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- Localización:

El presente estudio se llevó a cabo en la explotación agraria de Son Bernat (39º 42’N 3º 01’E) situada en el término municipal de Llubí (Mallorca). La finca se dedica principalmente a la producción láctea y para ello dispone de aproximadamente unas 50 cabezas de ganado bovino que son ordeñadas dos veces al día. Las reses se mantienen estabuladas en un recinto de 25 m2 siguiendo un sistema clásico de ganadería intensiva y se las alimenta con grano y paja. En el recinto donde se mantienen encerrados los animales se acumula orín y heces, que se mezclan con la paja, creando así un ambiente idóneo para la cría de Culicoides.

- Tipos de trampas:

Las cuatro trampas utilizadas para el estudio fueron (Fig. 12): - Trampa Onderstepoort:

Desarrollada por el Instituto Veterinario de Onderstepoort (Sudáfrica) y manufacturada desde entonces por el Instituto de Ingeniería Agrícola de ese país (ARC-Institute for Agricultural Engineering). Esta trampa está equipada con un tubo de luz U.V. azulada de 30 cm y 8 W. Se conecta directamente a la red eléctrica ya que posee transformador propio. Es una trampa robusta y pesada (4 kg). La succión de los insectos se realiza a través de un ventilador con una capacidad media de desplazamiento de aire de 204.5± 9.47 m3/min. (Venter y Meiswinkel, 1994; Goffredo y Meiswinkel, 2004). Las capturas son recogidas en un bote de 500 ml. La recogida de insectos de gran tamaño se evita por una malla de poliéster de 2 mm de paso colocada alrededor de la fuente de luz. Este tipo de trampa se ha utilizado desde 1970 como herramienta en la monitorización y captura de

Culicoides para aislamientos víricos en Sudáfrica (Meiswinkel et al., 2004) y, desde 1996,

se ha introducido en varios países de Europa como Italia (Goffredo y Meiswinkel, 2004), Grecia (Patakakis, 2004), Suiza (Cagienard et al., 2006) y Francia (Baldet et al., 2008; Balenghien, 2008).

47 - Trampa mini-CDC (modelo 1212):

Trampa manufacturada y distribuida por la Compañía John Hock (Gainesville, FL, EE.UU.). Está compuesta por un tubo de luz U.V. azulada de 15 cm y 4 W de potencia. Se puede activar mediante corriente o batería. Si se acciona a la corriente debe disponer de un transformador de 6 V, en el caso que la trampa posea célula fotosensible de activación/parada, o de 12 V, si carece de ella. Está fabricada en plástico y su peso es de 0.8 Kg. La succión de los insectos se realiza a través de un ventilador con una capacidad media de desplazamiento de aire de 11.06 m3/min (Chandler y Highton, 1975). Los insectos aspirados a través del ventilador son recogidos en un bote colector de 450 ml. La entrada de polillas e insectos de gran tamaño se evita mediante una rejilla metálica de diámetro de paso de 5 mm colocada entre la fuente de luz y el aspirador de la trampa. Se utiliza en España (Miranda et al., 2004), Portugal (Capela et al., 1993), Bélgica (De Deken et al., 2008) y EE.UU. (Smith y Mullens, 2003).

- Trampa Rieb:

J.P. Rieb diseñó esta trampa en 1979 (Rieb, 1982). Se compone de un tubo de luz U.V. blanca de 15 cm de longitud y 4 W de potencia. Posee incorporado un transformador de 12 V a través de cual se conecta a corriente eléctrica. Está fabricada en plástico y tiene un peso aproximado de 1 Kg. Las polillas e insectos de mayor tamaño son excluidos de la trampa mediante una rejilla de diámetro de paso de 5 mm colocada alrededor de la fuente de luz. El bote colector de insectos posee una capacidad de 40 ml. Se utilizó entre 2000 y 2005 para la monitorización de Culicoides en Francia (Baldet et al., 2008) y en 2006 fue sustituida por la trampa Onderstepoort.

- Trampa Pirbright:

Diseñada por John Boorman en el Instituto de Sanidad Animal de Pirbright (IAH, Reino Unido). Es una trampa de 2.4 Kg de peso provista de una bombilla incandescente de 4 W. Se conecta a la corriente eléctrica mediante un transformador propio. Las polillas e insectos grandes son excluidos de la trampa por una rejilla de metal de 5 mm de diámetro

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de paso colocada alrededor de la fuente de luz. La capacidad del bote colector de insectos es de 90 ml. Se utilizó para la monitorización de Culicoides en el Reino Unido y en España durante la epizootia de Peste Equina Africana en la década de los 90 (Rawlings y Mellor, 1994). También fue utilizada inicialmente en Grecia (Patakakis, 2004) y en el norte y este de África (Baylis et al., 1997; Rawlings et al., 1998). Esta trampa ya no está disponible comercialmente y se reemplazó por la Onderstepoort en 1996.

Onderstepoort Mini-CDC Rieb Pirbright

Figura 12. Fotos de las cuatro trampas utilizadas en el estudio. (Fotos:Dr. Gert Venter, Instituto Veterinario de Onderstepoort)

- Método de Comparación:

Las trampas se dispusieron siguiendo un diseño de bloque aleatorio de manera que todas ellas estuvieran en cada uno de los sitios seleccionados el mismo número de veces durante el periodo de ensayo (Snedecor y Cochran, 1980). Con este tipo de rotación se consigue que la media de las capturas obtenidas en cada una de las trampas sea independiente de cualquier efecto determinado por el sitio o por la posible interferencia entre trampas (Perry et al., 1980; Wall y Perry, 1980). Las trampas se pusieron en funcionamiento desde el atardecer hasta el amanecer, cerca de los animales estabulados, a una altura que variaba entre los 1.5 y los 2 m, y separadas entre ellas unos 20 m (Fig. 13). La comparación se llevó a cabo durante un número determinado de noches, no necesariamente consecutivas.

49 Vacas Terneros Terneros Toro

3

4

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Vacas Terneros Terneros Toro

3

4

1

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Figura 13. Esquema de la distribución de las trampas y los animales en la finca agrícola. Con los puntos rojos se designan las posiciones de las trampas junto con el número de referencia. Las cajas indican las instalaciones en donde se mantenían a los animales.

En la ubicación de las trampas se tuvo en cuenta que las distintas trampas estuviesen lo suficientemente separadas ente ellas para evitar cualquier tipo de interferencia y que estuviesen lo suficientemente cerca entre ellas como para que los cambios meteorológicos les afectasen por igual.

- Ensayos:

En total se realizaron tres ensayos:

• El primero tuvo lugar a mediados de otoño (18 de octubre-19 de noviembre 2007) y se llevaron a cabo nueve muestreos. El estudio se inició con las trampas Onderstepoort, Rieb y mini-CDC. La trampa Pirbright se incorporó más tarde (08-11-07) debido a problemas de suministro y la trampa Rieb se eliminó del estudio el 26-10-07 debido a sus repetidos fallos de funcionamiento.

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• El segundo ensayo se realizó a finales de invierno y principios de primavera (18 de febrero-4 de junio 2008). Se llevaron a cabo 20 muestreos y no se incorporó la trampa Rieb.

• El tercer y último ensayo tuvo lugar en otoño del 2008 (1 de octubre-20 de noviembre), con un total de 17 noches muestreadas y de nuevo solo 3 trampas (Onderstepoort, mini-CDC y Pirbright) fueron incluidas en el ensayo.

- Tratamiento de las capturas:

Los Culicoides capturados se identificaron y separaron por especies según su patrón alar con ayuda de una lupa binocular. Posteriormente se separaron por sexo y, en el caso de las hembras, se clasificaron también según su estado gonotrófico siguiendo el método descrito por Dyce en: Nulíparas, Paras, Grávidas y Alimentadas de Sangre (Dyce, 1969). La identificación del complejo Obsoletus se basó, al igual que para otras especies, en la morfología del patrón alar, por lo que dentro de este grupo se incluyen las especies C.

(Avaritia) obsoletus (Meigen 1818), C. (Avaritia) scoticus (Downes y Kettle 1952) y C. (Avaritia) montanus (Shakirzjanova 1962).

Una vez separados, los Culicoides se mantuvieron en etanol al 70%.

- Tratamiento de datos:

Los datos se expresaron como nº Culicoides /trampa y noche. Para los análisis de la varianza (ANOVA) se utilizó el test de la menor diferencia significativa de Fisher (Fisher’s Least Significant Difference; LSD test) utilizando intervalos de confianza del 95% y el test U de Mann-Whitney con el progama StatGraphics Plus.

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