2.3 Shocks
3.1.1 Thomson Scattering
RESULTADOS
MARÍA EUGENIA ZURITA. TRABAJO DE TESIS DOCTORAL 2015
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INTRODUCCIÓN
Como hemos detallado a lo largo de la introducción de este trabajo de Tesis, desde hace más de 20 años se viene registrando un aumento sostenido del número de casos de coqueluche en varios países incluidos aquellos con altas coberturas de vacunación. Diferentes causas se han esgrimido para explicar el resurgimiento de esta enfermedad inmunoprevenible. Entre ellas la baja efectividad de las vacunas en uso, la pérdida de inmunidad inducida por ellas, y la adaptación de agente causal a la inmunidad inducida por las vacunas. El peso de cada uno de estos factores, aunque no necesariamente el mismo en todas las regiones, se está debatiendo intensamente. Independientemente de cual sea el factor primordial que determina esta situación epidemiológica es claro que se requieren nuevas estrategias y nuevas formulaciones vacunales que permitan mejorar el control de la enfermedad. Para el diseño de nuevas vacunas resulta clave realizar acciones que permitan profundizar el conocimiento sobre el patógeno, la infección, la interacción patógeno-huésped y los mecanismos inmunológicos involucrados en la protección contra el mismo, entre otros.Respecto a estos últimos existen evidencias que indican que tanto la inmunidad humoral como la celular son importantes al momento de combatir la enfermedad [58, 59, 65, 100-102], pero los factores determinantes de la eliminación de B. pertussis del tracto respiratorio aún son poco conocidos. De manera interesante, en nuestro laboratorio hemos logrado identificar un escenario de eliminación de B. pertussisin vivo que se presenta como muy atractivo para avanzar en aquel conocimiento. Específicamente hemos podido identificar el fenómeno conocido como estimulación de la respuesta innata (StIR), en el cual la infección por B. pertussis se ve severamente perturbada como consecuencia de la estimulación exacerbada del sistema inmune [17].El fenómeno StIR fue descripto primariamente para otras infecciones pulmonares como la gripe A,
Streptococcus pneumoniae y Aspergillus niger [78, 79, 81] . El mismo consiste en un aumento inespecífico de la respuesta innata de las vías respiratorias que evita el progresodedichasinfecciones. Evans y colaboradores, utilizando el modelo murino de infección, observaron que la administración por vía intranasal de un lisado de
Haemophilus influenzae (NTHi) induce una respuesta inmune capaz de proteger frente a un inóculo Streptococcus pneumoniae que de otro modo resultaría letal.
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En nuestro laboratorio pudimos detectar que el fenómeno StIR puede ser desencadenado en B. pertussis a través de la administración de lipopolisacárido (LPS) purificado [17]. Los resultados alcanzados mostraron que el fenómeno StIR para B. pertussis puede desencadenarse con LPS de diferentes microorganismos incluso con aquellos que no están involucrados en la colonización de huéspedes animales. Más aún, el tratamiento con flagelina o con otros PAMPs distintos al LPS tales como poli I:C no resultaron ser capaces de inducir este fenómeno en B. pertussis. Experimentos realizados en cepas de ratones defectivos en la señalización vía TLR-4 (cepa C3H/HeJ) y en consecuencia hiporrespondedores a LPS, permitieron confirmar que la respuesta TLR4-dependiente es el principal responsable del fenómeno StIR observado en B. pertussis. El fenómeno de StIR ha sido descripto para otros microorganismos, en general empleando una mezcla compleja de agonistas de la inmunidad como estímulo. En el caso de B. pertussis basta con la administración de un agonista TLR-4 purificado para inducir una respuesta suficiente para evitar el progreso de la infección.
En el marco de mi trabajo de Tesis nos hemos propuesto caracterizar molecularmente el fenómeno StIR en el marco de la infección por B. pertussis. Para ello primeramente trabajamos en la puesta a punto de las condiciones experimentales que nos permitan evidenciar clara y oportunamente el fenómeno StIR. Como hemos mencionado los experimentos que nos permitieron identificar la presencia de StIR y los que describiré en esta sección de este trabajo de Tesis se realizaron empleando el modelo de infección en ratones.Antes de avanzar específicamente en la metodología y los resultados de estos experimentos, nos parece oportuno hacer una breve reseña sobreel modelo animal de infección de B. pertussis utilizado.
Aunque el hombre es el único huésped natural de B. pertussis, se ha realizado una búsqueda intensa de un modelo animal que permita reproducir la enfermedad. Así se ha trabajado en conejos, cerdos, perros, monos, ratas y ratones [103]. De todos ellos, el modelo murino ha sido y es el más ampliamente empleado no sólo por la simplicidad sino a que en este modelo se lograr visualizar características de la infección de B. pertussis en humanos: alta susceptibilidad a la infección en recién nacidos respecto a los adultos, períodos similares de infección pulmonar y manifestaciones clínica tales como hipoglucemia, leucocitosis y sensibilización a la histamina [58, 103].
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47 Más aún, al igual que en el hombre la respuesta pato-fisiológica en ratones depende de la edad y de la dosis de B. pertussis utilizada en la infección [5, 6, 10, 104].
Dada todas estas características y la experiencia de nuestro laboratorio, para este trabajo de Tesis hemos decidido emplear el modelo de infección intranasal en ratones [58]. A continuación se describen los resultados alcanzados.