Background - Randomized Numerical Linear Algebra for Large-scale Matrix Data

arilesterasa y expresión de CYP7A1 en ratas Zucker fa/fa.

Los resultados de estos parámetros se resumen en la Tabla 15.

Se observaron interacciones significativas entre el tipo de RP y el colesterol para todos los parámetros excepto para AE y CYP7A1. Tanto la adición de colesterol como el tipo de RP modificaron significativamente la mayoría los parámetros testados. No existieron diferencias significativas para ningún parámetro, excepto para la expresión CYP7A1 entre los grupos C, G y GS. No obstante, en los lotes G y GS la colesterolemia >5,16 mmol/L fue menos prevalente (0 y 17%, respectivamente) que en el grupo C (33 %).

Las ratas HC mostraron niveles más elevados de, colesterol total, TG, fosfolípidos y lípidos totales, así como de la relación colesterol/fosfolípidos (p <0,05), pero menores de AE, y de los cocientes AE/colesterol y AE/HDLc (P <0,05) que sus respectivas C. Las ratas HG manifestaron niveles mayores de lípidos totales, colesterol total y cocientes colesterol/fosfolípidos (P <0,05), pero menores de AE/colesterol (P <0,01) que las del grupo G. Con excepción de la disminución de TG, otros lípidos no se afectaron en las ratas HGS respecto al grupo GS. Los animales del lote HG exhibieron niveles significativamente menores de todos los parámetros excepto de colesterol/fosfolípidos, AE, AE/colesterol y AE/HDLc respecto a las ratas HC. En el grupo HGS respecto al. HC, todos los parámetros, excepto AE, se vieron afectados (como mínimo P <0,05); los niveles de lípidos disminuyeron y los cocientes donde se incluyó AE se incrementaron.

La expresión génica de la enzima CYP7A1 se afectó significativamente por los RP y por la adición de colesterol (como mínimo p =0,001). La inclusión de glucomanano o glucomanano más espirulina incrementó su expresión tanto en animales alimentados con dieta adicionada o no con colesterol. La expresión de CYP7A1 en el grupo GS fue el doble que en el G (p <0,05). Dicha expresión estuvo inversamente relacionada con los niveles de colesterol en plasma (r =-0,585; p =0,001) en ratas alimentadas con el agente hipercolesterolemiante.

Las concentraciones de colesterol y TG de las diferentes fracciones lipoproteicas se muestran en la Tabla 16. Se observó una interacción significativa entre el tipo de RP y el colesterol para VLDLc, (IDL+LDL)c, HDLc (todas con P <0,001), y HDL/TG (P =0,002), y para el cociente colesterol/TG en las HDL (P =0,040). La adición de agente hipercolesterolemiante a la dieta y el tipo de RP afectaron el contenido de colesterol de las fracciones VLDL e IDL+LDL (P <0,001), HDL (P =0,048) y HDL-TG (P =0,012). El colesterol en la dieta modificó el contenido de TG en IDL+LDL, el cociente colesterol/TG en VLDL, y el cociente colesterol total/HDLc (todos P <0,001), mientras que el tipo de RP cambió significativamente el contenido de VLDL-TG (P =0.038) y el cociente colesterol/TG en las HDL (P =0,002).

Se contabilizaron cantidades similares de todos los lípidos en las lipoproteínas de las ratas de los grupos G y C, mientras que las del grupo GS mostraron cantidades más elevadas de HDL-TG que las ratas de los grupos C y G. Respecto a los grupos HG y HGS las concentraciones de VLDLc, (IDL+LDL)c, HDLc y VLDL-TG fueron menores que las del grupo HC (como mínimo P <0,05). Respecto a las ratas que consumieron dietas enriquecidas en colesterol, el grupo HGS presentó concentraciones más bajas de (IDL+LDL)c, HDLc y VLDL-TG que el grupo HG. El cociente colesterol/TG fue significativamente menor en las HDL de los grupos HG y HGS que en las del lote HC (al menos P <0,05).

Tabla 14. Glucemia, insulinemia y marcadores de resistencia a la insulina y/o diabetes mellitus tipo 2 en ratas Zucker fa/fa en ratas alimentadas con cárnicos reestructurados (RP) control, con glucomanano y glucomanano más spirulina, adicionado o no con agente hipercolesterolemiante.

Colesterol añadido

C/HC G/HG GS/HGS ANOVA

RP Colesterol RP*colesterol

Media ± DE Media ± DE Media ± DE

Glucosa en plasma (mmol/L) No 19,29 ±1,93 19,71 ± 4,09 18,91 ± 3,36 0,986 0,001 0,865

Si 12,83 ±3,45** 12,43 ± 7,92 13,83 ± 4,80

Insulina (mUI/L) No 21,50 ± 18,15a 43,19 ± 14,53ab 75,94 ± 50,61b 0,070 0,025 0,011

Yes 26,60 ± 13,77 38,10 ± 23,83 18,51 ± 13,70*

HOMA IR No 18,82 ±17,80a 36,35 ± 9,72ab 60,02 ± 36,25b 0,037 <0,001 0,010

Yes 14,90 ± 8,65 18,28 ± 9,81** 10,96 ± 7,03**

HOMA S No 0,094 ± 0,071a 0,029 ± 0,007b 0,029 ± 0,030ab 0,48 0,12 0,27

Si 0,089 ± 0,049 0,073 ± 0,046* 0,21 ± 0,30

HOMA B No 27,06 ± 20,37a 57,33 ± 24,68ab 109,60 ± 24,68b 0,082 0,52 0,011

Si 62,02 ± 29,17ab* 126,27 ± 83,20a 40,25 ± 33,66b HOMA D No 1,53 ± 0,36 1,57 ± 0,60 1,69 ± 0,66 0,25 <0,001 0,24 Si 4,61 ± 2,21* 8,35 ± 5,65* 4,62 ± 3,68 QUICKI No 0,27 ± 0,026a 0,24 ± 0,006b 0,23 ± 0,023b 0,26 0,006 0,067 Si 0,27 ± 0,019 0,26 ± 0,019* 0,29 ± 0,042* Índice TyG¥ _No _{10,03 ± 0,61} _{10,13 ± 0,40} _{10,14 ± 0,25} _0,085 _0,025 _0,026 Si 10,25 ± 0,27a 9,68 ± 0,48ab 9,14 ± 0,70b*

Cociente Leptina/ Adiponectina Plasma (ng/µg)

No 0,88 ± 0,21 1,16 ± 0,10 1,64 ± 0,94 0,10 0,18 0,57

Si 0,89 ± 0,19 0,66 ± 0,06 1,21 ± 0,46

C, dieta RP control; HC, dieta RP control con agente hipercolesterolemiante, G, dieta RP con glucomanano; HG, dieta RP con glucomanano y agente hipercolesterolemiante; GS, dieta con glucomannan más spirulina; HGS, dieta RP con glucomanano más spirulina y agente hipercolesterolemiante. Valores (medias ± desviación estándar de 6 animales) en una misma fila con letras distintas (abc) fueron significativamente diferentes (P <0,05; test de Bonferroni, ó T2 de Tanhame). Valores en la misma columna para el mismo parámetro con asteriscos (*P<0.05, **P<0.01 y ***P<0.001) señalan diferencias significativas entre grupos adicionados o no con agente hipercolesterolemiante.

Tabla 15. Parametros plasmáticos determinados en ratas Zucker fa/fa en ratas alimentadas con cárnicos reestructurados (RP) control, con glucomanano y glucomanano más spirulina, adicionado o no con agente hipercolesterolemiante.

Colesterol

añadido C/HC G/HG GS/HGS _RP _ColesterolANOVA _Interacción

RP*colesterol Colesterol total (mmol/L)1 No 4,41 ± 0,98 4,34 ± 0,40 4,73 ± 0,87 ˂0,001 ˂0,001 ˂0,001 Si 25,6 ± 8,4 a** 10,8 ± 2,1 b*** 6,12 ± 3,60 b Trigliceridos (mmol/L)1 No 1,69 ± 1,08 1,75 ± 0,77 1,74 ± 0,47 0,055 0,12 0,022 Si 2,95 ± 0,79 a* 1,84 ± 0,27 b 0,96 ± 0,41 c* Fosfolípidos (mmol/L)1 No 4,06 ± 1,40 4,23 ± 1,14 4,05 ± 1,37 0,001 0,002 0,001 Si 9,71 ± 3,14 a** 5,52 ± 1,25 b 4,17 ± 0,99 b Lipidos totales en plasma

(g/L)2 No 6,26 ± 2,04 6,41 ± 1,20 6,42 ± 1,61 <0,001 <0,001 <0,001 Si 19,8 ±5,9 a*** 9,96 ± 1,59 b*** 6,34 ± 2,24 b Colesterol/fosfolípidos (mg/mg) No_Si _{1,36 ± 0,13 a***}0,61 ± 0,27 _{1,05 ± 0,31 ab*}0,59 ± 0,30 _{0,74 ± 0,35 b}0,64 ± 0,22 0,061 <0,001 0,037 Arilesterasa (U/L) No_Si 1012 ± 319_{610 ± 186*} 952 ± 292_{674 ± 210} 970 ± 297_{655 ± 226} 1 0,001 0,84 AE/colesterol

(U/mg) No_Si _{0,07 ± 0,04 a***}0,60 ± 0,17 _{0,16 ± 0,03 a**}0,58 ± 0,21 _{0,34 ± 0,19 b}0,54 ± 0,17 0,291 <0,001 0,046 AE/ HDLc

(U/mg) No_Si _{0,37 ± 0,16 a***}0,85 ± 0,19 _{0,96 ± 0,42 ab}0,89 ± 0,35 _{1,49 ± 0,86 b}0,69 ± 0,20 0,054 0,43 0,010 CYP7A1

(Unidades arbitrarias) No_Si _{192 ± 57,3 a**}100 ± 30,8 a _{335 ± 103 b**}172 ± 35,0 b _{442 ± 125 b}363 ± 107 c <0,001 0,001 0,46

Tabla 16. Concentraciones de colesterol y trigliceridos, y cocientes colesterol/TG en las fracciones lipoproteicas, en ratas Zucker fa/fa en ratas alimentadas con cárnicos reestructurados (RP) control, con glucomanano y glucomanano más spirulina, adicionado o no con agente hipercolesterolemiante.

Colesterol

añadido C/HC G/HG GS/HGS _RP _{Colesterol Interacción RP* colesterol}ANOVA

VLDL-colesterol (mmol/L) NoSi 5,26 ± 1,56 a***0,59 ± 0,22 2,62 ± 1,17 b**0,61 ± 0,21 1,88 ± 1,00 b*0,32 ± 0,05 <0,001 <0,001 <0,001 (IDL+LDL)-colesterol (mmol/L) NoSi 13,2 ± 3,89 a***0,48 ± 0,15 5,41 ± 1,69 b***0,30 ± 0,10 2,42 ± 0,97 c***0,33 ± 0,11 <0,001 <0,001 <0,001 HDL-colesterol (mmol/L) NoSi 4,81 ± 2,13 a3,05 ± 0,56 1,91 ± 0,29 b***2,86 ± 0,39 1,32 ± 0,55 c*3,68 ± 0,71 <0,001 0,048 <0,001 VLDL-TG (mmol/L) NoSi 1,79 ± 0,57 a1,41 ± 0,96 0,89 ± 0,15 b*1,42 ± 0,74 0,36 ± 0,29 c1,06 ± 0,41 0,038 0,41 0,19 (IDL+LDL)-TG

(mmol/L) NoSi 0,87 ± 0,34 a***0,08 ± 0,01 0,58 ± 0,25 ab**0,04 ± 0,02 0,41 ± 0,14 b*0,06 ± 0,04 0,050 <0,001 0,105 HDL-TG (mmol/L) NoSi 0,26 ± 0,14 a0,24 ± 0,14 0,33 ± 0,08 a0,33 ± 0,07 0,57 ± 0,18 b0,20 ± 0,12* 0,012 0,012 0,002 Colesterol total / HDL-colesterol NoSi 7,22 ± 1,82***2,12 ± 0,51 a 6,25 ± 1,83***1,53 ± 0,11 b 5,92 ± 3,34**1,52 ± 0,13 b 0,51 <0,001 0,76 Cociente VLDLcolesterol / TG No 0,21 ± 0,07 0,21 ± 0,08 0,15 ± 0,10 0,21 <0,001 0,19 Si 1,33 ± 0,39*** 1,32 ± 0,63** 2,83 ± 2,42* Cociente (IDL+LDL) colesterol /

TGo NoSi 7,24 ± 2,90 a8,26 ± 6,96 4,72 ± 2,56 ab4,34 ± 2,57 2,61 ± 1,01 b*14,84 ± 7,02 0,66 0,38 0,18 Cociente HDL colesterol /

TG NoSi 11,10 ± 3,00 a*6,04 ± 2,32 2,62 ± 0,81 b*4,02 ± 1,30 3,36 ± 1,77 b3,03 ± 1,17 0,002 0,061 0,040

Cuando los resultados fueron estudiados desde la perspectiva del RP, se encontró que los grupos HC, HG, y HGS presentaron más colesterol en las fracciones VLDL, IDL+LDL con respecto a sus respectivas normocolesterolémicas (como mínimo P <0,05). Los niveles de HDLc fueron menores en HG y HGS respecto a G y GS (P <0,001 y

P <0,05, respectivamente). La dieta HC incrementó los TG en la fracción IDL+LDL (P

<0,001), mientras que la dieta HG disminuyó VLDL-TG (P <0,05) y elevó el contenido de IDL+LDL-TG (P <0,01). En las ratas HGS vs. GS se observó más TG en la fracción IDL+LDL (P <0,05), pero menores niveles de HDL-TG (P <0,05). El cociente colesterol/TG fue significativamente mayor en VLDL en las ratas HC, HG y HGS vs. C, G, GS (P <0,05). Este cociente fue más elevado en las HDL de las ratas HC respecto a las C (P <0,05), pero más bajo en el grupo HG vs. G (P <0,05).

En las Figura 18a y 18b se presenta el efecto de las dietas sobre la fracción lipídica de las fracciones lipoproteicas, se observó una interacción significativa entre el colesterol y la dieta con respecto al porcentaje de colesterol en las fracciones IDL+LDL y HDL (P <0,001). El tipo de RP afectó al porcentaje de contribución del colesterol en VLDL, IDL+LDL y HDL (P <0,001). La suplementación con colesterol influyó en la concentración de colesterol (como mínimo P =0,003) y TG (P <0,001) en VLDL, IDL+LDL y HDL.

5.5. Efecto del consumo de reestructurados cárnicos conteniendo glucomanano o

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