Data and Status Depiction

Extracción de Mercurio Móvil

En esta etapa se emplea como agente extractante una disolución de HCl al 2% v/v en etanol al 10% v/v, y según los autores [40, 41], ésta será capaz de extraer las especies alquilmercúricas e inorgánicas solubles (ver tabla 3). Los pasos en esta etapa son los siguientes:

1. Pesar aproximadamente 1 g de muestra (suelo) en un tubo de centrífuga. 2. Añadir 2,5 mL de disolución de HCl al 2% y EtOH al 10%.

3. Mezclar en Vórtex durante 1-2 minutos.

4. Centrifugar las muestras a 3200 rpm durante 1 minuto.

5. Comprobar el pH: El sobrenadante debe tener un pH comprendido entre 1,5 y 3. Si el pH>3 se añade HCl concentrado con ayuda de un cuentagotas y se repiten las etapas 3-5, hasta que se encuentre entre 1,5 y 3.

6. Mezclar en Vórtex las muestras durante 1 minuto.

7. Introducir las muestras en baño de ultrasonidos a 60 ± 2 ºC durante 7 minutos. 8. Centrifugar las muestras a 3200 rpm durante 5 minutos.

9. Transferir el sobrenadante a un contenedor de PTFE u otro apropiado.

10. Repetir la extracción 3 veces más (pasos 2, 6, 7 y 8) y transferir los sobrenadantes al mismo contenedor.

11. Añadir al residuo 2,5 mL de agua bidestilada y repetir los pasos 6, 7 y 8. Combinar el lavado con los sobrenadantes anteriores en el mismo contenedor.

Eliminación de Cloruros Solubles

La presencia de iones cloruro en la muestra puede promover la solubilidad de las especies no móviles de mercurio (ej. HgS) a través de la formación de complejos cloromercuratos [HgCl4]2- que son muy estables y solubles en disolución nítrica. Para

evitar la solubilización de estas especies el método incluye una prueba de cloruros con objeto de eliminar la presencia de estos iones en la disolución. Los pasos a seguir son: 1. Añadir 5 mL de agua bidestilada al residuo que queda en el tubo de centrífuga tras la

extracción del Mercurio Móvil. 2. Mezclar en vórtex durante 1 minuto.

3. Introducir las muestras en baño de ultrasonidos a 60 ± 2 ºC durante 1 minuto.

4. Centrifugar a 3200 rpm durante 5 minutos y transferir el sobrenadante a un vial o vaso de precipitados pequeño (de 10 o 25 mL).

5. Añadir gota a gota una disolución de AgNO3 0,1M. La formación de un precipitado

blanco o turbidez blanca indica la presencia de cloruros en la disolución.

6. Repetir el proceso (pasos 1-5) hasta que la disolución decantada esté libre de cloruros, lo cual se pondrá de manifiesto por la ausencia de turbidez en la disolución al añadir AgNO3 0,1 M.

Sin embargo, en el desarrollo de los ensayos experimentales, se comprobó que la repetida aplicación de este procedimiento implica el incremento del pH de la disolución sobrenadante, debido a la adición de agua sobre el suelo previamente acidificado en la anterior etapa de extracción de Mercurio Móvil. Como consecuencia de este aumento de pH, se observó la formación de precipitados de textura muy fina que presumiblemente corresponden a hidróxidos metálicos. Aunque en los ensayos se aumentó la velocidad y tiempo de centrifugación, la presencia de grandes cantidades de estos hidróxidos hizo muy difícil en algunos casos, el alcanzar una buena separación de los sobrenadantes. Además, a partir de la tercera aplicación de este procedimiento, no se podían obtener soluciones claras en los sobrenadantes (aparecían invariablemente precipitados en suspensión). Por ello, desde un punto de vista práctico y con objeto de no perder

Capítulo 4: DESCRIPCIÓN DE METODOS ANALÍTICOS UTILIZADOS PARA EL ESTUDIO DEL Hg

mercurio con la pérdida de muestra sólida en suspensión en esta prueba, se redujo la aplicación de este procedimiento a un número máximo de tres veces. Se optimizaron las condiciones de centrifugación para cada una de las tres pruebas, de manera que en la primera, tal y como se propone en el método EPA 3200, se efectúe a 3200 rpm durante 7 minutos, mientras que para la segunda y tercera, si las hubiera, se emplearían condiciones más enérgicas: 4000 rpm durante 10 minutos y 5000 rpm durante 10 minutos, respectivamente.

Extracción de Mercurio Semimóvil

En esta etapa se emplea como extractante una disolución de HNO3 al 33% v/v. Los

pasos que tienen lugar son los siguientes:

1. Añadir 5 mL de disolución HNO3:H2O 1:2 v/v al residuo en el tubo de centrífuga.

2. Mezclar en Vórtex durante 1 minuto.

3. Calentar las muestras a 95 ± 2 ºC durante 20 minutos (como puede formarse gas durante el calentamiento abrir las tapas de los tubos de centrífuga de vez en cuando). 4. Centrifugar las muestras a 3200 rpm durante 5 minutos.

5. Transferir el sobrenadante a un contenedor apropiado. 6. Volver a repetir los pasos 1-5.

7. Combinar ambos sobrenadantes en el mismo contenedor. 8. Añadir al residuo 5 ml de agua bidestilada.

9. Mezclar en Vórtex durante 1 minuto. 10. Centrifugar a 3200 rpm durante 5 minutos.

11. Combinar el lavado con los sobrenadantes anteriores en el mismo contenedor. 12. Filtrar la disolución resultante a través de filtros de papel de celulosa de 0,45 μm.

Extracción de Mercurio No Móvil

En esta etapa se extraen las especies menos móviles de mercurio presentes en la muestra. Por ello para su extracción se emplea un agente extractante más agresivo: una disolución HCl:HNO3:H2O 1:6:7 (v/v/v). El esquema de actuación es el siguiente:

1. Añadir al residuo procedente de la extracción de Hg semimóvil 5 mL de disolución HCl:HNO3:H2O 1:6:7 (v/v/v).

2. Cerrar cada tubo de centrífuga y mezclar en Vórtex durante 1 minuto.

3. Calentar a 95 ± 2 ºC durante 20 minutos (como puede formarse gas durante el calentamiento abrir las tapas de los tubos de centrífuga de vez en cuando).

4. Centrifugar a 3200 rpm durante 5 minutos y transferir el sobrenadante a un contenedor apropiado.

5. Volver a añadir 5 mL de disolución HCl:HNO3:H2O 1:6:7 (v/v/v) y repetir los pasos

2, 3 y 4, transfiriendo el sobrenadante al mismo contenedor anterior. 6. Añadir al residuo 5 mL de agua bidestilada.

7. Mezclar en Vórtex durante 1 minuto. 8. Centrifugar a 3200 rpm durante 5 minutos.

9. Combinar el lavado con los sobrenadantes anteriores en el mismo contenedor. 10. Filtrar la disolución resultante a través de filtros de papel de celulosa de 0,45 μm.

Subfraccionamiento del Mercurio Móvil (Extracción en Fase Sólida)

Como ya se ha indicado antes, el método EPA 3200 incluye un subfraccionamiento de la fracción de Mercurio Móvil mediante la aplicación de un método de extracción en fase sólida, empleando como medio sólido de extracción fibra de algodón con grupos funcionales sulfidrilo. El acondicionamiento de la disolución y la columna, así como la elución secuencial de las especies de mercurio retenidas en la misma tienen lugar según los siguientes pasos:

1. Ajustar el pH del extracto procedente de la extracción de Hg móvil a pH 5-7 con una disolución de NaOH 10 M.

2. Filtrar la disolución empleando una jeringa de 10 mL con filtro de jeringa de teflón (PTFE) de 10 μm de tamaño de poro.

3. Lavar las partículas retenidas en el filtro con 3 mL de una disolución de HCl al 0,1%.

4. Combinar el lavado y la disolución filtrada.

5. Ajustar el pH de la disolución resultante a un valor de pH de 3 ± 1 empleando una disolución HCl 6 M. Añadir la disolución gota a gota y comprobar el pH.

Capítulo 4: DESCRIPCIÓN DE METODOS ANALÍTICOS UTILIZADOS PARA EL ESTUDIO DEL Hg

6. Pasar la disolución a través de la columna de Fibra de Algodón de Sulfidrilo (SCF) a velocidad de 1 mL min-1.

7. Eluir los compuestos organomercúricos, haciendo pasar 8 mL de disolución SCF1, seguidos de 2 mL de agua bidestilada.

8. Eluir las especies inorgánicas de Hg, haciendo pasar 8 mL de disolución SCF2, seguidos de 2 mL de agua bidestilada.

4.3.2.4. Método propio de extracción secuencial de Hg