3.2 Stochastic Integrals
3.2.4 Vector Valued Integrals
3.5.1 Granja
Dicho diseño experimental fue desarrollado en el establecimiento porcino “Agroporc”, ubicado en Coronel Vidal, partido de Mar Chiquita, provincia de Buenos Aires. La explotación cuenta con 380 madres en producción confinadas. Se trata de una granja de tipo intensiva, de ciclo completo que cuenta con 3 sitios bien definidos. El sitio I conformado por 1 galpón de gestación que alberga los vientres y las futuras madres del plantel reproductivo (cachorras de propia reposición) y, por otro lado, el galpón que alberga a las distintas salas de maternidad. El sitio II conformado por dos galpones que albergan las distintas salas de recría y, por último, el sitio III que cuenta con un galpón de desarrollo, 3 galpones para terminación y 2 galpones mixtos. Cabe aclarar que los galpones del sitio III están conformados por corrales de unos 30 animales cada uno, con piso pista de cemento, ventilación con cortina manual y alimentación automática. El trabajo experimental se desarrolló en el periodo comprendido entre Mayo y Octubre del 2017.
3.5.2 Antecedentes de la enfermedad
Se trata de un establecimiento, que por estar a escasos metros de una planta de faena de cerdos, es endémica para ciertas enfermedades como Influeza Porcina, Mycoplasma hyopneumoniae, Circovirus Porcino y App, enfermedades que en conjunto forman parte del Complejo Respiratorio Porcino Para evitar posible brotes, se llevan a cabo medidas preventivas, entre las cuales se encuentran la aplicación de vacíos sanitarios en los casos en que la estructura lo permita, principalmente en maternidad y recría y en algunos casos, en forma parcial, en el engorde. Asimismo, se realiza la vacunación contra Mycoplasma hyopneumoniae y Circovirus Porcino.
Como se observa en la Tabla 2, la primovacunación contra App es efectuada a los capones de 45 días de vida con un refuerzo a los 65 días de vida
La vacuna suministrada pertenece al laboratorio Ceva®. La misma está indicada para la inmunización activa de los porcinos contra la Pleuroneumonía causada por App. COGLAPIX contiene antígenos somáticos y toxoides APX I, II y llI de App. La bacterina se encuentra suspendida en Hidróxido de Aluminio.
Los signos clínicos característico de la enfermedad respiratoria acompañados de muertes súbitas, suelen presentarse con mayor frecuencia en la etapa de desarrollo y continúan hasta la etapa de venta.
Tabla 2: Plan sanitario. (Granja “Agroporc”, 2017)
Vacunas Categoría Edad
(días) Refuerzo (días) Actinobacillus pleuropneumoniae Cachorras 174 194 Vientre 90 - Lechón 45 65 Mycoplasma hyopnuemoniae (monodosis) Cachorras 174 - Lechón 21 - Circovirus Porcino (monodosis) Lechón 45 - Parvovirus/Leptospira /Erisipela Cachorra 174 194 Madre lactante 10 (de parida) -
3.5.3 Diseño experimental
Se realizó un estudio serológico previo para determinar los títulos de anticuerpos contra App e Influenza Porcina, para lo cual se obtuvieron un total de 54 muestras, en las siguientes categorías: Cachorras, hembras de primero, tercero y quinto parto y animales de 20,40, 60, 80, 100, 120 y 140 días de vida (Figura 1 y 2). Cabe aclarar, que el diagnóstico de ELISA basado en el uso de toxina ApxIV, sólo determinó la presencia o ausencia de infección y el momento en que los animales se infectaron. Además, no detecta anticuerpos vacunales ya que la vacuna utilizada en la granja sólo contiene los toxoides Apx I, II y III. Como se observa en la Figura 3, los títulos contra App en los animales de 20, 40 y 60 días se mantienen altos., probablemente debido a los anticuerpos maternos, luego se observa una caída y a partir de los 90-100 días de vida, los títulos vuelven a aumentar coincidiendo con la aparición de los signos clínicos. De esta manera, se evaluó la posibilidad de realizar la primovacunación a los 65 días de vida con un refuerzo a los 93 días de vida, considerando además que no es adecuado realizarlo antes de las 8 semanas debido a una posible interferencia anticuerpo materno-vacunal.
Figura 2: Distribución de títulos serológicos de Influenza (Granja “Agroporc,
Se utilizaron 188 lechones clínicamente sanos provenientes de 15 madres alojadas en una sala de maternidad. Para su estudio, los lechones se identificaron individualmente con un sistema de caravana colocada en el borde superior de su oreja. Cada caravana contaba con un número individual y fueron diferenciadas en color verde y naranja, identificando así, a los animales del grupo control y a los animales del grupo tratamiento, respectivamente. Durante todo el ensayo recibieron agua y alimento ad libitum.
Para que la distribución de los animales en los distintos grupos fuera al azar, el sistema implementado para la colocación de la caravana fue verde- naranja para los lechones de la primera madre, y luego naranja-verde para los de la segunda. Y así se prosiguió con las siguientes respetando ese orden. Una vez realizado este trabajo, se tomó nota del número de caravana de cada lechón, el color de la misma, el peso y edad del lechón al inicio del estudio y, finalmente, el número de identificación de la madre del cual provenía.
3.5.4 Parámetros de comparación de rendimientos
Para determinar el peso inicial de los animales, los mismos fueron pesados individualmente en un balde con una balanza digital tipo “gancho”.
La edad inicial promedio de los dos grupos fue de 18 días de vida, con 4.68 Kg los animales del grupo control y 4.63 Kg los del grupo tratamiento.
Grupo control (caravana verde)
Grupo tratamiento (caravana naranja)
Edad (días de vida) 18 18
Peso (Kilogramos) 4.68 4.63
Tabla 3: Edad y peso inicial del grupo control (caravana verde) y el grupo tratamiento (caravana naranja).
Al día siguiente, los animales fueron destetados y trasladados a una sala de recría con capacidad para 200 animales, donde permanecieron durante 49
días. Los mismos fueron divididos en dos grupos al azar de 94 animales. En cada grupo había animales del grupo control y tratamiento.
Los animales del grupo control, a las 3 semanas de ingresados a la recría y con una edad entre 34 y 41 días de vida fueron primovacunados contra App, con un refuerzo a los 28 días.
Los animales del grupo tratamiento recibieron la primovacunación a las 6 semanas y media de haber ingresado a la recría, con una edad de entre 62 y 69 días de vida y con un refuerzo a los 28 días.
Posteriormente, los animales pasaron al galpón de desarrollo, con una distribución de 30 animales por corral, previa selección por tamaño.
A los 73 días vida promedio, fueron pesados nuevamente de manera individual en una balanza utilizada para la carga de animales que van a faena registrando, además, el número y color de caravana. Los animales del grupo control arrojaron un peso promedio de 25.25 Kg y los del grupo tratamiento 24.94 Kg.
Grupo control (caravana verde)
Grupo tratamiento (caravana naranja)
Edad (días de vida) 73 73
Peso (Kilogramos) 25.25 24.94
Tabla 4: Edad y peso promedio del grupo control (caravana verde) y grupo tratamiento (caravana naranja).
El peso final, registrado previo al envío a faena fue de 99.77 Kg y 177 días de vida para el grupo control y de 104.88 Kg con 177 días de vida para el grupo tratamiento.
Grupo control (caravana verde)
Grupo tratamiento (caravana naranja)
Edad (días de vida) 177 177
Peso (Kilogramos) 99.77 104.88
Tabla 5: Edad y peso final del grupo control (caravana verde) y el grupo tratamiento (caravana naranja).
Además de las variables de interés registradas como peso inicial (al destete), medio (al final de la recría) y final (venta), en la faena fueron registrados el peso de la res, los milímetros de espesor de grasa, los milímetros de espesor de músculo y el porcentaje de magro.
Para evaluar el efecto de tratamiento (caravanas verdes vs. naranjas), fue realizado un análisis de variancia contemplando en el modelo, las covariables: peso inicial y edad a la venta, y los factores: sexo, número de parto de la madre (1 y 2 o más) y efecto de grupo o tratamiento. Para el análisis fue utilizado el software estadístico SAS V9. (SAS, Institute Inc., Cary, NC, USA).
La ganancia media diaria fue estima utilizando el Peso Inicial y el Peso a la Venta sobre la cantidad de días que los animales permanecieron alojados hasta su faena (177 días de vida).
3.5.5 Parámetros clínicos
Los animales que presentaron signos respiratorios fueron tratados con amoxicilina inyectable durante 3 días consecutivos.
Todos los animales recibieron medicación antibiótica en el alimento (premix). Las categorías medicadas por esta última vía fueron iniciador (en recría), desarrollo y terminación. La droga utilizada fue Florfenicol a razón de 500 gramos por tonelada de alimento, con un periodo de ventana entre tratamiento y tratamiento de 14 días.
3.5.6 Parámetros de comparación lesiones pulmonares
Para la inspección de los pulmones en frigorífico se utilizó un score pulmonar (adaptado de Sobestiansky y Barcellos, 2007), el cual considera los siguientes parámetros:
1. Cicatrices 2. Pleuritis craneal
3. Lesiones de neumonía (Madec modificado) 4. Lesiones dorsocaudales (SPES)
En el caso de las cicatrices el programa evaluó la prevalencia de fisuras o cicatrices en base a su presencia o ausencia. La incidencia de fisuras indica que las infecciones viejas probablemente fueron provocadas por Mycoplasma hyopneumoniae.
La pleuritis craneal puede ser atribuida a procesos patológicos relacionados a la presencia de Mycoplasma hyopneumoniae y otros patógenos respiratorios como el virus de la Influenza, Pasteurella multocida o Streptococcus suis. El programa evaluó tanto la presencia de pleuritis en la superficie de los lóbulos apical y cardiaco o entre ellos, siendo 0 o 1, ausencia o presencia respectivamente.
A la neumonía se le asignó un puntaje en base al método Madec (Figura 4), el cual ha sido modificado considerando la contribución de cada lóbulo a la capacidad total de los pulmones, siendo:
- Puntaje 0: sin lesiones
- Puntaje 1: 1-25 % de la superficie afectada
- Puntaje 2: 26-50% de la superficie del lóbulo afectada - Puntaje 3: 51-75% de la superficie del lóbulo afectada - Puntaje 4: 76-100 de la superficie del lobulo afectada.
El método de evaluación de las lesiones dorsocaudales (SPES) producidas por App, desarrollado por Dottoni en 2007, clasifica a las lesiones pleurales de acuerdo con su localización, apariencia y extensión.
- Puntaje 0: ausencia de lesiones de pleuritis crónica - Puntaje 2: lesión focal dorsocaudal monolateral
- Puntaje 3: lesión bilateral de tipo 2 o monolateral extendida (al menos 1/3 de un lóbulo diafragmático)
- Puntaje 4: lesión bilateral severamente extendida (por lo menos 1/3 de ambos lóbulos diafragmáticos).
Fueron inspeccionados 174 pulmones y se obtuvo muestras de 10 pulmones, elegidos al azar (Figura 5). Las muestras obtenidas fueron: 2 muestras por pulmón, una de la zona craneoventral y otra de la zona dorsocaudal fijadas en formol al 10 % para su posterior estudio histopatológico. Una muestra estéril de la zona dorsocaudal para aislamiento bacteriológico y una muestra de pulmón de la zona craneoventral para el estudio mediante biología molecular utilizando la prueba de reacción de cadena de la polimerasa (PCR) para determinar la presencia del genoma del virus del Circovirus porcino, virus de la Influenza porcina y Mycoplasma hyopneimoniae.
Las muestras para histopatología fueron procesadas y analizadas por la Dra. María Belén Riccio del Servicio de Diagnóstico de la FCV Tandil, mientras que las muestras para el aislamiento bacteriológico y molecular fueron procesadas por INTA Marcos Juárez.
Figura 5: Pulmones elegidos al azar para obtener las muestras para aislamiento bacteriológico, biología molecular (PCR) y procesamiento
Finalmente, fueron estimadas las frecuencias y los porcentajes de lesión pulmonar, y la comparación entre ambos grupos fue realizada mediante la prueba de Chi-cuadrado o el test exacto de Fisher cuando fue necesario.
3.5.7 Índice de mortandad
Fueron registradas, las muertes de cada animal según el número y color de caravana. Se realizaron las necropsias correspondientes en busca de lesiones compatibles con App. Posteriormente se estimó el porcentaje de mortandad de cada grupo.
3.6 Resultados
Los animales del grupo tratamiento (caravana naranja) presentaron una mayor ganancia media diaria en comparación con los animales del grupo control (caravana verde).
3.6.1 Parámetro de comparación de rendimiento
Peso a la Venta
En la tabla 6 se muestran los promedios y el error estándar (e.e.) de los pesos en cada etapa, para cada grupo. El peso a la venta está linealmente asociado al peso inicial (P<0,0001). Fue detectada diferencias significativas entre ambos grupos (P=0,0018), siendo el peso a la venta de 105,2±1,6 para el grupo tratamiento (caravana naranja) y 99,8±1,4 para el grupo control (caravana verde). Además, fue detectada diferencia para el peso a la venta según el sexo del animal (P=0,0033), siendo 98,8±1,7 y 105,7±1,4 para hembras y machos respectivamente. La ganancia media diaria fue estima utilizando el Peso Inicial y el Peso a la Venta sobre la cantidad de días que los animales permanecieron alojados hasta su faena (177 días).
Grupo Peso Grupo control (caravana.verde) Grupo tratamiento (caravana.naranja)
n Media e.e. n Media e.e.
Inicial 94 4,69 0,11 94 4,63 0,12
Recría 89 25,26 0,52 93 24,95 0,54
Venta 80 99,8 1,43 80 105,2 1,62
Tabla 6. Promedio y error estándar (e.e.) de pesos en cada grupo (Rodríguez, E. UNCPBA; 2018).
Ganancia media diaria
En la Tabla 7 se observan las distintas ganancias medias diaria globales de cada grupo apreciándose una diferencia mayor de 31 gramos por día para los animales del grupo control (caravana verde) con respecto a los animales del grupo tratamiento (caranavana naranja).
Ganancia media diaria global Grupo control (caravana verde) Grupo tratamiento (caravana naranja) Gramos/día 537 568
Tabla 7: Ganancia media diaria de peso en cada grupo.
Peso de la Res
En la tabla 8 se muestran los promedios y el error estándar (e.e.) de las variables registradas en la faena. El peso de la res está linealmente asociado al peso inicial (P<0,0001). Fueron detectadas diferencias significativas entre ambos grupos (P=0,0055), siendo el peso de la res de 89,3±1,6 para el grupo tratamiento (caravana naranja) y 84,3±1,2 para el grupo control (caravana
verde). También, fue observada diferencia según el sexo del animal (P=0,0217), siendo 84,2±1,5 y 88,9±1,3 para hembras y machos respectivamente.
Tabla 8: Promedio y error estándar (e.e.) de las variables registradas en la carcasa, en cada grupo (Rodríguez, E. UNCPBA; 2018).
Grasa en la Res
La variable grasa no está asociada al peso inicial de los animales como con las variables anteriores (P=0,1315). Sin embargo, fueron detectadas diferencias significativas entre ambos grupos a la faena (P=0,0020), siendo de 17,0±0,6 para el grupo tratamiento (caravana naranja) y 14,7±0,5 para el grupo control (caravana verde). También, fueron detectadas diferencias, en la grasa, según el sexo del animal (P=0,0480), siendo 15,0±0,6 y 16,6±0,5 para hembras y machos respectivamente.
Músculo en la Res
La variable músculo está linealmente asociada al peso inicial de los animales (P=0,1315). No fue detectada diferencia significativa, en el músculo, entre los tratamientos (P=0,5411). Tampoco fue detectada diferencia según el sexo del animal (P=0,1121).
Grupo Carcasa Grupo control (caravana verde) n=72 Grupo tratamiento (caravana naranja) n=71
Media e.e. Media e.e.
Res (kg) 84,28 1,18 89,30 1,55
Grasa 14,67 0,48 17,03 0,59
Músculo 74,42 0,59 74,99 0,56
Porcentaje de Magro
La variable músculo está linealmente asociada al peso inicial de los animales (P=0,4151). Fue detectada diferencia significativa entre los tratamientos (P=0,0020). Y fue detectada diferencia, en el porcentaje de Magro, según el sexo del animal (P=0,0182), siendo 59,4±0,4 y 58,0±0,4 para hembras y machos respectivamente.
3.6.2 Parámetros de comparación lesiones pulmonares
En la Tabla 9 se muestran las frecuencias y porcentajes de lesiones encontradas en los diferentes lóbulos, en cada grupo. Solo en el lóbulo CI fueron detectadas diferencias significativas (P=0,0199).
Grupo control (Caravana verde) n=75
Grupo tratamiento (caravana naranja) n=72
P valor
Lugar Con lesión Sin lesión
Con lesión Sin lesión
AI 2 (2,7%) 73 (97,3%) 2 (2,8%) 70 (97,2%) 1,0000* CI 25 (33,3%) 50 (67.7%) 12 (16,7%) 60 (83,3%) 0,0199 DI 9 (12,0%) 66 (88,0%) 5 (6,9%) 67 (93,1%) 0,2966 AD 7 (9,3%) 68 (90,7%) 9 (12,5%) 63 (87,5%) 0,5377 CD 23 (30,7%) 52 (69,3%) 14 (19,4%) 58 (80.6%) 0,1171 DD 6 (8,0%) 69 (92,0%) 8 (11,1%) 64 (88,9%) 0,5206
* Test exacto de Fisher
Tabla 9: Frecuencia y porcentaje de lesiones los lóbulos, Apical Izquierdo (AI) Craneal Izquierdo (CI), Diafragmático Izquierdo (DI), Apical Derecho (AD),
Craneal Derecho (CD), Diafragmático Derecho (DD) y Accesorio (Acc); en cada grupo (Rodríguez, E. UNCPBA; 2018).
En la Figura 6 se puede observar los porcentajes de lesiones encontradas en cada lóbulo para los animales del grupo control (caravana verde), mientras que en la Figura 7 se observan los porcentajes de las lesiones pulmonares para los animales del grupo tratamiento (caravana naranja).
Figura 6: Porcentaje de lesión en cada lóbulo pulmonar en el grupo control (caravana verde) (Rodríguez, E. UNCPBA; 2018).
Acc 8 (10,7%) 67 (89,30%) 8 (11,1%) 64 (88,9%) 0,9311 Total 34 (45,3%) 41 (54,7%) 27 (37,5%) 45 (62,5) 0,3353 AD CD AI CI DD DI Ac 9,3% 30,7% 8,0% 10,7% 2,7% 12,0% 33,3%
Figura 7: Porcentaje de lesión en cada lóbulo pulmonar en el grupo tratamiento (caravana naranja) (Rodríguez, E. UNCPBA; 2018)
En la Tabla 10 se muestran las frecuencias y porcentajes de lesiones compatibles con lesiones dorsocaudales (SPES), pleuritis y cicatrices. Las diferencias entre ambos grupos no fueron estadísticamente significativas (P>0.05). Mientras que en la Tabla 11, se puede observar más específicamente, la cantidad de animales que responden al grado 0, 2, 3 y 4 del sistema SPES (lesiones dorsocaudales) en ambos grupos, determinándose que la mayor cantidad de animales presentan grado 2.
AD CD AI CI DD DI Ac 12,5% 19,4% 11,1% 11,1% 2,8% 6;9% 16,7%
* Test exacto de Fisher
Tabla 10: Frecuencia y porcentaje de lesiones compatibles con lesiones dorsocaudales (SPES), pleuritis y cicatrices, en cada grupo (Rodríguez, E.
UNCPBA; 2018).
Lesiones Dorsocaudales (SPES)
Grado 0 2 3 4 Total
Grupo.control 70 3 1 1 75
Grupo.tratamiento 69 3 0 0 72
Total 139 6 1 1 147
Tabla 11: Grado de lesión según sistema SPES (lesiones dorsocaudales) para los animales del grupo control (caravana verde) y el grupo tratamiento
(caravana naranja) (Rodríguez, E. UNCPBA; 2018).
Tipo Con lesión Sin
lesión
Con lesión Sin lesión
Lesiones Dorso- caudales (SPES) 5 (6,7%) 70 (93,3%) 3 (4,2%) 69 (95,8%) 0.2311* Pleuritis 30 (40,0%) 45 (60,0%) 23 (31,9%) 49 (68,1%) 0.3092 Cicatrices 16 (22,2%) 56 (77,8%) 0.3249 Grupo control (caravana verde) n=75 Grupo tratamiento (caravana naranja) n=72 P valor
3.6.3 Índice de mortandad
El porcentaje de mortandad de los animales de caravana verde fue del 2,71%. Las muertes se centraron en el rango de los 45 a 95 días de vida con un mayor foco al día 65.
El porcentaje de mortandad de los animales de caravana naranja fue del 2,64 %. Las muertes se centraron en el rango de los 75 a 95 días de vida con un foco mayor a los 75 días de vida.
3.7 Discusión
El uso de la metodología de ELISA basado en el uso de toxina ApxIV, determinó la presencia de infección. Los títulos contra App en los animales de 3, 6 y 8 semanas de edad se mantuvieron altos, luego se observó una caída y a partir de las 13-14 semanas de vida, los títulos volvieron a aumentar coincidiendo con la aparición de los signos clínicos. Esto coincide con los estudios de Chiers et al (2002) que demuestra que los animales se tornan susceptibles a la infección a partir de las 8 semanas de vida, de allí que se podría sugerir que la seropositividad encontrada a partir de los 60 días de edad puede ser consecuencia de una probable infección activa. Además, Haesebrouck et al. (1997) señalan que la protección de los anticuerpos maternales no supera las 3 semanas.
Por lo anterior mencionado y por recomendación personal del Dr. M. Gottschalk se realizó la primovacunación a los 65 días de vida con un refuerzo a los 93 días de vida. Esto no solo mejoró la ganancia media diaria (Grafico 1), sino que también hubo diferencias significativas en el peso a la venta (grupo tratamiento “N”: 105,2±1,6 vs grupo control “V”: 99,8±1,4), como se observa en el Grafico 2 y en el peso de la res (grupo tratamiento “N”: 89,3±1,6 vs grupo control “V”: 84,3±1,2).
Por otro lado, se sabe que las pleuritis dorsocaudales están fuertemente asociadas a infecciones por App. Se dan en la cara caudal de los lóbulos
diafragmáticos y necesitan al menos de 3 meses para su resolución, lo cual, por la dinámica de infección de la enfermedad, hace que sea muy difícil su desaparición previa a la llegada a matadero (Espigares, 2016).
Después de los resultados del score pulmonar (adaptado de Sobestiansky y Barcellos, 2007), para evaluar cicatries, pleuritis craneal, lesiones de neumonía (Madec modificado) y lesiones dorsocaudales (SPES) y haber sido enfrentados ambos grupos ante el programa estadístico, se determinó que no hubo diferencias estadísticamente significativas entre uno y otro en cuanto al porcentaje de animales con lesiones y sin lesiones, como se observa en el Grafico 3, aunque podría tenerse en cuenta desde el punto de vista clínico.
No hubo diferencias significativas en cuanto al Índice de mortandad.
Gráfico 1: Comparación de la Ganancia Media Diaria a los 18, 73 y 177 días. Grupo control Grupo tratamiento 0 200 400 600 800 18 73 177 260 374 716 257 369 771 GR AMO S GANAD O S DÍAS DE VIDA 18 73 177 Grupo control 260 374 716 Grupo tratamiento 257 369 771