Tabla IV Resultados obtenidos para Tratamiento I. Extractos Calea peruviana
Tabla V Resultados obtenidos para el Tratamiento II. Extractos y fracciones de
Calea peruviana
Tabla VI Resultados obtenidos en el Tratamiento III. Extractos y fracciones de
Tabla VII Resultados obtenidos para el Tratamiento IV. Extractos Calea
prunifolia
Con base en los datos obtenidos registrados en las Tablas IV, V, VI y VII, utilizando el diseño experimental de análisis de varianza de una sola vía, empleando para llevarlo a cabo el software MICROCAL ORIGIN 6.0 e iniciando con los datos encontrados para los extractos de Calea peruviana hacemos las siguientes consideraciones:
Tabla VIII. Resultados obtenidos para el Análisis de Varianza para los extractos obtenidos de Calea peruviana en el edema tópico por TPA. Tratamiento I
En que: = Media; δ2
= Varianza; N = número de ratones empleados para el análisis. *Diferencias de media significativas; %I= % Inhibición
Mediante un análisis de varianza de una sola vía podemos comparar el efecto antiinflamatorio que tienen los diferentes extractos utilizados en este trabajo, arrojándonos unos resultados que nos permiten inferir que los extractos
n CONTROL INDOMETACINA EXTRACTO CH2Cl2
C.peruviana EXTRACTO ETANÓLICO C. peruviana SESQUITERPEN LACTONAS C. peruviana EXTRACTO CHCl3 FLORES ∆p(mg) ∆p(mg) ∆p(mg) ∆p(mg) ∆p(mg) ∆p(mg) 1 8 6 1 9 9 10 2 10 2 2 5 6 4 3 10 2 4 6 1 2 4 9 1 3 4 4 3 5 5 9 2 10 5 5 6 14 2 5 3 5 1 9,3333 3,6667* 2,8333* 6,1667 5,0000* 4,1667* δ2 8,6667 9,8667 2,1667 7,7667 6,8000 10,1667 N 6 6 6 6 6 6 %I 60,71 69,64 46,43 55,36
obtenidos de Calea peruviana tienen actividad antiinflamatoria significativa, como el extracto de diclorometano que muestra diferencias significativas con respecto al grupo control e incluso frente a la Indometacina a la cual supera en su acción antiinflamatoria, en este mismo grupo nos encontramos que el extracto etanólico completo muestra una leve actividad antiinflamatoria frente al grupo control, aunque presenta una pequeña inhibición del efecto, lo que nos indica que los compuestos responsables de la actividad antiinflamatoria son de más baja polaridad o que no están en concentración suficiente en este extracto para ejercer una actividad antiinflamatoria significativa, afirmación que resulta fortalecida cuando se analizan los resultados frente a la fracción que muestra resultados positivos frente a los ensayos de cualificación para sesquiterpenlactonas, para el seguimiento por cromatografía de placa delgada se utilizaron como reveladores: la Vainillina con ácido ortofosfórico, los vapores de yodo elemental, la luz ultravioleta 254 nm , el reactivo de Legal. También podemos inferir que los extractos de cloroformo obtenidos de las flores tienen una actividad antiinflamatoria similar a la de la Indometacina. Al comparar los resultados obtenidos entre el control y el extracto etanólico utilizando un t de Student de dos poblaciones tampoco encontramos diferencias significativas entre estos dos tratamientos, situación que nos fortalece nuestra apreciación pues ambas pruebas son robustas para la comparación de medias.
Con base en los resultados anteriores se realizó un fraccionamiento por cromatografía de columna del extracto etanólico de Calea peruviana obteniendo las fracciones de diclorometano, primer solvente utilizado en el fraccionamiento del extracto etanólico, que presenta mejor actividad antiinflamatoria que todos las demás fracciones obtenidas, la fracción 16 – 18 y 23 de las que se obtienen cantidades que permiten realizar las pruebas y se encuentran en un nivel de pureza aceptable, pues solo se observa una mancha cuando se revelan con el reactivo de Legal en una cromatoplaca de cromatografía de placa delgada.
En la tabla siguiente se muestran los resultados utilizados para comparar la actividad antiinflamatoria frente al extracto etanólico y frente al extracto de cloroformo de las hojas de la especie, mediante un análisis de varianza de una vía obteniendo los siguientes resultados:
Tabla IX .Efecto de los extractos y fracciones de Calea peruviana en el edema tópico por TPA. Tratamiento II
n CONTROL INDOMETACINA EXTRACTO CH3-CH2OH
C.peruviana FRACCIONES 16 –18 C. peruviana FRACCION 23 C.peruviana EXTRACTO CHCl3(Hojas) C.peruviana Δp(mg) Δp(mg) Δp(mg) Δp(mg) Δp(mg) Δp(mg) 1 12 0 0 8 9 5 2 6 9 8 4 11 2 3 12 8 5 1 5 7 4 5 5 6 3 8 0 5 10 1 6 5 7 9 6 12 0 3 2 7 2 9,5 3,8333* 4,6667* 3,8333* 7,8333 4,1667* δ2 10,3 16,5667 7,8667 6,1667 4,16667 11,7667 N 6 6 6 6 6 6 %I 59,65 50,88 59,65 56,14 En que: = Media; δ2
= Varianza; N = número de ratones empleados para el análisis.
*Diferencias de media significativas; %I= % Inhibición.
Vemos que con una probabilidad de 0.05 se obtiene un Valor de F = 3.719 y unas medias significativamente diferentes, aplicando el análisis de varianza de una sola vía, a diferencia de los resultados anteriores el extracto etanólico mostró una actividad antiinflamatoria muy significativa al comparar el grupo control con el grupo al que se le aplicó el extracto etanólico; si comparamos los resultados obtenidos para los dos grupos control observamos que no existe diferencia significativa entre ellos lo que nos permite inferir que hay concordancia entre los resultados, de la misma manera si comparamos las respuestas de los grupos tratados con Indometacina tampoco existe diferencia significativa entre sus medias, que nos reafirma la confiabilidad de los resultados obtenidos y que hay concordancia con sus respuestas, además que las diferencias se deben a los tratamientos y no a otras causas.
Tabla X Efecto de los extractos y las fracciones de Calea prunifolia en el edema tópico por TPA. Tratamiento III
En que: = Media; δ2
= Varianza; N = número de ratones empleados para el análisis. *Media significativamente diferente frente al grupo control; %I= %Inhibición.
Utilizando el mismo método de análisis de los dos tratamientos anteriores podemos observar que la fracción 4 y la fracción 9 de Calea prunifolia presentan diferencias significativas frente al grupo control, pero con efecto antiinflamatorio muy inferior al de la Indometacina.
Tabla XI. Efecto de las fracciones de Calea prunifolia en el edema tópico por TPA. Tratamiento IV
En que: = Media; δ2
= Varianza; N = número de ratones empleados para el análisis. *Media significativamente diferente frente al grupo control
n CONTROL INDOMETACINA FRACCION 2
C. prunifolia FRACCION 4 C. prunifolia FRACCION 9 C. prunifolia FRACCION 10 C. prunifolia Δp(mg) Δp(mg) Δp(mg) Δp(mg) Δp(mg) Δp(mg) 1 5 0 4 2 6 4 2 4 3 11 5 4 4 3 16 0 5 3 4 7 4 7 4 9 5 4 4 5 7 0 10 3 2 3 6 9 2 8 2 5 8 8,000 1,5000* 7,8333 3,3333* 4,1667* 5,000 δ2 18,4000 3,1000 7,7667 1,8667 1,7667 4,000 N 6 6 6 6 6 6 %I 81,25 58,33 47,92
n CONTROL INDOMETACINA FRACCION 3
C. prunifolia FRACCION 5 C. prunifolia FRACCION 6 C. prunifolia FRACCION 7 C. prunifolia Δp(mg) Δp(mg) Δp(mg) Δp(mg) Δp(mg) Δp(mg) 1 9 5 11 2 6 1 2 5 7 10 9 4 4 3 12 6 0 6 3 4 4 11 5 7 4 8 3 5 12 3 9 1 8 7 6 15 2 9 1 7 8 7 3 9,5714 4,6667 7,6667 3,8333* 6,0000 4,5000* δ2 17,9524 3,4667 15,8667 10,1667 4,4 6,7000 N 7 6 6 6 6 6 %I 51,54 59,95 52,98
En el tratamiento IV también encontramos dos fracciones de Calea prunifolia con diferencias significativas frente al grupo control, la fracción 5 y la fracción 7, para contrastar si había alguna incidencia con respecto a los grupos controles se realizó un análisis de varianza de una vía entre ellos y no se encuentran diferencias significativas lo que no indica que todos los grupos responden por igual al tratamiento con el agente inflamatorio empleado. Del mismo modo se realizó con respecto a los grupos tratados con Indometacina para mirar la similitud de la respuesta frente a este agente antiinflamatorio, encontrándose que no hay diferencias significativas entre los cuatro grupos.
Con respecto al porcentaje de inhibición se puede observar que en los cuatro tratamientos se encuentran sustancias que tienen una acción antiinflamatoria importante, incluso presentándose superior la inhibición a la producida por el patrón antiinflamatorio utilizado en el presente estudio.