One-sided commitment

2.3.1 Materiales y Métodos

Los estudios de comportamiento fueron realizados en túnel de viento para evaluar y corroborar la respuesta del macho a la conducta de llamado de hembras vírgenes encontrada en los ensayos realizados en laboratorio anteriormente. El túnel de viento cuenta con 4 componentes que funcionan en conjunto: el túnel de acrílico, el sistema de filtros y ventilación, el sistema de luces, y el sistema de extracción (Figura 2 - 9). El túnel está elaborado en acrílico inodoro y mide 2 metros de largo con apertura de cuadrada de 0.65 metros x 0.65 metros. Tiene una compuerta para introducir muestras en el extremo que va contra en sistema de ventilación y una base de acero inoxidable. El flujo de aire fue controlado mediante la consola de control del sistema de ventilación del túnel de viento, programada a una velocidad de 0,30 m/s.

Figura 2 - 9: Túnel de viento empleado en las evaluaciones de comportamiento sexual de

Diatraea saccharalis.

Los ensayos fueron realizados en condiciones controladas de temperatura 25 ºC, 50 % humedad relativa y fotoperiodo 12h Luz: 12h Oscuridad, empleando el fotoperiodo invertido entre la quinta y doceava hora después del inicio de la escotofase. El túnel de viento fue iluminado mediante el uso de lámparas de luz roja (Figura 2 - 10) para no interferir en el comportamiento de los insectos.

Comportamiento sexual Diatraea saccharalis 35

c

Figura 2 - 10: Iluminación del túnel de viento para realizar las evaluaciones.

Los adultos empleados en las evaluaciones provenían de la cría previamente establecida. Los machos y hembras fueron agrupados por edades de uno y dos días. Cinco hembras de la misma edad fueron confinadas en un cilindro de plástico con malla (10 x 20 cm de diámetro y longitud) las cuales fueron ubicadas dentro del túnel de viento frente a la entrada de aire (fuente), mientras que los machos fueron individualizados en tubos de vidrio con los dos extremos abiertos y situados en el mismo sentido cerca a la apertura cuadrada del túnel (Figura 2 - 11).

Figura 2 - 11: Evaluación de la respuesta de machos en túnel de viento. Plataforma de

liberación

♂

Jaula con

♀

36 Comportamiento sexual Diatraea saccharalis Conducta de llamado de hembras de Diatraea saccharalis

Se evaluó la respuesta de 15 machos de cada edad, realizando las siguientes combinaciones: ♂dos días ♀ un día, ♂ dos días ♀ dos días, ♂ un día ♀ dos días y ♂ un día ♀ un día. Adicionalmente, se realizaron bioensayos de control utilizando jaulas de plástico sin hembras (n = 10 por cada edad de los machos). En cada bioensayo, los machos eran liberados individualmente en el extremo del túnel.

Cada macho fue observado durante 10 minutos, registrando su comportamiento en respuesta a la conducta de llamado de las hembras. La evaluación finalizaba cuando el macho respondía al llamado y lograba llegar a la jaula con hembras o si el macho no mostraba ninguna respuesta durante los 10 minutos, si el macho no podía volar o si la hembra interrumpía el llamado realizando la retracción de la glándula sexual.

Para determinar la respuesta de los machos en túnel de viento, se implementó un diseño completamente al azar con cuatro tratamientos, tres repeticiones y cinco parejas por repetición. Para el análisis de los datos de esta variable, se usaron modelos lineales generalizados, tomando como funciones la distribución binomial y la función de enlace logit. Para determinar diferencia de medias entre edades respecto a la variable de respuesta, se realizó una comparación de LSD Fisher (p < 0,05), con corrección de Bonferroni. Todos los análisis se hicieron usando el software estadístico R, versión 3.6.0.

2.3.2 Resultados y Discusión

Se estudió la respuesta de machos vírgenes de D. saccharalis en túnel de viento, observando que el acto principal que desencadena los demás eventos es el conocido como llamado, dónde las hembras realizan la exposición de la glándula, mientras se mantienen inmóviles para iniciar la liberación de la feromona sexual, como estímulo para atraer al macho, acompañado de un movimiento rítmico de las antenas. En respuesta a este estímulo el macho agita las antenas y las alas, realiza la exposición del aparato genital e inicia el desplazamiento en búsqueda de la fuente del estímulo.

Comportamiento sexual Diatraea saccharalis 37

Posterior a la activación se observó que el macho inicia su desplazamiento caminando o por medio de vuelo dirigido o aleatorio, reposa en las paredes o en la base del túnel, inicia nuevamente el vuelo y finalmente aterriza en la jaula dónde se encuentran confinadas las hembras (fuente de estímulo).

De acuerdo con el análisis de comparación de medias, la mayor proporción de machos que respondió al estímulo fue para la combinación ♂un día ♀ un día con un 80% de respuesta, seguido por el grupo ♂ un día ♀ dos días con un 40%; los menores porcentajes de respuesta observados fueron para las parejas ♂dos días ♀ dos días y ♂ dos días ♀un día con valores de 7% y 27% respectivamente (Figura 2 - 12).

En los controles evaluados (machos sin hembras) no se encontró respuesta, lo cual indica que no se encontraban contaminantes que pudieran alterar el comportamiento de los machos en el túnel de viento. Los datos obtenidos coinciden con los encontrados en el anterior ensayo, confirmando que son los adultos de un día de edad los más activos, y que desde el primer día de emergencia cuentan con la madurez sexual necesaria para llevar a cabo la copula.

* Comparación de medias LSD Fisher. Medias con una letra común no son significativamente diferentes (p < 0.05).

Figura 2 - 12. Gráfico de comparación de medias para la variable respuesta de machos de

D. saccharalis al estímulo liberado por hembras vírgenes (feromona sexual) en túnel de

viento. B B AB A 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 ♂2d ♀1d ♂2d ♀2d ♂1d ♀2d ♂1d ♀1d R esp ue st a de m ach os

38 Comportamiento sexual Diatraea saccharalis Conducta de llamado de hembras de Diatraea saccharalis

Una de las estrategias que puede ser empleada en los planes de manejo integrado de insectos plaga, es la manipulación del comportamiento reproductivo. El uso de la comunicación química entre machos y hembras puede ser empleado inicialmente para monitorear la población, y posteriormente disminuirla a través de la captura interfiriendo en la cópula y disminuyendo su progenie (Unnithan y Paye, 1991). Los ensayos realizados en túnel de viento permiten inferir que las estrategias de manejo deben ir enfocadas al manejo y control de adultos de un día de edad pues, son estos los que presentaron mayor actividad, al observar un alto porcentaje de machos que respondieron al estímulo liberado por la hembra.

Según los resultados reportados por Leyton-Flor et al., (2018) dónde indican que la plaga se distribuye de forma agregada y su colonización inicia en los bordes de los lotes, el uso de trampas con feromonas o con hembras vírgenes para atraer machos podría ser empleada como una estrategia que permita disminuir las poblaciones en campo, esto permitiría tener una mayor atracción de machos de un día de edad puesto que según los resultados obtenidos en este ensayo son los más activos y se esperaría fuera la población mayormente atraída a las trampas de captura.

Los estudios realizados en túnel de viento asemejan las condiciones de campo donde la hembra libera la feromona sexual para atraer el macho y esta es dispersada en el ambiente en una pluma de olor, hasta llegar como estímulo al macho. Es necesario realizar más estudios para evaluar el efecto de este comportamiento en la reproducción, puesto que en condiciones de campo se presentan factores que pueden afectar el comportamiento (precipitaciones, humedad relativa, radiación solar, temperatura, viento, presión atmosférica etc.) influyendo en las interacciones inter e intraespecíficas. Al respecto, Pellegrino et al., (2013) evaluaron el efecto de la presión atmosférica en el comportamiento de cópula de Diabrotica speciosa Germar, 1824, Pseudaletia unipuncta (Haworth, 1809) y

Macrosiphum euphorbiae Thomas, 1878, observando que las especies evaluadas

mostraron modificaciones comportamentales, interespecíficas relacionadas con la capacidad de vuelo y la periodicidad de la cópula.

Pec et al., (2018) estudiaron el rango de dispersión de D. crambidoides empleando trampas de feromona sexual en cultivos de caña de azúcar en Guatemala, logrando establecer que el rango de dispersión de los machos es de aproximadamente 53,8 metros por día. Qureshi

Comportamiento sexual Diatraea saccharalis 39

et al., (2006) evaluaron la dispersión de adultos marcados de D. grandiosella en cultivos

de maíz, indicando que el 90% de adultos fue recapturado dentro de los 300 m cercanos al punto de liberación, los autores sugieren que la dispersión de adultos en campo puede ser mayor a la observada en el estudio gracias a las zonas de refugio presentes en los bordes del cultivo y a la diferencia de edades y subpoblaciones que pueden existir entre los adultos liberados y los nativos.