Continuar investigando sobre hongos micorrízicos de orquídeas en Colombia, con aplicación ecológica en esta planta y biocontrol de patógenos en agricultura, ampliando las zonas de muestreo para evitar sesgos.
Utilizar los aislamientos de Ceratobasidium obtenidos en este estudio, para realizar proyectos de conservación ex situ e in situ con orquídeas presentes en diferentes hábitats en Colombia.
Hacer estudios detallados de Rhizoctonia binucleada de orquídeas con su teleomorfo en Ceratobasidium, para conocer su variada actividad (micorrízico, patógeno y biocontrolador) y biología (interacción microorganismo- microorganismo, microorganismo-hospedero y microorganismo-hospedero- ambiente).
Reconocer el mecanismo de biocontrol utilizado por Rhizoctonia binucleada de orquídeas (teleomorfo Ceratobasidium). El cual posiblemente fue resistencia sistémica inducida, sugerido en este estudio, por los resultados similares a los obtenidos con aislamientos de Rhizoctonia binucleada (BNR).
Enfatizar en evaluaciones de patogenicidad con aislamientos de Rhizoctonia binucleada de orquídeas (teleomorfo Ceratobasidium), utilizando diferentes hospederos de interés agrícola y reconocer su potencial biocontrolador sobre hongos patógenos del suelo de importancia económica.
Investigar en condiciones de campo el comportamiento de aislamientos de Rhizoctonia binucleada de orquídeas (teleomorfo Ceratobasidium), no solo en
119
arroz sino en hospederos utilizados para rotación de este cultivo (soya, frijol, maíz, hortalizas, entre otros) y así poderlos incorporar en sistemas de producción agrícola para el manejo integrado de patógenos del suelo, haciendo énfasis en R. solani.
Generar productos formulados con Rhizoctonia binucleada de orquídeas (teleomorfo Ceratobasidium) y evaluar métodos de incorporación al suelo, para el manejo en campo de patógenos del suelo como R. solani.
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134 ANEXOS
Anexo A. Análisis de varianza (ANOVA) para porcentaje de incidencia de la enfermedad causada por el género-forma Rhizoctonia en hojas cosechadas de arroz in vitro. Variable dependiente: Porcentaje de Incidencia Transformado (PIT) (P≤0.05).
Fuentes Suma de Cuadrado
de variación GL cuadrados medio Valor F Pr > F
Modelo 15 553.542636 36.902842 4.11 <.0001
Error 144 1293.421463 8.982093
Total corregido 159 1846.964099
R-Cuadrado Coeficiente
de Variación Raíz CME Media de PIT
0.299704 100.9564 2.997014 2.968623
Fuente de variación GL Tipo I SC Cuadrado medio Valor F Pr > F
Aislamiento 15 553.542636 36.902842 4.11 < .0001
Fuente de variación GL Tipo III SC Cuadrado medio Valor F Pr > F
135
Anexo B. Análisis de varianza (ANOVA) para porcentaje de severidad de la enfermedad causada por el género-forma Rhizoctonia sobre plantas vivas de arroz en invernadero.
Fuente de variación GL Cuadrado
medio F calculado F tabulado Valor de P *Aislamiento 11 328.4 387.0 1.91 0.7x 10 -100 *Dosis 2 3.5 4.1 3.07 0.018 Suelo 1 0.6 0.7 3.92 0.404 Bloque 2 1.4 1.6 3.07 0.205 Suelo x Dosis 2 2.5 2.9 3.07 0.058 *Suelo x Aislamiento 11 1.7 2.0 1.91 0.032 *Dosis x Aislamiento 22 2.7 3.2 1.64 1.5 x 10 -5 *Suelo x Dosis x Aislamiento 22 1.9 2.3 1.64 0.001 Bloque x Tratamiento 1 142 0.8
* indica que existe diferencia significativa entre las medias de los tratamientos.
1
para el análisis estadístico el error de muestreo fue reemplazado por la interacción Bloque x Tratamiento.
136
Anexo C. Efecto patogénico del género-forma Rhizoctonia en hojas cosechadas in vitro y plantas vivas de arroz en invernadero con valores transformados y sin transformar.
Porcentaje de Incidencia por Aislamiento 1.3
Porcentaje de Severidad por Aislamiento 2.3
Tratamientos Datos sin transformar
Datos
transformados
Tratamientos Datos sin transformar Datos transformados R. solani 85 a 8.8 a R. solani 34.5 a 5.6 a Q2M19 35 b 4.2 b Q1.1M14 1.4 b 1.0 b Q1M16 1.1 27.5 b 4.0 b Q2.2M14 0.7 bc 1.0 bc JTO160 25 bc 3.8 bc Q1M15 0.5 bcd 1.0 bcd Q3M17 1.2 25.2 bc 3.6 bc Q1M16 1.1 0.5 cde 0.9 cde BS69 20 bc 3.3 bc Q2M19 0.5 cde 0.9 cde Q2.2M14 20 bc 3.2 bc Q3M17 1.2 0.4 cde 0.9 cde PB01 17.5 bc 3.1 bc Q1M16 1.2 0.3 de 0.9 de Q1M19 17.5 bc 2.8 bc Q1M13 0.3 de 0.9 de Q1M16 1.2 12.5 bc 2.6 bc Q1M19 0.3 de 0.9 de Q1M15 12.5 bc 2.1 bc Medio S.A+ 0.2 e 0.8 e Q1M13 7.5 bc 1.8 bc C. Absoluto 0.2 e 0.8 e Q1.1M14 10.0 bc 1.6 bc RS1AP 2.5 bc 1.2 bc Medio PDA 0 c 0.7 c C. Absoluto 0 c 0.7 c 1
Los porcentajes de incidencia de la enfermedad corresponden a la media del promedio de 40 observaciones/tratamiento.
2
Los porcentajes de severidad de la enfermedad corresponden a la media del promedio de 180 observaciones/tratamiento; 3 los valores seguidos de la misma letra en la columna no son significativamente diferentes (P≤0.05) según la prueba de Duncan.
137
Anexo D. Efecto de dosis de nitrógeno en la patogenicidad del género-forma Rhizoctonia sobre plantas vivas de arroz en invernadero combinando tratamientos con valores transformados y sin transformar.
Dosis de nitrógeno % de Severidad de la
enfermedad 1, 2
Datos sin transformar
% de Severidad de la enfermedad 1, 2 Datos transformados 250 kg N /ha 3.8 a 1.4 a 150 kg N /ha 3.3 b 1.3 b 0 kg N /ha 2.9 b 1.2 b 1
Los porcentajes de severidad de la enfermedad corresponden a la media de los promedios combinando tratamientos.
2
Los valores seguidos de la misma letra en la columna no son significativamente diferentes (P≤0.05) según la prueba de Duncan.
138
Anexo E. Análisis de varianza (ANOVA) del efecto biocontrolador de RBO sobre R. solani en plantas de arroz en invernadero.
Fuente de variación GL Cuadrado
medio F calculado F tabulado Valor de P *Aislamiento 11 146.9 62.5 1.91 8 x 10 -49 *Dosis de N 2 58.1 24.7 3.07 6.2 x 10 -10 *Suelo 1 11.0 4.7 3.92 0.032 *Bloque 2 14.8 6.3 3.07 0.002 *Suelo x Dosis 2 26.4 11.2 3.07 3 x 10 -5 *Suelo x Aislamiento 11 4.7 1.9 1.91 0.032 Dosis x Aislamiento 22 3.3 1.4 1.64 0.124 Suelo x Dosis x Aislamiento 22 2.4 1.0 1.64 0.468 Bloque x Tratamiento 1 142 2.3
* indica que existe diferencia significativa. 1
Para el análisis estadístico el error de muestreo fue reemplazado por la interacción Bloque x Tratamiento.
139
Anexo F. Efecto biocontrolador de RBO sobre R. solani en plantas de arroz en invernadero en cada tratamiento.
Porcentaje de severidad de la enfermedad por tratamiento 2
Tratamientos1 Datos sin
transformar 3 Datos transformados 3 R. s 16.5 a 3.9 a Q1M5 + R. s 10.6 b 3.1 b Q1.1M14 + R. s 9.3 c 2.9 c Q3M17 1.2 + R. s 8.8 c 2.8 c Q2M19 + R. s 8.3 cd 2.8 cd Q1M13 + R. s 8.3 cd 2.8 cd Q1M16 1.2 + R. s 8.0 cd 2.7 cd Q1M16 1.1 + R. s 7.8 cd 2.7 cd Q1M19 + R. s 7.2 d 2.6 d Q2.2 M14 + R. s 5.4 e 2.1 e Médio S.A+ 0.6 f 0.9 f Control Absoluto 0.0 f 0.7 f 1
R. solani (R.s) inoculado sólo y en combinación con RBO para evaluar el biocontrol
2
Los porcentajes de severidad de la enfermedad corresponden a la media del promedio de 180 observaciones/tratamiento; 3 los valores seguidos de la misma letra en la columna no son significativamente diferentes (P≤0.05) según la prueba de Duncan.
140
Anexo G. Efecto de la dosis de nitrógeno en el biocontrol de RBO sobre R. solani en plantas vivas de arroz en invernadero combinando tratamientos.
1
Los porcentajes de severidad de la enfermedad corresponden a la media de los promedios al combinar tratamientos.
2
Los valores seguidos de la misma letra en la columna no son significativamente diferentes (P≤0.05) según la prueba de Duncan.
Anexo H. Efecto del suelo en el biocontrol de RBO sobre R. solani en plantas vivas de arroz en invernadero combinando los tratamientos.
Suelo
% de severidad de la enfermedad Datos sin transformar 1,2
% de severidad de la enfermedad Datos transformados 1,2