Lloberas, M.1; Entrocasso, C.1; Alvarez, L.2,3; Borda, B.1; Virkel, G.2,3; Lanusse, C.2,3; Lifschitz, A.2,3 1INTA EEA Balcarce; 2Lab. Farmacología FCV, UNCPBA, Tandil; 3CONICET
Introducción
Las lactonas macrocíclicas (LMs) son un grupo de fármacos ampliamente utilizados en el control de parásitos en rumiantes. Dentro de este grupo, ivermectina es la más difundida por su utilización en diferentes especies animales, existiendo un número importante de estudios farmacocinéticos con este fármaco. La resistencia de algunos helmintos nematodos gastrointestinales del ganado a la ivermectina y después a otros endectocidas se extendió ya en los años 90 del siglo pasado, sobre todo en ovinos. En estudios realizados previamente, la utilización de las LMs por la vía oral en ovinos y caprinos demostró tener una mejor eficacia frente a nematodos resistentes comparado con la vía SC (Gopal et al., 2001). Además, se reportaron diferentes patrones de eficacia para ivermectina (IVM), abamectina (ABM) y moxidectina (MXD) en ovinos infestados con nematodos gastrointestinales resistentes (Barnes et al., 2001; Alka et al., 2004). Aunque estos compuestos son estructuralmente semejantes y presentan el mismo mecanismo de acción, se han observado algunas diferencias en la eficacia contra los nematodos resistentes, particularmente después de su administración oral en ovinos infestados. En base a estos antecedentes se planteó como objetivo de este trabajo comparar la eficacia de IVM, ABM y MXD contra nematodos resistentes a IVM después de su administración intrarruminal a corderos infestados naturalmente con parásitos gastrointestinales.
Materiales y Métodos
Se utilizaron veinticuatro (24) corderos infectados naturalmente con nematodos gastrointestinales resistentes a IVM (cepa R8). Se eligieron corderos de peso y HPG homogéneo. Los animales se asignaron en forma aleatoria a cuatro (4) grupos experimentales (n = 6), un grupo control no tratado y 3 grupos tratados por vía intrarruminal a razón de 0,2 mg / kg con IVM, ABM o MXD. Se realizó el Test de reducción del conteo de huevos (TRCH) para obtener la eficacia clínica de cada uno de los fármacos. Para ello se extrajeron muestras de materia fecal, directamente del recto de los corderos, para el
conteo de huevos de parásitos
gastrointestinales (HPG) a los 0, 6, 9 y 15 días después del tratamiento. Se realizó el
coprocultivo para determinar los géneros intervinientes a partir de un pool de materia fecal de cada grupo y en cada muestreo. Para el cálculo de la Eficacia de cada uno de los fármacos se realizó un Test de eficacia controlada (TEC), para ello se efectuó el examen post-mortem al día 15 después del tratamiento y se recuperaron los nematodos gastrointestinales adultos de cada órgano. Se llevó a cabo el conteo e identificación de géneros (Niec, 1968). Los resultados obtenidos en cada prueba (TRCH y TEC) se calcularon según los lineamientos de la WAAVP. La comparación estadística se realizó por métodos no paramétricos (Kruskal Wallis).
Resultados
Los resultados obtenidos demuestran altos niveles de resistencia a las LMs en la cepa R8. El TRCH mostró una falla completa en el porcentaje de reducción de huevos de IVM y ABM (0%), mientras la reducción de huevos de MXD alcanzó un 87% (Gráfico 1).
Gráfico 1. HPG A los 15 días post tratamiento, valores del porcentaje de reducción para cada grupo tratado.
La eficacia total medida por el TEC, mostró diferencias significativas (p ≤ 0.001) entre las diferentes LMs, 84,8% (IVM), 90,2% (ABM) y 98,0% (MXD). Haemonchus contortus fue la especie que demostró ser siempre resistente. En esta especie la eficacia fue de 20 % para IVM, 39 % para ABM y 89,6 % para MXD (Tabla 1).
La eficacia frente a los nematodos intestinales fue mayor al 98 % en todas las especies presentes (Tabla 2) con una eficacia del 99,5 % para IVM, 99,9 % para ABM y 100 % para MXD. 0 1000 2000 3000 4000 5000
CONTROL IVM ABM MXD
TRCH 0% TRCH 0% TRCH 87%
Tabla 1. Media geométrica de nematodos adultos abomasales obtenidos a los 15 días post tratamiento. Letras diferentes presentan diferencia significativa (p≤ 0,05)
H.contortus Teladorsagia T. axei
CONTROL 1275a 1707a 116a
IVM 1020a 5b 0b
ABM 768ab 0b 0b
MXD 130b 0b 0b
Tabla 2. Media geométrica de nematodos adultos del intestino delgado obtenidos al día 15 post tratamiento. Letras diferentes presentan diferencia significativa (p≤ 0,05) T. colubriformis Cooperia spp. Nematodirus spp. CONTROL 963a 171a 958a IVM 6ab 3ab 5b ABM 0b 0b 2b MXD 0b 0b 0b Discusión
Las LM comparten algunas propiedades fisicoquímicas generales; pequeñas diferencias en la estructura química entre avermectinas (IVM y ABM) y milbemicinas (MXD) o aun dentro de las avermectinas determinan cambios en el comportamiento farmacocinético, lo cual repercute sobre la eficacia y la persistencia antiparasitaria de las mismas (Lanusse et al., 2013).
Existen evidencias previas que sugieren que IVM, ABM y MXD comparten su mecanismo de acción uniéndose a un receptor de alta afinidad, lo que provoca un incremento en la permeabilidad de los iones Cl-, con el consiguiente desprendimiento del parásito por una parálisis flácida. Y también existen evidencias que comparten sus mecanismos de resistencia. Generalmente la resistencia a una droga dentro de una clase de antihelmínticos confiere resistencia a toda la clase, este fenómeno es denominado resistencia lateral. Algún grado de resistencia lateral existe y fue demostrada previamente por algunos autores. No obstante, en este trabajo, a la dosis terapéutica recomendada para rumiantes, MXD fue más efectiva respecto a las AVM bajo estudio. Estos resultados pueden deberse a que los mecanismos de resistencia no son exactamente idénticos para las diferentes LMs, y que frente a determinados géneros MXD puede presentar una mayor potencia relativa que la IVM (Lanusse et al., 2013).
Existen numerosos antecedentes de que esta mayor eficacia puede ser solo de carácter temporal y que está supeditada a la selección de genes adicionales de resistencia. En este sentido y teniendo en cuenta la frecuencia de la resistencia a IVM, la resistencia a MXD es cada
vez más frecuente en diferentes lugares del mundo y en nuestro país.
En el presente trabajo MXD conserva elevados valores de eficacia, aun cuando existe una marcada resistencia a ABM e IVM, este concepto es coincidente a los expuestos por varios autores, entre ellos Kaplan et al. (2007) y Anziani et al. (2008).
Conclusión
La ventaja de la utilización de la vía de administración oral (IR) comparado con la vía parenteral y los patrones de eficacia diferencial observados entre las diferentes LMs deberían ser considerados para optimizar el control de los nematodos gastrointestinales en estadios tempranos del desarrollo de la resistencia antihelmíntica, antes de que ocurra una completa falla terapéutica. Por otro lado, la mayor potencia relativa de MXD, puede ser utilizada en forma estratégica en el planteo de programas de control parasitario, principalmente cuando la resistencia a otras LMs está presente.
Bibliografía
-Alka K,Gopal RM:, Sandhu KS., Sidhu PK. 2004. Efficacy of abamectin against ivermectin-resistant strain of Trichostrongylus colubriformis in sheep. Vet. Parasitol., 121, 277-83.
-Gopal RM., West DM., Pomroy WE. 2001. The difference in efficacy of ivermectin oral,moxidectin oral and moxidectin injectable formulations against an ivermectin-resistant strain of Trichostrongylus colubriformis in sheep. N Z Vet J., 49, 133-137. -Lanusse, C.; Álvarez, L.; Lifschitz, A.; Suárez, G. 2013. Bases farmacológicas de la terapéutica antihelmíntica. En: Enfermedades Parasitarias de Importancia Clínica y Productiva en Rumiantes. Fiel, C. y Nari A. Editorial Hemisferio Sur, SRL (Uruguay), pp 223-53.
-Kaplan, R.M., Vidyashankar, A.N., Howell, S.B., Neiss, J.M., Williamson, L.H., Terrill, T.H. 2007. A novel approach for combining the use of in vitro and in vivo data to measure and detect emerging moxidectin resistance in gastrointestinal nematodes of goats. International Journal for Parasitology, 37 (7): 795–804.
-Anziani,O.S., Caffe, G., Aguilar, S., Cervilla, N., Litterio, N., Boggio, J. 2008. Eficacia de la moxidectina en el control de aislamientos de Haemonchus spp. resistentes a la ivermectina en cabras. xviii Jornadas Argentinas y xiii Jornadas Latinoamericanas de Fármaco-Toxicología. Buenos Aires. Argentina.
-Niec R. 1968. Cultivo e identificación de larvas infectantes de nematodes gastrointestinales del bovino y ovino. Manual técnico N° 3. INTA, Argentina, Pp 1-37.