Three Ways of Working.

El río Palmar nace en el municipio de Choachí, específicamente en el Parque Ecológico Natural Matarredonda a los 3.500 msnm, luego de un recorrido de 30.5 km entregando sus aguas al río Negro a la altura de 1.360 msnm (Universidad Militar Nueva Granada, 2009) Durante su recorrido recibe las aguas de las quebradas El Molino, Idaza, Funia, Colorada, Los Chochos, del Salitre, San Pedro – Felipe, Cenicero, del Michiga, Blanca, del Chamizal, del Buitre y del Salteador (Pinto y Pinzón, 2014). La importancia de este río se evidencia principalmente en el municipio de Ubaque donde la extensión del río ocupa cerca 95% del territorio municipal, además, es la principal fuente abastecedora de agua, sin embargo, este río está sufriendo las consecuencias de las malas prácticas agropecuarias y otras actividades antrópicas como la deforestación con el fin de ampliar la frontera agrícola, adicional a esto, la cabecera municipal no cuentan con un planta de tratamiento de aguas residuales, por lo que las aguas producidas por actividades domésticas e industriales, así como las generadas por los mataderos que existen en municipio van directamente al río sin ser tratadas previamente (Universidad Militar Nueva Granada, 2009). Aunque se tienen pocos estudios en la zona que soporten el estado de la calidad del agua, se le atribuye en gran medida que las enfermedades y el deterioro de la salud humana son por causa de la baja calidad de la misma debido a los vertimientos que se realizan y a la falta de monitoreo por parte de las autoridades ambientales competentes (Pinto y Pinzón, 2014).

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2. METODOLOGÍA 2.1. Área de estudio.

Para el desarrollo de esta investigación se seleccionaron tres zonas a lo largo del río Palmar, que acabaron el nacimiento y la desembocadura, el criterio de selección de las zonas trabajabas se basó en que estas tuvieran una diferencia altitudinal de por lo menos 1000 metros de altura entre cada una de ellas y que además, las densidades de vegetación ribereña y geomorfología de las zonas fueran diferentes.

44 La primera zona corresponde al Parque Ecológico Natural Matarredonda ubicado a 4° 33’ 13,6” latitud norte y 74° 00’ 20,3” longitud oeste en el en el municipio Choachí a la altura de 3.294 msnm, la vegetación de esta zona corresponden a bosque alto-andino (Figura 6.) con gran predominación de tapetes de musgo y líquenes. La segunda zona, fue en el municipio de Ubaque a 4°48’03,49” latitud norte y 74° 94,2’11.6” longitud oeste a la altura de 1.958 msnm (Figura 7), y por último, la tercera zona corresponde al municipio de

Guayabetal a 4° 20’ 69,14” latitud norte y 73° 74’ 76” longitud oeste a un altura de 1.090 Figura 5. Área de estudio.

Río Palmar

Río Negro

Parque Ecológico Natural Matarredonda

Municipio de Ubaque

45 msnm, la formaciones vegetales de esta dos últimas zonas se caracterizó por la presentación de vegetación ribereña (Figura 8). Esta investigación se desarrolló en los meses de septiembre de 2018 a febrero de 2019 dentro de los cuales se llevaron a acabo 3 muestreos que comprendiente el periodo seco.

2.2. Fase de campo.

En cada zona se seleccionó un transecto de cien metros que fuera lo más representativo del río y que no presentara indicios de haber sufrido alguna perturbación natural o inducida reciente, que pudiera haber alterado sus características fisicoquímicas y biológicas normales. Este transecto se dividió en diez estaciones, en cada una de ellas se emplearon dos métodos cuantitativos para la captura de los individuos, con el fin de abarcar mayor cantidad de hábitats y poder contribuir al análisis de riqueza y abundancia. El primero método corresponde a una red tipo “D” con un diámetro de 30 cm y una apertura de ojo de malla de 500 micras (Figura 9A.) la cual se utilizó en las zonas de mayor profundidad, removiendo con los pies el sustrato situado en los 0,5 m cercanos a la boca de la red, este proceso se repitió hasta completar un barrido en toda la estación. El segundo método, consistió en una red Surber (Figura 9B.) de 900 cm2 empleada en la zonas del litoral, donde se colocó la red sobre el fondo de la corriente y con ayuda de las manos se removió el sustrato del fondo. El material obtenido en cada uno de los métodos se lavó con abundante agua sobre tres tamices de 2.0, 0.80 y 0.30 micras (Figura 9C.) con el objetivo de retirar las piedras, hojarasca y materia orgánico que pueda dañar los individuos durante su trasporte, además de facilitar el proceso de separación en el laboratorio, posteriormente, todo el contenido en el tamiz se guardó en bolsas con cierre hermético debidamente rotuladas preservadas con alcohol al 97%, finalizado este proceso se empaco cuidadosamente cada bolsa en una nevera de icopor para su transporte.

Se obtuvieron 20 muestras por zona, 10 realizadas por cada método, lo que da como resultado un total de 60 muestras, a cada una de ellas se les asignaron un código que referenciaba la zona de muestreo, método de captura y número de muestra, todo esto para realizar los análisis posteriores.

46 Adicionalmente, en cada estación se llevaron a cabo la toma de parámetros fisicoquímicos para conductividad, pH, oxígeno disuelto, temperatura, sólidos totales disueltos, salinidad, resistividad y turbiedad, así como algunos datos ambientales como presión barométrica y temperatura ambiente, los cuales se realizaron con la ayuda de una sonda YSI*Model 556 (Figura 10.). Estos parámetros fueron tomados antes de iniciar la captura de los individuos, con el fin de no modificar o alterar las condiciones iniciales del agua, ya que estos pueden verse gravemente afectos al remover los sustratos y rocas del fondo. Por último se llevó a cabo una caracterización de los rasgos físicos más relevantes como la dimensión del curso y caudal, por medio de mediciones de longitud, ancho, velocidad y profundidad, basándose en los métodos de Darrigran, y colaboradores (2007).

Finalmente, para hallar el área muestreada se utilizaron los cálculos propuestos por la confederación hidrológica del Ebro (2008) donde establecen las directrices para la toma de muestras de invertebrados bentónicos. Estos cálculos consisten en multiplicar el área de la tipo “D” (0.15m2) por 20 “Kicks” o barridos hechos en 100 metros, para el caso de esta investigación se realizaron 10 barridos en 100 metros los que da un área muestreada de 1.5 m2 para la tipo de “D” y para el caso de red Surber es necesario multiplicar el área de la trampa que es de 900 cm2 (0.09 m2) por el número de veces que se haya realizado, en este caso fueron 10 veces (una por cada estación), lo que nos da un área de muestreo de 0.9 m2, al sumar las áreas de la tipo D y la red Surber, nos da un área muestreada total de 2.4 m2, muy cercana a la propuesta por el Ebro (2008) que es de 2.5 m2 por cada zona que se desea estudiar para una obtener una representatividad optima de la fauna del sitio.

47 Figura 6. Parque Ecológico Natural Matarredonda. A. Quebrada; B. Tapetes de musgo; C- D. Zona pedregosa.

48 Figura 8. Guyabetal. A. Cascada; B. Bosque ripario; C. Quebrada.

Figura 9. Métodos de muestreo. A. Red tipo “D”; B. Red Surber; C. Tamizaje de las muestras.

49 Figura 10. Cuantificación de parámetros fisicoquímicos in situ.

2.3. Fase de laboratorio.

El proceso de separación, limpieza y preservación de las muestras biológicas se llevó a cabo en el laboratorio de entomología del grupo de investigación en artrópodos Kumangui de la Universidad Distrital Francisco José de Caldas, utilizando un estereoscopio ZEISS Stemi 2000-C, donde se empleó una cuchara para sacar parte del material contenido en las bolsas y depositarlo en un recipiente de fondo blanco que permito la observación y extracción de los individuos, los cuales fueron separados inicialmente por órdenes y familias teniendo en cuenta el estadio adulto y larval en viales de vidrio de tapa blanca con alcohol al 97 % y rotulados con una etiqueta temporal elaborada a mano que identifica el código que relaciona el método de muestreo, el número de la muestra y el nivel taxonómico (Figura 11A.)

La determinación taxonómica se realizó hasta el nivel de morfoespecie teniendo en cuenta los caracteres morfológicos diagnósticos para cada grupo descritos en la bibliografía, apoyándose en claves taxonómicas especializadas como los de Roldán, (1996), Merritt y colaboradores (1996), Domínguez y Fernández (2009), Flowers y de la Rosa (2010), Springer (2010), Ramírez (2010), Hamada y colaboradores (2014) y Hamada (2018). Para la observación detallada de las estructuras se utilizó un estereoscopio Motic SMZ 17. Algunos grupos requirieron extracción y aclaración de piezas del aparato bucal y capsula cefálica, para lo cual se utilizó agujas entomológicas y tubos eppendorf para la disección de la estructura deseada, posteriormente esta se sumergió en KOH al 10% sometido a baño de maría por aproximadamente 20 a 30 minutos dependiendo del grado de esclerotización de las estructuras, finalizado este proceso las piezas fueron montadas y observadas con ayuda de un microscopio ZEISS (Figura 11B.). Todo esto permitió detallar la organización de los dientes del mentón y el número de setas y dentículos presentes en los tarsos, caracteres clave para la determinación taxonómica interespecífica de los grupos. Los especímenes fueron

50 Figura 11. Curaduría de las muestras biológicas; A. Separación y etiquetaje de las muestras;

B. Extracción y aclaración de estructuras; C. Toma de fotografías con Estereoscopio de cámara Zeiss KL 200.

corroborados por la especialista Neusa Hamada, doctora del Instituto Nacional de Pesquisa da Amazonia (INPA) en Manaos, Brasil en cooperación a su grupo de investigación en insectos acuáticos.

El registro fotográfico se realizó por medio de un estereoscopio de cámara Zeiss stemi 2000 - C (Figura 11C.) utilizando el software Axio-vision 7.0 y editadas en el programa Combine Z5.3 Updted 2006, con el fin de obtener imágenes detallas de las estructuras de importancia taxonómica, las cuales fueron enviadas a la especialista para su respectiva corroboración.

Finalmente el material fue almacenado en alcohol al 97% en la colección de Artrópodos y otros Invertebrados de la Universidad Distrital CAUD siguiendo el protocolo de registro y reemplazando la etiqueta provisional hecha a mano por una impresa en la que aparecen consignados los datos exigidos por la colección.

2.4. Análisis de resultados.

Los datos obtenidos en las fases de campo y de laboratorio fueron organizados y digitalizados en dos tablas dinámicas, utilizando el programa Excel. En la primera tabla se depositaron los

51 taxones obtenidos con sus respectivas abundancias, separados por zona y método de muestreo y en la segunda, se colocaron los valores de cada parámetro fisicoquímico evaluado.

Con base en los datos obtenidos y consignados en tablas dinámicas, se realizó una curva de acumulación de especies mediante los estimadores no paramétricos Chao1 y Chao2, Singlentos y Doublentons, utilizando el software libre Estimates 9.1 (Colwell et al., 2012). Posterior a esto, se calcularon las abundancias relativas y totales y se efectuaron análisis de diversidad con el estimador de Shannon, dominancia de Simpson y equitatividad de Pielou, también se llevaron a cabo análisis multivariados tales como: Análisis de Componentes Principales (ACP), Análisis de Correspondencia Múltiples (ACM) y Análisis de Correspondencias Canónicas (ACC) para establecer la asociación de la entomofauna acuática a las zonas y a las variables fisicoquímicas estudiadas, y finalmente un análisis cluster de Similitud, un escalamiento multidimensional nMDS y un ANOSIM en una sola vía bajo el estimador Bray-Curtis empleando el software Past, versión 3.18 (Colwell, 2013).

Por último, se realizó un análisis de varianza no paramétrico con la prueba de Kruskal-Wallis mediante el programa R-proyect versión 3.6.1. para observar si existen variaciones en los parámetros fisicoquímicos encontrados en cada zona.

3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

A continuación se presentan los resultados obtenidos con su respectiva discusión, a partir de análisis de tablas y graficas generadas en los diferentes programas y teniendo en cuenta el orden ascendente de los objetivos propuestos, de igual forma, se añade un apartado exclusivo para los registros nuevos en el departamento de Cundinamarca junto con la revisión bibliográfica y la discusión correspondiente.

52 Figura 12. Valor promedio, máximo y mínimo de los parámetros fisicoquímicos obtenidos para el río Palmar, Cundinamarca. A. Temperatura del agua; B. pH; C. Turbiedad; D. Oxígeno disuelto.