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7. Performance

7.4 Task Farm Performance

Las proteínas plasmáticas pueden ser determinadas a partir del plasma que se encuentra en la parte superior de un tubo capilar centrifugado para la determinación del hematocrito

Rosa Luz Mondragón Vargas

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(Hto). Se rompe el tubo por arriba de la capa leucoplaquetaria, se deposita una gota en el refractómetro clínico y se realiza la lectura en la escala de proteínas o sólidos totales. Ya que, tanto el Hto, como las pp son afectados por el estado de hidratación del paciente, es de utilidad determinar ambos, para evaluar anemias, eritrocitosis y disproteinemias. Las alteraciones encontradas en las pp son hiperproteinemias e hipoproteinemias.

Hiperproteinemias.

Hiperproteinemias. Hiperproteinemias.

Hiperproteinemias. Hiperproteinemias. La causa más frecuente de este tipo de alteración se relaciona con:

Hemoconcentración. Algunos signos clínicos que se pueden mencionar en la anamnesis son:

vómito, diarrea, poliuria, ascitis, fiebre, sudoración profusa y, en equinos, en algunos casos de síndrome abdominal agudo. Se recomienda efectuar perfil de laboratorio para detectar otras alteraciones concomitantes como: eritrocitosis, hiperalbuminemia, hipergammaglobulinemia e hiperazotemia prerrenal.

Inflamación. En caso de que ésta sea aguda, la causa de hiperproteinemia puede deberse a

un aumento de fibrinógeno; en el caso de inflamación crónica, la elevación de proteínas totales puede ser atribuida al aumento en la síntesis de globulinas (hipergammaglo- bulinemia), por lo que se recomienda efectuar determinaciones bioquímicas.

Neoplasias. Por ejemplo plasmocitoma (conocido también como mieloma múltiple) y

linfosarcoma, cuando el valor de las proteínas plasmáticas es igual o mayor a 100 g/L. La fracción responsable de la elevación suele ser la gamma.

Hipoproteinemias.

Hipoproteinemias. Hipoproteinemias.

Hipoproteinemias. Hipoproteinemias. Se deben considerar las siguientes causas:

Disminución en la síntesis proteica, provocada por insuficiencia hepática, alimentación con

escasa cantidad de proteínas, síndrome de mala digestión (insuficiencia exocrina pancreática), síndrome de mala absorción (enteropatía con pérdida de proteínas) e insufi- ciencia cardiaca congestiva.

Pérdida de proteínas, por vía renal (glomerulonefropatía), a través del intestino (diarrea con

pérdida de proteínas), por quemaduras, hemorragia, secuestro a espacios terceros.

Edad, los animales recién nacidos tienen concentraciones de pp más bajas que los anima-

les adultos. El consumo del calostro provoca una elevación temporal. Luego el total de proteínas plasmáticas se incrementa gradualmente con la edad hasta llegar a los valores de referencia para los animales adultos.

Sobrehidratación (causa hemodilución). La anamnesis puede mencionar terapia de líquidos

previa a la toma de la muestra.

Fibrinógeno

Es una proteína producida y almacenada en los microsomas de los hepatocitos, hasta que es necesario. Su vida media va de dos a tres días. Además de participar en la coagulación, sirve como defensa migrando hacia los sitios de lesión para confinar los procesos patoló- gicos inflamatorios.

Hiperfibrinogenemia. Es la elevación del fibrinógeno en la sangre y ocurre durante procesos

inflamatorios, puede estimarse por una modificación de la técnica de pp y microhemato- crito. El fibrinógeno es estimado mediante la diferencia de las lecturas en la concentración de pp entre 2 tubos de microhematocrito. La primera lectura es la rutinaria para pp y la segunda lectura se realiza a partir de un tubo de microhematocrito que se ha calentado en un rango de 56 a 58 °C por 3 minutos. El fibrinógeno es precipitado por el calentamiento

y removido por centrifugación. La diferencia entre ambas lecturas equivale a la concentra- ción de fibrinógeno. La estimación del fibrinógeno es usada más frecuentemente en bovi- nos y caballos.

Hipofibrinogenemia. Es la disminución en las concentraciones de fibrinógeno y se detecta

en muestras de sangre con coágulos; enfermedades hepáticas (los datos de la anamnesis deben ser acordes con coagulopatías); eliminación rápida del fibrinógeno por fibrinolisinas, como ocurre en choque; neoplasias extensas de vejiga, páncreas o próstata; coagulación intravascular diseminada; leucemia granulocítica del perro e infecciones estreptocócicas del caballo y el perro.

Albúmina

La albúmina plasmática representa alrededor de los dos tercios de las proteínas del com- partimento circulatorio y la mitad de la albúmina total del organismo. Sintetizada por el hepatocito, su vida media es de aproximadamente 20 días. Ochenta por ciento de la pre- sión oncótica del plasma se atribuye a la albúmina, que es la principal responsable de los movimientos acuosos entre el medio intravascular y el medio intersticial. Una baja en la albuminemia se denomina hipoalbuminemia. Por ejemplo, cuando este proceso alcanza las cifras de 300 a 400 ì mol/L, favorecerá la formación de edema. Su segunda función en el plasma es garantizar el transporte de diversas sustancias, entre las que se encuentran: bilirrubina, ácidos grasos, medicamentos (fenilbutazona, fenitoína y otros) y hormonas. Posee varios lugares de fijación de diversa especificidad. La mayoría de las interferencias medicamentosas sobre los métodos colorimétricos se deben a una competición entre los principios activos y los colorantes en los lugares de fijación de la albúmina, en este caso la albúmina estará infravalorada.

El método para su determinación comúnmente usado es la unión con el colorante verde de bromocresol, el cual puede dar resultados falsos elevados con concentraciones de albúmina bajas a consecuencia de la unión del colorante con otras proteínas. La bilirrubina y anticonvulsivos, como carbamacepina, fenitoína o fenobarbital, causan hipoalbuminemia, mientras que ciertos antibióticos, como ampicilina y carbenicilina, compiten con la albúmina por el colorante y causan una desviación de la densidad óptica, provocando que ésta sea diferente de la causada por la albúmina; por este motivo puede llegar a presentarse una lectura baja falsa.

Hiperalbuminemia. Suele ocurrir básicamente por hemoconcentración, por lo que se asocia

a la relación alúmina: globulinas (A:G) normal.

Hipoalbuminemia. Se relaciona con las causas mencionadas en hipoproteinemias, tales como

sobrehidratación, dietas deficientes en proteínas, síndrome de mala digestión, síndrome de mala absorción, disminución en la producción por enfermedad hepática, pérdidas a través del riñón y pérdida a espacios terceros.

Globulinas

La concentración de la mayor parte de las proteínas es calculada; a las proteínas séricas se les resta la concentración de albúmina.

La prueba de turbidez de sulfato de zinc es utilizada como una prueba tamiz para determinar la absorción de las inmunoglobulinas del calostro en potros y becerros.

Rosa Luz Mondragón Vargas

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Hiperglobulinemia. Indica proceso inflamatorio crónico. También puede llegarse a observar

en neoplasias como linfosarcoma bovino o plasmocitoma.

Hipoglobulinemias. Los animales recién nacidos (que no han tomado calostro) tienen con-

centraciones menores de globulinas en relación con las concentraciones de los adultos. En animales adultos se atribuye a inmunodeficiencias.

Relación albúmina:globulinas (rel. A:G)

Es un valor calculado, obtenido de dividir la albúmina entre las globulinas. Disminución de la relación

Disminución de la relación Disminución de la relación

Disminución de la relación Disminución de la relación AAAAA:::::GGGGG. Aumento de globulinas por las causas previamente

mencionadas, disminución de albúmina. Elevación de la relación

Elevación de la relación Elevación de la relación

Elevación de la relación Elevación de la relación AAAAA:::::GGGGG. Hipogammaglobulinemia (frecuente en becerros),

inmunodeficiencia congénita, inmunodeficiencia adquirida.

Separación de las diversas proteínas por electroforesis

La mayoría de las proteínas séricas tienen carga negativa cuando se disuelven en amorti- guadores alcalinos. Si se aplican a placas de acetato de celulosa o geles de agarosa, las proteínas séricas pueden ser separadas con base en su densidad de carga y su movilidad resultante en un campo eléctrico. La albúmina es una proteína de peso molecular bajo y alta carga negativa, por lo que migra con la mayor velocidad hacia el ánodo (polo positi- vo). La densidad de carga negativa de las diversas globulinas disminuye de las alfa a las beta, hasta prácticamente las casi carentes de carga, las gammaglobulinas, que se mueven poco del punto de aplicación. Siguiendo la electroforesis, a la membrana o gel se le aplica una tinción para proteínas y la evaluación se hace por densitometría. La amplitud y den- sidad de cada banda de proteínas está representada por la amplitud y altitud de un pico sobre la traza del densitómetro. Se mide el área bajo cada pico en el electroforetograma y se determina el porcentaje de cada fracción; el valor absoluto para cada proteína se calcula multiplicando el porcentaje de las concentraciones de proteínas séricas obtenidas por ensayos químicos de cada fracción.

Aplicación clínica.

Aplicación clínica. Aplicación clínica.

Aplicación clínica. Aplicación clínica. La electroforesis de proteínas séricas puede brindar información útil

para la determinación de la causa de una concentración elevada de proteínas séricas; a excepción de los animales con deshidratación, la concentración aumentada de proteínas séricas indica concentraciones elevadas de inmunoglobulinas (Ig). Estudios en perros han demostrado que la mayoría de casos con concentraciones elevadas de alfa-2 globulinas pueden ser atribuidas a una elevación en la proteína reactiva de fase aguda haptoglobina. La concentración de haptoglobina aumenta después de la administración de glucocorticoides, también en perros.

Un aumento en la concentración de inmunoglobulinas ocurre en procesos inflamatorios crónicos o neoplásicos. Cuando la elevación ocupa las regiones alfa y beta, los términos hiperglobulinemia policlonal y gammopatía policlonal son usados para describir la ma- yor concentración de inmunoglobulinas. La hiperglobulinemia policlonal usualmente es el resultado de una condición inflamatoria crónica. Cuando la mayor concentración de inmunoglobulinas se debe a una sola región, que aparece como un pico alto de base delgada (similar al de la albúmina), se utilizan los términos hiperglobulinemia monoclonal y gammopatía monoclonal. Si la proteína anormal migra en la región beta, ésta es referida como proteína M o paraproteína. La mayoría de las gammopatías monoclonales son pro-

ducidas por la proliferación clonal de células neoplásicas de la serie linfoide B (plasmocitoma, macroglobulinemia de Waldenstrom, linfoma y leucemia linfocítica cró- nica), sin embargo, las gammopatías monoclonales también se han observado, aunque raramente en animales con proliferación de células plasmáticas no neoplásicas, en ehrlichiosis canina, gastroenterocolitis plasmocítica y leishmaniasis, amiloidosis y en au- sencia de causa identificada (paraproteinemia idiopática o gammopatía monoclonal de significancia indeterminada). Las gammopatías biclonales con paraproteínas separadas se han encontrado raramente en animales con tumores de células plasmáticas.

Interpretación

Gammopatías policlonales:

✦ InfecciónInfecciónInfecciónInfecciónInfección: Bacterianas, ehrlichiosis, gusano del corazón, infección fungal de tipo

sistémico, peritonitis, infección con el virus de inmunodeficiencia felina, virus de leucosis enzoótica bovina.

✦ Procesos estérilesProcesos estérilesProcesos estérilesProcesos estérilesProcesos estériles: Inmunomediados.

Gammopatías monoclonales:

✦ NeoplasiasNeoplasiasNeoplasiasNeoplasiasNeoplasias: Plasmocitoma, linfosarcoma, macroglobulinemia primaria.

✦ InfeccionesInfeccionesInfeccionesInfeccionesInfecciones: Ehrlichiosis, leishmaniasis.

✦ Otras causasOtras causasOtras causasOtras causasOtras causas: Gammopatía monoclonal idiopática, amiloidosis cutánea,

gastroenterocolitis plasmocítica, plasmocitoma hepático, pioderma crónico.

Prueba para la determinación de inmunoglobulinas (Prueba de precipitación de sulfito de sodio)

Esta es una prueba efectiva y rápida en condiciones de campo, que consiste en la precipi- tación de las inmunoglobulinas del suero del becerro al contacto con las sales del com- puesto. Es útil cuando se aplica en animales de 24 horas a cinco días de edad. Para su realización se preparan tres soluciones de sulfito de sodio al 14%, 16% y 18%, en agua destilada. Se colocan 1.9 mL de cada solución en tres tubos de ensayo (con capacidad de 3 a 5 mL) y se añade 0.1 mL del suero del becerro en cuestión a cada uno de los tubos, mezclando perfectamente bien el contenido.

En caso de haber titulación de inmunoglobulinas de inmediato se observará turbidez, y la formación de un precipitado, al cabo de 30 a 60 minutos. La interpretación puede realizarse de acuerdo con lo referido por Bouda, et al. (1994).

Araceli Lima Melo

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ÍPIDOS

Araceli Lima Melo

L

os lípidos son moléculas orgánicas insolubles en agua, que tienen especial impor

tancia como reservas de energía y componentes de la membrana celular. Los triglicéridos son los lípidos más importantes en el almacén del exceso de energía en el tejido adiposo. Los fosfolípidos y el colesterol son los principales constituyentes de membrana. El colesterol es componente de la pared celular y es la base para la síntesis de ácidos biliares y esteroides.

Los ácidos grasos de cadena larga, frecuentemente llamados ácidos grasos libres (AGL)

o ácidos grasos no esterificados, son ácidos grasos de cadena simple con 12 o más átomos de carbono. Usualmente son sintetizados en plantas y animales, en gran parte en hígado, desde donde son liberados para transportar triglicéridos al tejido adiposo, en el cual la

lipoproteína lipasa cataliza su hidrólisis a los AGL y el glicerol que penetran en la célula.

Cuando existe un aumento de la oxidación de ácidos grasos por el hígado, la velocidad a que es producida la acetil CoA puede exceder la de su oxidación, en tales circunstancias, la acetil CoA es utilizada para la producción de ácido acetoacético, ácido betahidroxibutirato y acetona (cuerpos cetónicos).

Debido a su insolubilidad, los lípidos deben contar con proteínas para transportarse, y varias proteínas están involucradas en esta función. La unión de lípidos a una proteína específica llamada apoproteína, que es sintetizada en hígado o intestino, es conocida como lipoproteína.

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