Como se puede apreciar en el Cuadro 6, el porcentaje de presencia de cada síntoma varía según la edad del fruto. La aparición de deformaciones o gibas,
95 alcanza el 77,8% de frutos de un mes de edad mientras que para los frutos de dos meses el porcentaje se reduce al 40%.
Cuadro 6. Porcentaje de ocurrencia de síntomas y signos desarrollados por la inoculación de M. roreri sobre frutos de cacao.
Edad de los frutos (Mes)
Porcentaje de síntomas y signos
% de daño interno Gibas 1 Decoloración 2 Mancha 3 Inicio de esporulación 4 Esporas maduras 5 1 77.8 0 100 100 100 100 2 40 80 100 80 80 100 3 0 83.3 100 100 83.3 100 4 0 70 0 0 0 50 5 0 20 0 0 0 0
La decoloración de los frutos alcanza valores de 80 y 83% en frutos de dos y tres meses de edad, y se reduce conforme la edad del fruto se incrementa, hasta llegar al 20% en frutos de cinco meses. Mientras que la aparición de manchas, se presenta en el 100% de frutos infectados de uno a tres meses de edad; y en la formación de tejido esporulante, el valor fluctúa entre el 80 y el 100 % de los frutos de uno a tres meses de edad.
Figura 16. Síntomas y signos presentes en frutos de cacao infectados con
96 4.2.1.3. Severidad interna en frutos de cacao inoculados con M. roreri.
El daño interno ocasionado por las inoculaciones de M. roreri es expresado en Índice de Severidad Interna (ISI), en el Cuadro 7, se puede apreciar que los frutos de uno, dos y tres meses de edad al ser infectados con el hongo M.
roreri, presentan la mayor afectación con un ISI 5, el cual indica una necrosis
del 80 al 100% del fruto, por lo que las semillas no pueden ser aprovechadas. El nivel de daño interno en el fruto se reduce a medida que éste se acerca a su madurez ya que se observó que en frutos de cuatro meses de edad, el 10% de los frutos presentaron ISI de 3 y el 40% con ISI de 5; en frutos de cinco meses de edad, a pesar de que se observa un 20% de frutos con decoloración, hacia el interior del fruto no causa ningún daño, permitiendo aprovechar el 100% de los granos.
Cuadro 7. Índice de severidad interna en frutos inoculados con M. roreri. Edad de los
frutos (Meses)
Índice de severidad interna (%) 0 (Fruto sano) 1 (1-20%) 2 (21-40%) 3 (41-60%) 4 (61-80%) 5 (81-100%) 1 0 0 0 0 0 100 2 0 0 0 0 0 100 3 0 0 0 0 0 100 4 50 0 0 10 0 40 5 100 0 0 0 0 0
Los resultados obtenidos en esta investigación muestran que M. roreri presentó la habilidad de desarrollar infección en todas los estados de desarrollo de los frutos infectados, alcanzando una alta incidencia de la enfermedad, lo que denota una alta capacidad de infección de este patógeno, esto explica la gravedad del daño que M. roreri ocasiona en las regiones donde está presente y el efecto devastador que puede tener en las cosechas de cacao (Aranzazu; Enríquez et al., 1982; Krauss y Soberanis, 2001). Es probable que este comportamiento corresponda a la alta especialización que M. roreri ha alcanzado como producto de su largo proceso de coevolución con sus hospederos.
97 La forma y secuencia como se presentan los síntomas de la moniliasis, observados en esta investigación, son concordantes con la descripción realizada por diversos investigadores (FHIA, 2003; Krauss et al., 2006; Aranzazu, Martínez y Martínez, 2009) en los que se reporta que los frutos jóvenes hasta de tres meses de edad, son los más susceptibles; y en estos el patógeno logra desarrollar completamente su ciclo hasta la formación de estroma esporulante.
En cuanto al período que dura cada síntoma en manifestarse, se observa que en condiciones de Tapachula y en el clon estudiado, el número de días en que estos síntomas son visibles en frutos infectados con M. roreri es mayor a los reportados por los citados autores; ellos reportan que la formación de protuberancias y algunos puntos aislados, observables ocurre entre 30±10 días, la presencia de la mancha ocurre a los 60±10 días y la formación del micelio o estroma con formación de esporas ocurre entre los 60±70 días después de la infección. En frutos mayores de tres meses, los citados autores describen que el síntoma inicial corresponde a puntos acuosos, inicialmente aislados y luego concéntricos que se observan entre los 30±10 días; la mancha aparece a los 60±10 días y la esporulación entre los 60 a 70 días. Esta variación en el tiempo de expresión de los síntomas y signos podría estar evidenciando la influencia del componente genético del clon estudiado así como el efecto ambiental.
En Honduras, según reporta la FHIA (2003) el hongo M. roreri manifiesta un largo período de incubación, es decir desde que infecta al fruto hasta que se observa algún síntoma externo. Este tiempo puede ser de tres a ocho semanas, el cual varía según la edad del fruto, la severidad del ataque, la susceptibilidad del árbol y las condiciones ambientales. En frutos tiernos, en días lluviosos y calurosos, el período de incubación se acorta a tres semanas. En los frutos adultos (mayores de tres meses) el síntoma más común de la moniliasis es una mancha de color café, que puede extenderse hasta cubrir todo el fruto.
98 El conocimiento de la forma y período en que ocurren los síntomas y signos que provoca la moniliasis en frutos infectados, obtenidos en esta investigación permiten comprender la importancia que tiene la edad del fruto al momento de la infección y que indican que el período más importante para la implementación de estrategias de protección de los frutos, ya sea por la aplicación del control químico convencional, el biocontrol o aspersiones de biofungicidas. Estos tratamientos deben de intensificarse durante los primeros cuatro meses de edad de los frutos de cacao. Es en esta etapa en la que hay que poner mayor énfasis en el manejo de las plantaciones y en la protección de los frutos, ya que esto permitirá alcanzar una mayor cantidad de frutos sanos. En la Figura 17 se presenta el ciclo de la enfermedad en condiciones de Tapachula, Chiapas- México.
Figura 17. Ciclo de M. roreri sobre clon UNACH 130, en condiciones de Tapachula, Chiapas - México.
99 4.2.2. Efecto de extractos sobre inhibición de la germinación.
4.2.2.1. Incidencia de M. roreri.
En la Figura 18 se muestran los resultados de los tratamientos en relación al porcentaje de incidencia de la enfermedad sobre los frutos de cacao, en la cual se aprecia como con la aplicación de los extractos antes de la inoculación con
M. roreri el mejor efecto se presentó con el hidrolato de pimienta ya que tan
solo mostró el 25% de incidencia de la enfermedad en los frutos, seguido del hidrolato de canela con el 28% y el valor más alto lo registró el hidrolato de clavo con el 44,4%, valor que coincide con su aplicación después de la inoculación, mientras que los valores tanto para el hidrolato de canela como el de pimienta aplicados después de la inoculación con M. roreri aumentaron registrando valores del 50 y 75% respectivamente, mostrando un efecto más antiesporulante que fungicida; el polisulfuro de calcio mostró el mejor efecto ya que tanto con su aplicación antes y después de la inoculación no permitió la infección del patógeno mostrando un efecto fungistático y fungicida.
Según el análisis de varianza practicado existen diferencia entre los tratamientos (Anexos 29 y 30) y la prueba de Tukey indica que el testigo inoculado muestra diferencias con los demás tratamientos, los extractos de clavo aplicado antes y después, así como los extractos de canela y pimienta aplicados antes de la inoculación registraron diferencias con los demás tratamientos, mientras que el polisulfuro de calcio aplicado tanto antes como después fue el único producto que no registro diferencias con el testigo sin inocular ya que no permitieron la infección ni avance de la enfermedad.
100 0 20 40 60 80 100 120 A Clav SH20% A Can AH30% A Pim SH30% A Polisul Ca D Clav SH20% D Can AH30% D Pim SH30% D Polisul Ca Test sin In Test In % I N C I D E N C I A TRATAMIENTOS
Figura 18. Efecto de extractos vegetales sobre la Incidencia de M. roreri en cacao por inoculación artificial.