PRUEBA PREVIA DE LA CLINICA:
0No 1Si
Cual: ___________________________________________________________________
Resultado:___________________________________________________________
MUESTRA DE SANGRE_______________________________________________
PRUEBA PARA CHAGAS-IFI____________________________________________
185
Caracterización molecular del elemento repetido disperso pequeño, SIRE, en las seis Discrete Typing Units (DTU) de Trypanosoma cruzi y su aplicación en una prueba de PCR
Anexo 3 Microhematocrito
1. Tomar la muestra de sangre en tubos capilares con heparina como anticoagulante.
2. Centrifugar en una microcentrifuga a 3000 r.p.m por 3 minutos.
3. Cortar en capilar por encima de la fase de los glóbulos rojos (Fig. ) para así obtener las fases de glóbulos blancos y plasma en donde se encuentras los parásitos.
4. Depositar el contenido del capilar en un tubo eppendorf y con micropipeta poner 30 µl de la fase entre la cámara de Neubauer y cubreobjetos.
5. Realizar el recuento en los cuatro cuadrantes y realizar el cálculo de la parasitemia según la siguiente fórmula:
Total parásitos x 10 x Factor de Dilución 4
Parásitos/µl=
55 (correspondiente al volumen del capilar)
Fig. Microhematoctiro con sangre separada por microcentrifugación Imagen tomada de html.rincondelvago.com
Referencia: Arias y Ferro, 1988. Corte
Caracterización molecular del elemento repetido disperso pequeño, SIRE, en las seis Unidades Discretas de Tipificación (DTU) de Trypanosoma cruzi y su aplicación en una prueba de PCR
Producción intelectual
Los resultados presentados en este trabajo han sido publicados y presentados parcialmente en congresos nacionales e internacionales.
Artículos científicos
Barrera, Y., Guevara, J., Pavía, P., Montilla, M., Nicholls, R.S., Parra, E., Puerta, C.J. 2008. Evaluación de las pruebas de PCR TcH2AF-R y S35-S36 para la detección de Trypanosoma cruzi en tejido cardíaco de ratón. Biomédica, 28: 616- 626.
Pavia, P.X., Montilla, M., Flórez, C., Herrera, G., Ospina, J.M., Manrique, F., Nicholls, R.S; Puerta, C.J. (2009) Reporte del primer caso de enfermedad de Chagas transplacentaria analizado por AP-PCR en Moniquirá, Boyacá. Biomédica. 29: 513-522.
Pavía, P. X., Roa, N. L., Uribe, A. M, Puerta, C. J. 2011. Seguimiento de paciente chagásico con trasplante de corazón mediante las pruebas de PCR S35-S36 y TcH2AF-R.Biomédica 31. Citación provisional.
Pavia, P. X., Thomas, M. C; López, M. C., Puerta, C. J. Molecular characterization of the short interspersed repetitive element SIRE in the six Discrete Typing Units (DTUs) of Trypanosoma cruzi. Manuscrito en preparación.
Ponencias en eventos científicos
Montilla, M., Pavia, P., Rodríguez, G., Parra, E., Nicholls, R.S., Puerta, C.J. 2004. Caracterización de cepas de Trypanosoma cruzi colombianas aisladas de pacientes chagásicos agudos. IX Encuentro Científico, Instituto Nacional de Salud. Bogotá, Colombia.
Caracterización molecular del elemento repetido disperso pequeño, SIRE, en las seis Unidades Discretas de Tipificación (DTU) de Trypanosoma cruzi y su aplicación en una prueba de PCR Guevara, J., Barrera, Y., Montilla M., Nicholls R.S., Parra, E., Pavía P., Puerta C. 2007. Detección de Trypanosoma cruzi en tejido cardiaco de ratón mediante pruebas de PCR. XIII Congreso Colombiano de Parasitología y Medicina Tropical. Ibagué, Colombia.
Manrique-Abril, F.G., Ospina, J.M., Herrera, G.M., Nicholls, R.S., Montilla, M., Florez, A.C., Pavia, P., Puerta, C.J. 2007. Enfermedad de Chagas transplacentaria en Miraflores y Moniquirá, Boyacá-Colombia. XIII Congreso Colombiano de Parasitología y Medicina Tropical. Ibagué, Colombia.
Pavia, P., Montilla, M., Nicholls, R.S., Florez, A.C., Manrique-Abril, F.G., Herrera, G.M., Puerta, C.J. 2007. Análisis de un caso de enfermedad de Chagas transplacentario en Moniquirá (Boyacá) mediante AP-PCR. XIII Congreso Colombiano de Parasitología y Medicina Tropical. Ibagué, Colombia.
Pavia, P., Montilla, M., Florez, A.C., Herrera, G.M., Ospina, J.M., Manrique-Abril, F.G., Nicholls, R.S., Puerta, C.J. 2008. Reporte de un caso de enfermedad de Chagas transplacentario en el municipio de Moniquirá (Boyacá). VI Encuentro Nacional de Investigación en Enfermedades Infecciosas. Santa Marta, Colombia.
Pavía, P., Puerta, CJ. 2009. Aislamiento y caracterización molecular de una cepa de Trypanosoma cruzi a partir de la sangre de un paciente chagásico crónico. X Congreso de la Investigación en la Pontificia Universidad Javeriana. Bogotá, Colombia.
Manrique-Abril, F., Herrera, G., Ospina, J.M., Pavia, P., Puerta, C.J., Montilla, M., Florea, A.C., Nicholls, R.S. 2009. Prevalencia de enfermedad de Chagas en maternas e incidencia transplacentario en Boyacá. XIV Congreso Colombiano de Parasitología y Medicina Tropical. Medellín, Colombia.
Caracterización molecular del elemento repetido disperso pequeño, SIRE, en las seis Unidades Discretas de Tipificación (DTU) de Trypanosoma cruzi y su aplicación en una prueba de PCR
Pavia, P.X., Roa, N., Urina, M.E., Suarez, A., Correa, J.R., Uribe, A.M., Puerta, C.J. 2009. Seguimiento de reactivación de la enfermedad de Chagas en un paciente trasplantado mediante las pruebas de PCR TcH2AF-R y S35-S36. XIV Congreso Colombiano de Parasitología y Medicina Tropical. Medellín, Colombia.
Pavia, P.X., Montilla, M., Florez, C., Herrera, G., Manuel, J.M., Manrique-Abril, F., Nicholls, R.S., Puerta, C.J. 2009. Caracterización molecular de 9 cepas de
Trypanosoma cruzi aisladas de casos de Chagas congénito en los municipios de Miraflores y Moniquirá (Boyacá). XIV Congreso Colombiano de Parasitología y Medicina Tropical. Medellín, Colombia.
Pavía, P., Lopez, M.C., Puerta, C. 2005. Comparación de la secuencia 3´no codificante de los genes H2A de 1,2 kb entre cepas de Trypanosoma cruzi I y II. XVII Congreso Latinoamericano de Parasitología. Mar de Plata, Argentina.
Manrique-Abril, F.G., Ospina, J.M., Herrera, G.M., Nicholls, R.S., Montilla, M., Florez, A.C., Pavia, P., Puerta, C.J. 2007. Enfermedad de Chagas transplacentaria en Miraflores y Moniquirá, Boyacá-Colombia. XVIII Congreso de la Federación Latinoamericana de Parasitología (FLAP 2007). Isla Margarita, Venezuela.
Resúmenes publicados en revistas indexadas
Guevara, J., Barrera, Y., Montilla M., Nicholls R.S., Parra, E., Pavía P., Puerta C. 2007. Detección de Trypanosoma cruzi en tejido cardiaco de ratón mediante pruebas de PCR. Biomédica 27 (Supl.2), 211.
Caracterización molecular del elemento repetido disperso pequeño, SIRE, en las seis Unidades Discretas de Tipificación (DTU) de Trypanosoma cruzi y su aplicación en una prueba de PCR Pavia, P., Montilla, M., Nicholls, R.S., Florez, A.C., Manrique-Abril, F.G., Herrera, G.M. & Puerta, C.J. (2007). Análisis de un caso de enfermedad de Chagas transplacentario en Moniquirá (Boyacá) mediante AP-PCR. Biomédica 27 (Supl.2), 238.
Pavia, P., Montilla, M., Florez, A.C., Herrera, G.M., Ospina, J.M., Manrique-Abril, F.G., Nicholls, R.S., Puerta, C.J. 2008. Reporte de un caso de enfermedad de Chagas transplacentario en el municipio de Moniquirá (Boyacá). Infectio 12 (Supl.1), 107.
Manrique-Abril, F., Herrera, G., Ospina, J.M., Pavia, P., Puerta, C.J., Montilla, M., Florea, A.C., Nicholls, R.S. 2009. Prevalencia de enfermedad de Chagas en maternas e incidencia transplacentario en Boyacá. Biomédica 29 (Supl. 1) 315-6.
Pavia, P.X., Roa, N., Urina, M.E., Suarez, A., Correa, J.R., Uribe, A.M., Puerta, C.J. 2009. Seguimiento de reactivación de la enfermedad de Chagas en un paciente trasplantado mediante las pruebas de PCR TcH2AF-R y S35-S36. Biomédica. 29 (Supl. 1) 212-3.
Pavia, P.X., Montilla, M., Florez, C., Herrera, G., Manuel, J.M., Manrique-Abril, F., Nicholls, R.S., Puerta, C.J. 2009. Caracterización molecular de 9 cepas de
Trypanosoma cruzi aisladas de casos de Chagas congénito en los municipios de Miraflores y Moniquirá (Boyacá). Biomédica. 29 (Supl. 1) 179-80.
Pavía, P., Lopez, M.C., Puerta, C. (2005). Comparación de la secuencia 3´no codificante de los genes H2A de 1,2 kb entre cepas de Trypanosoma cruzi I y II.
Caracterización molecular del elemento repetido disperso pequeño, SIRE, en las seis Unidades Discretas de Tipificación (DTU) de Trypanosoma cruzi y su aplicación en una prueba de PCR Manrique-Abril, F.G., Ospina, J.M., Herrera, G.M., Nicholls, R.S., Montilla, M., Florez, A.C., Pavia, P., Puerta, C.J. 2007. Enfermedad de Chagas transplacentaria en Miraflores y Moniquirá, Boyacá-Colombia. Boletín de Malariología y Salud Ambiental XLVII (Supl. 1), 238.
Secuencias de nucleótidos anotadas en el GenBank
Trypanosoma cruzi isolate Maracay clone 2 SIRE repeat sequence
434 bp linear DNA, GQ404843.1 GI:256681956
Trypanosoma cruzi isolate Maracay clone 1 SIRE repeat sequence
433 bp linear DNA, GQ404842.1 GI:256681955
Trypanosoma cruzi isolate Y clone 2 SIRE repeat sequence
430 bp linear DNA, GQ404841.1 GI:256681954
Trypanosoma cruzi isolate Y clone 1 SIRE repeat sequence
441 bp linear DNA, GQ404840.1 GI:256681953
Trypanosoma cruzi isolate CANIII clone 3 SIRE repeat sequence
436 bp linear DNA, GQ404839.1 GI:256681952
Trypanosoma cruzi isolate CANIII clone 1 SIRE repeat sequence
431 bp linear DNA, GQ404838.1 GI:256681951
Trypanosoma cruzi isolate Mn cl2 REF clone 2 SIRE repeat sequence
438 bp linear DNA, GQ404837.1 GI:256681950
Trypanosoma cruzi isolate Mn cl2 REF clone 1 SIRE repeat sequence
Caracterización molecular del elemento repetido disperso pequeño, SIRE, en las seis Unidades Discretas de Tipificación (DTU) de Trypanosoma cruzi y su aplicación en una prueba de PCR Trypanosoma cruzi isolate 92122102R clone 3 SIRE repeat sequence
430 bp linear DNA, GQ404835.1 GI:256681948
Trypanosoma cruzi isolate 92122102R clone 2 SIRE repeat sequence
420 bp linear DNA, GQ404834.1 GI:256681947
Trypanosoma cruzi isolate Bug 2148 cl1 clone 3 SIRE repeat sequence
430 bp linear DNA, GQ404833.1 GI:256681946
Trypanosoma cruzi isolate Bug 2148 cl1 clone 2 SIRE repeat sequence
441 bp linear DNA, GQ404832.1 GI:256681945
Trypanosoma cruzi isolate Tu 18 cl 93 clone 3 SIRE repeat sequence
427 bp linear DNA, GQ404831.1 GI:256681944
Trypanosoma cruzi isolate Tu 18 cl 93 clone 2 SIRE repeat sequence
433 bp linear DNA, GQ404830.1 GI:256681943
Trypanosoma cruzi strain CL Brener clone 2 SIRE repeat sequence
429 bp linear DNA, GQ404829.1 GI:256681942
Trypanosoma cruzi strain CL Brener clone 1 SIRE repeat sequence
437 bp linear DNA, GQ404828.1 GI:256681941
Trypanosoma cruzi isolate Thul clone 2 SIRE repeat sequence
434 bp linear DNA, GQ404827.1 GI:256681940
Trypanosoma cruzi isolate Thul clone 1 SIRE repeat sequence