IVERMECTINA CONTRA Haemonchus contortus RESISTENTE EN
OVINOS
Lloberas, M.1; Álvarez, L2; Entrocasso, C.1; Virkel, G.2; Lanusse, C.2; y Lifschitz, A.2
1Laboratorio de Parasitología, EEA INTA Balcarce, Argentina; 2Laboratorio de Farmacología, CIVETAN
(CONICET), Facultad de Ciencias Veterinarias, UNCPBA, Tandil, Argentina
Introducción
Las LMs se pueden administrar por diferentes vías que fueron extensamente probadas. Las formulaciones disponibles para ovinos son soluciones inyectables para ser aplicadas por vía subcutánea y soluciones para ser administradas vía oral. Las mismas presentan algunas diferencias que comprenden desde su utilización en la práctica clínica así como también de su espectro antiparasitario. En nuestras condiciones de explotación, la formulación subcutánea de IVM fue la más utilizada, por su practicidad, su espectro contra endo y ectoparásitos y su elevada eficacia inicial, además de ser la única formulación disponible en el mercado. Sin embargo, con la aparición de resistencia por parte de diferentes géneros parasitarios, las condiciones óptimas de vías de utilización deben ser reevaluadas. En este escenario el objetivo del trabajo fue comparar la eficacia clínica y la farmacocinética de la Ivermectina bajo condiciones estandarizadas en un mismo estudio, administrada por diferentes vías (subcutánea e intraruminal) sobre cepas de parásitos resistentes a endectocidas
Materiales y Métodos
Se utilizaron 26 corderos, naturalmente infectados en la Reserva 8 de INTA Balcarce, con antecedentes de resistencia a la Ivermectina (IVM). Los animales fueron divididos en tres grupos experimentales homogéneos en cuanto a edad, peso y estado sanitario: a) sin tratamiento antihelmíntico (grupo CONTROL), (n=6); b) tratado con Ivermectina (IVM) por vía subcutánea a la dosis de 0,2 mg/kg (grupo SC, (n=9); y c) tratado con IVM por vía intraruminal a la dosis de 0,2 mg/kg (grupo IR, n=10). Para el estudio parasitológico, al día 15 post-tratamiento se realizó la necropsia parasitológica de seis animales por grupo, para el conteo e identificación de parásitos adultos en el aparato digestivo según los lineamienlos de la World Association for the Advancement of Veterinary Parasitology (WAAVP).
El porcentaje de eficacia de cada grupo fue calculado a través de la determinación de la media geométrica del número de nematodos recuperados en cada grupo experimental, utilizando la siguiente fórmula:
Eficacia (%) = [(media geométrica control - media geométrica tratado) / media geométrica control] x 100.
Se realizó el análisis estadístico por métodos no paramétricos (Kruskal Wallis).
Para el estudio farmacológico se tomaron muestras de sangre por punción venosa durante los 15 días del experimento para evaluar la disponibilidad plasmática según tratamiento. Se sacrificaron cuatro animales por grupo a los tres días post-tratamiento, de los que se tomaron muestras de mucosas y fluidos del abomaso e intestino, y también se recolectaron los especímenes adultos de H. contortus. Las muestras colectadas fueron analizadas por cromatografía líquida de alta performance (HPLC). El análisis de los datos obtenidos se realizó por el programa PK solution y se realizó un ANOVA para establecer las diferencias estadísticas.
Resultados
La eficacia total fue de 70,3 y 95,3% para los grupos SC e IR, respectivamente. En el abomaso, la eficacia fue de 52,4 y 81,9%; los géneros implicados se muestran en la Tabla 1. En el intestino la eficacia fue de 59,2 y 99,9% para SC e IR, respectivamente, encontrándose diferencias significativas de los tratamientos con respecto al grupo testigo y entre tratamientos.
Tabla 1. Media geométrica (Xg) y eficacia de los tratamientos en el control de parásitos del abomaso.
Como muestra la Figura 1, las concentraciones plasmáticas de IVM administrada por vía SC fueron mayores que cuando fue administrada por vía IR, lo que determina una mayor Trata-
Miento Haemonchus spTelad. sp T.axei Total CONTROL Xg 502,4 a 789,8 a 322,0 a 1.740,6 a SC Xg Eficacia (%) 597,4 a 36,1 b 20,6 b 829,2 ab 0 95,4 93,6 52,4 IR Xg Eficacia (%) 300,1 a 3,2 c 0,6 c 313,8 b 40,2 99,6 99,8 81,9
disponibilidad plasmática, particularmente útil en el tratamiento de parásitos externos. Sin embargo, las concentraciones de IVM en el contenido y mucosas del tracto gastrointestinal (sitio de localización del parásito) fueron mayores cuando la droga fue administrada por vía IR (Figura 2).
Figura 1. Perfil de concentraciones plasmáticas (promedios ± desvío estándar) de Ivermectina tras su administración por vía subcutánea (SC) e intraruminal (IR) a razón de 0,2 mg/kg en.
Figura 2. Concentraciones de Ivermectina (IVM) en H. contortus tras su administración por vía subcutánea (SC) e intraruminal (R) a razón de 0,2 mg/kg en ovinos. 0 20 40 60 80 100 120 140 160 IVM concentration (ng/g) SC IR *
El inserto muestra la correlación obtenida entre las concentraciones de droga en e! parásito y las obtenidas en el contenido abomasal. (*) Concentraciones significativamente diferentes; r2 coeficiente de correlación.
Discusión
La disponibilidad plasmática para ambas vías de administración fue similar. No obstante los resultados del TEC mostraron que la eficacia de la IVM es mayor cuando la droga es administrada por vía IR. Esta diferencia es más marcada en el abomaso y más específicamente en H. contortus, principal parásito del ovino, donde la eficacia aumentó un 40% cuando se administró IVM por vía IR. La mayor concentración del fármaco hallada en el parásito luego del tratamiento IR permite aseverar que la incorporación de la droga al parásito por vía transcuticular es relevante para su eficacia, aún para aquellos parásitos hematófagos como H. contortus, y la mayor concentración del fármaco en el sitio de localización parasitaria es fundamental para la incorporación de dicho fármaco al parasito. Estas mayores concentraciones encontradas en el contenido abomasal y en el parasito se correlacionan con los valores de eficacia obtenidos luego de los dos trtamientos. Por lo tanto, la vía enteral puede ser utilizada como alternativa terapéutica en casos de resistencia múltiple a drogas.
Conclusión
La mayor concentración de IVM dentro de los parásitos luego de la administración por vía IR, permite aseverar que la incorporación de la droga al parásito por vía transcuticular es relevante para la eficacia clínica, aún para aquellos parásitos hematófagos como H. contortus. Basados en estos resultados el incremento de la exposición al fármaco modificando la vía de administración puede ser una buena estrategia para matar a los nematodos resistentes heterocigotos presentes en las fases tempranas del desarrollo de la resistencia.
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