Soma t i c an d ma l e
-sp e c i f i c
(
F +)
c o l i p h ag e s a r e p r om i s i ngi n d i c a t o r s o f f e c a l c o n t am i n a t i o n a nd h uma n e n t e r i c v i r u s e s i n
w a t e r . T h e r e a r e v a r i o u s me t ho d s f o r t he d e t e c t i o n a nd a s s a y o f
t he s e c o l i p h a g e s , b u t t h e y h a v e n o t be e n a d e qua t e l y ev a l u a t e d i n
c om pa r a t
i
v e s t u d i e s . We c o m p a r e d t wo me t ho d s f o r de t e c t i o n an da s s a y o f t he s e p h a g e s i n 1 0 8 s am p l e s o f f e ca l l y c o n t am i na t e d
su r f a c e w a t e r s :
(
1)
d i r e c t p l a t i n g o f 1 0 0 m l v o l ume s b y t h es i ng l e a g a r l a y e r
(
SA L)
me t h o d , a n d(
2)
i n i t i a l c o nc en t r a t i o nf r om a p p r o x i ma t e 1 - l i t e r v o l u me s b y a d s o r
p t i o n t o a nd e l u t i o n
f r om f i l t e r s , f ol l o w e d b y do ub l e a g a r l ay e r
(
D A L)
a s sa y . We a l s oc om
p
a r e d t w o ho s t s f o r s om a t i c c o l i p ha g e s , E . co l l C a n d CN 1 3 ,a nd t h r e e h o s t s f o r F+ c o l i p ha g e s , E . c o l i C 3000 a n d Fam p a n d
Sa l mo n el l a ty p h i mur i um WG49 . Soma t i c a nd F + c o l i p h a ge s we r e
f ou n d i n a l l 1 0 8 s am p l e s , bu t t h e f o r me r ou t n u mb e r e d t h e l a t t e r .
T he t wo me t ho ds
(
SA L an d v i r a l f i l t r a t i o n-a d s o r p t i o n
-e l u t i o n
f o l l o we d b y D A L
)
d e t e c t e d s i m i l a r p h ag e l ev e l s . H o s t s E . c o l i Ca nd CN 13 de t e c t e d s
i
m i l a r c o l i p h a ge l ev e l s , a n d F + c o l i p h a g eho s t s E . co l i C 3 00 0 a nd Fa mp a n d Sal mo n el l a t y p h i mu r i um WG4 9
de t e c t e d s i m i l a r p h a g e l e v e l s . H ow e v e r , wh e n p h a ge i s o l a t e s f r o m
t he t hr e e F + h o s t s w e r e c ha r a c t e r i z e d b y c r o s s p l a t i n g o n v a r i o u s
p ha g e ho s t s , t he r e w e r e d i f f e r e n c e s i n ho s t sp e c i f i c i t y a nd
s e n s i t i v i t y . O f t h e p h a ge
i
s o l a t e s o n E . c ol i C 3 0 0 0 5 0 % w e r es o ma t i c c o l i p h a ge s , a nd o f t h o s e o n S . t y p h i mu r i um WG4 9 , 1 0 % w e r e
s o ma t i c Sa l mo n e l l a p hag e s . N o n e o f t h e i s o l a t e s o n ho s t E . c o l i
Ul
f i l t r a t i on - a b s o r
p t i o n - e l u t i o n f o l l ow e d
b y DA L p l a qu e a s s ay i s
c om pa r ab l e t o t he S A L me t ho d f o r c o l i ph a ge d e t e c t i o n w h i l e ha v i n g
t he c om p a r a t i v e adv a n t a g e o f a n a l y z i ng l a r g e r s am p l e v o l ume s .
H o s t s E . c o l l C a nd CN 13 w e r e c o m pa r a b l e i n s oma t i c c o l i p h a ge
d e t e c t i o n , bu t F + c o l i p ha g e ho s t E . co l i Fa m p w a s su p e r i o r t o
h o s t s E . c o l i C 3 0 00 a nd S . t y ph i mur i um WG4 9 b e c a u s e i t w a s mo r e
sp e c i f i c a n d s e n s i t i v e wh i l e d e t e ct i n g com p a r ab l e F + c o l i p h age
T h a nk y o u f o r t h e a s s
i
s t a n c e a n d g u i da n c e e sp e c i al l y t oA d v i s o r D r . M . D . So b s e y , R e a d e r D r . Y .
- S
. Ca r o l Sh i eh
, R e ade r
Dr . M i c h a e l S y mo n s , a n d R e a de r Dr . D . Cr a w f o r d - B r ow n . Tha n k y o u
a l s o t o D o u g Wa i t , F u
- C h i H s u
, Ch i p Si mmo n s , C . L . L a s s i t e r ,
Ro g e l i o T o r n e r o - Ve l e z , S h e l l e y R e n e e Po ov ey , Li s a To mas ko , Dr .
Da v
i
d J . Ama n t e , Ama nd a F r e ema n , D o r o t h y T ho m p s o n , D r . Ke l l o g gSchw ab , Da v i d B a t t ag e l l i , D e l o r e s Pl u mme r , R eb e k k ah C o t e , Pho eb e
Ama n t e , T o d d Ama n t e , Gw y
- Am S h i n
, J o n a t h a n J u l i a n o , M i c ha e l
Ca s t e e l , Sop h i e N e w l a nd , S u s a n Ba r b e e , a n d al l t h e l ab o r a t o r i e s ,
p r o f e s s o r s , a nd s t u d e n t s w ho a s s i s t e d w i t h s amp l i n g a nd ma n y
T A B L E O F C O N T ENT S
A BST RA CT i i - i i i
A CK NOWLE DGME NT S i v
T AB L E OF C ON T E N TS v
L I ST O F T AB L E S v i
L I S T O F G RAP H S v i i
L I ST OF F I G UR E S v i i
i
L I S T O F A P P E N D I C E S i x
I N T RODU CT I O N 1
O B J ECT I V E S 4
BA CKGRO UN D A N D R E V I E W O F L I T E RAT U R E 5 - 39
MAT E R I AL S A N D M E T H O D S 4 0- 52
R E S U L T S 53 - 6 6
D I SCU SSI ON 67- 8 4
C ON CLU S I ON S 85 - 8 6
F U T U R E R E S E A R C H 8 7 - 88
T A B L E S 1 1 , 2 1 , 8 9
- 9 4
GRAP H S 8 , 9 5
- 96
F I GU R ES 25 , 97
- 1 0 0
R E F E R E N CE S CI T E D 101 - 1 1 7
L I S T O F T A B L E S
T a b l e 1 I m p o r t a n t H uma n V i r u s e s a n d Co n c om i t a n t D i agno s t i c
S y m p t oms 1 1
T a b l e 2 C r i t e r i a f o r I de a l I n d i c a t o r o f Fe ca l Co n t am i n a t i on i n
Wa t e r 2 1
T a b l e 3 Ho s t a n d A n t i b i o t i c Co mb i n a t i o n s f o r Cr o s s - P l a t i n g
As s a y 8 9
T a b l e 4 S um ma r y Co m pa r i s o n o f U n w e i gh t e d a nd We i g h t e d C o l i ph a ge 9 0 Ta b l e 5 Co m p a r i s o n o f Un we i g ht ed a nd We i g h t e d Co l i p ha ge
Co n c e n t r a t i o n s 91
T ab l e 6 Re l a t i v e Pe r c e n t a g e s o f Co l i p ha g e s De t e c t ed b y S A L a nd
FAE
/
D A L 92T ab l e 7 Pe a r s o n '
s Co r r e l a t i o n f o r F A E
/
DAL A s s ay b y Ho s t 9 3 T a b l e 8 F + Ho s t Spe c i f i c i t y a nd Se n s i t i v i t y f o r F R NA Co l i p h a ge9 3 T a b l e 9 U n we i g h t ed F r e s h W a t e r FAE
/
DAL F + H o s t s Co r r e c t e db y Cr o s s
-p l a t i ng 9 4
T a b l e 1 0 We i g ht e d Fr e s h Wa t e r F A E
/
D A L F+ H o s t s Co r r e c t e d b y Cr os sV I I
L I ST O F GRAP H S
Gr a p h 1 I n c i d e n c e o f Wa t e r b o r ne B a c t e r i al a n d Pa r a s i t i c
D i s e a s e i n Mo d e r n H i s t o r y 8
Gr ap h 2 So ma t i c Co l i p h a ge Co n c e n t r a t
i
o n s D e t e c t e d b y S AL Ve r su sF A E
/
D A L A s s ay 9 5Gr a p h 3 Ma l e
-S pe c i f i c Co l i p hag e Co n c e n t r a t i o n s D e t e c t e d b y SAL
6 6 Ah s s y I v a
/
SM
d ^ s a n B d8 6 Ab s sv a v s e B a nBx d
L 6 u o x :i nq x a :is x a Bu x x du i e s o x x[ d p j :Bo BO z B J n Bx ^
S Z S 96 H X[ do x a : 9 :io Ha 50 s s x x x u i h j a o Ce w i e a r iBx ^
s a an o i a a o i s
n
I X
L I S T OF A P P E N D I C E S
A P P E N D I X 1
A P P E N D I X 2
A P P E N D I X 3
A P P E N D I X 4
A P P E N D I X 5
A P P E N D I X 6
AP P E N D I X 7
A P P E N D I X 8
AP P E ND I X 9
L i s t i ng o f Sam p l i ng S i t e s b y Co n t am i n a t i o n S o u r c e , B od y o f W a t e r a nd Ge og r ap h i c al L o c a t i o n 1 1 8 - 1 2 0
Co m p i l a t i o n o f Co l i p ha ge A s s a y Con c e n t r a t i on s b y Ho s t
a n d b y Me t ho d 1 2 1 - 1 23
Com p i l a t i o n o f Lo gi o Tr a n s f o r me d Co l i p h ag e As s ay
Co n c e n t r a t i o n s b y H o s t an d b y Me t h o d 1 2 5 - 1 2 9
Pe ar s o n ' s Co r r e l a t i o ns 1 3 0 - 1 3 1
Com p a r i s o n P l o t s o f U n we i gh t e d Co l i p h a g e
Co n c e n t r a t i o n s D e t e c t e d b y SA L Ve r s u s F A E
/
D A LMe t h o ds Ma t c he d b y Ba c t e r i a l Ho s t s a n d Sa m p l e
N u mb e r 1 3 2
-1 3 6
Cumu l a t i v e F r e qu e nc y D i s t r i bu t i o n s f o r Soma t i c an d
Ma l e
-S pe c i f i c Co l i p h a ge H o s t s i n Fr e s h a nd S al i n e
Wa t e r s 137 - 1 4 2
Com p i l a t i o n o f Pha ge I s o l a t e C h a r a c t e r i z a t i o n b y
Cr o s s
-p l a t i n g 1 43
-1 4 5
Un we i g ht e d a nd We i g h t e d F r e sh W a t e r DAL Ma l e
-S p e c
i
f i c H o s t Co nc e n t r a t i o n s C o r r e c t e d b y C r os s-p l a t i n g . . 1 4 6
D r i n k i n g w a t e r dr a w n f r om bo t h su r f a c e a nd g r o u n d s o u r c e s ma y
b e i m p a c t e d b y c o n t am i n a t i o n f r o m hu ma n a n d a n i ma l f e c a l ma t e r i a l
f r om a v a r i e t y o f s ou r c e s
(
Cr au n 19 86 a & 1 98 8)
. Of t h e ma n yd i f f e r e n t d i s e a s e c au s i n g m i c r o o r g a ni sms i n h uma n f e c al w a s t e s
t ha t may c o n t a m i n a t e dr i n k i ng w a t e r s o u r c e s , huma n e n t e r i c
v i r u s e s ha v e be e n r e sp o n s i b l e f o r d r i nk i n g w a t e r b o r n e o u t b r e ak s
o f d i s e a s e . Ad d i t i o na l l
y , hu ma n e n t e r i c v i r u s e s h a v e b e e n
d e t e c t e d i n b o t h t r e a t e d a n d s o u r c e wa t e r s
(
H ej
ka l e t a l . , 1 98 2 ;Pay me n t e t a l .
, 1 9 85 ; D e e t z e t a l . , 1 98 4 ; K e s w i c k e t a l . ,
198 4
)
.T h e g r e a t e r p e r s i s t e n c e o f v i r u s e s t ha n b a c t e r i a i n w a t e r a n d
t h e i r g r e a t e r r e s i s t a n c e t o w a t e r t r e a t me n t p r o c e s s e s , i n c l u d i ng
d
i
s i n f e c t i o n , ha s b e e n do cume n t ed i n b o t h l a bo r a t o r y a nd f i e l ds t u d i e s . D r i n k i ng w a t e r sup p l
i
e s a r e r a r e l y a n a l y z e d f o r huma ne n t e r i c v i r u s e s de sp i t e t he i m p o r t a n c e o f huma n e n t e r i c v i r u s e s
a s w a t e r b o r ne e n t e r i c pa t hoge n s . The a n al y s i s o f w a t e r f o r huma n
e n t e r
i
c vi
r u s e s ha s b e e n c o n s i de r e d t o o u n r e l i a b l e , t e c hn i c a l l ydema nd i n g , t i me
-c o n sum i ng , s l ow t o p r o du c e r e s ul t s , a n d c o s t l y
f o r r ou t i n e o r ev e n p e r i o d i c u s e .
T he pub l
i
c he a l t h c o n c e r n s a b ou t hu ma n e n t e r i c v i r u se s i nd r i nk i n g w a t e r su p p l i e s a n d t h e ba r r i e r s t o t h e i r p r a c t i c a l
a n a l y s i s i n w a t e r spu r r e d t he mo t i v a t i o n t o d ev e l o
p
a nd e v a l u a t ei nd i c a t o r v i r u s e s
(
l A W P R C St ud y Gr o up , 19 91 ; Go y a l e t a l . ,1 9 87
)
. T h e t w o mai
ngr o u p s o f b a c t e r
i
o p h a ge s t ha t ha v e r e c ei
ve dv i r u se s a r e t he s oma t i c a n d ma l e - s
p e c i f i c c o l i p h ag e s
(
F a r r a h ,1 9 8 7 ; F u r u s e , 1 9 8 7 ; Ge r b a , 1 987 ; H a v e l a a r , 1 9 93 ; l A W P R C S t u d y
-Gr o u p , 19 91
)
. S oma t i c c o l i p hag e s o c cu r i n huma n a n d a n i ma lf e c e s , a n d i n bo t h po l l u t ed a nd u n p o l l u t e d n a t u r a l w a t e r s .
T h e ma l e
-sp e c i f i c c o l i p ha g e s h av e b e e n p r op o s e d a s v i r a l
i nd i c a t o r s o f f e c a l c on t am i n a t i on
(
F u r u s e 1 9 8 7 ; H av e l a ar 1 9 9 3)
,a nd c e r t a i n s u b
-g r o up s o f t h em may b e s
p
e c i f i c f o r hu man f e c alc o n t am i n a t i on a n d p e r h ap s hu ma n e n t e r i c v i r u s e s
(
H su e t a l .1 995
)
. T he t w o ma i n g r o up s o f ma l e
-sp e c i f i c c o l i p h a ge s a r e t ho s e
c on t a i n i n g RNA a s ge n e t i c ma t e r i a l
(
FR N A c o l i p ha ge s)
a nd t h o s ec o n t ai n i n g D N A
(
F D NA c o l i p ha g e s)
. A t t e n t i o n h a s f o cu se d ma i n l yo n t h e F R N A c o l i p h a ge s b e ca u s e o f t h e i r p r e do m
i
n a n c e o v e r F D NAc ol i p hag e s a n d t he i r ge n e r al s i m i l ar i t y t o c e r t a i n hu ma n e n t e r i c
v i r u s e s
(
e n t e r o v i r u s e s , HAV , a n d hu ma n c a l i c i v i r u s e s)
(
Sob s e y e ta l . 19 9 5
)
.T he huma n h e a l t h r i s k s p o s e d b y v i r a l a n d p r o t o z o a n p a t h og e n s
i n d r i nk i n g w a t e r su p p l i e s u s i n g su r f a c e wa t e r s o u r c e s p r o m p t ed
t h e Un i t e d St a t e s E n v i r o n me n t a l P r o t e c t i o n Ag e n cy
(
U S E PA)
t op r op o s e t h e c o l l e c t i o n o f da t a o n v i r u s a nd p a r a s i t e o c c ur r e n c e
i n s u ch w a t e r sup pl i e s a s a s t ep t o w a r d r e v i s i o n o f t h e c u r r e n t
r e gu l a t i o n f o r m i c r o b
i
a l c on t a m i n a n t s , t h e Su r f a c e Wa t e rT r e a t me n t R u l e . T he s e da t a c o l l e c t i on r e gu l a t i o n s , c a l l e d t h e
I n f o r ma t i o n Co l l e c t i o n R u l e
(
I CR)
, i n i t i a l l y p r op o s e d t h a t l a r ge rw a t e r sup p l i e s u s i n g su r f a c e s o u r c e s an a l y z e f o r c u l t u r a b l e hu ma n
e n t e r i c v i r u s e s a nd p e r h a p s b o t h s oma t i c a nd ma l e
-sp e c i f i c
f i l t r a t i o n
-ad s o r p t
i
o n-e l u t i o n me t ho d o l o g y a r e u n c e r t a i n f o r
c o l i p h ag e s . A d d i t i o n a l l y , t he r e a r e no c om p a r a t i v e da t a o n t he
r e l a t i v e s e n s i t i v i t y an d sp e c i f i c i t y of t h e c a nd i da t e h o s t
b a c t e r i a f o r s o ma t i c an d ma l e
-sp e c i f i c c o l i p ha g e s . T he pu r p o s e
o f t h i s s t ud y w a s t o ev a l u a t e and c o m p a r e t he me t h o ds t o de t e c t
soma t i c a nd ma l e
-sp e c i f i c c o l i p h ag e s i n f e c a l l y c o n t am i n a t e d
s u r f a c e w a t e r s , a nd t o c om pa r e t he o c c u r r e n c e o f t he s e t w o
O B J E C T I V ES
To c om pa r e a nd e v a l u a t e t he Si ng l e A ga r La y e r
(
S A L)
a s s a y a n dt he F i l t r a t i o n - A d
s o r p t i o n - El u t i
o n
/
D o u b l e A ga r L a y e r(
F A E/
D A L)
a s s a y me t h o ds f o r d e t e c t i ng c o l i p h a ge s i n e n v i r o n me n t a l su r f a c e
w a t e r s .
T o c om p a r e t he d e t e c t i o n a nd o c cu r r e n c e o f s oma t i c c o l i p hag e s
i n e n v i r o nme n t al su r f a c e w a t e r s u s i ng b a c t e r i a l h o st s E . c ol i C
a n d C N 1 3 .
T o c o m p a r e t he de t e c t i o n a n d o c cu r r e n c e o f ma l e - s
p e c i f i c
c o l i p h a ge s i n e n v i r o n me n t a l su r f a c e w a t e r s u s i n g b ac t e r i a l ho s t s
E . co l l C3 0 00 a n d F am p a nd Sa l mo n e l l a t y p h l mu r i um W G 4 9 .
T o c om p a r e t h e d e t e c t i o n a nd o c cu r r en c e s oma t i c a nd ma l e
-sp e c
i
fi
c c o li
p ha g e si
n e n v i r o nmen t a l su r f a c e w a t e r s b e t w e e n ,a mo n g , a n d w i t h i n ho s t gr o up s .
T o d e t e r m
i
n e w hi
ch c o l i p h a ge ho s t de mo n s t r a t e d t h e b e s tc om b i n a t i o n o f s e n s i t i v i t y a nd spe c i f i c i t y f o r F RN A c o l i p h a ge s
W A T E R S U P P L Y A N D H E A L T H
T he pu b l i c he al t h l i t e r a t u r e do cume n t s t ha t t he qu a l i t y of
e n v i r o nme n t a l s u r f a c e w a t e r s
(
a s dr i n k i n g w a t e r s u p p l i e s a ndr e c r e a t i o n a l w a t e r s
)
s t r o ng l y i n f l u e n c e s t h e h e a l t h o f t h ep u b l i c . T he p o t e n t i al of f e c a l l y c o n t am i n a t e d w a t e r t o t r a n sm i t
d i s e a s e h a s b e e n w e l l e s t ab l i sh e d . Wo r l dw i de mo r e t ha n 2 5 0
m i l l i o n n e w c a s e s o f w a t e r b o r n e d i s e a s e a r e r ep o r t e d e a c h y e a r
r e su l t i n g i n mo r e t ha n 1 0 m i l l i on d e a t h s
(
H a z en 1 98 8)
. N e a r l y7 5% o f t he s e c a s e s o c c u r i n t r op i c a l a nd sub t r op i c a l a r e a s o f t h e
de v e l op
i
n g wo r l d . One o f t h e t o p t h r e e d i s e a s e si
n t he w o r l dt o d ay i s d
i
a r r he a l d i s e as e , w h i ch c a n c a u s e e x t r eme de h y d r a t i o na nd d e a t h , e sp e c i a l l y i n ve r y yo u n g ch i l dr e n . I n ma n y d ev e l op i ng
n a t i o ns d r i n k i n g a n d ba t h i n g w a t e r s c o n t i n u e t o b e a n i m p o r t a n t
t r a n sm i s s i o n r ou t e f o r t h e ba c t e r i a l , v i r a l , a n d p r o t o z o a n a g en t s
r e s po n s i b l e f o r d i a r r he a l d i s e as e s .
I n t h e U n i t e d St a t e s t o d ay a n d i n ma ny i ndu s t r i a l i z e d
c ou n t r i e s t he s i t ua t i o n i s mu c h d i f f e r en t . T he U n i t e d St a t e s h a s
mad e l a r ge c ap i t a l i n v e s t me n t s i n f a c i l i t i e s t o t r e a t dr i nk i ng
w a t e r s p h y s i c a l l y a nd c he m i c a l l y a nd t o p r o t e c t t h em f r om
c on t am i n a t i on w i t h f e c a l ma t e r i a l . D e v e l op me n t s i n s a n i t a r y
e ng i ne e r i ng a n d w a t e r b a c t e r i o l o g y w e r e g r e a t l y r e s p o n s i b l e f o r
t he r e du c t i o n s i n w a t e r b o r ne o u t b r e a k s
i
n t he e a r l y p a r t o f t h i sa s ch o l e r a a n d t y p h oi d f e v e r , wh
i
ch we r e c o m mo n i n t h e l a s tc e n t u r y , a r e n ow e x t r e me l y r a r e i n t he U n i t e d S t a t e s .
Ho we v e r , t he u n pr e c e de n t e d 1 993 Mi l wa u k e e o u t br e a k o f
g as t r oe n t e r i t i s du e t o Cr y p t osp o r i d i um p a r v um u nd e r s c o r e d t he
i m
p
o r t a n c e o f ma i n t a i n i n g a h i g h m i c r ob i o l o g i c al qu a l i t y o f w a t e rsu p p l i e s a nd de mo n s t r a t e d t he c o n s e qu e n c e s o f b r e a k do w ns i n l a r g e
mu n i c i p a l t r e a t me n t sy s t ems . Th i s o u t b r e ak o f wa t e r b o r n e
p ar a s i t i c d i s e a s e a f f e c t e d o v e r 4 0 0 , 0 0 0 c i t i z e ns o r a b ou t h a l f
t h e p opu l a t i o n o f Mi l w a uk e e , Wi s c o n s i n .
Th e r o l e o f w a t e r i n t he t r a n sm i s s i on o f e n t e r i c d i s e a s e s w a s
f i r s t d emo n s t r a t e d i n t he mo de r n e r a b y J o h n S n o w du r i n g a n
o u t b r e a k o f c ho l e r a i n Lo nd o n i n 1 8 5 4
(
S n ow , 1 9 3 6)
. A l t ho u g h t h ea g e n t r e s po n s i b l e f o r t he o u t b r e a k , Vi jbr
i
o ch o l e r a , wa s no ti d e n t i f i e d u n t i l 3 0 ye a r s l a t e r , S no w de du c e d t h a t c o n t am i n a t e d
wa t e r w a s r e sp o n s i b l e f o r t h e o u t b r e a k b y c om p a r i n g t he i n c i de n c e
o f d
i
s e a s e be t w e e n u p s t r e a m a n d d ow n st r e am co m mu n i t i e s whi
c h dr e wwa t e r f r om d i f f e r en t s ou r c e s n e a r t he Tha me s r i v e r . T h e
do w n s t r e a m c om mu n i t y wh i c h d r e w i t s wa t e r f r om a p o l l u t e d p o r t i o n
o f t h e Th ame s R i v e r ha d a mu c h h i g h e r i n c i d e n c e o f ch o l e r a t h an a
s i m i l ar c om mu n i t y wh i c h r e l i e d o n w a t e r t ak e n u p s t r e am f r om t h e
p o i n t o f c o n t a m i n a t i o n .
I n t h e Un i t e d St a t e s , t y p h o i d f ev e r , c a u s e d b y t h e ba c t e r i u m
Sa l mo n el l a t y p h i , w a s of g r e a t c o nc e r n a nd w a s r e sp o n s i b l e f o r
t he e a r l y wo r k i n t he d e ve l op me n t o f w a t e r t r e a t me n t p r o c e s s e s .
Exp e r i me n t s o n w a t e r f i l t r a t i o n w e r e f
i
r s t c a r r i e d ou t i n t h eUn i t e d St a t e s i n t h e l a t e 1 8 0 0 '
s , a n d t he ch em i c a l - c o a
gu l a t i o n
i n 1 9 0 8 i n J e r s ey C i t y , N . J . By 1 9 1 4 mo s t o f t h e c i t i e s i n t h e
U n i t e d S t a t e s w e r e u s i n g s ome t y p e o f c h em i c a l d i s i n f e c t a n t .
Thu s , t h e s t a nd a r d t r e a t men t s ch eme u s e d t o da y , f i l t r a t i o n a n d
d i s i n f e c t i on , w a s e s t a b l i sh e d b y t h e e a r l y p a r t o f t h i s c e n t ur y .
Th e e f f e c t s o f t h e s e d ev e l op me n t s w e r e d r ama t i c . T he d e a t h
r a t e f r om t y p ho
i
d f e v e r f e l l f r om a n a ve r a ge o f 3 0 p e r 1 0 0 , 0 0 0 t ol e s s t h a n 0 . 1 p e r 1 0 0 , 0 0 0
(
F a i r e t a l . , 1 9 6 7)
. Si
m i l a rr e duc t i o n s w e r e s e e n f o r o t h e r ep i dem i c w a t e r b o r n e d i s e a s e s
i
nt h e Un i t e d St a t e s o v e r t h e p e r i o d 1920 - 8 0
(
Gr ap h 1)
. T h ei n c r e a s e i n ou t b r e a k s s i n c e 1 9 65 i s mo s t l i ke l y du e t o b e t t e r
su r v e i l l a n c e a n d r e p o r t i n g p r o c e du r e s a s w e l l as t h e i n c r e a s e d
n u mb e r o f
i
n di
vi
du a l s b e i ng s e r v ed b y c om mu n i t y a n d n o n-c om mu n i t y
wa t e r s y s t e ms . A l t ho u g h t he n u mb e r o f o u t b r e a k s ha s no t c ha ng e d
o v e r t h i s t i me pe r i o d , t he e t i o l og i c a l a ge n t s r e s po n s i b l e f o r
t he s e o u t b r e ak s ha v e c h a nge d . Sa l mo n el l a ty p h i , r e sp o n s i b l e f o r
t y p ho i d f ev e r , w a s t he p a t ho g e n mo s t c ommo n l y i d e n t i f i e d i n
w a t e r b o r n e o u t b r e ak s pr i o r t o 19 6 6
(
Cr au n 1 98 6a)
. F r om 19 6 6 - 75
h e pa t
i
t i s A vi
r u s a n d S h i ge l l a we r e t h e mo s t f r e qu e n t l yi de n t i f i e d , a n d f r o m 1 9 7 5 o n w a r d G i a r d
i
a l am b l i a w a s c i t e d mo sto f t e n
(
C r a u n 1 9 8 6a)
. O v e r a l l t he d i s e a s e mo s t o f t e n r ep o r t e d i s
a cu t e g a s t r o e n t e r i t i s o f u n de f i n e d o r u nk n o w n e t i o l o g y
(
Cr a u n198 8
)
. Gr ap h 1 i l l u s t r a t e s w a t e r b o r n e o u t b r e a k s o f t y p h o i df e v e r , g a s t r o e n t e r i t i s , a n d s h i g e l l o s i s f r om 19 2 0 t o 1 9 80
(
Cr au nGr ap h 1
Wa t e r b o r n e Ou t b r e ak s o f
Ty p ho i d Fe v e r
, Ga s t r o e n t e r i t i s , a nd S h i ge l l o s i s f r om 19 2 0 t o 1 9 80
1 4 0
ty p ho i d
ga stro e n te r itis
sh ige llo s is
A
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-^c^
^
-^c^ <6^
^c^
v
-^c
^
(
C
^. c
^
^
'A d ap t e d f r om Cr a u n 1 98 6a
W h
i
l e t h e n u mbe r s o f o u t b r e a k s d u e t o b a c t e ri
a l p a t h og e n s h a sb e e n d e c r e a s i ng , t he r e ha v e b e e n
i
n c r e a s i n g n u mb e r s o f o u t b r e a k sc a u s e d b y o t he r p a t ho gen s
, mo s t
i
m p o r t a n t o f whi
c h a r e hu mane n t e r i c v i r u s e s a n d pr o t o z o a n s . D u r i ng t h e p e r i o d 19 8 6
- 8 8 t h e r e
w e r e 5 0 o u t b r e ak s wh
i
c h r e su l t ed i n 2 5 , 84 6 c a s e s . O f t h e s e , o n ly
7
(
1 4%)
o f t h e o u t br e a k s a n d 3 0 5 0(
1 1 . 8 %)
o f t he c a s e s w e r ed
u et o b ac t e r i a l a ge n t s
[
Sal mo n el l a , S hi
g e l l a , an d Cam py
l ob a c t er)
.Ac u t e
g
a s t r oi
n t e s ti
n a li
l l n e s s o f u nk n o w n e ti
o l og y
w a sp e r i o d , du r a t i o n o f i l l n e s s a n d sy m p t o ms f o r ma ny o f t he s e
o u t b r e a k s s u g g e s t e d t ha t t he y w e r e c a u s e d b y N o r w a l k - l i k e
v i r u s e s .
The r e a l i z a t i o n t ha t ma n y o u t b r e ak s o f w a t e r b o r n e d i s e a s e o f
u n kn ow n e t i o l og y may be due t o e n t e r i c v i r u s e s c r e a t e d i n t e r e s t
i n d e t e r m i ni ng t he r o l e o f d r i nk i n g a nd r e c r e a t i o n a l w a t e r
s o u r c e s i n t h e t r a n sm i s s i o n of t h e s e ag e n t s . Co n c e r n a bo u t t h e
w a t e r b o r n e t r a n sm i s s i o n o f v i r u s e s s t ems f r om s ev e r a l f a c t o r s :
(
1)
v i r u s l a d e n w a s t e s ma y c o n t am i n a t e bo t h s u r f a c e a nd g r o u ndw a t e r s , wh i c h ma y u l t i ma t e l y b e t h e s o u r c e w a t e r f o r a
c omm u ni t y '
s w a t e r su p p l y ;
(
2)
e n t e r i c v i r u s e s a r e o f t e n mo r er e s i s t a n t t o c o n v e n t i o n a l wa t e r t r e a t me n t p r o c e s s e s su c h a s
f i l t r a t i o n a nd d i s i n f e c t i o n ;
(
3)
t he i n f e c t i o u s do s e o f v i r u s e sf o r hu ma n s may be a s sma l l a s o n e c e l l cu l t u r e i n f e c t i o u s u n i t
a n d
(
4)
e n t e r i c v i r u s e s c a n p r o du c e a v a r i e t y o f d i s e a s e s , n o ta l l o f wh i c h a r e r e a d i l y a n d c a u s a l l y i de n t i f i e d a s a r i s i ng f r o m
c o n t am i n a t e d d r i n k
i
n g w a t e r(
Ra o a n d Me l n i c k 19 8 5)
.I n r eg i o n s w he r e s e w a ge i s d i s c h a r g e d d i r e c t l y t o r e c e i v i ng
w a t e r s , o r ap p l i e d t o a g r i cu l t u r al l a n d , l a r
g
e n u mb e r s o f v i r u s e smay be r e l e a s e d i n t o t h e en v i r onme n t . Ra w s e w a ge i s k n ow n t o
c on t a i n l a r g e n um b e r s o f en t e r i c v
i
r u s e s an d r ep o r t e d r e c o v e r i e so f v i r u s e s i n s e w a ge v a r y w i de l y de p en d i n g o n t h e me t ho d u s e d a n d
ma n y o t h e r f a c t o r s . An a v e r a ge c o nc en t r a t i o n o f 7 0 0 0
/
L h a s b e e ne s t i ma t e d
(
C l a r k e e t a l . 196 4, Me l n i ck 1 98 7
)
a nd t h e n u mb e r mayb e 1 0 0 t o 1 0 0 0 t i me s h i g he r i n l e s s de v e l o p e d c ou n t r i e s
(
Me l n i c k10
i n r e du c i ng v i r u s e s t h a n ba c t e r i a a n d t y p i c a l v
i
r u s r e du c t i on s b yc o n v e n t i o n a l p r i mar y a n d s e c o nda r y t r e a t me n t f o l l o we d b y
d i s i n f e c t i o n a r e on l y 90 - 9 9 %
(
R a o a nd Me l n i c k 1 98 6)
.
Co n v e n t i o n al l y t r e a t e d w a st ew a t e r e f f l u e n t ma y c o n t a i n
ap p r e c i a b l e l ev e l s o f e n t e r i c v i r u s e s w h i c h i n t u r n a r e
d i s ch a r g e d i n t o r e c e i v i n g w a t e r s .
O t h e r s ou r c e s o f f e c a l c o n t am i n a t i o n s t e m f r o m p o i n t a nd no n
-p o i n t s o u r c e s . Re c r e a t i o n a l b o a t s a r e kn o w n t o dum p s e w ag e
d i r e c t l y i n t o e n v i r o nme n t a l w a t e r s . Se
pt i c t a nk s wh i c h l e a k o r
a r e p o o r l y s i t e d c a n f e c al l y c o n t am i n a t e s ou r c e w a t e r s . Wh e n
f l o od i ng c o nd i t i o n s o c c u r , s ew a g e t r e a t me n t p l a n t s may d i v e r t
wa s t e wa t e r t o o v e r f l o w o u t f a l l s wh i c h c a n l e a d t o su r f a c e wa t e r
c o n t am i n a t i o n . An i ma l s al s o c o n t r i b u t e t o t h e f e c a l
p ol l u t i o n o f
en v i r on me n t al w a t e r s b u t p r e s e n t l e s s o f a v i r a l t hr e a t t o hu ma n
h e a l t h t ha n huma n f e c e s .
H UMA N E N T E R I C V I R U SE S
O v e r 1 0 0 t y p e s o f e n t e r i c v i r u s e s a r e e x c r e t e d b y i n f e c t e d
hu ma n s i n t h e i r f e c e s a nd s ome a r e a l s o ex c r e t e d i n t h e
i
rr e sp i r a t o r y s e c r e t i o n s , u r i n e , an d o t he r ex ud a t e s . T h e s e v i r u s e s
ma y f i n d t he i r w ay e v en t u a l l y i n t o su r f a c e wa t e r s
(
Me l n i c k a ndGe r b a 198 0
)
. T ab l e 1 l i s t s t h e p r i n c i pa l f e c a l l y ex c r e t e d huma ne n t e r i c v i r u s e s a n d t h e i r a s s o c i a t e d sy m pt oms o r d i s e a s e s
(
T ab l eT ab l e 1
Fe c a l l y E x c r e t ed H uman E n t e r i c V i r u s e s
V i r u s Gr o u p D i s e a s e o r Sy m p t o ms Ca u s e d
E n t e r o v i r u s e s
Po l i o v i r u s
Ec ho v i r u s
Cox s a c k i e A
Cox s a c k i e B
E n t e r ov i r u s t y p e s 6 8 - 7 1
Po l i om y e l i t i s , me n i n g i t i s , f ev e r
Me n i n g i t i s , f e v e r , ga s t r o e n t e r i t i s
He r p a ng i n a , r e sp i r a t o r y d i s e as e , f e ve r ,
me n i n g i t i s , ha n d
- f o o t - m
ou t h d i s e a s e
My o c a r d i t i s , p l e u r o d y n i a , f e v e r ,
men i n g
i
t i sMe n i ng i t i s , e n c e p ha l i t i s , r e sp i r a t o r y
d i s e a s e , f e v e r , a cu t e he mo r r ha g i c
c o n
j
u n c t i v i t i sHep a t i t i s A v i r u s I n f e c t i o u s He p a t i t i s
N o r wa l k v i r u s , Sma l l Ro u n d
V i r u s e s
(
Ca l i c i v i r u s e s ,A s t r o v i r u s e s ,
Pa r v o v i r u s e s , e t c .
)
A c u t e a du l t ga s t r o en t e r i t i s
(
e p i de m i c vo m i t i n g a nd d i a r r he a)
R e ov i r u s e s R e s p i r a t o r y a n d e n t e r i c i nf e c t i o n s
R o t a v i r u s C h i l d h o od g a s t r o e n t e r i t i s ; d i a r r h e a
Ad e n o v i r u s e s R e s p i r a t o r y d i s e a s e ,
-c h i l d h o o d
ga s t r o e n t e r i t i s
Ep
i
d em i c no n - A, n o n - B
h e p a t i t i s v i r u s
(
h e pa t i t i sE v i r u s o r H E V
)
I n f e c t
i
o u s h ep a ti
ti
sCo r on a v i r u s e s Re s p i r a t o r y i l l n e s s ; e n t e r i c
i n f e c t i o n s
Ad ap t e d f r o m R a o a nd Me l n i ck 19 8 6 a nd Ha v e l a a r 1 9 8 6
E N T E R O V I R U SE S
The e n t e r o v i r u s e s i n c l ud e p o l i o v i r u s e s , c o x s a ck
i
e v i r u s e s A a n dB , e n t e r i c c y t o pa t h o ge n i c huma n o r p ha n v i r u s e s
(
e c h ov i r u s e s)
a n de n t e r o v i r u s e s 6 9 - 7 1
. A l t ho ug h he p a t i t i s A v i r u s
(
H A V)
, f o r me r l y
c l a s s i f i e d a s e n t e r ov
i
r u s 7 2 ,i
s mo r p h o l o g i c a l l y si
mi
l a r t o t h een t er ov i r u s e s , H AV
i
s ge n e t i c a l l y d i s t i n c t i s n o w i n a se p a r a t e12
f am i l y a n d a r e sma l l (2 7 nm
)
, n o n- e nv e l o
p e d , i c o s ahe d r a l s h a p ed
a nd c on t a i n s i n g l e s t r a n de d R NA . Po l i ov i r u s c a u s e s a s e v e r e
d
i
s e a s e , p a r a l y t i c p o l i om y e l i t i s , a l t h ou g h t h i s c l i n i c a l d i s e a s eo c c u r s i n o nl y 0 1 . - 1
. 0 % o f i n f e c t i o n s
(
Ra o a nd Me l n i c k 1 986)
. I ni n du s t r i a l i z e d c o u n t r i e s t h a t u t i l i z e a l i v e , o r a l po l i o v a c c i n e ,
t h e p o l i o v i r u s e s e x c r e t e d i n t o t he e n v i r o nme n t a r e u su a l l y
v ac c i n e de r i v e d a n d n o n
-p a t ho g e n i c .
I N F E C T I O US H E PAT I T I S
Hep a t
i
t i s A vi
r u s h a s be e n de mo n s t r a t e d t o c au s e w a t e r b o r n eou t b r e ak s o f i n f e c t i ou s h ep a t i t i s . A l t h ou g h p e r s o na l c o n t a c t an d
f o o d b o r n e t r a n sm i s s i o n a r e r e sp o n s i b l e f o r t h e m a
j
o r i t y o fh ep a t i t i s ou t b r e a k s , w a t e r c l e a r l y ha s b e e n s ho w n t o b e a v e h i cl e
f o r n ume r o u s o u t b r e a k s . I t i s a l s o a s su me d t h a t man y c a s e s o f
wa t e r bo r ne HAV go u n r ep o r t e d du e t o t he d i f f i cu l t y i n d e t e r m i n i ng
t h e s o u r c e o f i n f e c t i o n . Be t w e e n 1 95 8 a nd 1 9 7 2 , 8 3 w a t e r b o r n e
e p i dem i c s o f H A V w e r e d o c ume n t e d t o h av e o c c u r r e d i n t h e U n i t e d
S t a t e s
(
Mo s l e y 1 96 7 , Go l d fi
e l d 1 9 76)
. C l i v e r(
1 98 3)
l i s t e d 1 1 7o u t b r e a k s o f i n f e c t i o u s he pa t i t i s due t o c o n t a m i n a t e d dr i n k i ng
w a t e r . I n t he U n i t e d St a t e s f r o m 1 97 1 t o 1 9 8 3 , 2 2 o u t br e a k s
o c c u r r e d c a u s
i
n g 7 30 c a s e s(
Cr a u n 1 98 6a , 1 9 8 6 b)
. I n Ge o r g e t o w n ,T ex a s , a w a t e r b o r ne ou t b r e a k o c cu r r e d i n 1 9 8 0 i n wh i c h 3 6 c a s e s
w e r e r ep o r t ed . A f e w w e e k s b e f o r e t h e H AV o u t b r e a k , a n o u t b r e a k
o f ga s t r o i n t e s t i n a l i l l n e s s o c c u r r e d i n v o l v i ng 7 9 % o f t h e 10 , 0 0 0
r e s i d e n t s o f t h e c omm u n i t y
(
H ej
ka l e t a l . 19 82)
. N o t a b l y ,Co x sa c k i e v i r u s e s B 2 a nd B3 w e r e i s o l a t e d f r om t h e w e l l w a t e r an d
Co x s a c k i e v i r u s B3 w a s i s o l a t e d f r o m a s am p l e o f c h l o r
i
n a t e d t apA no t h e r c au s a t i v e a ge n t o f i n f e c t i o u s h ep a t i t i s , he pa t i t i s E
(
H E V)
, ha s be e n r e c o gn i z e d . W a t e r b o r n e n o n - A, n o n
-B h e pa t i t i s
(
he pa t i t i s E)
h a s b e e n r ep o r t e d t o b e r e sp o n s i b l e f o r a t l e as t 5ep i d em i c s i n I n d i a a nd o t he r s i n N ep a l a n d t h e f o r me r So v i e t
U n i o n
(
Ra o a n d Me l n i ck 1 98 6)
. I t i s su sp e c t e d t o b e t hec a u s a t i v e a ge n t f o r t he s i n g l e l a r g e s t d o c u me n t e d w a t e r b o r n e
ou t b r e ak o f i n f e c t i ou s h ep a t i t i s , w h i c h r e s u l t e d i n 3 0 , 0 0 0 c a s e s
i n Ne w D e l h i , I nd i a i n 1 95 5 - 5 6
(
Khu r o o 198 0)
. I t i s a l s osu sp e c t e d a s t h e a g e n t r e sp o n s i b l e f o r a he p a t i t i s o u t br e a k i n
A l g e r i a r e s ul t i n g i n 7 88 c a s e s
(
B e l a b b e s e t a l . 1 98 5)
. Th e v i r u si s c l e ar l y d i f f e r e n t f r o m HAV a nd c a n i n f e c t i nd i v i du a l s
p r e v i ou s l y i n f e c t e d w i t h HAV . He p a t i t i s E v i r u s i s a c a l i c i v i r u s
wh i c h c l a s s i f i e s t he v i r u s i n t h e s ame t a x o n om
i
c g r o u p a s No r w a l kv i r u s a n d o t h e r N o r w a l k - l i k e v i r u s e s c a u s i n
g a c u t e
g a s t r o en t e r i t i s . Th e c a l i c i v i r u s e s a r e ab o u t 3 0
- 3 5 n m i n
d i ame t e r , a n d t he y c o n s
i
s t o f p o s i t i v e s e n s e , s i ng e-s t r an de d R NA ,
a b ou t 7 . 5 k i l o ba s e s l o n g , wh i c h i s su r r o u nd e d b y a n o u t e r ca p s i d
c o n t a i n i n g a s i ng l e ma
j
o r p r o t e i n . T h e mo s t s e r i o u s i l l n e s s e sc a u s e d b y he pa t i t i s E v i r us o c c u r i n p r e gn a n t wo me n w he r e t h e
c a s e f a t a l i t y r a t e av e r a ge s 2 0 %
(
R a o a n d Me l n i ck 1 9 8 6a)
.R OT A V I R USE S
R o t a v i r u s e s a r e k no w n t o b e a ma
j
o r c a u s e o f i n f a n t i l eg a s t r o e n t e r i t i s t h r o u g ho u t t h e wo r l d . Ap p r o x i ma t e l y h a l f o f t h e
h o s p i t a l
i
z e d c a s e s o f a c u t e di
a r r he ai
n v e r y y ou n g c h i l d r e ni
nt em p e r a t e c l i ma t e s a r e c a u s e d b y t h i s a ge n t
(
B l ac k l ow an d Cu ko r198 1
)
. R o t a v i r u s ha s al s o c a u s e d o u t b r e a k s a mon g a du l t s a nd i s a14
R o t a v i r u s h a s b e e n su s p e c t e d a s t h e c a u s a t i v e a g e n t i n s e v e r a l
w a t e r b o r n e o u t b r e a k s o f ga s t r o e n t e r i t i s . Th e s e i n c l u de a n
o u t b r e a k i n Sw ed e n i n 1 97 7 r e su l t i ng i n ov e r 3 0 0 0 c a s e s a n d o n e
i n Co l o r a d o i n 19 81 i n wh i c h ov e r 1 70 0 c a s e s o f g a s t r o e n t e r i t i s
w e r e r ep o r t e d
(
Ly c k e e t a l . 1 9 8 7 , H a r r i s e t a l . 1 9 8 3)
.R o t a v i r u s e s a r e a bo u t 8 0 n m i n d i a me t e r , c o n t a i n 1 1 u n i qu e
s e g me n t s o f do ub l e - s t r a nd ed R NA a n d h a v e a d ou b l e c a
p s i d l ay e r
g i v i ng t he m a wh e e l - l i k
e ap p e a r a nc e .
NOR W A L K A N D R E L A T E D V I RU SES
T h e No r w a l k ag en t a nd r e l a t e d v i r u s e s a r e no w b e l
i
e v e d t o b e ama
j
o r c a u s e o f w a t e r b o r n e ou t b r e a k s o f ga s t r o e n t e r i t i s i n t heU n i t e d St a t e s . N o r wa l k
, a c a l i c i v i r u s , i s a n t i ge n i c a l l y a n d
ge n e t i c a l l y r e l a t e d t o a n u mb e r o f sma l l , r o u nd , s t r u c t u r e d
v i r u s e s
(
S RSV s)
t h a t c au s e s i m i l a r ga s t r o i n t e s t i n a l i l l n e s s e s ,s u ch a s Sno w Mo u n t a i n a ge n t , Ha w a i i a g e n t , a nd ma ny o t he r s .
Ca l i c i v i r u s e s ha ve a c h a r a c t e r i s t i c ap p e a r a n c e ma r k e d b y c u p o r
c ha l i c e sh ap e d s u r f a c e d e pr e s s i o n s . A l t ho u g h No r w a l k v i r u s i s
d i f f i cu l t t o d e t e c t , du e t o t h e i n ab i l i t y t o p r o p a ga t e t h e v i r u s
i n v i t r o , i t ha s be en de t e c t e d b y e l e c t r o n m i c r o s c op y a n d
i m mu no a s s a y s i n f e c a l s
p
e c i me n s f r o m a f f e c t e d i n d i v i du a l s o fs e v e r a l w a t e r b o r n e o u t b r e ak s . B e c a u s e o f i t s c ha r ac t e r i s t i c
sy m p t o mo l o g y
(
d i a r r he a , v o m i t i ng , a b d om i na l p a i n , e t c .)
, s h o r ti n cu b a t i o n pe r i o d
(
1-2 da y s
)
, a n d s ho r t du r a t i o n o f i l l n e s s(
1 - 2da y s
)
, i t ha s b e e n l i n k e d t o a n u mb e r o f o u t b r e ak s o f a cu t ega s t r o e n t e r i t i s o f u nk n ow n e t i o l o g y i n w h i ch t he s e sy m pt o ms w e r e
I n 1 9 7 7 c o m me r c i a l l y ma n u f a c t u r e d N o r w al k - l i k e v i r u s
c on t a m i n a t ed i c e c a u s e d a n o u t b r e a k o f a p p r o x i ma t e l y 5 0 0 0 c a s e s
o f i l l n e s s o v e r s e v e r a l n o r t h e a s t e r n s t a t e s
(
L e v i n e e t a l . 1 9 9 0)
.
A s t u d y b y t he Ce n t e r s f o r D i s e a s e Co n t r o l e s t i ma t e d t ha t 4 2% o f
t h e a cu t e n o n - b a
c t e r i al g a s t r o en t e r i t i s o u t b r e a k s o c c u r r i n g f r o m
1 9 7 6- 8 0 we r e c au s e d b y t h i s a
g e n t
(
K ap l an e t a l . 19 82)
. F r om1 98 6
-8 -8 , 2 4 o f 5 0 r ep o r t e d w a t e r bo r n e o u t b r e a k s w e r e o f u n k no w n
e t i o l og y . Ca s e h i s t o r i e s f r o m ma n
y o f t h e s e ou t b r e ak s a l s o
su g ge s t a N o r wa l k - l i k
e v i r u s e t i o l o g y
(
L ev i ne e t a l . 1 9 9 0)
.O C CU R R E N CE OF H U M AN E N T E R I C V I R USE S I N D R I N K I NG A N D SU R F ACE
W A T E RS
D r i nk i n g a nd su r f a c e w a t e r s a r e c l e a r l y d emo n s t r a t e d a s
ve h i c l e s o f t r a n sm i s s i o n o f hu ma n e n t e r i c v i r u s e s , p r i ma r i l y i n
d e f i n ed , c om mo n
-s o u r c e , a nd s ome t i me s r e l a t i v e l y l a r ge w a t e r b o r n e
ou t br e a k s
(
Ka p l an e t a l . 1 9 82 , Ly c k e e t a l . 19 87 ; H a r r i s e t a l .1 9 83
)
. I t i s cu r r e n t l y d i f f i cu l t t o de mon s t r a t e l ow l e v e l o re n d em i c v i r u s t r a n sm i s s i o n v i a su r f a c e wa t e r s f o r s e v e r a l
r e a s o n s . F i r s t , ma n y o f t h e i n f e c t i o n s ma y be e
i
t he r mi l d o ra sy m p t o ma t i c a nd may n o t be r e po r t e d . Se c o n d , du e t o t he l o w
n u mb e r s a n d sp o r a d i c d i s t r
i
bu t i o n t hr o u g ho u t t he c om mu n i t y ,dr i n k i n g a nd su r f a c e wa t e r s may no t be s u s pe c t e d , e sp e c i a l l y i f
t he w a t e r s c o n s i s t en t l y demo n s t r a t e l o w l e ve l s o f c o l i f o r m
b a c t e r i a . T h i r d , t h e d i v e r s i t y o f s y m p t oms t ha t may b e c o me
ma n i f e s t du r
i
n g v i r al i l l n es s ma y n o t i nd i c a t e a c om mo n s o u r c e .P R E S E N C E O F V I RAL CO N TAM I N A T I O N I N D R I N K I NG W A T E R
R e c o gn i t i o n o f t he r o l e o f c o n t am i n a t e d su r f a c e w a t e r i n
16
su p p l i e s , l e d t h e U n i t e d S t a t e s E n v i r o n me n t a l P r o t e c t i on A g en c y
(
U S E PA)
t o c r e a t e mo r e s t r i n ge n t s t a n da r d s f o r dr i n k i n g w a t e rt r e a t me n t . T he S u r f a c e Wa t e r T r e a t me n t R u l e
(
S W T R)
o f t h eN a t i o n a l Pr i ma r y D r i n k i n g W a t e r Re gu l a t i on s
(
N P D W R)
, i s s u e d u n d e rt h e Sa f e Dr i n k i n g Wa t e r A c t
(
S D W A)
, a r e i n r e s p o n s e t o c o n c e r n sr e g a r d i n g t h e po t e n t i a l a dv e r s e he a l t h e f f e c t s o f v i r u s e s ,
G i a r d i a l am b l i a , a n d L e g i on el l a
(
U SE P A 1 9 8 9)
.U nd e r t h e s e r e gu l a t
i
o n s w a t e r t r e a t me n t p l a n t s a r e r e qu i r e d t oa ch i e v e a 9 9 . 9 9%
(
4 l ogi o
)
r e du c t i o n i n v i r u s e s a n d a 9 9 . 9 %(
3l o g i o
)
r e du c t i o n i n G . l am
bl i a t hr o ug ho u t t he t r e a t me n t p r o c e s s .
A s n o e f f e c t i v e me a n s o f mo n i t o r i n g a c t u a l v i r u s l e v e l s i n r a w
a nd f i n i s he d w a t e r s i s n o w a v ai l ab l e , t he S WT R o f t h e SD WA a l l o w s
f o r sp ec i f i c t r e a t me n t p r o c e s s e s t o c o u n t t ow a r d s t h e 9 9 . 9 9 %
(
4l o g i o
)
g o a l f o r v i r u s e s . T h e r e f o r e , w a t e r t r e a t me n t p l a n t s u s i ng
r a p i d f i l t r a t i o n p r e c e d e d b y o p t i m i z e d c o a gu l a t i o n a n d
s e d i me n t a t i o n a r e gr a n t e d a 9 9 %- 9 9
. 9 %
(
2 - 3 lo gi o
)
v i r u sr e du c t i o n . T h e n , t he y a r e r e qu i r e d t o a p p l y d i s i n f e c t a n t
su f f i c i e n t t o r e a c h a f u r t h e r 9 0 - 9 9 %
(
1 - 2 lo g i o
)
r e du c t i o n .H ow e v e r , t h e p r e s e n c e o f en t e r i c v i r u s e s i n w a t e r t r e a t me n t
p l a n t s a nd t h e i r r e s i s t a n c e t o n o r ma l t r e a t men t p r o c e s s e s
i
n d i c a t e t ha t sma l l n u mb e r s o f huma n e n t e r i c v i r u s e s may be f o u n di n t a p w a t e r me e t i ng d r i n k i n g w a t e r s t a n da r d s . Re s e a r ch e r s ha v e
de mo n st r a t e d t he p r e s e n c e o f e n t e r i c v i r u s e s i n f i n i s h ed w a t e r
(
P ay me n t e t a l . 19 85 , K e sw i c k e t al . 1 9 84 , D e e t z e t a l . 19 84)
.Be c au s e o f t h e l o w i n f e c t i o u s do s e f o r mo s t v i r u s e s i t ma y b e
p
o s s i b l e t ha t l o w l ev e l s o f g a st r o i n t e s t i n a l i l l n e s s ma y o c c u r i nA s i gn i f i c a n t r o l e o f d r i n k i n g w a t e r i n c om mu n i t y - w i d e ,
e nd em i c g as t r o i n t e s t i n a l i l l n e s s ha s b e e n su g g e s t e d b y Pa y men t e t
a l .
(
1 9 9 1)
. Th i s c o m mu n i t y- b
a s e d e p i dem i o l o g i ca l s t u d y c o m pa r e d
r a t e s o f g a s t r o i n t e s t i n a l i l l ne s s i n h o us e h o l d s dr i nk i ng
c o n v e n t i o n a l l y t r e a t e d t apwa t e r d e r i v e d f r om a c o n t am i na t e d
su r f a c e s o u r c e t o h o u s e h o l d s i n wh i c h t h i s w a t e r w a s f u r t he r
t r e a t e d b y r e v e r s e o smo s i s . Ab o u t 3 0 % mo r e ga s t r o e n t e r i t i s
o c c u r r ed i n t h e h o u s e h ol d s d r i n k i n g c o n ve n t
i
o n a l l y t r e a t e dt apw a t e r , a nd t he s y m p t o ms o f i l l n e s s we r e mo s t c o m p a t i b l e w i t h a
v i r a l e t i o l o g y .
T he r e gu l a t i o n s o f t he SWTR f a i l t o a d e qu a t e l y mo n i t o r o r
p r o t e c t t h e pub l i c dr i n k i n g w a t e r s u p p l i e s f o r e n t e r i c v i r u s e s .
F u r t h e r mo r e t h e S W T R f o c us e s p r i m a r i l y o n d r i n k i n g w a t e r a n d
p r o v i de l i t t l e pr o t e c t i o n o r mo n i t o r i n g o f o t he r wa t e r s . S i n c e
e n t e r i c v i r u s e s ha v e be e n sh ow n t o be mo r e r e s
i
s t a n t t o t r e a t me n tp r o c e s s
(
Sob s ey , 1989)
, t o p e r s i s t l o n g e r i n t he na t u r a len v i r on me n t
(
B e r g an d Me t c al f , 1 97 8)
a n d t o b e e l i m i n a t e d l e s se f f i c i e n t l y f r om s he l l f
i
s h t ha n i nd i c a t o r b a c t e ri
a(
B a c hu r ,1 9 8 8
)
, t he p r e s en t b a c t e r i a l i n d i c a t o r s an d t he s t a nd a r ds b a s e dup o n t h em do no t p r o v i de a s u f f i c i e n t ma r g i n o f s a f e t y w i t h
r e g a r d t o e x p o su r e t o h uman e n t e r i c v i r u s e s
(
C hu ng , 199 3)
.P R E S E NCE OF V I RAL C O N T A MI N A T I ON I N E N V I RONME N T A L SU R F A CE WAT E R S
Thr e a t s t o t h e he a l t h o f t h e pub l i c may co me f r om a v a r i e t y o f
e n v i r o nmen t a l s u r f a c e w a t e r s . Fe c a l l y c o n t am
i
n a t e d f r e sh a n ds a l i n e r e c r e a t i o n a l wa t e r s a n d sh e l l f i s h h a r v e s t i n g w a t e r s may
s e r v e a s r e s e r v o i r s o f v i r u s e s a nd v e h i c l e s o f w a t e r b o r ne v i r u s
18
E s t u ar i n e sh e l l - f i
sh h a r ve s t i n g w a t e r s a n d she l l f i s h ma y
ha r b o r e n t e r i c v i r u s e s . Ov e r 2 1 m i l l i o n a c r e s o f n a t i on a l
e s t u a r i n e w a t e r s a r e c l a s s i f i ed f o r s he l l f i sh g r o w i n g r egu l a t o r y
-pu r po s e s a c c o r d i n g t o gu i de l i n e s e s t ab l i s he d b y t he N a t i o n a l
S h e l l f i s h Sa n i t a t i o n Pr o g r am , a n d on l y 6 4% o f t he s e w a t e r s a r e
c l a s s i f i e d a s a p p r o ve d f o r s h e l l f i sh ha r v e s t i n g . T he r ema i n i n g
a r e a s a r e c l a s s i f i e d a s p r o h i b i t e d , c o n d i t i o n a l l y ap p r ov e d o r
r e s t r i c t e d
(
U S F D A , 1 9 90)
. V a ug h n e t a l .(
1 9 75)
n o t e t h a t s t u d i e sl i n k i n g s he l l f i sh c ar r i a ge o f e n t e r i c v i r u s e s t o hu ma n s
(
H e ds t r oma n d Ly ck e 1 9 6 4 ; H o f f a n d B ac ke r 1 9 6 8 ; M a s o n a nd Mc Le a n 1 9 6 2 ;
Me t c a l f a nd S t i l e s 1 96 5 , a nd St i l e s 1 9 7 0
)
ha ve s t i mu l a t e di n t e r e s t i n t he ap p e a r a n c e of t h e s e v i r u s e s i n s h e l l f i sh . Go y a l
e t a l .
(
1 9 79)
f o u n d t h a t v i r u s e s w e r e de t e c t e di
n b o t h w a t e r a ndo y s t e r s am p l e s o b t a i n e d f r o m a r e a s o p e n a n d c l o s e d t o sh e l l f i s h
ha r v e s t
i
n g . A l s o v i r u s e s i n wa t e r we r e mo d e r a t e l y c o r r e l a t edw i t h t o t a l c o l i f o r ms i n wa t e r a nd o y s t e r s , a nd w i t h f e c a l
c o l i f o r ms i n o y s t e r s . A d d i t i o n a l l y , e n t e r i c v i r u s e s ha v e b e e n
de t e c t e d i n c o as t a l w a t e r s a nd s he l l f i sh me e t i ng t o t a l o r f e c a l
c o l i f o r m b a c t e r i a l s t a n d a r d s
(
Ge r b a e t a l . 1 98 0 ; Go y a l e t a l .1 97 9 ; Wa i t e t a l . 19 8 3 ; V a ug hn e t a l . 1 9 79 , 1 9 8 0
)
.R e c r e a t i o n a l wa t e r s wh i c h ma y h a r b o r e n t e r i c v i r u s e s i nc l u de
bo a t i ng a n d b a t h i n g w a t e r s i n f r e s h a n d s a l i n e b o d i e s o f w a t e r .
R a o a nd Me l n i c k
(
1 9 8 3)
n o t e t ha t s w i m mi
n g-a s s o c
i
a t edga s t r o e n t e r i t i s i n c h
i
l dr en c o u l d b e qua n t i t a t i v e l y a s s o c i a t e dw i t h t he qu a l i t y o f t h e ba t h i n g w a t e r a s me a s u r e d b y e n t e r o c o c c u s
a n d E . c ol i d en s i t i e s . Ma r i no e t a l .
(
1 9 9 5)
s t u d i ed t h ew h i c h p r e s e n t Gd a h i gh l e v e l o f f e c a l po l l u t i o n . M a r i n o e t a l .
sh ow e d t ha t ex po su r e t o t he f e c a l l y c o n t a m i n a t e d s e aw a t e r
i n c r e a se d t h e i n c i de n c e of s k i n a nd e n t e r i c i n f e c t i o n s a n d t h a t
t h e i r mo r b i d i t y w a s s i gn i f i c a n t l y a s s o c i a t e d w i t h t h e p r e s e n c e o f
i nd i c a t or o r g a n i sms . Mo r r i s
(
19 91)
n o t e s t ha t o n l y o n 4/
24o c c a s i o n s d i d t h e i nl an d f r e s h su r f a c e w a t e r me e t t h e z e r o
v i r o l o
g i
c a l s t a n d a r d o f t he E u r op e a n Co m mu n i t y d i r e c t i ve .Ha v e l a a r
(
1 9 9 3)
n o t e s t h e r e gu l a r pr e s e n c e o f hu ma n e n t e r i cv i r u s e s i n f r e sh a n d s a l i n e ba t h i n g w a t e r s mo n i t o r e d f o r hu man
e n t e r i c v i r u s e s i n E u r op e .
Ca r t w r
i
g ht(
19 9 3)
s a y s t ha t t he r i sk o f u si
n g r e c r e a ti
o n a lwa t e r sh ou l d b e r edu c e d t o a m i n i mu m a n d t h a t t h e da n ge r s o f
s e w ag e c o n t am i n a t i o n c a u s i ng a ma
j
o r i l l n e s s a r e we l l r e c ogn i z e d .Ca r t w r i g h t a d d s t h a t s t u d i e s ha v e r e p o r t e d a c o r r e l a t i o n b e t w e e n
t he c o n c e nt r a t i o n o f a n i n d i c a t o r o r ga n i sm a nd h i g h l y c r e d
i
b l ega s t r o i n t e s t i n al sy m p t o ms
(
v om i t i n g , d i a r r h e a w i t h o r w i t h o u tf e v e r , a nd st o ma c ha c he o r na u s e a w i t h o r w i t h o u t f e v e r
)
.F u r t h e r mo r e , o u t b r e a k s o f h e p a t i t i s A a n d v i r a l g a s t r o e n t e r i t i s
c o n t i n u e t o o c c u r b y c o n sum p t i on o f c o n t am i n a t e d b i v a l v e s o r b y
ba t h i ng i n c o n t am i n a t e d r e c r e a t i o n a l wa t e r
(
R i c ha r d , 19 8 5 ;Ca b e l l i e t a l .
, 19 82
)
.R EC O G N I T I ON OF T H E T H R EAT OF V I RAL C O NT AMI N AT I O N I N D R I N K I NG A N D
S UR FA CE WAT E R S
I n a d d i t i o n t o t h e r e c en t l y r e co gn i z e d t h r e a t o f v i r a l
c o n t am i n a t i o n i n f r e sh a n d s a l i n e w a t e r s , t h e p r omu l g a t i o n o f t he
S W T R o f t h e S D WA c r e a t e d i n t e r e s t i n d ev e l o p i ng a s i m p l e a nd
2 0
v i r u s e s i n d r i n k i n g a n d su r f a c e w a t e r s . T h i s h a s p r omo t e d
i n t e r e s t i n de v e l o p i n g a n i nd i c a t o r s y s t em , s i m i l a r t o t h e
c o l i f o r m b a c t e r i a , wh i ch w o u l d p r o v i d e a mo r e a c c u r a t e me a n s o f
e s t i ma t i n g t h e v i r a l qu a l i t y o f s ou r c e a nd dr i n k i n g w a t e r s .
Si n c e t he d i r e c t cu l t u r e o f ma ny e n t e r i c v i r u s e s r e ma i n s
d i f f i cu l t o r i m p o s s i b l e , i n d i c a t o r s o f en t e r i c v i r u s e s i n w a t e r s
h a v e b e e n i n v e s t i ga t e d .
A s a s t e p t o w a r d t h e r e v i s i o n o f t h e SW T R , t h e I n f o
n
na t i o nCo l l e c t i o n R u l e w a s p r o p o s e d b y t h e U S E P A i n 19 9 4 . Th e I CR
s i gn i f i c a n t l y b r o a de n s t he s c op e m i c r o b i a l mon i t o r i n g o f
e n v i r o nme n t a l su r f a c e w a t e r s u s e d a s dr i n k i n g w a t e r s o u r c e s . Th e
I C R b r o ade n s a nd r e f i n e s t h e me t h o do l og y f o r a n al y z i ng d r i n k i n g
a nd s u r f a c e w a t e r s f o r f ec a l co n t am i n at i o n . T h e I C R r equ
i
r est h a t l a r ge w a t e r su p p l i e s sh o u l d mo n i t o r w a t e r s f o r ba c t e r i a ,
v i r u s e s a nd p r o t o z o a n s .
I N D I CAT O R ORGA N I SMS F OR EN T E R I C V I R U S E S
I n d i c a t o r o r g an i sms ha v e be e n pr op o s e d f o r s e v e r al f u n c t i o n s
i nc l u d i n g t he d e t e c t i o n o f f e c a l p o l l u t i o n
(
i n de x f u n c t i o n)
a n da s mo d e l o r g a n i sms t o mo n i t o r t he e f f i c i e nc y o f t r e a t me n t
p r o c e s s e s
(
i n d i c a t o r f u n c t i o n)
. I d e a l l y , a n i n d i c a t o r w o u l d bepr e s e n t w he n p a t h o ge n s a r e p r e s en t a n d a b s e n t wh e n p a t h o ge n s ar e
ab s e n t u nde r a l l t y pe s o f w a t e r a nd e n v
i
r onme n t a l c o n d i ti
o n s(
T ab l e 2)
. Th eg r e a t e r t he n u mb e r o f c r
i
t e r i a me t , t he b e t t e rt he c a nd i da t e i nd i c a t o r s e r v e s a s a n i nd
i
c a t o r o f f e c a lS i n c e 191 4 , c o l
i
f o r m b a c t e r i a ha v e b e e n u s e d t o de t e r m i n e t h es a n i t a r y qu a l i t y o f d r i nk i n g w a t e r s
(
Ha z en 1 98 8)
. A l t h o u g h t h e yd o no t me e t a l l o f t h e r equ i r eme n t s l i s t ed i n T ab l e 2 , t he y ha v e
T ab l e 2
Cr i t e r i a f o r I de a l I nd i c a t o r Or ga n i sm
1 . S h ou l d b e p r e s e n t wh en p a t ho ge n s a r e p r e s en t a n d a b s e n t w he n
p a t h o ge n s a r e a b s en t
2 . Pe r s i s t e n c e a n d g r o w t h c ha r a c t e r
i
s ti
c s o f t h e i n di
c a t o r s ho u l dbe s i m i l a r t o pa t h o ge n s
3 . I nd i c a t o r s hou l d no t mu l t i p l y i n t he e n v i r o n me n t
4 . R a t i o b e t w e en i n d i c a t o r a n d p a t h o ge n s s h ou l d b e c o n s i s t e n t 5 . I nd i c a t o r sh ou l d b e p r e s e n t i n g r e a t e r c on c e n t r a t i o n s t ha n
pa t h o g en s i n c o n t am i n a t e d w a t e r s
6 . I nd i c a t o r sh ou l d b e a s r e s i s t a n t t o adv e r s e e n v i r o n me n t a l
f a c t o r s a n d d i s i n f e c t i on a s p a t h og e n s
7 . I nd i c a t o r sho u l d b e n o n
-p a t h o ge n i c a nd e a sy t o qu a n t i f y
8 . T e s t s f o r t h e i n d i c a t o r sh ou l d b e e a sy a n d a p p l i c ab l e t o a l l t y p e s o f w a t e r
A da p t e d f r o m Go y a l , S . M . 1 9 8 3
t r a d i t i on a l l y be e n c o n s i de r e d a u s e f u l i nd i c a t o r , e sp e c i a l l y f o r
t h e c l a s s i c a l ba c t e r i a l pa t h o g en s su ch a s Sal mo n el l a , S h i g e l l a ,
a n d Vi br i o ch ol er a . M a n y sh o r t c o m i ng s ha v e b e c o me a p p a r e n t . N o t
a l l o f t h e c o l i f o r m b a c t e r i a de t e c t e d i n w a t e r a r e n e c e s s a r i l y o f
f e c a l o r i g i n , w h i ch c o n s e qu e n t l y g e ne r a t e s o c c a s i o na l f a l s e
p o s i t i v e s f o r f e c a l c o n t am
i
na t i o n . T h i s i s e s pe c i al l y ap r o b l e m
i n t r o p i c a l wa t e r s w he r e t o t a l a nd f e ca l c o l i f o r ms ha v e b e e n
d emo n s t r a t e d n o t o n l y t o p e r s i s t f o r l o ng p e r i o d s i n t h e
e n v i r o nme n t bu t a l s o t o mu l t i p l y
(
T o r a n z o s e t a l . 19 9 1)
.
F u
j
i o k a(
1 9 8 8)
f ou n d b e t we en 1 0 0 a nd 10 , 0 00 c o l o n y f o r m i n gu n i t s o f f e ca l c o l i f o r ms p e r 1 0 0 m l i n st r e ams
i
n H a w a i i ,i n c l u d i n g s t r e a ms w i t h n o kn o w n f e c a l i npu t . Ri v e r a e t a l