Los cambios más significativos que hemos encontrado en cuanto a la eficacia de acoplamiento a las proteínas G a receptores 5-HT1B se exponen a continuación (tabla 5;
fig 16). Los valores vienen referidos como estimulación de la fijación específica [35S]GTPγS (% de la fijación basal, 100%) inducida por el agonista selectivo del receptor 5-HT1B/D GTI (10 µM). Áreas donde se detectaron niveles altos de
estimulación de la fijación específica de [35S]GTPγS por el agonista (175-150% de la fijación basal) en las secciones de los animales control fueron: la corteza entorrinal, el núcleo del septo latero-dorsal, el giro dentado del hipocampo y la sustancia negra; niveles medios o moderados (150-125%) en la cortezas frontoparietal y cingular, el globo pálido, y la sustancia gris periacueductal; los porcentajes de estimulación más bajos (125-100%) fueron medidos en el caudado-putamen, las capas CA1-CA2 del
hipocampo, el tálamo, el hipotálamo, la amígdala, así como en los núcleos del rafe dorsal, mediano y magnus.
Núcleos septales
En el núcleo septal ventro-lateral no se observaron diferencias significativas entre los animales bulbectomizados y los animales control, sin embargo el tratamiento crónico con fluoxetina produjo una hipersensibilidad del receptor 5-HT1B en los
animales bulbectomizados (+54%; q=6.380, p<0.001). Las mayores fuentes de variación se debieron a las variables interacción [ANOVA interacción: F(3,20)=12.49,
p<0.01] y a la cirugía [ANOVA cirugía: F(3,20)=11.68, p<0.01].
Hipocampo
En las capas CA1 CA2 del hipocampo no se observaron diferencias significativas entre las ratas bulbectomizadas y las ratas control (p>0.05), aunque el tratamiento
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hipersensibilización de receptores 5-HT1B en los animales bulbectomizados (+41%;
q=6.281, p<0.05), mientras que no produjo ningún efecto en los animales control (p>0.05). Las mayores fuentes de variación se debieron a las variables interacción [ANOVA interacción: F(3,20)=19.03, p<0.01] y a la cirugía [ANOVA cirugía: F(3,20)=7.08, p<0.05].
Hipotálamo
A nivel de los núcleos hipotalámicos ventromediales se observó una hiperfuncionalidad del receptor 5-HT1B en los animales bulbectomizados con respecto a
los animales control (+49%; q=5.499, p<0.01), que desapareció tras el tratamiento crónico con fluoxetina (q=4.462, p<0.01) hasta observarse unos valores equivalentes a los de las ratas control (p>0.05). Las mayores fuentes de variación correspondieron a las variables tratamiento [ANOVA tratamiento: F(3,20)=6.973, p<0.05] y cirugía [ANOVA cirugía: F(3,20)=12.54, p<0.01].
Tronco del encéfalo
En la sustancia gris periacueductal no se detectaron diferencias significativas entre las ratas bulbectomizadas y las ratas control. Tras el tratamiento crónico con fluoxetina se observó una desensibilización del receptor 5-HT1B tanto en las ratas control (-29%;
q=5.755, p<0.01) como en las ratas bulbectomizadas (-24%; q=4.079, p<0.05). El ANOVA de dos vías reveló que la mayor fuente de variación correspondió a la variable tratamiento [ANOVA tratamiento: F(3,20)=19.91, p<0.001].
A nivel del núcleo dorsal del rafe no se observaron diferencias en la funcionalidad del receptor 5-HT1B entre las ratas control y los animales bulbectomizados, pero tras el
tratamiento crónico con fluoxetina se observó una desensibilización de este receptor en el grupo de las ratas bulbectomizadas (-33%, q=5.835, p<0.01). La mayor fuente de
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variación correspondió a la variable interacción [ANOVA interacción: F(3,20)=13.21,
p<0.01].
En el núcleo mediano del rafe tampoco se observaron diferencias entre las ratas control y las ratas bulbectomizadas, aunque el tratamiento crónico con fluoxetina produjo hipersensibilidad del receptor 5-HT1B en el grupo de las ratas control (+27%;
q=4.367, p<0.01) pero desensibilización en las ratas bulbectomizadas (-41%; q=5.066,
p<0.01). Las mayores fuentes de variación correspondieron a las variables interacción
[ANOVA interacción: F(3,20)=19.31, p<0.001] y cirugía [ANOVA cirugía: F(3,20)=15.29, p<0.01].
A nivel del rafe magnus se observó hiperfuncionalidad del receptor 5-HT1B en las
ratas bulbectomizadas en relación a las ratas control (+53%; q=4.879, p<0.01), que desapareció tras el tratamiento crónico con fluoxetina (q=6.896, p<0.001) hasta unos niveles equivalentes a los observados en las ratas control (q=2.017, p>0.05). El tratamiento con fluoxetina produjo una hipersensibilidad del receptor 5-HT1B en las
ratas control (+53%; q=4.846, p<0.01). La única variable que aportó variación fue la interacción [ANOVA interacción: F(3,20)=20.54, p<0.001].
Ratio funcionalidad/densidad: “señalización” vía receptor 5-HT1B
En el animal bulbectomizado no hay cambios en la señalización a través del receptor 5-HT1B, salvo una hiperfuncionalidad significativa a nivel del hipotálamo
ventromedial (R= 1,4) y del núcleo del rafe magnus (R= 1,3). Sin embargo, el tratamiento crónico con fluoxetina induce cambios diferenciales en la señalización vía este receptor 5-HT1B: desensibilización en los núcleos del tronco cerebral (R ≤ 0,7) y
ausencia de cambios o tendencia a la hipersensibilidad en ciertas áreas telencefálicas y diencefálicas (i.e. R= 1,4 en el septo lateroventral; i.e. R = 1,1 en hipotálamo ventromedial).
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Una de las áreas de proyección serotonérgica en las que es interesante analizar el valor R es la corteza frontoparietal del animal bulbectomizado aunque no se detectasen cambios significativos ni en la densidad ni en la funcionalidad: vemos una tendencia a una menor señalización (valores de R entre 0,8-0,7) debido a la reducción en la fijación específica [35S]GTPγS registrada a este nivel (-19/26%) sin cambios en la densidad (+5/10%), y que se revierte tras el tratamiento crónico con fluoxetina.
El tratamiento crónico con fluoxetina en el animal control tiende a producir reducciones paralelas y de similar magnitud en la funcionalidad y en la densidad del receptor (R ≈ 1), en general, en la mayoría de la áreas analizadas pero con las siguientes excepciones: en la sustancia gris periacueductal se confirma una clara desensibilización (R= 0,7) mientras que valores de R = 1,4 y 1,6 confirman la presencia de una hipersensibilidad del receptor en los núcleos del rafe mediano y magnus.
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Figura 16. Autorradiograma representativo de la estimulación de la fijación de
[35S]GTPγS por el agonista 5HT1B/D GTI 10 µM en el cerebro de animales
bulbectomizados tratados y no tratados con fluoxetina (10 mg/kg/día, s.c., 14 días) a nivel del hipocampo anterior y del núcleo dorsal del rafe. A y A´, son secciones representativas de la fijación basal de [35S]GTPγS; B y B´, representan la fijación estimulada de [35S]GTPγS por GTI 10 µM en el animal bulbectomizado OB sin tratamiento con fluoxetina; C y C´, representan la fijación estimulada de [35S]GTPγS por GTI 10 µM en el animal bulbectomizado tratado con fluoxetina OBF. CxFP, corteza frontoparietal; CA1, lámina CA1 del hipocampo; DG, giro dentado del hipocampo; Amyg, núcleos basolaterales de la amígdala; Hyp, hipotálamo; DRN, núcleo dorsal del rafe.
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