Analytical Model for Chip Performance

A continuación se presentan los resultados obtenidos en el cálculo de la concentración de fósforo en las muestras usando el método de la adición de estándar.

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Tabla 3.9. Datos obtenidos para el método de adición de estándar

Réplicas Adiciones (mg/L) _{c (PO4}3-_{) en la} muestra (mg/L) 2 4 6 10 Día 1 0,4455 0,5453 0,6640 0,8645 135,78 Día 2 0,4470 0,5453 0,6583 0,8667 135,21 Día 3 0,4467 0,5497 0,6583 0,8680 135,73 Día 4 0,4447 0,548 0,6577 0,8647 135,84 media 0,4460 0,547 0,6596 0,8660 135,64 varianza 1,16x10-6 _4,65x10-6 _8,77x10-6 _2,82x10-6 _0,0852 DE 0,0011 0,0022 0,0030 0,0017 0,2920 CV % 0,2410 0,3940 0,4489 0,1940 0,2152

Para cada uno de los días en que se analizó la concentración de fósforo en la muestra utilizando el método de adición de estándar se construye la curva correspondiente y se determina la concentración expresada en mg/L.

c = intercepto / pendiente

Fig 3.4. Curvas para el método de adición de estándar.

y = 0,0527x + 0,3399 R² = 0,999 y = 0,0528x + 0,3391 R² = 0,9996 y = 0,0528x + 0,3404 R² = 0,9999 y = 0,0526x + 0,3394 R² = 0,9999 0,200 0,300 0,400 0,500 0,600 0,700 0,800 0,900 1,000 0 2 4 6 8 10 12 A c (mg/L)

Adición de estándar

44

La concentración de Ptotal presente en la muestra de los EM se calculó por medio de la

ecuación obtenida de la curva de adición de estándar, teniendo en cuenta que hubo dilución de la muestra a lo largo del desarrollo del método la concentración de PO43-

45

Conclusiones

 Se establecen las condiciones de trabajo adecuadas para el correcto desempeño del método espectrofotométrico del ácido vanadomolibdofosfórico propuesto para la determinación de fósforo total en productos de fermentación de microorganismos eficientes.

 El proceso de validación demuestra que el método es lineal, preciso en términos de repetibilidad y reproducibilidad y veraz en el intervalo de concentraciones de 2,00 a 12,00 mg/L. Siendo el límite de detección 0,30 mg/L y el límite de cuantificación de 0,85 mg/L. Se demuestra que la contribución del efecto matriz no tiene influencias significativas en la determinación.

 Se aplica el método propuesto a la muestra de microorganismos eficientes CBQ-VTC, lote: Investigación 200 L siendo la concentración de fósforo total determinada por el método de la curva de calibración y por el método de adición del estándar iguales a 136,10 ± 0,2045 mg/L y 135,64 ± 0,4642 mg/L respectivamente. No existiendo diferencias significativas entre las concentraciones calculadas por ambos métodos.

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Recomendaciones

 Aplicar el método espectrofotométrico del ácido vanadomolibdofosfórico propuesto para la determinación de fósforo total en otras muestras de microorganismos eficientes.

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Anexos

Anexo 1. Bloc digest 6 plazas (equipo utilizado para la digestión de la muestra)

Anexo 3. Datos para la confección del gráfico, espectro de absorción para la solución patrón de 5 mg/L. λ (nm) A Promedio de A I II III 400 0,396 0,402 0,411 0,403 405 0,353 0,357 0,367 0,359 410 0,313 0,315 0,325 0,318 415 0,278 0,279 0,287 0,281 420 0,246 0,247 0,254 0,249 425 0,218 0,218 0,225 0,220 430 0,194 0,194 0,20 0,196 435 0,172 0,173 0,178 0,174 440 0,155 0,155 0,160 0,157 445 0,140 0,138 0,144 0,141 450 0,126 0,126 0,131 0,128 455 0,115 0,115 0,118 0,116 λ (nm) A Promedio de A I II III 460 0,104 0,103 0,107 0,105 465 0,094 0,094 0,096 0,095 470 0,084 0,082 0,085 0,084 475 0,073 0,076 0,075 0,075 480 0,062 0,062 0,065 0,063 485 0,052 0,052 0,055 0,053 490 0,043 0,043 0,045 0,044 500 0,027 0,027 0,028 0,027 550 0,001 0,002 0,004 0,002 600 0,001 0,003 0,001 0,002 650 0,004 0,001 0,004 0,003

Anexo 4. Datos para la confección del gráfico, espectro de absorción para la solución patrón de 12 mg/L. λ (nm) A Promedio de A I II III 400 0,970 0,988 0,940 0,966 405 0,870 0,880 0,838 0,863 410 0,774 0,775 0,748 0,766 415 0,682 0,691 0,665 0,679 420 0,605 0,612 0,588 0,602 425 0,540 0,545 0,520 0,535 430 0,478 0,483 0,465 0,475 435 0,428 0,434 0,413 0,425 440 0,383 0,390 0,372 0,382 445 0,346 0,352 0,336 0,345 450 0,314 0,319 0,305 0,313 455 0,285 0,290 0,279 0,285 λ (nm) A Promedio de A I II III 460 0,258 0,262 0,255 0,258 465 0,232 0,236 0,225 0,231 470 0,207 0,211 0,201 0,206 475 0,182 0,185 0,177 0,181 480 0,157 0,160 0,153 0,157 485 0,132 0,135 0,128 0,132 490 0,109 0,112 0,106 0,109 500 0,069 0,073 0,068 0,070 550 0,001 0,004 0,002 0,002 600 0,000 0,003 0,001 0,001 650 0,001 0,008 0,002 0,004

Anexo 5. Diagrama de flujo para la determinación de PTotal: Dige s tión á c ida Tomar 50 mL de muestra en un block de digestión Añadir 5 mL de HNO3(conc) y

1 mL de H2SO4(conc)

Digestar por 30 minutos a 150ºC

Enfriar

Añadir 0.1 mL (2 gotas) de fenolftaleína

Neutralizar con NaOH 10 mol/L hasta que aparezca el

color rosa Trasvasar a un matraz de 100 mL, enfriar a temperatura ambiente y enrasar E li mina c ión de c olor Tomar 100 mL y añadir 4 g de carbón activado Agitar durante 5 minutos Filtrar a vacío y lavar bien el

filtrado

(Si fuera necesario filtrar más de una vez pudiera usarse la filtración a

gravedad)

Trasvasar a un matraz de 2 L todo el contenido inicial de la

muestra ya decolorada

Tomar 500 mL de muestra y diluir a 1000 mL en un matraz volumétrico Des a rrol la dor de c ol or Medir 10 mL y llevar a un matraz de 25 mL Preparar paralelamente Añadir 5 mL de la solución vanadato-molibdato (reactivo desarrollador de color) Enrasar y dejar desarrollar

color durante 10 minutos

Ajustar espectrofotómetro con el blanco de reactivos a la

longitud de onda seleccionada (420 nm)