• Remítase a la Guía de usuario del sistema Rapid Capture para limitaciones adicionales del procedimiento específicas para el uso de ese sistema para una producción de muestras de alto volumen.
• No se recomienda la prueba de ADN del VPH de alto riesgo digene HC2 para los tipos de virus de papiloma humano 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 y 68 para la evaluación de abuso sexual sospechoso.
• La prevalencia de la infección por VPH en una población puede afectar el desempeño. Se reducen los valores predictivos positivos cuando se prueban poblaciones con prevalencia baja o individuos sin riesgo de infección.
• Un resultado negativo no excluye la posibilidad de infección por VPH porque niveles muy bajos de infección o error en el muestreo pueden causar un resultado falso negativo. Tampoco esta prueba detecta los tipos de ADN de VPH de bajo riesgo (6, 11, 42, 43, 44 y muchos otros tipos de bajo riesgo).
• Solamente deberá usarse la prueba de ADN del VPH de alto riesgo digene HC2 con especímenes cervicales recolectados usando el dispositivo de recolección de ADN digene HC2 con medio de transporte de especímenes digene (STM) o especímenes citológicos cervicales recolectados usando un dispositivo de recolección tipo escoba y colocarse en solución PreservCyt. Pueden ensayarse los especímenes de la biopsia solamente si se colocan inmediatamente en STM y se conservan a -20° C hasta que se ensayen.
• No deberá usarse el dispositivo de recolección de ADN «digene HC2 DNA Collection Device» para la recolección de especímenes de mujeres embarazadas.
• La infección con VPH no es un indicador de HSIL citológico o NIC de alto grado subyacente ni implica que se desarrollen NIC 2-3 ó cáncer. La mayoría de las mujeres infectada con uno o más tipos de VPH de alto riesgo no desarrollan NIC 2-3 ó cáncer.
• Un resultado de VPH de alto riesgo negativo no excluye la posibilidad de HSIL citológico futuro o NIC 2-3 subyacente o cáncer. Ocurre una pequeña proporción de lesiones de alto grado en mujeres que son VPH de alto riesgo negativas a través de tecnologías existentes. 6
positivos debido a la hibridación cruzada con los tipos de VPH 11, 40, 53, 54, 55, 66, MM4, MM7, MM8 ó MM9. 39 Aunque son raros varios de estos tipos de VPH o tipos novedosos no encontrados frecuentemente con enfermedad de alto grado, puede reportarse incorrectamente a pacientes cuyos especímenes contienen niveles altos de estos tipos de ADN del VPH como positivas en la prueba de ADN del VPH de alto riesgo digene HC2. 12, 40
• La prueba de ADN del VPH de alto riesgo digene HC2 está diseñado para detectar tipos de VPH de alto riesgo, incluyendo 39, 58, 59 y 68. Estudios analíticos conducidos por QIAGEN, usando el ADN plasmídico de VPH clonado, demuestran que el ensayo detecta estos tipos en niveles que van de 0.62 pg/mL a 1.39 pg/mL. Esto es equivalente a las características de detección de los otros tipos de VPH como blanco por la prueba de ADN del VPH de alto riesgo digene HC2. QIAGEN pudo validar la detección de estos tipos de VPH solamente en un número limitado de especímenes clínicos. Debido a la prevalencia baja de estos tipos en la población general (como fue demostrado por Bosch et ál.), no se han confirmado estadísticamente las características de desempeño de la prueba de ADN del VPH de alto riesgo digene HC2 para la detección de los tipos de VPH 39, 58, 59 y 68.
• Si están presentes altas concentraciones de crema antifúngica, jalea anticonceptiva o ducha vaginal en el momento en que se recolecte un espécimen para las pruebas de VPH, existe probabilidad de obtener un resultado falso negativo si estos especímenes contienen niveles de ADN del VPH que produzcan valores de URL/CO cerca del corte del ensayo.
• Es posible una reactividad cruzada entre la sonda de VPH de alto riesgo y el pBR322 plasmídico. Se ha reportado la presencia de secuencias homólogas de pBR322 en especímenes genitales humanos y podrían ocurrir resultados falsos positivos en presencia de niveles altos de plásmido bacteriano.
• No existe una utilidad conocida para las pruebas de VPH en los resultados AGUS de Papanicolaou. • Cuando procese especímenes de la solución PreservCyt, podrían ocurrir resultados falsos negativos si no
está visible el pellet celular después de la centrifugación. Esta observación es indicativa de material celular insuficiente disponible para obtener un resultado de prueba confiable.
• Se consideran inadecuados los especímenes de la solución PreservCyt que contengan volúmenes menores a 4 mL después de que se preparan los portaobjetos de la prueba de Papanicolaou ThinPrep para las pruebas de ADN digene HC2.
• Prepare los especímenes de la solución PreservCyt en lotes de 36 ó menos. Si procesa más de 36 especímenes al mismo tiempo, pueden soltarse y desecharse de manera accidental los pellets adicionales formados después de la centrifugación durante la etapa de decantación.
• Debe realizarse la etapa de desnaturalización del procedimiento de procesamiento de especímenes como se instruyó en estas instrucciones de uso. La ejecución inapropiada de la etapa de desnaturalización del procedimiento de la prueba de ADN del VPH de alto riesgo digene HC2 puede conducir a resultados falsos positivos. La colocación en el vórtice de especímenes, inversión de tubos y agitación inapropiados podría dar como resultado una desnaturalización incompleta de los híbridos de ARN/ADN no específicos endógenos a especímenes cervicales. Podrían ocurrir resultados falsos positivos debido a la contaminación del espécimen de la prueba de ADN del VPH de alto riesgo digene HC2 con estos híbridos de ARN/ADN no específicos. Con el fin de prevenir un posible desplazamiento de este material celular no desnaturalizado, es importante que la punta de la micropipeta no toque los costados del tubo de desnaturalización de especímenes durante la transferencia del espécimen desnaturalizado al microtubo o micropozo usados para la hibridación de sondas de VPH.