Involvement and Development
CHAPTER 6: CONCLUSIONS AND RECOMMENDATIONS
A
B
C
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DISCUSIÓN
De acuerdo con los resultados registrados en esta investigación, detallan que tanto controladores como fitopatógenos son limitados por la temperatura y el medio de cultivo, en donde se evidencia la teoría planteada por Luque63, que determinó que esto se debe a diversos factores como: Las características de los fitopatógenos (grosor de hifas), humedad y temperatura usada en el medio de cultivo, son factores que crean resistencia a los antagonistas y deformaciones irregulares a lo largo de la experiencia, en tanto la investigación de Morales García64, indicaba que la temperatura óptima de desarrollo en condiciones in vitro para C. gloesporioides es de 20 a 30°C, igual a esta investigación, en donde el hongo se desarrolla en menor tiempo de lo esperado, impidiendo así el avance de cualquier antagonista.
De acuerdo con los datos registrados en las tablas N°1, 2 y 3 & 10, 11 y 12, la disminución del crecimiento micelial del biocontrolador C. rosea en la prueba de antagonismo realizada a 10°C, 20°C y 30°C en los medios de cultivo Agar Papa Dextrosa (PDA) & Agar Sabouraud Dextrosa (DSA) respectivamente; Chavez17 & Papavizas22, demostraron en sus respectivas investigaciones que esto se debe a que entre las condiciones que pueden afectar el desempeño de G. roseum (=C. rosea) como biocontrolador está: La temperatura y el tiempo de siembra del antagonista que delimitó el crecimiento de este biocontrolador, que en condiciones ambientales favorables, para los autores mencionados el antagonista incrementa su actividad supresiva según se incrementa la temperatura de 10° C a 25 °C y a partir de los 15 °C la germinación de los conidios del biocontrolador es mayor al 80%, incrementándose también con el aumento de temperatura. Worsatit54 en cambio, relacionó la no efectividad de este antagonista, con la cantidad de metabolitos producidos por C. rosea en una prueba de antagonismo, donde depende de los nutrimentos y no siempre está relacionada con la habilidad para controlar alguna enfermedad. Tal y como se pueden observar gráficamente en las figuras: 1, 2 y 3 en PDA & 10, 11 y 12 en DSA.
A demás en las tablas N° 4, 5 y 6 & 13, 14 y 15, de la prueba de antagonismo realizada a 10°C, 20°C y 30°C en los medios de cultivo Agar Papa Dextrosa (PDA) y Agar Sabouraud Dextrosa (DSA) respectivamente, nos muestra la clara competencia por nutrientes de F. oxysporum frente a C. gloesporioides, donde el crecimiento de este hongo usado como antagonista, se limita ya que, según Fletcher56 & Nelson57, no
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revelaron la patogenicidad exacta de Fusarium oxysporum fuera de un género hospedante, el hongo presenta características importantes sobre muchas plantas no hospedantes, al igual que la sobrevivencia saprofítica en el suelo y tener una temperatura óptima de desarrollo entre 25 y 30ºC, pero concluyeron que ejerce solo cierta competencia por nutrientes en vez de un antagonismo en condiciones in vitro. Debe tenerse en cuenta; sin embargo, que son estudios llevados a cabo en condiciones in vitro, las cuales pueden diferir marcadamente de las condiciones de campo.Lo antes mencionado se puede observar gráficamente en las figuras N° 4, 5 y 6 en PDA & 13, 14 y 15 en DSA.
Mientras que en las tablas N° 7, 8 y 9 & 16, 17 y 18, de la prueba de antagonismo realizada a 10°C, 20°C y 30°C en los medios de cultivo Agar Papa Dextrosa (PDA) y Agar Sabouraud Dextrosa (DSA) respectivamente, nos muestra el claro antagonismo demostrado por T. harzianum sobre C. gloesporioides, en las tablas 7 y 8, pero de manera más clara en la tabla 9, donde, Fernandez58 por ejemplo, sostiene que el género Trichoderma es un agente de control biológico muy eficiente puesto que presenta alta velocidad de crecimiento, abundante esporulación y una amplia gama de sustratos donde pueden crecer debido a la riqueza de enzimas que posee; además, menciona que la habilidad de Trichoderma como excelente competir por espacio y recursos nutricionales se debe a la presencia en forma natural de este hongo en diferentes tipos de suelos que evidencia el amplio rango de hospedante de este antagonista. Al respecto, Mont 42, refiere que T. harzianum tiene una alta capacidad de competencia por el sustrato; como consecuencia de ello, el organismo afectado tiende a entrar en un estado de latencia, que podría ser por deficiencia de nutrientes o la presencia de cierto nivel de sustancias inhibitorias, lo cual impide que siga creciendo; coincidiendo, con una parte de los resultados obtenidos en la presente investigación. Asimismo, Ezziyyani59 refiere que T. harzianum presenta una gran adaptabilidad a diferentes temperaturas del medio ambiente, pudiendo crecer y reproducirse normalmente hasta los 35°C, a este nivel estas enzimas juegan un importante papel en el micoparasitismo. Al respecto, Harman60complementó lo anterior y especificó que la temperatura y humedad son considerados como parámetros de importancia en la distribución natural de este antagonista en el suelo; por la alta presencia de saprófitos que compiten por espacio y alimento, considerando a Trichoderma como un competidor agresivo; Papavizas61. Tal y como las podemos observar gráficamente en las figuras N° 7, 8 y 9 en PDA.
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Asimismo, las tablas N° 19,20 y 21 & 22,23 y 24, nos evidencia la resistencia de C. gloesporioides frente a C. rosea, Fusarium oxysporum y Trichoderma harzianum sólo en el medio Agar Sabouraud Dextrosa, que nos indicó la resistencia de este fitopatógeno ya que probablemente contribuyó a la expresión de resistencia, debido a que existen muchas posibilidades de que surjan alteraciones en algunos procesos metabólicos que son gobernados por un número reducido de genes como la cuantificación del crecimiento micelial, germinación de esporas en medio de cultivo adicionado con fungicidas, y pruebas in vivo de la efectividad biológica de dichos productos, como lo demostró en sus investigaciones Delp65 & Dekker66. Las características antes mencionadas las podemos observar gráficamente en las figuras N° 22, 23 y 24 respectivamente.
Asimismo, la figura N° 19 y 20, nos muestra el porcentaje de inhibición obtenido por Colletotrichum gloesporioides que obtuvo frente a C. rosea, F. oxysporum y T. harzianum en un medio de cultivo PDA presentaron un porcentaje de inhibición de 11.04%, 26.38% y 46.01% respectivamente, mientras que a los 20°C presentaron un porcentaje de inhibición de 17.91%, 24.25% y 38.43% y a los 30°C de evaluación presentaron un porcentaje de inhibición de 34.88%, 36.05% y 65.12% respectivamente., mientras que medio en el medio de cultivo DSA presentaron un porcentaje de inhibición de 14.19%, 14.55% y 1.81% respectivamente, mientras que a los 20°C presentaron un porcentaje de inhibición de 24.56%, 14.47% y 17.11% y a los 30°C de evaluación presentaron un porcentaje de inhibición de 27.35%, 17.04% y 17.93% respectivamente; donde estos datos obtenidos se pueden vincular a la siembra del fitopatógeno realizada con 24 horas de anticipación frente a su antagonista en condiciones in vitro, donde a medida que desarrollaba la colonia del patógeno en relación a sus antagonistas mayor era el porcentaje de inhibición frente a estos antagonistas.
El estudio de Colletotrichum gloesporioides es muy limitado en nuestra región y poco conocido sobre todo en el Perú. Hasta el momento los resultados indican la gran capacidad de resistencia de este fitopatógeno causante de la antracnosis en distintos alimentos cosechados en nuestro país frente a algunos antagonistas, por lo cual este trabajo es un modelo a seguir para seguir investigando en busca de biocontroladores para los distintos tipos de hongos fitopatógenos que causan daño económico en la agricultura peruana.
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CONCLUSIONES
El mejor controlador biológico de C. gloesporioides fue T. harziaum en el medio de cultivo Agar Papa Dextrosa (PDA) y Agar Sabouraud Dextrosa (DSA) con un grado 2 según la escala de Bell en las temperturas de 10°C, 20°C y 30°C.
La acción antagónica de C. rosea y F. oxysporum frente a C. gloesporioides alcanzó un grado 3 en la escala de Bell en los medios de cultivo PDA y DSA en las temperaturas de 10°C, 20°C y 30°C.
El mayor porcentaje de inhibición del crecimiento de C. gloesporioides también fue para T. harzianum con un 65.12% en medio de cultivo PDA respecto a 34.88% para C. rosea y 36.05% para F. oxysporum para la temperatura de 30°C.
El mayor porcentaje de inhibición del crecimiento de C. gloesporioides en medio de cultivo DSA fue para C. rosea con 27.35% respecto a los 17.04% de F. oxysporum y 17.93% de T. harzianum.
La temperatura no influye en la determinación del control antagónico (escala de Bell) pero frente al porcentaje de inhibición si existe una influencia de la temperatura, donde se determinó que a mayor temperatura existe mayor porcentaje de inhibición.