A B S T
R
A
C
T
B
i
od i
e s el
, a n al k y
l
e st
e r of
p l
a nt
oi l
st
h
at
c a nb
e u s ed i
n a n u nm
od
i f
i ed
d i
e s el
e ng
i
n e,i
st
h
efi
r st
r e n ew
ab l
ed i
e s el f i
iel
al
t
e r nat
i
v et
o sh
ow
si g
n s of b
e c om
i
ng
a c om
m
e r ci
al ly
a c c e
p
t
ed p
a rt
of
o u r n at
i
o n's e n e r
g y i
nf
r a st
r u ct
u r e.F
o rt
r ad i
t
i
o n al d i
e s el f
u el
e xh
a u st
,i
t
h
a sb
e e nd
em
o n st
r at
ed
t
h
at t
h
ep
a rt
i
c ul
at
em
at t
e r(
P
M )
o rg
a ni
c c om p
o n e nt
sp l
ay
a r ol
ei
n a c ut
ei
nf l
am m
at
o ry
r e a ct
i
o n s.H
ow
e v e r,t
h
el i
t
e r at
u r e of f
e r s o nl y
af
ew
cy
t
ot
o xi
ci
t
y
a nd
m
ut
ag
e ni
ci
t
y
st
ud i
e s o nb
i
od
i
e s el
em
i
s si
o n s.N
o a c ut
eh
e al
t
h
ef
f
e ct
s st
ud i
e st
od
at
ep
r o vi d
ec
l
e a r a nd
s ub
st
a nt
i
at
ed
e vi d
e n c et
h
at
e xp
o s u r et
ot
h
e o rg
a ni
cf
r a ct
i
o n of b i
od i
e s el
e xh
a u st
i
nd
u c e sl
u ng
ef f
e ct
sd i
f f
e r e nt
f
r om
t
h
e ef f
e ct
sp
r od
u c ed b
y p
et
r ol
e um
d i
e s el
.I
nt
h i
s st
ud y
,B E A S
-
2 B
, a
t
ra n sf
o rm
ed h
um
a n ai
rw
ay
ep i
t
h
el i
al
c el l l i
n e,w
a s e xp
o s ed
i
n vi
t
r ot
ot
h
eP
M
o rg
a ni
c e xt
r a ct
sf
r om
S
t
a nd
a rd R
ef
e r e n c eM
at
e ri
al
(
S RM
)
1 9 7 5
, s oy
et
h y l
e s
t
e r(
SE E
)
, s oy
m
et
h y l
e st
e r(
S
M
E
)
, a nd p
et
r ol
e um d
i
e s el
,f
o r2 4
h
o u r s.T h
i
s st
ud
y
d
em
o n st
r at
ed
t
h
at t
h
e o rg
a ni
c e xt
r a ct
s of b i
od i
e s el P
M
i
n a n aq
u e o u s s ol
ut
i
o n c a nm
od
ul
at
et
h
e r el
e a s e of p
r oi
nf l
am m
at
o ry
cy
t
ok i
n e sb y
ep i
t
h
el i
al
c el l
s.B i
od i
e s el
e xt
r a ct
sw
e r em
o r ep
ot
e nt
i
nf l
am m
at
o ry
st
i m
ul
a nt
st
h
a nt
h
e o rg
a ni
c e xt
r a ct
s of
t
w
od i
e s el P
M
s am
p l
e s o n am i
c r og
r am
P
M
eq
ui
v al
e nt
p
e rm
l
(
|
ag P
M
eq /
m
l
)
b
a si
s.T h
ed
o s e r a ng
et
e st
ed
w
a s n ot
c
y
t
ot
o xi
c.I
t
w
a s al
s o n ot
ed
t
h
at t
h
e s ol
v e nt
e x ch
a ng
em
et
h
od
,w h i
ch w
a s u s ed
,m
ay
n ot
b
ea
p p
r op
ri
at
ef
o rt
h
ei
n v e st
i g
at
i
o n of b i
od i
e s el
e xt
r a ct
s,t
h
o ug h i
t
h
a sb
e e n u s ed
e xt
e n si
v el y i
nd i
e s el
r e s e a r ch
.A
v al
u ab
l
e n ew fi
nd i
ng f
r om
t
h
e s e e xp
e ri
m
e nt
si
st
h
at t
h
e s ol
ub l
e o rg
a ni
cf
r a ct
i
o n(
S O F
)
of b i
od i
e s el b
eg i
n st
o el i
ci
t
a cy
t
ok i
n e r e sp
o n s ei
nB E A S
-2 B
c e
l l
s at
ad
o s e of
a
p p
r o xi
m
at
el y 4 0 |
jg P
M
eq /
m
l i
nk
e r at
i
n o cy
t
eg
r ow
t
h
m
ed i
a(
K G
M )
+
0
.2
% d i m
et
h y l
s u
l f
o xi d
e(
D
M
S O
)
.H
ow
e v e r,m
o r e r e s e a r ch
i
s r eq
ui
r ed
t
od
efi
ni
t
i
v el y
ch
a r a ct
e ri
z et
h
eA C
K
N O
W
L E D
G
E
M
E N T
I f i
rst
m
et
m
y
r e s e a r ch
adv
i
s o r,D
r.A
nd y G h i
o,
in
M
a r cli
2 0 0 4 w h
e nI i
nt
e r vi
ew
ed f
o r a st
ud
e nt
c o nt
r a ct
o rp
o sit
i
o n at t
h
eU S E PA
.D
u ri
ng
t
h
ey
e arI w
ork
ed i
nh i
sl
ab
,I
st
um
b l
ed
o nto
at
op i
cth
at
c ap
t
iv a
t
ed
m
e,b i
od i
e s el
.I
t
h
ad
vi
rtu a
l ly
n ot
h i
ng
t
odo
w i
th
A
nd y
' s
s
p
e ci
al
t
y
,i
r o nm
et
ab
ol i
sm
.L
i
k
eA
nd
y
,t
h
o ug h f
o rd
i f f
e r e nt
r e a s o n s,I h
ad
n ai
v el y
a s s um
ed
t
h
ep
r oj
e ct
w
o ul
d b
e c ut
a nd
d
ry
.T
h
el
a st
y
e a r a nd
ah
al f h
a sbe e n
af
a s ci
n at
i
ng
j
o u r n ey
t
hr o u
g h
th
e r e s e a r ch p
r o c e s s.I
c a n n ot
b
eg i
nt
ot
h
a nk y
o uf
o r af f
o rd
i
ng
m
et
h
e op p
o rtu n
i
t
y
t
op
u r s u eth i
s r e s e a r ch
.Y
o u of f
e r ed
m
et
h
e op p
o rt
u nit
y
to
d
i
s c o v e rw
h
oI
am
a s a s ci
e nt
i
st
.I
al
s o e sp
e ci
al l y
w
a nt
t
ot
h
a nk
D
r.M
i
ch
a el
M
ad d
e n a nd
D
r.N
o rm
a nK
ad
of
o rc o o r
d i
n at
in
g
a nd
s up p l y i
ng
t
h
eb i
od i
e s el
e xtr a c
t
s,t
h
e e s s e nt
i
al
c om
p
o n e nt
of
t
h
e r e s e a r ch
.I
g
r e at
l y
ap p
r e ci
at
et
h
ei
r r e ad i
n e s sto
d
i
s c u s s n ot
j
u st
r e s e a r ch
d
e si g
n a nd
t
e ch
ni
c al i
s s u e sb
ut
t
h
eb
i g g
e ri m
p l
i
c at
i
o n s of
t
h
eg
r ow i
ng
b
i
od i
e s el
i
nd
u st
ry
.I
al
s o ow
e ad
eb
i
t
of
g
r at
it
ud
et
ob
oth D
r.L
o ui
s eB
al l
a nd D
r.L
e e n aN
y l
a nde r
-F
r e n ch f
o rt
h
eir
c o n st
a nt
e n c o u r ag
em
e nt
o v e rt
h
el
a st
3 y
e a r s.I
t
h
a nk D
o nG
r af f
,P h
a rm
.D
.,f
o rh
el p i
ng
m
e u nd
e r st
a nd
a nd i
nt
e rp
r et
m
y
r e s e a r c
h d
at
a a nd
M
r s.Ja c
k
i
eS
t
o n eh
e um
e r a nd
M
s.L i
s aD
ai l y f
o rt
h
ei
rte c
h
ni
c al
e xp
e rt
i
s ea n
d
e xt
r a o rd
i
n a ry p
at
ie n c e
h
el p
i
ng
m
ed
e v el
op m y
r e s e a r ch
e xp
e ri m
e nt
s.T h
r o ug h
t
h
ep
ow
e r of
e-m
a
i l
c om m
u ni
c at
io n
,t
h
ef
ol l
ow i
ng
i
nd i
vi
d
u al
s,w h
oh
a v e e a ch p l
ay
ed
a ni
m
p
o rta n
t
p
a rt
i
nb
i
od i
e s el
r e s e a r ch
,g
r a ci
o u sl y
r e sp
o nd
ed
t
o al l
m
y q
u e st
i
o n s :J
u rg
e nB
i i
ng
e r,M
D
, c u r r e nt
l y
at
B G F A
,R
e s e a r ch
f
o rH
e alt
h P
r ote c
t
i
o n at th
eWo r
k p l
a c e,i
nB
o ch
um
,G
e rm
a ny f
o rk i
nd l y p
r o vi d
ed
a c op y
of h i
sp
ap
e r s;
D
a vi d K
o r ot
n ey
,E PA
c o nt
a ct
f
o rt
h
eD
r aft
T
e ch
ni
c al R
ep
o rt
"A C
om
p
r eh
e n si
v eA
n aly
si
s of B i
od i
e s el I
m
p
a ct
s o nE
xh
a u st
E
m
i
s si
o n s"f
o rh
elp i
ng
m
e u nd
e r st
a nd i
ng
t
h
e r e s ult
s of
t
h
ei
r a n al y
si
s;
D
rW
ol f g
a ng R
od i
ng
e r,H
e ad
of F
ed
e r al A g
e n cy
of
W
at
e rM
a n ag
em
e nt
-In s
t
i
tu
t
ef
o rW
at
e rQ
u al i
t
y i
nV i
e n n a,A
u st
ri
af
o rd
i
s c u s si
ng h
i
s e c ot
o xi
c ol
og i
c al f i
nd
i
ng
of
b i
od i
e s el f
u el
;
D
r.G
e rh
a rd
K
n ot
h
e,U S D A
/
A R S
/ N
C A U R
,f
o rp
r o vi
d
i
ng
m
e a v e ry
ob
s c u r ep
at
e nt
ap
p
l i
c at
i
o nf
o rb i
od i
e s el
p
r od
u ct
i
o na n
d
a v al
u ab
l
el
i
st
of
r ef
e r e n c e s;
P
o n a sP
o vi l
a sM
a rt
in
k
u s,d
o cto r a
l
st
ud
e nt
at
K
l
ai
p
ed
aU
ni
v e r si
t
y
,S
cho o
l
of
M
a rit
i
m
eT
e ch
n ol
og y
D
ep
a rt
m
e nt
of
T
e ch
n ol
og i
c al
P
r o c e s s e si
nK l
aip
ed
a,L i
th
u a ni
af
o rd i
s c u s si
ng h i
sw
o rk
o nt
h
eb i
od
eg
r ad
ab i l i
t
y
of
b
i
od i
e s el f
u el
.T h
e o ut
c om
e of
t
h i
sp
r oj
e ct
w
a sg
r e at
l y
e nh
a n c ed
b
y
a s si
st
a n c ef
r om
t
h
ef
ol l
ow i
ng
i
nd
iv
i d
u al
s :M
r.M
i
ch
a el
C
um m
i
ng
s,E PA
l
i
b
r a ri
a n ,w h
om
ad
ep
o s si b l
et
h
e r e ad i
ng
m
at
e ri
al
sI
n e ede
d
t
op
ul l
t
h
i
s off
(
I
a sk
ed f
o r s om
e ob
s c u r e stu
f f ! H
ef
o u nd
E V E R Y T H I N G
f
o rm
e)
;
E PA
E p i d
em
i
ol
og i
st
,E l i
z ab
eth
H i l
b
om
,D V
M
f
o rh
el p i
ng
m
e u nd
e r sta nd
e
p i d
em
i
ol
og y d
ata
;
G
e o rg
eL
ut
aP h
.D
,b i
o st
at
i
st
i
ci
a n, n ei
g h b
o r a nd
f
ri
e nd
,f
o r st
at
i
st
i
c al
h
elp
;
T h
eP i
ed m
o nt
B i
of
u el
sg
r o up (
"
w w w
.b i
of
u el
s.c o op
'
)
:L y l
eE
st
i l
l
,R
a ch
a el B
u rto n
,L
ei f
F
o r e r.T h
a nk
sL y l
ef
o r of
f
e ri
ng
y
o u r v eh i
cl
ef
o rte s
t
i
ng
a nd
t
oR
a ch
a el
a nd
L
ei f
f
o r ed
u c at
i
ng m
et
h
r o ug h
t
h
ei
r "B i
od
i
e s el
"c o u r s e a
t
P ie
d m
o nt
c om
m
u ni
t
y
c ol l
eg
e.In
th
eE S E
D
ep
a rt
m
e nt
,M
r.J
a ck
W
h
al
ey
,D
i
r e cto r
of E N V R St
ud
e nt
S
e r vi
c e s,f
o rh
elp i
ng
m
e n a vi g
ate
t
hr o u
g
h
t
he
p
r o c e s s o v e rt
h
el
a st
3 y
e a r s;
a nd
r e s e a r ch
stud
e nt
sY
u-m
e eK i
m
F i
n al l y
,f
o r al l
t
h
ed
ay
-t
o-d
ay
s up p
o rt
a nd
e n c o u r ag
em
e nt t
h
e r ew
a sm
y f
abu
l
o u sh
u sba n
d
,E
ri k
.T h
a nk
sf
o rb
el i
e vi
ng i
nm
eI
t
h
a nk
al l
m
y f
am
i ly
,f
ri
e nd
s(
i
n cl
ud
i
ng
t
h
o s ei
nG h
a n a)
a nd
n ei g h b
o r sw h
ol i
ste n ed
to
m
et
al k i
n c e s s a nt
ly
ab
o ut
b
i
od i
e s el f
o rt
h
el
a st
y
e a ra n
d
ah
al f
.T h
i
s r e s e a r ch
w
a sm
ad
ep
o s si b l
eb y
s up p
o rt
f
r om
t
h
eN
H E E R L
-D E S E C
o o
p
e r ati
v eT
r ai
ni
ng i
nE
n vi
r o nm
e nt
al S
ci
e n c e sR
e s e a r ch
,E P A C T 8 2 6 5 13
.W
h i l
ew
ork i
ng
at th
eE PA
,I g
ai
n ed
v al
u ab l
ein s
i g h
t t
oth
em
y
ri
ad
s cie n
t
i
f
i cto o
l
s a v ai la
b l
et
ob
et t
e r u nd
e r st
a nd
o u r n at
ur al
a nd h
um
a n alt
e r ed
e n vi
r o nm
e nt
si
n ap
ow
erf
ul l y
n ew
w
ay
t
h
at
e n ab l
e s u st
ow
o rk
T A B L E O F C O N T E
N
T S
A B S T RA
C T
i i
A C K N O
W
L E D G E
M
E
N
T S
i i i
T A B L E O F C O
N
T E N T S
vL I S T O F T A B L E S
vi i
L I S T O F F I G U R E S
i
xL I S T O F A B B R E V I A T I O
N
S
xi i i
C h
ap
t
e r sI
N
T R O D U C T I O N
1
1
.1
B i
od i
e s el
7
L l
.l
H i
sto r
y
&
U
s e7
1 1
.2
P
r od
u ct
i
o n-
b
a si
c ch
em
i
st
ry
9
1
.1
.3
C
om
b
u st
i
o nP
r od
u ct
s1 1
1
.1
.4
P
ote n
t
i
al H
e alt
h E f f
e ct
of B i
od i
e s el E
xh
a u st1 3
1
.1
.4
.1
P
a rt
i
c ul
ate
M
at t
e r v s.O
rg
a ni
c s1 3
1
.1
.4
.2
E p i d
em
i
ol
og y
1 7
1
.1
.4
.3
I
n vi
v oE
xp
e ri
m
e nt
1 7
1
.1
.4
.4
M
ut
ag
e n ci
t
y
19
1
.1
.4
.4
.1 I
n vi
t
roM
ut
ag
e ni
ci
t
y S
t
ud i
e s2 1
1
.1
.4
.4
.2 S
um m
a ry / C
o n cl
u si
o n of
M
uta
g
e ni
ci
t
y A
s s ay
s3 4
1
.1 4 5
I
n vi
t
roC j
^
oto x
i
ct
y
3 5
1
.1
.4
.6
W
el f
a r eE
ff
e ct
s3 6
1
.1
.4
.7
A
c ute
I
nf l
am m
ato r
y R
e sp
o n s e3 9
1
.2
I
n vi
t
r oC
el l S y
st
em
(
B E A S
-
2 B
)
:R
at
i
o n al
e a nd S i g
ni f
i c a n c e4 0
1
.3
l
nt
e rl
e uk
in
-8
(
I L
-8
)
. ..4 1
1
.4
l
nt
e rl
e uk
in
-
6
(
I L
-6
)
4 3
2
.M
A T E R I A L S
«&
M
E T H O D S
4 4
2
.1
M
at
e ri
al
s4 4
2
.1
.1
B i
od i
e s el S
am
p l
e s :C
ol l
e ct
i
o n,
E
xtr a c
t
i
o n a nd P
r o c u r em
e nt
4 4
2
.1
.3
C y
to
t
o xi
ci
t
y A
s s ay
s4 6
2
.1
.4
I
nf la
m m
at
o ry E
nd
-
P
oi
nt
s4 7
2
.2
S
am
p l
eP
r ep
a r at
i
o n s4 8
2 2
.1
U V
A
^
I S S p
e ctr o s c o
p y
4 9
2
.2
.2
P
r ep
a r ati
o n of D
o s eS
ol
ut
i
o n s5 0
2
.3
St
at
i
sti
c al A
n al y
si
s5 1
3
.R E S U L T S
5 3
3
.1
E
xp
o s u r et
ot
h
e s ele c
t
ed d
o s e s of b i
od i
e s el S O F i
s n ot
cy
to
t
o xi
c5 3
3
.2
E
xp
o s u r et
oB i
od i
e s el S O F
ap p
e a r st
ob
e am
o r ep
ot
e nt
in
f l
am m
at
o ry
st
im
ul
a nt
i
nB E A S
-2 B
c om
p
a r ed
t
oth
eS O F
f
r om
2
d
i
e s el P
M
s am
p l
e s5 7
3
.3
E
xp
e rim
e nta
l
c o nt
r ol
s sh
ow
n o stat
i
sti
c al l y
sig
ni f
i c a nt
i
n c r e a s ein
I L
-8
o r
I L
-6
r e s
p
o n s e7 0
3
.4
B i
ol
og i
c al l y
a ct
iv e o r
g
a ni
c si
nh ig
h
e rd i l
ut
i
o n s of S R
M
1 9 7 5
7 1
3
.5
O
rg
a ni
cC h
r om
op h
o r e s a r ed
ete c
t
ed
i
n aq
u e o u sp
r ep
a r at
i
o n s of b i
odi
e s el P
M
e x
tr a c
t
s7 2
4
.D I S C U S S I O
N
7 6
5
.C O
N
C L U S I O
N
S
7 8
6
.R E F E R E
N
C E S
7 9
A P P E
N
D I X A
:S
um m
a ry
of B i
od ie s e
l C y
t
ot
o xi
ci
t
y
a nd
M
uta
g
e ni
cit
y S
t
ud i
e s8 6
A P P E N D I X B
:C
al
c ul
at
i
o n of
th
eP
e r c e nta
g
e of
t
h
eT h
e o r et
i
c al ly C
ap
a ci
t
y
of B i
od i
e s el
P
r od
u ct
i
o nto
M
e et
D i
e s el D
em
a nd
in
th
eU S
8 8
A P P E N D I X C
:E q
ui p
m
e nt
/ S
oft w
a r eU
s ed
8 9
A P P E
N
D I X D
:A S T
M
Sp
e ci f
i c at
i
o nf
o rp
u r e(
1 0 0
%
)
b i
od i
e s el
9 0
A P P E
N
D I X E
:D
et
e rm
i
ni
ng
th
ep
e r c e nt
ag
e of S O F
e xt
r a ct
ed f
r om
S R
M
2 9 7 5
to
p
r od
u c eS R
M
1 9 7 5
9
1
A P P E
N
D I X F
:C
al
c ul
at
i
o nf
o rD
et
e rm in
in
g S R
M
1 9 7 5 PM
eq
ui
v al
e n c e(
P
M
eq
)
9 2
A P P E N D I X G
:M
a n uf
a ct
ure r'sI
n str u c
t
i
o n sf
o rI L
-6 E L I S A
. .. .
9 4
A P P E N D I X H
:M
a n uf
a ct
u r e r 'sI
n str u c
t
i
o n sf
o rI L
-8 E L I S A
9 6
A P P E N D I X I
:T h
eI L
-8
a nd I L
-6
r e sp
o n s eb y B E A S
-2 B
a c r o s s e x
p
e ri
m
e nt
sw h
e n e xp
o s ed
t
oS R
M
1 9 7 5
f
o r2 4
h
9 8
A P P E N D I X J
:I L
-8
a nd
I L
-6
r e sp
o n s eb y B E A S
-2 B
e xp
o s ed
t
o e xp
e ri
m
e nt
al
c o ntr o
l
s. . ..9 9
A P P E N D I X K
:C
om
p
a ri
ng
th
eS O F p
e r c e nt
ag
e sb
et
w
e e nb i
od i
e s el P
M
a nd d i
e s el P
M
. . .1 0 3
L I S T O F T A B L E S
T
ab l
e1
:C
om
p
o si
t
i
o n of
e xh
a u st
f
r om
t
h
ei
nt
e r n al
c om b
u st
i
o n e ng i
n e12
T
ab l
e2
:H
e al
t
h
e v al
u at
i
o n s o rt
ed b y b l
o ck f
o rT i
e r2
s ub
ch
r o ni
ci
nh
al
at
i
o n st
ud y
1 8
T
ab l
e3
:S
um m
a ry
of m
ut
ag
e ni
cit
y
st
ud i
e s c o nd
u ct
ed
o nb
i
od i
e s el
e xt
r a ct
s2 3
T
ab
l
e4
:B i
o a s s ay T
e st
i
ng
:&
t
y p h i m
u ri
um
st
r ai
n s u s ed
i
nb i
od i
e s el
m
ut
ag
e n ci
t
y
st
ud i
e s.T
ab l
em
od i f
i ed
f
r om
[
3 8,
4 4
,4
6
]
2 4
T
ab l
e5
:PA H
a nd
ni
t
r o-PA
H
m
e a s u r ed
i
nB
ag
l
ey
et
al
. st
ud
y
[
4 0
]
C
a n c e r cl
a s si f
i c at
i
o nb
a s ed
o nt
h
eR
ep
o rt
o nC
a ri
n og
e n s.[
4 7
]
T h
eG
r o up i
s a s si g
n ed b
y
t
h
eI
nt
e r n at
i
o n al
A g
e n cy
f
o rR
e s e a r ch
o nC
a n c e r2 5
T
ab l
e6
:S
um m
a ry
t
ab l
e of
M
ut
ag
e nE
m
i
s si
o nR
at
e s u nd
e r c ol d
a nd h
ot
st
a rt
c o nd i
t
i
o n sf
o rn u
m b
e r2 d i
e s el
(
D 2
)
a nd 5 b
i
o
d i
e s el
s am
p l
e s.T h
eD 2
s ol
ub
l
e o rg
a ni
cf
a ct
i
o n(
S O F
)
h
ad
h i g h
e rm
ut
ag
e n em
i
s si
o n r at
e s(
h i g h l i g h
t
ed
i
nb l
u e)
i
n al l
c at
eg
o ri
e s c om
p
a r ed
t
o al l 5
b
i
od i
e s el
s am
p l
e s.M
od i
f
ied
f
r om
[
4 1
]
3 0
T
ab l
e7
:F
u el
st
e st
ed i
n a si m
ul
at
ed f
r e sh
w
at
e r aq
u at
i
c e n vi
r o nm
e nt
f
o rb i
od
eg
r ad
at
i
o ne v a
l
u at
ed
b y C O
2 e v ol
ut
i
o n a nd
v al i
d
at
ed b y G C
a n al
y
si
st
h
r o ug h
t
h
ed
i
s ap p
e a r a n c e of
s u
b
st
r at
e(
t
e st
f
u el
)
f
r om
t
h
e sy
st
em
o v e rt
i
m
e3 8
T
ab l
e8
:T
e st
f
u el
p
r op
e rt
i
e s a nd
r eg
ul
at
ed
p
ol l
ut
a nt
em
i
s si
o n sf
o rt
h
eU
ni
v e r si
t
y
of
C
al i f
o r ni
a(
U C D
)
s am
p l
e s.I
n cl
ud
ed
o nt
h
et
ab l
e a r e c u r r e nt
l y
a c c ep
t
ed
f
u el p
r op
e rt
y
s
t
a nd
a rd
s a nd
t
h
eE PA
em
i
s si
o n st
a nd
a rd f
o r19 9 4 h
e a vy
-d
u
t
y
e ng
i
n em
od
el y
e a r.4 5
T
ab l
e9
:U
ni
v e r si
t
y
of C
al i f
o r ni
a at
D
a vi
s(
U C D
)
i d
e nt
i f
i c at
i
o n a nd
c o r r e sp
o nd i
ng f
u el
t
y p
e.4 5
T
ab
l
e1 0
:T h
e v ol
um
e of
t
h
e al
i q
u ot
d
i
sp
e n s ed f
o r e a ch
U C D
s am
p l
e a nd
t
h
e v ol
um
e of
D
M
SO
ad d
ed
t
op
r ep
a r e1
.4
m
l
of 4 0 |
jg P
M
eq
/m
l
c o n c e nt
r at
i
o ni
nK G
M
+
0
.2
%
D
M
S O
.5 0
T
ab l
e1 1
:S
e ri
al d i l
ut
i
o n sw
e r em
ad
efr
om
t
h
eh i g h
d
o s ef
o r e a ch U C D
s am
p l
e5 0
T
ab l
e1 2
:E
xp
e ri
m
e nt
1
of
3
:Sl
op
ef
r om
t
h
e r eg
r e s si
o n a n al y
si
sf
o r co
nt
r ol
,d i
e s el
, a nd
b i
odi
e s el
c at
eg
o ry
.T h
eb i
od i
e s el
c at
eg
o ry
c om b
i
n e st
h
e s oy
et
h
y l
e st
e r(
S E E
)
a nd
t
h
e s oy
m
et
h
y
l
e st
e r(
S
M
E
)
r e s ul
t
s5 8
T
ab l
e1 3
:E
xp
e ri
m
e nt
1
of 3
:S l
op
ef
r om
t
h
e r eg
r e s si
o n a n al y
si
s, af
t
e r u ng
r o up i
ng
t
h
eb i
od i
e s el
c at
eg
ory
,d
e s c ri b
e st
h
ep
ot
e n cy
of
s oy
et
h y l
e st
e r(
S E E
)
vs soy
m
et
h y l
e st
er(
S
M
E
)
.T
ab
l
e1 4
:E
xp
e ri
m
e nt
2
of 3
:S l
op
ef
r om
t
h
e r eg
r e s si
o n a n al y
si
sf
o r c o nt
r ol
,d i
e s el
, a nd
b
i
od
i
e s el
c at
eg
o ry
.T
h
eb
i
od i
e s el
c at
eg
o ry
c om
b i
n e st
h
e s oy
et
h y l
e st
e r(
S E E
)
a nd
t
h
e s oy
m
et
h y l
e st
e r(
S
M
E
)
r e s ul
t
s6
1
T
ab
l
e1 5
:E
xp
e ri
m
e nt
2
of 3
:S l
op
ef
r om
t
h
e r eg
r e s si
o n a n al y
si
s, a
ft
e r u ng
r o up i
ng
t
h
eb io
d
i
e s el
c at
eg
o ry
,d
e s c ri b
e st
h
ep
ot
e n cy
of
s oy
et
h y l
e st
e r(
S E E
)
v s s oy
m
et
h y
l
e st
e r(
S
M
E
)
.6 3
T
ab l
e1 6
:E
xp
e ri
m
e nt
3
of 3
:S l
op
ef
r om
t
h
e r eg
r e s si
o n a n al y
si
sf
o r c o nt
r ol
,d i
e s el
, a nd
b io
d
i
e s el
c at
eg
o ry
.T h
eb i
od
i
e s el
c at
eg
o ry
c om
b i
n e st
h
e s oy
et
h y l
e st
e r(
S E E
)
a nd
t
h
e s oy
m
et
h y l
e st
e r(
S
M
E
)
r e s ul
t
s6 4
T
ab l
e1 7
:E
xp
e ri
m
e nt
3
of 3
:S l
op
ef
r om
t
h
e r eg
r e s si
o n a n al y
si
s, aft
e r u ng
r o up i
ng
t
h
eb
i
od
i
e s el
c at
eg
o ry
,d
e s c ri
b
e st
he
p
ot
e n cy
of
s oy
et
h y l
e st
e r(
S E E
)
v s s oy
m
et
h y l
e st
e r(
S
M
E
)
.6
6
T
ab l
e1 8
:S
um m
a ry
t
ab
l
e of
sl
op
e sf
o rt
h
eI L
-8
r e sp
o n s e a c r o s s e xp
e ri
m
e nt
sb y
t
e st
m
at
e ria
l
.T h
e u ni
t
of
ch
a ng
ei
sp g
of p
r ot
ei
n/ j
ig P
M
eq
6 7
T
ab l
e1 9
:S
um m
a ry
t
ab l
e of
sl
op
e sf
o rt
h
eI L
-6
r e sp
o n s e a c r o s s e xp
e rim
e nt
sb y
t
e st
m
at
e ri
al
.T h
e u ni
t
of
ch
a ng
ei
sp g
of p
r ot
ei
n/ )
jg P
M
eq
6 8
T
ab
l
e2 0
:S
um m
a ry
a c r o s s e xp
e rim
e nt
s of
t
h
eD
u n n'sM
ul
t
i p l
eC
om
p
a ri
s o nT
e st
f
o rt
h
eI L
-8
r e s
p
o n s e.T h
em
ul
t
i p l
e c om
p
a ri
s o nt
e st
i
sp
e rf
o rm
ed
i f
t
h
eK
r u sk
al
-W
al l i
s(
o n e-w
ay
A N O V A
)
n o n-p
a r am
et
ri
ct
e st
i
s st
at
i
st
i
c al l y
si g
ni f
i c a nt
.Wh
e r ep
i
s<
0
.0 5
t
h
e r ei
s as
t
at
i
si
t
c al ly
si g
ni f
i c a nt
d i f f
e r e n c e si
nt
h
em
ed i
a n sb
et
w
e e n c om
p
a ri
s o ng
r o up
s(
h i g h l i g h
t
ed i
nb
l
u e)
6
9
T
ab l
e2 1
:S
um m
a ry
a c r o s s e xp
eri
m
e nt
s of
t
h
eD
u n n'sM
ul
t
i p l
eC
om
p
a ri
s o nT
e st
f
o rt
h
el L
-6
r e s
p
o n s e.T h
em
ul
t
i p l
e c om
p
a ri
s o nt
e st
i
sp
e rf
o rm
ed
i f
t
h
eK
r u sk
al
-W
a
l l i
s(
o n e-w
a
y
A
N
O V A
)
n o np
a r am
et
ri
ct
e st
i
s st
at
i
st
i
c al ly
si g
ni f
i c a nt
.W
h
e r ep
i
s <0 0 5
t
h
e r ei
s as
t
at
i
si
t
c al l y
si g
ni f i
c a nt
d i f f
ere n c e si
nt
h
em
ed i
a n sb
et
w
e e n c om
p
ari
s o ng
r o up
s(
h ig h l i g h
t
ed i
nL I S T O F F I
G
U R E S
F
i
g
u r e1
:1 9 9 8 D i
r e ct
l y E
m
i
t t
ed
(
A
)
P
a rt
i
c ul
at
eM
at t
e rP
M
i o a nd
(
B
)
P
a rti
c ul
at
eM
at t
e rP
M
2 5E
m
i
s si
o n sb y P
rin c
i p
al S
o u r c eC
at
eg
o ri
e sf
o rN
o nf
ug i
t
iv e
D
u st
S
o u r c e s.S
o u r c e[
1
]
2
F i g
u r e2
:1 9 9 8 D ir e c
t
l y E
m
it t
ed
(
A
)
V O C
s(
B
)
C O
a nd
(
C
)
N O E
m
i
s si
o n sb
y P
rin c
i
p
al
S
o u r c eC
at
eg
o ri
e s.S
o u r c e[
1
]
3
F
i
g
u r e3
:C
om
p
a ri
s o n of
ag g
r eg
at
ed
t
o xi
c s a nd T H C
.G
r ap h
ta
k
e nfr o
m
p g
.8 9
[
1 5
]
6
F i g
u r e4
:E
st
i
m
at
ed U S B i
od i
e s el P
r od
u ct
i
o np
e ry
e a r.S
o u r c e :N
at
io n a
l B i
od ie s e
l B
o a rd
(
N B B
)
9
F i g
u r e5
:T
r a n s e st
i fi
c at
io n
r e a ct
i
o nf
o rp
r od
u ci
ng b i
od ie s e
l w h
e r eR
i,R
i, a nd
R
3 a r el
o ng
ch
ai
n s of
s at
u r at
ed/
u n s atu r a
te
d h y d
r o c a rb
o n s(
i
.e.f
at t
y
a ci d
ch
ai
n s)
1 1
F
i g
u r e6
:S
c a n ni
ng E l
e ct
r o nM
i
c r o s c op
ei
m
ag
e of d i
e s el P
M
(
SR
M
2 9 7 5
)
a nd
a sty
l i
z ed
i m
ag
e of
d i
e s el
e ng
i
n e em
i
s si
o n s.[
2 8
]
M
od i f
i ed
f
r om
[
1 0
]
1 2
F i g
u r e7
:T y p
i
c al
ch
em
i
c al
c om
p
o si
t
i
o nf
o rd i
e s el p
a rt
i
c ul
ate
m
at t
e r(
P
M
2 5)
f
r om
n ew
(p
o st
-1 9 9 0
)
d i
e s el
v eh ic
l
e e xh
a u st
.S
o u r c e[
1
]
1 4
F
i
g
u r e8
:C
om
p
a ri
s o n of
ch
em
i
c al
c om
p
o si
t
i
o n of
(
A
)
C
al if
o r ni
aR
ef
o rm
ula
te
d
D i
e s el
(
R F D
)
P
M
v s.(
B
)
B i
od i
e s el P
M
f
r om
a1 9 9 6
D
od g
eR
am 2 5 0 0
.T h
eb
i
od ie s e
l
P
M
h
ad
ah i g h
e rp
e r c e nt
o rg
a ni
c c a rb
o nf
r a ct
i
o nt
h
a nt
h
eR F D
(
ci
r cl
ed
)
1 5
F i g
u r e9
:C
om
p
a ri
s o n of
ch
em
i
c al
c om
p
o sit
i
o n of
(
A
)
C
al if
o r ni
aR
ef
o rm
ul
ate
d
D i
e s el
(
R F
D
)
P
M
v s.(
B
)
B
io
d i
e s el P
M
fr o
m
a1 9 9 5 F
o rd
F 3 5 0
.T h
eb
i
od
i
e s el P
M
h
ad
ah i g h
e rp
e r c e nt
o rg
a ni
c c a rb
o nf
r a ct
i
o nth
a nt
h
eR F D
(
ci
r cl
ed
)
1 6
F i g
u r e1 0
:C
om p
a ri
s o n of p
e r c e nt
p
art
i
cl
em
a s s siz
ed i
st
ri b
ut
i
o nb
etw
e e nb
oth
th
e(
A
)
1 9 9 6
D
od g
eR
am
2 5 0 0
a nd
t
h
e(
B
)
1 9 9 5 F
o rd
F 3 5 0 f
u el
ed
o nB 1 0 0
a nd
R F D
.B
oth
v eh ic
l
e sf
u ele
d
w i
th b i
od i
e s el
em
i
t t
ed
ag
r e at
e rp
e r c e nta
g
e of p
a rt
i
cl
em
a s sle s s
t
h
a n1
.0 (
xm
i
n si
z ec o
m
p
a r ed
t
ot
h
eR F D
1 7
F i g
u r e1 1
:B
r ak
e-sp
e ci
fi
ct
ota
l p
a rt
i
c ul
at
em
at t
e r(
T P
M
)
em i
s si
o n sw i
t
h
t
h
e r el
ati
v e c o ntr
i b
uti
o n s of
t
he
s ol
ub l
e o rg
a nic
f
r a ct
i
o n(
S O F
)
, s ol
id
,i
n s ol
ub l
em
ate r
ia
l
(
SO L
)
, a nd
v ap
o r-p h
a s e o rg
a ni
cm
at
e ri
al
(
X O C
)
em
i
s si
o n s o v e rth
el i g h
t
-d
ut
y
t
r a n si
e nt t
e st
cy
cl
e.D 2
i
s n um b
e r2
d
i
e s el f
u el
;
O C C i
s o xi
d
at
iv e c a
t
al y
t
i
c c o n v e rt
e r.T h
e9 5%
c o nf
id
e n e c ei
nt
e r v al
i
s e xp
r e s s ed
a s2
.5%
c o nf
id
e n c eb
a s ed
o nt
he
t
-
d i
stri b
ut
i
o nF i g
u r e1 2
:B
r ak
e-sp
e ci fi
c em
i
s si
o n s of
s ol
ub l
e o rg
a ni
cf
r a ct
i
o n(
S O F
)
a nd
v ap
o rp h
a s e(
X O C
)
a s s o ci
at
ed m
uta
g
e ni
c a ct i
vi t
y
o v e rt
h
el i g h
t
-d
u
t
y
t
r a n si
e nt t
e st
cy
cl
e.D 2 i
s n um
b
e r2
d i
e s el
fu e
l
;
O C C
is
o xi d
at
i
v e c atal y
t
i
c c o n v e rt
e r.T h
e9 5
%
c o nf
id
e n c ei
nt
e r v al
i
se x
p
r e s s ed
a s2
.5
%
c o nfi
d
e n c eb
a s ed
o nth
et
-
d i
st
ri
b
u
t
i
o n .S
o u r c e[
4 0
]
2 7
F i g
u r e1 3
:T
ot
al m
ut
ag
e ni
ci
t
y
eq
ui
v al
e nt
em
i
s si
o n sf
r om
n um b
e r2 d i
e s el
(
D 2
)
s ol
ub l
e o rg
a ni
cf
r a ct
i
o n(
S O F
)
a nd
1 0 0
%
r ap
e et
h y l
e st
e r(
R E E
)
S O F
(
A
r r ow
sp
oi
nt
t
ot
h
em
ut
ag
e ni
ci
t
y d
at
af
o rt
h
ef
u el
st
o c om
p
a r e)
.E
ng
in e
w i
th
o ut
c at
al y
t
i
c c o n v e rt
e r.A l l f
u el
sw
e r et
e st
ed
u nd
erh
ot
start
co nd it
i
o n s u nl
e s si
nd i
c at
ed
a s a c ol d
st
a rt
(
C
)
.S
o u r c e[
3 6
]
2 9
F i g
u r e1 4
:T
ot
al m
ut
ag
e ni
ci
t
y
eq
ui
v al
e nt
em
i
s sio n s
fr o
m
n um b
e r2 d i
e s el
(
D 2
)
s olu
b l
e o rg
a ni
cf
r a ct
i
o n(
S O F
)
a nd
1 0 0
%
r ap
e et
h y l
e st
e r(
R E E
)
S O F
(
A
r r ow
sp
oi
nt
to
t
h
em
uta
g
e ni
ci
t
y
d
at
af
o rt
h
ef
u el
sto
c om
p
a r e)
.E
ng i
n ew i
t
h
c at
al y
t
i
c c o n v e rt
e r.A l l
f
u els
w
e r et
e ste
d
u nd
e rh
ot
sta rt
c o nd
it
i
o n s u nl
e s si
nd i
c at
ed
a s a c ol d
st
a rt
(
C
)
.S
o u r c e[
3
6
]
3
0
F i g
u r e1 5
:M
ut
ag
e ni
cit
y
of
s ol
ub l
e org
a ni
cf
r a ct
i
o n(
S O F
)
of
r ap
em
et
h y l
e st
e r(
R
M
E
)
a nd
d i
e
s el
f
u el
(
D F
)
i
nS
.t
yp h i m
uri
um
st
r ai
nTA 9 8
at
r at
ed p
ow
e r a nd i d l
ew i
t
h
a nd w i
th
o ut
m
et
ab
ol i
c a ct
i
v at
i
o nb y i
nd
u c ed
r at
li
v e rh
om
og
e n ate s
(
S 9
)
.W
he n
th
e e ng i
n ei
sf
u el
ed
o nd i
e s el
f
u el
t
h
e n um
b
e r of
r e v e rt
a nt
si
sg
r e at
e ri
nth
e -S 9 f
r a ct
i
o n at
b
ot
h
r at
ed p
ow
e r a nd
i d l i
ng
.H
ow
e v e r,
w
h
e nt
h
e e ng i
n ei
s at
i d l
e r u n ni
ng
o nRM
E
t
h
e n um
b
e r of
r e v e rt
a nt
si
sg
r e at
e ri
nt
h
e +S 9 f
r a ct
i
o n(
ci
r cl
e o ng
r ap h
)
.T h i
s s ug g
e st
sp
o s si b l y
m
o r ei
nd i
r e ct
a ct
i
ng
m
ut
ag
e n s a r e em
i
t t
ed
at
i d l
ew h
e nth
e e ng i
n ei
s ru n o nRM
E
.M
od i fi
ed f
r om
[
2
]
3 3
F i g
u r e1 6
:M
ut
ag
e ni
cit
y
of
s ol
ub
l
e o rg
a ni
cfr a c
t
i
o n(
S O F
)
of
r ap
em
et
h y l
e st
e r(
R
M
E
)
a nd
d
ie s e
l
f
u el
(
D F
)
in
S
.t
yp
h
im
u ri
um
st
r ai
nTA I OO
at
r ate
d
p
ow
e r a nd
i d
l
ew i
th
a nd
w i
th
o ut
m
et
ab
ol
i
c a ct
i
v at
i
o nb y i
nd
u c ed
r at
l i
v e rh
om
og
e n at
e s(
S 9
)
.A
si
m
i l
a r r e sp
o n s ei
s ob
s e r v ed
i
nth i
sS
al
m
o n el l
a str a
i
n;
w h
e nt
h
e e ng i
n ei
s r u n o nR
M
E
at
i d l
et
h
eS O F
c om
p
o n e nt
of
t
h
ee
m
i
s si
o n s c a u s e s a sl
i
g h
t
l y h i g h
e r n um
b
e r of
r e v e rta n
t
si
nt
h
e +S9 f
r a ct
i
o nt
h
a ni
nt
h
e-
S 9
fr a c
t
i
o n.T h i
s s ug g
e st
sp
o s si b ly
m
o r ei
nd ir e c
t
a ct
i
ng
m
ut
ag
e n s a r e em
it te
d
at
i
d
l
ew h
e nt
h
ee n
g i
n ei
s r u n o nR
M
E
.M
od i fi
ed f
r om
[
2
]
3 3
F i g
u r e1 7
:T h
eg
r ap h i l l
u st
r at
e sth
at
s oi l
r e sp i
r at
io n
w
a sg
r e ate r
w
i
th b i
od i
e s el
t
h
a nw i
t
h
d i
e s el
.R
e c r e at
ed g
r ap h f
r om
t
h
e e c o-t
o xi
c ol
og y
l
ab
o r at
o ry
stu
d y
o nm
i
c r ob i
al
r e sp i
r at
i
o ni
nfu e
l
c o nt
am
i
n at
i
o n .[
5 6
]
3 9
F i g
u r e18
:O
rg
a ni
cd
i
e s el P
M
e xt
r a ct
si
nd
u c eI L
-8 p
r od
u ct
io n
in
b
r o n ch i
al
ep i
t
h
el i
al
c el l
s.S
o u r c e[
2 9
]
4 1
F i g
u r e1 9
:H y p
oth
e si
z ed
m
e ch
a ni
sm
of
a ct
i
o n of d
i
e s el
e xh
a u st
p
a rti
cl
e s a nd
t
h
e r ol
e of
o r
g
a ni
c c om
p
o u nd
si
nt
he
b i
ol
og i
c al
r e sp
o n s e4 3
F i g
u r e2 0
:E
xp
e ri
m
e nt
1
of 3
:B E A S
-2 B
e x