3.7 Data Collection
3.7.1 Researcher Field Notes
Se recomienda para posteriores estudios pedir pruebas de estabilidad al fabricante de los desinfectantes usados en el laboratorio de Indicadores de Calidad de Aguas y Lodos de la Pontificia Universidad Javeriana con el fin de tener certeza sobre calidad de los agentes químicos y comprobar sus propiedades.
Hacer un muestreo de ambientes y superficies mensualmente, para comprobar si hay una reducción de la carga microbiana presente en las áreas y superficies del laboratorio.
Si se alteran las condiciones ambientales del laboratorio es importante hacer la revalidación de los desinfectantes utilizados con el fin de verificar su efectividad teniendo en cuenta concentraciones y tiempos de acción.
43
10. BIBLIOGRAFÍA
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45
ANEXOS
Anexo 1. ROTACIÓN DE DESINFECTANTES 2013- 2014
MES
BIOENSAYOS
BACTERIAS Y
VIRUS
PARASITOLOGÍA
ENERO
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
FEBRERO
Desinfloor 0.25%
Desinfloor 0.50%
Desinfloor 0.50%
MARZO
Hipoclorito3.125%
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
ABRIL
Fagetriald0.25%
Fagetriald 0.50%
Fagetriald 0.50%
MAYO
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
JUNIO
Desinfloor0.25%
Desinfloor 0.50%
Desinfloor 0.50%
JULIO
Hipoclorito3.125%
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
AGOSTO
Fagetriald0.25%
Fagetriald 0.50%
Fagetriald 0.50%
SEPTIEMBRE
Hipoclorito3.125%
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
OCTUBRE
Desinfloor0.25%
Desinfloor 0.50%
Desinfloor 0.50%
NOVIEMBRE
Hipoclorito3.125%
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
DICIEMBRE
Fagetriald0.25%
Fagetriald 0.50%
Fagetriald 0.50%
MES
BIOENSAYOS
BACTERIAS Y
VIRUS
PARASITOLOGÍA
ENERO
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
FEBRERO
Fagetriald 0.25%
Fagetriald 0.50%
Fagetriald 0.50%
MARZO
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
ABRIL
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
MAYO
Desinfloor 0.25%
Desinfloor 0.50%
Desinfloor 0.50%
JUNIO
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
JULIO
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
AGOSTO
Fagetriald 0.25%
Fagetriald 0.50%
Fagetriald 0.50%
SEPTIEMBRE
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
OCTUBRE
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
NOVIEMBRE
Desinfloor 0.25%
Desinfloor 0.50%
Desinfloor 0.50%
DICIEMBRE
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
MES
BIOENSAYOS
BACTERIAS Y
VIRUS
PARASITOLOGÍA
ENERO
Desinfloor 0.25%
Desinfloor 0.50%
Fagetriald 0.50%
FEBRERO
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
MARZO
Desinfloor 0.25%
Desinfloor 0.50%
Fagetriald 0.50%
ABRIL
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
MAYO
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
JUNIO
Fagetriald 0.25%
Fagetriald 0.50%
Desinfloor 0.50%
JULIO
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.15%
AGOSTO
Fagetriald 0.25%
Fagetriald 0.50%
Desinfloor 0.50%
SEPTIEMBRE
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
OCTUBRE
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
Hipoclorito 3.125%
NOVIEMBRE
Desinfloor 0.50%
Desinfloor 0.50%
Desinfloor 0.50%
46
Anexo 2. Tabla del recuento en superficie de los 14 puntos de muestreo, por medio del método horizontal antes y después de la limpieza y desinfección con HIPOCLORITO DE SODIO
recuento en superficie por medio del método horizontal Recuento de microorganismos en agar nutritivo
Puntos de muestreo
P1 P 2 P 4 P 6 P 7 P 8 P 10 P 11 P 12 P13 Antes de LyD Mesófilos
UFC UFC UFC UFC UFC UFC UFC UFC UFC UFC Antes LyD Mesófilos
1 44 110 5 2 188 13 10 1 8 Antes L y D Mesófilos
recuento en superficie por medio del método horizontal
Recuento de microorganismos en agar nutritivo después de la limpieza y desinfección
Puntos de muestreo
P1 P 2 P 4 P 6 P 7 P 8 P 10 P11 P12 P13 Después Ly D Mesófilos
UFC UFC UFC UFC UFC UFC UFC UFC UFC UFC Después L y D Mesófilos
0 3 2 5 3 11 2 7 0 0 Después L y D Mesófilos
recuento en superficie por medio del método horizontal
Recuento de microorganismos en agar Mac conkey
Puntos de muestreo
P1 P 2 P 4 P 6 P 7 P 8 P 10 P 11 P 12 P13 Antes de LyD Coliformes fecales y
totales UFC UFC UFC UFC UFC UFC UFC UFC UFC UFC Antes LyD Coliformes
fecales y totales 0 2 174 X108 1 0 12 4 8 0 0 Antes L y D Coliformes fecales y totales
47
recuento en superficie por medio del método horizontal
Recuento de microorganismos en agar macconkey después de la limpieza y desinfección
Puntos de muestreo
P1 P 2 P 4 P 6 P 7 P 8 P 10 P11 P12 P13 Después Ly D Coliformes fecales y
totales UFC UFC UFC UFC UFC UFC UFC UFC UFC UFC Después L y D Coliformes
fecales y totales
0 0 0 0 0 7 0 2 0 0 Después L y D Coliformes fecales y
totales
recuento en superficie por medio del método horizontal
Recuento de microorganismos en agar Sabouraud
Puntos de muestreo P1 P 2 P 4 P 6 P 7 P 8 P 10 P 11 P 12 P13 Antes de LyD Hongos colonia Coloni a
Colina colonia colonia Colonia colonia Colonia colonia colonia Antes LyD Hongos
1 1 2 0 2 2 2 2 1 1 Antes L y D Hongos
recuento en superficie por medio del método horizontal
Recuento de microorganismos en agar sabouraud
Puntos de muestreo
P1 P 2 P 4 P 6 P 7 P 8 P 10 P 11 P 12 P13 Antes de LyD Hongos
colonia Colonia colonia colonia colonia colonia colonia colonia colonia colonia Antes LyD Hongos
48
Anexo 3.Tablas del Resultado del recuento de microorganismos mediante Método de sedimentación en placa.
método de sedimentación
Recuento de microorganismos en agar nutritivo Puntos de muestreo
P 3 P5 P9 P 14 Antes Ly D Mesofilos
UFC UFC UFC UFC
5 6 2 8 Antes L y D Mesófilos
método de sedimentación
Recuento de microorganismos en agar nutritivo Puntos de muestreo
P 3 P5 P9 P 14 después Ly D Mesofilos
UFC UFC UFC UFC
4 3 0 4 Después Ly D Mesófilos
método de sedimentación
Recuento de microorganismos en agar sabouraud Puntos de muestreo
P 3 P5 P9 P 14 Antes Ly D microorgan ismos colonias colonias colonias colonias
1 1 1 2 Antes L y D Hongos
método de sedimentación
Recuento de microorganismos en agar sabouraud Puntos de muestreo
P 3 P5 P9 P 14 después Ly D Microorgani smos colonias colonias colonias Colonias hongos
49
ANEXO 4. Resultados de la parte estadística NormalidadEn la tabla 4 se observan los test de normalidad aplicados a los residuales que utilizan la hipótesis nula de que la distribución es normal vs que no es normal. En todos los casos el p valor fue menor a 0.05 lo que rechaza la hipótesis nula, es decir, la distribución de los residuales no es normal.
Tabla 4. Test de normalidad para los residuales Test Estadístico P valor
ShapiroWilk W 0.17551 Pr < W <0.0001 ShapiroWilk D 0.462963 Pr > D <0.0100 Cramer von Mises 34.89888 Pr > W-Sq <0.0050 Anderson Darling 162.6986 Pr > A-Sq <0.0050
En la gráfica 1 se ve el QQ plot que contrasta la distribución de los residuales con la distribución normal esperada, si el ajuste fuese perfecto esperaríamos una línea roja idéntica a la azul, pero en este caso se ve que la distribución de los residuales tiene colas más delgadas que la distribución normal.
2 1 0 -1 -2 99,9 99 95 90 80 70 60 50 40 30 20 10 5 1 0,1 RESID P o rc e n ta je Media 7,500904E-14 Desv .Est. 0,2417 N 486 A D 162,689 Valor P <0,005
Gráfica de probabilidad de RESID Normal - 95% de IC
Figura 1. QQ plot para los residuales del GLM No correlación
La no correlación de los residuales se puede ver en el gráfico 2, ya que no se presenta ningún patrón definido cuando el ajuste crece.
50
100 80 60 40 20 0 2 1 0 -1 -2 INHIBICION R E S IDGráfica de dispersión de RESID vs. INHIBICION
Grafica 2. Diagrama de dispersión para los residuales vs ajustados Homoceasticidad
Para probar la homoceasticidad (varianza igual) de los residuales se utilizan frecuentemente dos test, el de Bartlett y el de Levene, el primero usa la distribución chi cuadrado y el segundo la Fisher. La hipótesis nula es vs la hipótesis alternativa . Cada test por su parte rechazo este supuesto con un p- valor menor a 0.05. En la tabla 5 se observan los resultados del test de Bartlett y en la tabla 6 del test de Levene.
51
ANEXO 5. Figuras del porcentaje de inhibición de los diferentes microorganismos aislados e identificados frente a los 4 desinfectantes validados
HIPOCLORITO DE SODIO ENFRENTADO A LOS DIFERENTES MICROORGANISMOS
DESINFECTANTE CONCENTRACIONES Escherichia coli cepa de referencia 3.125% 6.25% 12.5 % Escherichia coli cepa Pseudomonas sp. cepa de referencia Pseudomonas sp. cepa nativa Pstaphylococcus aureus cepa de referencia Pstaphylococcus aureus cepa nativa
Bacillus subtillis cepa de referencia
Bacillus subtillis cepa nativa
52
NEW FAGETRIALD ENFRENTADO A LOS DIFERENTES MICROORGANISMOS
DESINFECTANTE CONCENTRACIONES Escherichia coli cepa de referencia 0.25% 0.50% 1 % Escherichia coli cepa nativa Pseudomonas sp. cepa de referencia Pseudomonas sp. cepa nativa Pstaphylococcus aureus cepa de referencia Pstaphylococcus aureus cepa nativa
Bacillus subtillis cepa de referencia
Bacillus subtillis cepa nativa
53
NEW DESINFLOOR ENFRENTADO A LOS DIFERENTES MICROORGANISMOS
DESINFECTANTE CONCENTRACIONES Escherichia coli cepa de referencia 0.25% 0.50% 1 % Escherichia coli cepa nativa Pseudomonas sp. cepa de referencia Pseudomonas sp. cepa nativa Pstaphylococcus aureus cepa de referencia Pstaphylococcus aureus cepa nativa
Bacillus subtillis cepa de referencia
Bacillus subtillis cepa nativa
54
TEGO 51 ENFRENTADO A LOS DIFERENTES MICROORGANISMOS
DESINFECTANTE CONCENTRACIONES Escherichia coli cepa de referencia 0.25% 0.50% 1 % Escherichia coli cepa nativa Pseudomonas sp. cepa de referencia Pseudomonas sp. cepa nativa Pstaphylococcus aureus cepa de referencia Pstaphylococcus aureus cepa nativa
Bacillus subtillis cepa de referencia
Bacillus subtillis cepa nativa
55
Penicillum sp cepa nativa promedio de las 3 replicas
DESINFECTANTES CONCENTRACIONES 0.25% 0.50% 1% FAGETRIALD DESINFLOOR TEGO 51 HIPOCLORITO DE SODIO
Aspergillus flavus cepa nativa promedio de las 3 replicas
DESINFECTANTES CONCENTRACIONES 0.25% 0.50% 1% FAGETRIALD DESINFLOOR TEGO 51 HIPOCLORITO DE SODIO