On real ChIP-Seq data

Hace 20 años la complejidad del efecto del alcohol en la mezcla 𝑆 + 𝐴 sobre la formulación fue reproducido en el diagrama esquemático de la XFigura 14X

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. Esta figura recoge unos diagramas, llamados diagrama de fase de Bourrel, no porque él

los haya presentado por primera vez, sino porque les proporcionó una gran utilidad. Dichos diagramas son una gráfica de la cantidad total de anfífilo (𝑆 + 𝐴) que se requiere para obtener una región monofásica al centro del diagrama (a 𝑊𝑂𝑅 = 1) versus la variable de formulación. Se ha encontrado que el máximo valor de solubilización se presenta al mínimo de la región monofásica (donde se cruzan las líneas que dividen la región trifásica de la monofásica de las gráficas de la XFigura 14X), el cual es la posición exacta de la microemulsión que contiene igual cantidad de agua y aceite solubilizados. La formulación óptima corresponde a la línea centrada entre las regiones monofásicas y trifásicas en cada una de las gráficas de la XFigura 14X la cual es representada por la línea punteada e indica los valores de (𝑆 + 𝐴) y de la variable de formulación que produce un valor de 𝑅 = 1 o un 𝐻𝐿𝐷 = 0.

Figura 14: Diagramas de fase de Bourrel: a) Diagrama normal (gamma); b) Diagrama inclinado (forma de pez)

La XFigura 15X presenta una serie de diagramas de fase de Bourrel (sólo está representado el punto de cruce de cada uno de los diagramas, llamado punto 𝑋) para sistemas que contienen nonilfenoles etoxilados, cuya variable de formulación es el número promedio de 𝐸𝑂𝑁, con octano, salmuera de NaCl al 1% m/v, un 𝑊𝑂𝑅 = 1, y con diferentes n-alcoholes a una relación 𝑆 𝐴 constante (72:28 en peso). 2 3 1 2 S + A (%) Variable de Formulación HLD = 0 3 2 1 2 S + A (%) HLD = 0 Variable de Formulación

El número junto a la intersección de las dos líneas de cada diagrama se refiere al número de átomos de carbono del n-alcohol en cada caso. El valor de cero corresponde a un sistema que carece de alcohol, mientras que 3,5 a una mezcla equimolar de n-propanol y n-butanol.

La ubicación del punto 𝑋 y su cambio de un caso a otro provee información acerca del cambio de la formulación en la abscisa y del cambio de solubilización en la ordenada.

La XFigura 15X muestra que mientras se incrementa el largo de la cadena del alcohol, se presentan cuatro etapas sucesivas, que aquí serán denotadas desde (a) hasta (d) y son identificadas por flechas en la figura.

Figura 15: Posición del punto tricrítico en el mapa de concentración anfifílica / formulación como una función del tamaño de cadena del co

- surfactante. El efecto del alcohol es compensado por cambios en el grado de etoxilación del surfactante no iónico

(a) Desde ausencia de alcohol hasta etanol, la flecha indica que el 𝐸𝑂𝑁 disminuye, esto es que el surfactante requerido para equilibrar la afinidad de 𝑆 + 𝐴 en la interfase se vuelve menos hidrofílico; entonces la contribución del co-surfactante es hidrofílica. Por otro lado, la cantidad de 𝑆 + 𝐴 en el punto 𝑋 se incrementa, denotando una disminución en la solubilización, lo cual se explica por el hecho de

5 6 7 8 10 30 20

S + A

EON

que las moléculas de alcohol reemplazan las moléculas de surfactante en la interfase y éstas son menos eficientes en crear interacciones entre las sustancias absorbidas en la interfase y el agua y el aceite.

(b) De etanol a la mezcla equimolar de propanol y butanol, el alcohol se hace menos hidrofílico entonces la flecha se gira hacia la derecha y los valores de 𝑆 + 𝐴 se incrementan denotando de nuevo una disminución de la solubilización.

(c) Como el alcohol se vuelve más lipofílico, la flecha continua apuntando hacia la derecha, debido a que es necesario compensar el cambio producido por el alcohol (mas lipofilico) por un aumento de la hidrofilicidad del surfactante. La cantidad de 𝑆 + 𝐴 disminuye; por lo cual se puede decir que se incrementa la solubilización. (d) En la última etapa, para alcoholes más largos que el octanol, el valor óptimo de 𝐸𝑂𝑁 disminuye, indicando una disminución en el efecto lipofílico del alcohol. El que haya disminuido el efecto lipofílico del alcohol puede ser explicado por una disminución de la adsorción de las moléculas de alcohol presentes entre las cabezas hidrofílicas del surfactante. Como el tamaño de la cadena alquílica aumenta, la afinidad del alcohol por la fase aceite también aumenta cambiando al alcohol hacia el lado del aceite, en vez de en la interfase, y ubicándolo entre las colas del surfactante, en lugar de hacerlo entre las cabezas hidrofílicas del mismo. Debido a que menos cantidad de alcohol está presente entre las cabezas hidrofílicas del surfactante, y gracias a que el alcohol puede separar los tallos del surfactante, puede haber más cantidad del mismo en la interfase y el 𝑆 + 𝐴 disminuye.

Observando los sistemas del caso (d), se requiere una explicación del hecho de que la formulación óptima para los alcoholes de C10 - C12 no coincida con el caso de ausencia de alcohol. Primero dichos puntos están ubicados a un 𝐸𝑂𝑁 que es significativamente más alto que el que se exhibe en sistemas que carecen de alcohol. Esto significa que la interacción entre los anfífilos y el aceite es más alta que la esperada. El segundo motivo es que la solubilización con éstos alcoholes se incrementa notablemente en relación con el sistema sin alcohol.

De esta información, es claro que la etapa (d) conlleva a un nuevo fenómeno, producido por alcoholes muy lipofílicos.