problemas analíticos. Aunque en muchas oportunidades tiene el inconveniente de la falta de especificidad,
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debido a la interferencia con los productos de degradación los cuales en ocasiones pueden presentar un espectro idéntico al componente sin degradar. Se trabaja con celdas de 1cm y se encuentra en el intervalo espectral de 200 nm a 400 nm8, 17.
El último método realizado para el ensayo de identificación fue Cloruros, donde se evidencio la presencia de cloruros por la formación de la solución precipitada 8, 18
En la tabla 4, el ensayo de pH fue conforme, con un resultado ligeramente ácido de 6,32; el pH durante el proceso de fabricación puede variar por diferentes factores como la adición de los excipientes, el agua, etc. Las lágrimas oculares neutralizan soluciones y suspensiones ácidas como básicas al estar en contacto con el ojo, llevándolas a términos confortables del líquido lacrimal promedio, el cual es de 7,0 a 7,4. Se sabe que el ojo es capaz de tolerar valores de pH que oscilan entre 3,5 y 9,0 gracias a la capacidad tampón de las lágrimas pero es preferible que el pH de la formulación se encuentre próximo al fisiológico para evitar irritación ocular e incomodidad al paciente, y por consiguiente abandono del tratamiento y fracaso terapéutico 19, 20, 21, 22.
En la tabla 5 el resultado del ensayo de pérdida por secado fue 0,0%; este valor es la aproximación del valor real (Anexo 6) a la especificación técnica, la cual establece una pérdida no mayor de 0,5% de su peso. Este ensayo determina la cantidad de materia volátil de cualquier tipo que se elimina en las condiciones especificadas 8, 23.
En la tabla 6, el ensayo de residuo de incineración se obtuvo como resultado 0,1% (Anexo 7), cumpliendo la especificación no mayor de 0,2%. Este ensayo mide la cantidad de sustancia residual no volatizada de una muestra cuando esta se incinera en presencia de
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En la tabla 7, el resultado del ensayo de impurezas comunes fue 1,5% (Anexo 8), encontrándose dentro de la especificación a 2,0% como límite general para la cantidad total de impurezas; este ensayo hace uso de la CCD, el cual es un método que utiliza una fase estacionaria (adsorbente) que se mantiene en un soporte siendo en este caso la placa de silica gel y la fase móvil (eluyente) que ascenderá a lo largo de la placa por capilaridad. La fase estacionaria será un componente polar y el eluyente será por lo general menos polar que la fase estacionaria, de forma que los componentes que se desplacen con mayor velocidad serán los menos polares. Una aplicación de este método es comprobar la pureza de un componente, evaluando la presencia de impurezas comunes, que se definen como aquellas especies que se encuentran en fármacos y /o productos farmacéuticos que no poseen una actividad biológica indeseable significativa en las cantidades presentes. Estas impurezas pueden surgir de la síntesis, preparación o degradación 8, 24.
El HPLC es actualmente la técnica de separación más ampliamente utilizada debido a su versatilidad y amplio campo de aplicación. Los componentes de la muestra, previamente disueltos en un disolvente adecuado (fase móvil), son forzados a atravesar la columna cromatográfica gracias a la aplicación de latas precisiones. El material interno de la columna (fase estacionaria), está constituido por un relleno capaz de retener de forma selectiva los componentes de la mezcla. La resolución de esta separación depende de la interacción entre la fase estacionaria y la fase móvil, pudiendo ser manipulada a través de la elección de diferentes mezclas de disolventes y distintos tipo de relleno. Como resultado final los componentes de la mezcla sale salen de la columna separados en función de sus tiempos de retención en lo que constituye el cromatograma. A través del
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cromatograma se puede realizar la identificación cualitativa y cuantitativa de las especies separadas mediante la obtención de áreas o alturas25, 26, 27.
Una parte integral de los métodos de cromatografía de líquidos HPLC es la prueba de aptitud del sistema, ya que se emplean para verificar si la resolución y la reproductibilidad del sistema cromatográfico son adecuadas para el análisis a realizar 25, 28.
Tal como muestra en la tabla 8, el resultado de la valoración de Nafazolina clorhidrato fue 99,4% cumpliendo la especificación técnica, la cual indica de 98,0% a 102,0% con respecto a la sustancia seca 8, 13.
Del mismo modo, se cumplió con los requisitos de aptitud del sistema para asegurar las condiciones cromatográficas de trabajo (anexo 4), evidenciándose un factor de capacidad de 4,7, una eficiencia de columna de 1641 platos teóricos, un factor de asimetría de 1,9 y una desviación estándar relativa (%RSD) de 0,7% (Anexo 9) 9, 25, 28.
Todos estos ensayos son de mucha importancia para determinar la identidad, pureza y contenido de la materia prima y así garantizar su calidad para proceder con la fabricación de productos farmacéuticos. 2, 23.