mellifera L.)
M en C Daniel Prieto Merlos12 MVZ Karla Itzél Alcalá Escamilla13 Ph D Ernesto Guzmán Novoa14
M en C Felipe de Jesús Becerra Guzmán15
Lic Act. EEA Claudia Alcalá Escamilla16
PhD Miguel Arechavaleta Velasco17
INTRODUCCIÓN
Abejas africanizadas en la apicultura nacional Uno de los problemas serios de la
apicultura mexicana es la abeja africanizada, que ha ocasionado una disminución en la producción de miel, aumento en costos de producción y un aumento en el número de accidentes provocados por ataques de las abejas (Guzmán-Novoa, 1996). Las abejas africanizadas son difíciles de identificar a simple vista de las abejas europeas. Los métodos morfométricos Daly-Balling (Daly HV, Balling SS, 1978) y FABIS (Sylvester y Rinderer, 1987), permiten identificar con exactitud abejas con medidas europeas o africanizadas. Investigaciones realizadas demostraron por medio de estudios morfométricos que las abejas con promedios de longitud de ala mayor a 9.1 mm, tienden a ser más europeas y menos defensivas que aquéllas que poseen alas de menor tamaño (Guzmán-Novoa et al., 1994; Guzmán-Novoa y Page, 1999). En el Estado de México se realizó un estudio, donde demostraron que las abejas de genotipo africanizado fueron significativamente menos productivas, más defensivas y de menor longitud de ala (Uribe
et al., 2003).
OBJETIVO
El objetivo de este trabajo fue desarrollar un método práctico, económico y confiable para medir la longitud del ala anterior en abejas melíferas (Apis mellifera L.), para seleccionar abejas dóciles y productivas.
MATERIALES Y MÉTODOS
Localización del área de muestreo El muestreo se realizó en los apiarios localizados en
los municipios de Villa Guerrero y Coatepec Harinas. Los apiarios pertenecen al Centro de Mejoramiento Genético, Generación y Transferencia de Tecnología Apícola del INIFAP, ubicado en el km 29 de la carretera estatal Tenango del Valle municipio de Villa Guerrero, Estado de México (INEGI, 1998).
1 Profesor de apicultura FMVZ-UNAM 13 FMVZ-UNAM
14 Investigador. Universidad de Guelph, Cánada. Tutor Posgrado FMVZ-UNAM
15 Profesor Investigador Centro Universitario de la Costa sur. Universidad de Guadalajara 16 Jefa área estadística CANIEM
Formación de los grupos genéticos
Para el estudio se utilizaron cuatro grupos genéticos. El europeo se obtuvo mediante reinas europeas de libre fecundación originarias de Hawaii, de las razas italiana y carniola. Para el caso del africanizado fueron capturados enjambres de la región, seleccionando las colonias que presentaban características africanizadas de acuerdo al método de la plantilla (Prieto, 2002) modificado por Uribe18. De esta forma quedaron
conformados los grupos: madre europea con padre europeo (EE); madre africanizada con padre africanizado (AA).
Los grupos híbridos: madre europea con padre africanizado (EA); madre africanizada con padre europeo (AE), se formaron criando reinas y zánganos de origen europeo y africanizado, cada reina fue inseminada instrumentalmente con el semen de cinco zánganos del genotipo opuesto.
Cada una de las colonias fueron alimentadas con dos litros de jarabe de azúcar, cada quince días. Además de medicarse con oxitetraciclina (Terramicina TM-50®) integrada con
azúcar glass, cada ocho días por cinco ocasiones para evitar enfermedades bacterianas. Como tratamiento preventivo contra varroosis se les colocó tiras de flumetrina (Bayvarol®),
entre los bastidores de la cámara de cría.
Se tomaron las muestras de abejas dos meses después de la introducción de las reinas. El muestreo fue realizado los días 28 y 29 de septiembre del 2004, utilizando quince colmenas de cada genotipo. Se colectaron de cada colmena al menos 50 abejas en un frasco de vidrio con alcohol etílico al 70%. Para la identificación de las muestras se escribió con lápiz en un pedazo de papel bond: nombre del apiario, número de la colmena y grupo genético. El papel se introdujo en el interior del frasco.
Identificación de las abejas
En el laboratorio de Identificación y Diagnóstico Apícola del Programa Nacional para el Control de la Abeja Africana dependiente de la SAGARPA ubicado en la delegación de Xochimilco D.F., se trabajaron las muestras con los métodos de plantilla, regla fija y FABIS I, y para evitar sesgos se reclasificaron las muestras.
PLANTILLA
Basado en medir la longitud del ala anterior de abejas obreras, sin la necesidad de que éstas fueran desprendidas del cuerpo de las abejas y sin utilizar instrumentos de laboratorio. Para elaborar la plantilla se utilizó el diseño realizado por Uribe-Rubio, el cual consistió en un pedazo de lámina de 7 cm de largo x 1 cm de ancho x 0.7 mm de grosor. Con un vernier fue medida la distancia de 9 mm a partir de uno de los extremos de 1 cm y se marcó una línea delgada con la ayuda del filo de una navaja. De cada muestra fueron tomadas 30 abejas que eran colocadas sobre papel secante para quitar el alcohol. Las abejas se sujetaron del tórax con los dedos pulgar e índice, en posición dorso ventral. Con los dedos de la mano contraria, se estiró el ala quedando perpendicular al tórax. La plantilla fue colocada en la parte ventral del ala. Las mediciones fueron realizadas siempre en el ala anterior derecha. Para determinar el tamaño de cada ala, se verificó si el vértice
de ésta era mayor, igual o menor a la escala de 9 mm, registrando las medidas de las alas (Prieto, 2002).
REGLA FIJA
El método propuesto se elaboró con una porción de lámina de 15 cm de largo x 1 cm de ancho x 0.7 mm de grosor, atornillada a una base de madera de 30 x 20 cm de ¾ de pulgada. Sobre la lámina, en medio de ella se marcaron dos líneas paralelas con una distancia de 9 mm entre ellas, las marcas se realizaron de la misma forma que con la plantilla. Se utilizaron 30 abejas por muestra, estas fueron colocadas sobre una hoja de papel secante para quitar el alcohol. A cada abeja se le desprendió el ala anterior derecha con los dedos pulgar e índice de la mano derecha, sujetándola desde su articulación al tórax (tégula) con el fin de que al desprender el ala, ésta tuviera parte del tejido del tórax. A cada ala se le retiró el exceso de tejido mediante un suave movimiento hecho con la uña del dedo índice derecho quedando expuesta la escotadura de la vena costal la cual sirvió como referencia para la medición. Con la ayuda de un lápiz se depositaba una gota de agua en medio de la marca de los 9 mm y se colocaba un ala para medirla. El agua se utilizó para manejar las alas fácilmente y ayudar en la medición ya que la extendía completamente. La escotadura de la vena se colocaba sobre una de las marcas formando un ángulo de 90° con ésta y el borde más externo del ala sirvió como base para la medición. El número de alas mayores, iguales o menores a la marca de 9 mm, fue registrado.
FABIS I
Para realizar la técnica es necesario un microscopio estereoscópico, pinzas de entomología, pinzas de relojero, monturas para transparencias, cubre objetos (22 x 44 mm), micrómetro calibrado, regla de 50 cm de plástico transparente y un proyecto de transparencias. Se tomaron las alas anteriores derechas de doce abejas por muestra, estas eran colocadas entre dos cubreobjetos que se montaron en un armazón de diapositiva de 35 mm, la cual se proyecto sobre una pared blanca. La imagen proyectada era calibrada con un micrómetro para producir una imagen magnificada 25X. La longitud de las alas fue medida con la regla de plástico, desde la escotadura de la vena costal del ala hasta el borde más externo de la misma, la medida era registrada. Para calcular el promedio de longitud de 10 alas se aplicaba la siguiente formula (Sylvester y Rinderer, 1987)
Σ long de las alas x 4 = Prom de longitud de 10 alas 100
De acuerdo con este método, las abejas cuya longitud promedio de ala es mayor a 9.281 mm son consideradas europeas, mientras que las que tienen una longitud menor a 8.715 mm, se clasifican como africanizadas. Aquéllas cuyo promedio se encuentra entre 9.280 y 8.716 mm son consideradas intermedias y dudosas (Sylvester y Rinderer, 1987).
Análisis de datos
Para estimar la confiabilidad de los dos métodos fue aplicada la prueba de rangos con signo de Wilcoxon, como variables bivariadas se incluyeron los métodos de plantilla y
regla fija por cada muestra (Conover, 1980). Además, se aplicó la prueba de coeficiente de correlación de rangos de Spearman para medir el grado de asociación lineal entre los rangos de FABIS I con plantilla y regla fija (Canavos, 1996), se analizaron los datos con el programa estadístico JMP-4 ®.
Se obtuvo la media ± intervalo de confianza 95% de las alas que rebasaron la medida de 9 mm, para calcular el número de abejas necesarias para clasificar a las muestras como europeas, africanizadas e híbridas (Canavos, 1996).
RESULTADOS
El método FABIS I fue utilizado como control para medir la confiabilidad de los métodos de plantilla y regla fija.
La regla fija contó mayor cantidad de abejas con medidas europeas (>9 mm) que la plantilla (T= -2.42; n= 15; P=0.0078; rangos con signo de Wilcoxon). Para las muestras africanizadas (<9 mm) no hubo diferencias en el conteo de las abejas entre ambos métodos (T= -0.19; n= 15; P=0.4247). En las abejas híbridas (=9 mm) el método de la regla fija contó más abejas híbridas para el caso de AE (T= -2.60; n= 15; P=0.0047), pero en EA no hubo diferencias en los conteos (T= 0.15; n= 15; P=0.5596) (Cuadro 1).
La correlación de rangos de Spearman entre plantilla y FABIS I fue de rs= 0.7878 (n= 60;
P<0.0001), para regla fija y FABIS I fue de rs= 0.9086 (n= 60; P<0.0001) (Figura 1).
Los intervalos de confianza determinaron el número de abejas que se requieren por método para clasificar una muestra como europea; para plantilla 25 y para regla fija 23 abejas, para clasificar como africanizadas, tanto la plantilla y regla fija requieren de 12 abejas, ambos medidos en una muestra de 30 abejas obreras (Cuadro 2).
El tiempo empleado en minutos fue de 7, 16 y 25, para plantilla, regla fija y FABIS I respectivamente. Los costos de materiales fueron $210.00, $222.00 y $37,179.00 para plantilla, regla fija y FABIS I respectivamente.
DISCUSIÓN
Los resultados muestran que la regla fija contó mayor cantidad de abejas con medidas europeas que la plantilla, lo que la hace más confiable. Plantilla y regla fija al contar la misma cantidad de abejas con medidas africanizadas, no mostraron diferencias. En las muestras híbridas AE la regla fija contó mayor cantidad de alas intermedias y no hubo diferencias en el genotipo EA con respecto a la plantilla. Dado que el interés es seleccionar abejas con alas mayores a 9.1 mm, por que se ha comprobado que tienen características más europeas (Guzmán-Novoa y Page, 1999; Uribe et al., 2003), el método de regla fija es el más confiable al clasificar más abejas con alas mayores a 9.1 mm.
El método de la plantilla presenta una alta correlación con FABIS I, pero la correlación más alta fue entre FABIS I y la regla fija lo que representa una mayor confiabilidad que la plantilla, lo que permite el uso de la regla fija para diferenciar colonias de abejas con alas mayores a 9 mm.
Para comparar el coeficiente de correlación obtenido por Prieto (2002) de r= 0.65 (n= 209, P<0.0001) entre los resultados de plantilla y FABIS I, en éste trabajo se calculó un r= 0.80 (n= 60, P<0.0001), correlación más alta que el primer estudio, lo que podría deberse a que el trabajo de Prieto (2002) se realizó en colonias comerciales y en el presente trabajo fueron grupos genéticos definidos.
Al comparar los resultados del intervalo de confianza de Prieto (2002) con los del presente trabajo, existe diferencia en el número de abejas necesarias para clasificar las muestras con el método de plantilla. El número de abejas necesarias para clasificar las muestras como europeas fue mayor en este trabajo 25, (Prieto 22), posiblemente debido a los grupos genéticos definidos.
Prieto (2002) propone la plantilla como un método sencillo y rápido, el presente trabajo apoya sus resultados, pero el hecho de no desprender el ala, implica la posibilidad de no colocar adecuadamente la plantilla y generar resultados erróneos. La regla fija tarda el doble de tiempo que la plantilla, por desprender el ala, pero esto permite una mejor clasificación de las longitudes de alas, posible factor que género una mayor correlación con el FABIS I. Por lo anterior, por costos y facilidad de realización la regla fija es el método de elección sobre la plantilla. Para fines prácticos, el método de la regla fija puede ser usado por apicultores para diagnosticar africanización en sus colonias o para seleccionar abejas con características europeas.
La medición de ala también sirve para apoyar pruebas de comportamiento defensivo, tendientes a discriminar entre colonias defensivas y dóciles, ya que la longitud de ala está correlacionada con defensividad. Estos resultados son apoyados por investigadores que han encontrado una relación entre un menor tamaño de ala y una respuesta defensiva más alta (Collins et al., 1994; Guzmán-Novoa et al., 1994; Uribe et al., 2003).
CONCLUSIONES
1. La regla fija presenta una mayor confiabilidad que el método de la plantilla. Ambos discriminan a las abejas europeas de las africanizadas y de sus híbridos.
2. El método de medición de alas más rápido y económico fue la plantilla, pero la regla fija es más precisa y confiable que éste, por lo que el método de elección debe ser la regla fija.
3. La regla fija es fácil de realizar y requiere de menos tiempo e inversión que el método FABIS I. Por ello, es el método recomendado para ser usado por apicultores y criadores de abejas reinas. El método FABIS I por ser más preciso, es recomendable para investigaciones científicas y para tener mayor precisión en la selección de abejas con medidas europeas.
4. La regla fija constituye una herramienta para que investigadores, autoridades y apicultores puedan llevar a cabo controles, estudios y trabajos de mejoramiento genético, seleccionando de forma rápida y práctica abejas con características europeas y por lo tanto, más productivas y menos defensivas.
Cuadro 1. Valores de T obtenidos de la diferencia de plantilla y regla fija de cuatro grupos
genéticos: europeas (EE), africanizadas (AA), híbridas de madre europea (EA) e híbridas de madre africanizada (AE). Para contar el número de abejas y clasificarlas según genotipo. GENOTIPO CLASIFICACION T P EE > 9 mm -2.42 0.0078 AA < 9 mm -0.19 0.4247ns AE = 9 mm -2.60 0.0047 EA = 9 mm 0.15 0.5596ns
Tt = -1.6448. n= 15;. ns= no significativo. Los datos fueron analizados mediante la prueba
de rango con signo de Wilcoxon.
Cuadro 2. Media (± intervalo de confianza, 95%) para el número de abejas cuyas alas
rebasaron la escala de 9 mm de la plantilla y la regla fija en muestras de 30 obreras cada una. Las muestras fueron clasificadas como abejas con medidas africanizadas, europeas e híbridas, de acuerdo con Sylvester y Rinderer, 1987.
MÉTODO CLASIFICACIÓN N No. ABEJAS P*
AFRICANIZADAS 15 (±2.59) 9.73 12
EUROPEAS 15 (±2.54) 22.5 25
PLANTILLA
HÍBRIDAS (AE + EA) 30 (±0.32) 11.15 >12 <25
AFRICANIZADAS 15 (±2.93) 9.2 12
EUROPEAS 15 (±2.38) 25.7 23
REGLA FIJA
HÍBRIDAS (AE + EA) 30 (±0.75) 11.3 >12 <23 *P<0.05, para el número mínimo, máximo e intermedio de abejas cuyas alas rebasan la escala de 9 mm de los métodos usados, que se requieren para clasificar como africanizadas, europeas o híbridas, en una muestra de 30 obreras.
Figura 1. Correlación entre longitud media de ala (mm) de abejas obreras de 60 colonias,
obtenida mediante el método FABIS I y el número de alas mayores a 9 mm medidas con la regla fija.
REGLA FIJA vs FABIS I
Los coeficientes de correlación se obtuvieron con la prueba de rangos de Spearman.
REFERENCIAS CITADAS
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colony defence in Apis mellifera L. J Apic Res 1994; 33: 3-10.
Conover WJ. Practical nonparametric statistics. 2nd ed. United States of America: John Wiley & Sons 1980.
Daly HV, Balling SS. Identification of africanized bees in the western hemisphere by discriminant analysis. J Kansas Entomol Soc 1978; 51: 857-869.
Guzmán-Novoa E, Page RE. The impact of africanized bees on Mexican beekeeping. Am Bee J 1994; 134: 101-106.
Guzmán-Novoa E, Page RE, Fondrk MK. Morphometric techniques do not detect intermediate and low levels of africanization in honey bee (Hymenoptera: Apidae) colonies. Ann Entomol Soc Am 1994; 87: 507-515.
Guzmán-Novoa E. La apicultura en México y Centroamérica. Memorias de V Congreso Iberolatinoamericano; 1996 junio 1-3; Mercedes (Uruguay) Uruguay: Moyano-Rabel, S.A., 1996:14-17.
Guzmán-Novoa E, Page RE. Selective breeding of honey bees (Hymenoptera: Apidae) in africanized areas. J Econ Entomol 1999; 92: 521-525.
INEGI Instituto Nacional de Estadística Geografía e Informática. Anuario Estadístico del Estado de México. México (DF): INEGI, 1998.
Prieto MD. Confiabilidad de pruebas y métodos para evaluar el comportamiento defensivo y el tamaño corporal en tres genotipos de abejas melíferas (Apis mellifera L) (Tesis de maestría). México, D.F. México: Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia UNAM, 2002.
Sylvester HA, Rinderer TE. Fast Africanized bee identification system (FABIS) manual. Am Bee J 1987; 127: 511-516.
Uribe RJL, Guzmán NE, Hunt GJ, Correa BA, Zozaya RJA. Efecto de la africanización sobre la producción de miel, comportamiento defensivo y tamaño de las abejas melíferas (Apis
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LONGITUD DE ALAS (mm) N o. D E A LA S M A Y O R E S A 9 m m
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