Data Handling Processor (DHP)

Se han realizado estudios histológicos para comparar las características microscópicas de las fibras musculares y de los tendones de muestras frescas, obtenidas previamente a la inyección de las soluciones fijadoras (tiempo 0), y otras procesadas de acuerdo al método CFP–Soft Fix, a diferentes tiempos de conservación (tiempos I, II, III, IV y V).

El estudio histológico de las muestras de tejido muscular mostró diferencias sustanciales de acuerdo con el tiempo de conservación al cuál se realiza, pero no en cuanto a las dos formas de preservación.

En los preparados histológicos de las muestras a tiempo 0 se observó una estructura muscular normal, en la que las fibras musculares presentan núcleos periféricos y estriaciones transversales, con su cubierta conjuntiva (endomisio) conservada (Figura 53).

Figura 53

Histología de las fibras musculares estriadas esqueléticas normales (tiempo 0, previamente a la perfusión).

Referencias: Coloración de hematoxilina-eosina. a y b- corte transversal; c y d- corte longitudinal. Se observan los núcleos periféricos y las estriaciones transversales. Aumentos 20X y 40X, respectivamente.

Las muestras obtenidas inmediatamente luego de la perfusión de las soluciones fijadoras (tiempo I) mostraron algunas fibras musculares tumefactas, con escasos núcleos, estriaciones transversales parcialmente conservadas y vacuolización sarcoplasmática. En las muestras obtenidas luego de 7 días de inmersión del cadáver completo (tiempo II) se observó una imagen del tejido muscular equivalente a estadios iniciales de una necrosis por coagulación, donde se conserva la forma de las fibras, pero no se observan los núcleos ni las estriaciones transversales típicas del músculo esquelético. El sarcoplasma de algunas fibras es acidófilo y de aspecto homogéneo y el de otras presenta vacuolas.

Luego de 14 días de inmersión (tiempo III) la imagen del tejido muscular es la típica de una necrosis por coagulación, en la que las fibras musculares aparecen como si hubieran sido “picadas” o “molidas” (sin núcleos, con sarcoplasma acidófilo y homogéneo y sin estriaciones), pero contenidas en una vaina de colágeno (endomisio) que permanece intacta (Figura 54). Se observa también que las otras vainas conjuntivas,

el perimisio y el epimisio, se encuentran conservadas, manteniéndose así la estructura macroscópica del músculo (Figura 55).

Las alteraciones histológicas descriptas para las muestras de tiempo III se mantuvieron a lo largo del tiempo, es decir, en las muestras IV y V.

Figura 54

Histología de las fibras musculares estriadas esqueléticas luego de los 7 meses de preservación (tiempo V).

Referencias: Coloración de hematoxilina-eosina. a, b y c- corte transversal; d, e y f- corte longitudinal. Se observan fibras muscularessin núcleos, sin estriaciones y con sarcoplasma acidófilo y homogéneo o con vacuolas. Aumentos 10X, 20X y 40X, respectivamente.

Figura 55

Estructura del músculo estriado esquelético.

Referencias: Coloración tricrómica de Masson. a y b- Tiempo 0 (previamente a la perfusión); c y d- Tiempo V (luego de 7 meses de preservación). Se observan las vainas conjuntivas perfectamente conservadas. Aumentos 4X y 10X, respectivamente.

Se sabe que los ácidos tienen efectos muy corrosivos sobre las proteínas y, en nuestro caso, sobre las proteínas musculares (Benkhadra, y otros, 2011). El único ácido que está presente en las soluciones de conservación es el ácido bórico, por lo que se sospecha que es la razón del daño observado en el tejido muscular. No puede atribuirse a los otros productos químicos que componen las soluciones de embalsamamiento, esta singular desnaturalización de la estructura muscular (Hayashi et al., 2016).

El estudio histológico de las muestras del tejido conjuntivo que forma los tendones también mostró diferencias sustanciales de acuerdo al tiempo de preservación al cuál se realizó, no habiendo diferencias en cuanto a la forma de conservación.

Los cambios fueron visibles particularmente con la tinción tricrómica de Masson (coloración específica para las fibras de colágeno), no resultando de mayor utilidad la tinción de picrosirius Red-hematoxilina. En los preparados histológicos de las muestras a tiempos 0 y I se observó que los tendones tenían una estructura histológica normal, en

la que el tejido conjuntivo denso no modelado mostraba los característicos haces de fibras colágenas y núcleos de fibroblastos conservados (Figura 56, a y b). En las muestras obtenidas luego de 7 días de inmersión del cadáver completo se observó una imagen del tejido conjuntivo de aspecto similar al de las muestras a tiempo 0 pero con menor cantidad de núcleos de fibroblastos. Luego de 14 días de inmersión (tiempo III), las imágenes del tejido conjuntivo de los tendones mostraron fibras colágenas normales, pero de aspecto ondulado -típico de isquemia- y ausencia de núcleos de fibroblastos (Figura 56, c y d). Las características observadas en las muestras a tiempo III se replican en las muestras a los tiempos IV y V.

Figura 56

Histología del tejido conjuntivo de los tendones.

Referencias: Coloración tricrómica de Masson. a y b- Tiempo 0 (previo a la perfusión), estructura histológica normal; c y d- Tiempo V (luego de 7 meses de preservación), donde se observan fibras colágenas normales pero de aspecto ondulado -típico de isquemia- y ausencia de núcleos de fibroblastos. Aumentos: a- 20X, b, c y d- 40X.

Las modificaciones histológicas observadas en las muestras de músculo de los miembros pelvianos conservados por el método CFP-Soft Fix, posiblemente podrían explicar la excepcional flexibilidad de estos preparados y la disminución de la circunferencia muscular observada. Las fibras musculares perdieron su estructura

característica, pero permanecen contenidas en sus vainas de colágeno, intactas, preservando así la arquitectura general del músculo. En este sentido, si bien el examen con microscopio de luz no mostró alteraciones significativas en la estructura del tejido conjuntivo en general, no se puede excluir la posibilidad de que existan alteraciones en la ultraestructura del colágeno. Así, la estructura del colágeno debería ser estudiada más detenidamente por microscopía electrónica.