Los modelos animales raramente reproducen el espectro completo de las enfermedades humanas complejas. A su vez, las enfermedades en humanos a menudo expresan diferentes fenotipos clínicos. Por lo tanto, la utilidad de los modelos animales reside en reproducir ciertos aspectos de la patogénesis de las enfermedades en orden de obtener conocimiento de los mecanismos, aunque sea sólo sobre algunas etapas y proponer estrategias terapéuticas a ser testeadas en ensayos clínicos.
Existen, como ya describimos antes, una amplia variedad de modelos animales orientados al estudio de la intolerancia al antígeno dietario, gliadinas.
Particularmente, es el interés de esta sección prestar especial atención a aquellos modelos orientados a determinar la participación de HLA-DQ8 y la respuesta específica en el desarrollo de EC. Uno de estos modelos utilizó un ratón transgénico que expresaba el gen de la molécula DQ8 (Black, Murray, and David 2002). En este modelo, no se observó desarrollo espontáneo de signos asociados a enteropatía. Sin embargo, una vez sensibilizados con gluten por inyección intraperitoneal, los ratones desarrollaron una fuerte respuesta proliferativa de células T como así también una producción de anticuerpos anti-gliadinas elevada (Black, Murray, and David 2002). Otro estudio realizado con estos mismos ratones demostró que si a la inyección intraperitoneal de gliadinas se le suma la administración oral durante 3 semanas, se producía un incremento en el número de LIEs CD3+, pero aún así, no se observaba cambios histológicos (atrofia
vellositaria). En forma llamativa, los animales tratados presentaban una disfunción neuromuscular dependiente de gliadinas (E F Verdu et al. 2008).
Los resultados obtenidos en estos modelos muestran que el entorno generado por la molécula de HLA-DQ8 puede ser apropiado para la inducción de
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cierto tipo de respuesta pero es insuficiente per se para el desarrollo completo de las alteraciones observadas en EC.
Considerando que otros genes de predisposición deben estar involucrados, se emplearon animales de la cepa NOD con el fin de evaluar la contribución de un contexto de autoinmunidad al desarrollo de un modelo de EC. Estos animales han contribuido sustancialmente al conocimiento de los mecanismos de Diabetes Mellitus Tipo I (DMI), enfermedad asociada a EC (Rashtak, Marietta, and Murray 2009; Barera et al. 2002; Ludvigsson et al. 2006). Los ratones NOD presentaron altura de vellosidad reducida y un incremento en el número de LIEs mientras ingirieron gluten en su dieta (Maurano et al. 2005). Estos resultados revelaron que los animales NOD podían ser un modelo experimental útil para evaluar mecanismos de la patogénesis de EC.
Es sabido que DMI y EC comparten los alelos de susceptibilidad DQ2-DR3 y DQ8-DR4. Aunque son elementos críticos, la sola presencia de estas moléculas no es suficiente para el desarrollo de estas patologías.
Por todo lo mencionado, con el fin de evaluar la contribución tanto del entorno de autoinmunidad conferido por los ratones NOD como la participación de moléculas de los alelos de susceptibilidad, ratones NOD fueron cruzados con ratones transgénicos DQ8, obteniendo los ratones denominados NOD Abo DQ8 (NOD-DQ8). Estos animales son capaces de generar tolerancia al gluten sin desarrollar espontáneamente signos asociados a Sensibilidad al gluten (Marietta et al. 2004). Estos resultados sugieren que aún en presencia de un entorno de autoinmunidad, la expresión de DQ8 no es suficiente para generar alteraciones en la mucosa intestinal que reproduzcan lo observado en EC. Por lo tanto, estos modelos indican que los factores genéticos de susceptibilidad deben acompañarse de otros factores.
Un estudio reciente con ratones NOD-DQ8, realizado en colaboración con el grupo de la Dra Verdú (Hamilton, Canadá) encontró que la depleción parcial de linfocitos T regulatorios inyectando un anticuerpo anti-CD25, conduce a un incremento en el número de LIEs CD3+ y una disminución del cociente V/C.
Ambos cambios sólo fueron significativos cuando se realizó una sensibilización con gliadinas después de la depleción de los linfocitos T regulatorios. En forma llamativa, se observó una fuerte respuesta inflamatoria en páncreas, con insulitis severa; sin embargo, estos ratones no generaron hiperglucemia (Galipeau et al. 2011). Estos resultados sugieren que mediante una disrupción temporal pero severa de los linfocitos T regulatorios en los ratones NOD-DQ8 se pueden
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reproducir algunas de las características de la enteropatía dependiente de gluten si se los estimula con gliadinas. Además, también fue demostrado que la respuesta generada en intestino delgado puede tener consecuencias extraintestinales.
Como ya ha sido mencionado, los modelos experimentales desarrollados han permitido evaluar algunos aspectos relacionados con la respuesta específica frente a gliadinas. Sin embargo, hay dos aspectos relevantes que no han sido abordados aún. El primero, se refiere a los eventos iniciales que promueven una respuesta inflamatoria local (estudios desarrollados en los capítulos anteriores). El segundo, y de suma relevancia en el contexto de la patología, es conocer si la alteración provocada durante la respuesta inicial tiene consecuencias a largo plazo en la respuesta frente a gliadinas y en el establecimiento de la lesión crónica.
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OBJETIVOS
El objetivo de esta sección es investigar si la respuesta inflamatoria local inicial inducida por poly (I:C) o por el péptido p31-43, conduce a una enteropatía crónica dependiente de gliadinas en un modelo de ratones NOD-DQ8, genéticamente susceptibles a autoinmunidad y en presencia de una molécula capaz de presentar péptidos derivados de gluten.
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