ARTESANALES ADYACENTES AL BOTADERO DE RESIDUOS SOLIDOS CHILLA
3.3.1. Ubicación del sitio de estudio
El sector Chilla en encuentra ubicado a 5.00 Km. Respecto a la ciudad de Juliaca teniendo como límite al norte los distritos de Caminaca (provincia de Azángaro) y de Calapuja (provincia de Lampa). El sitio de estudio se encuentra delimitado acorde a la información de la siguiente tabla:
Tabla 2
Identificación de pozos adyacentes al botadero de Residuos Sólidos Chilla
Pozo Coordenadas Este Norte Distancia de pozo a botadero (m) Codificación Profundidad de Pozo (m) 1 381541 8287075 801 P-1 3.80 2 381737 8286910 699 P-2 4.00 3 381814 8286724 512 P-3 4.16 4 381346 8286057 251 P-4 3.80 5 381438 8285995 269 P-5 4.00 6 381487 8285852 271 P-6 4.00 7 382304 8285809 551 P-7 3.80 8 382416 8286057 475 P-8 4.16 9 382428 8286315 417 P-9 2.70 10 381969 8285781 200 P-10 2.50 11 381837 8285796 198 P-11 4.16
12 381680 8285713 290 P-12 3.80 13 381754 8285631 363 P-13 2.60 14 381796 8285489 509 P-14 2.60 15 382069 8285565 481 P-15 4.00 Nota: Observación directa.
Fuente: El investigador
3.3.2. Ubicación de Puntos de muestreo
Para la elección de los puntos de muestreo se realizó una previa evaluación, para la ubicación de los pozos artesanales adyacentes al botadero de residuos sólidos estos se distribuyeron de la siguiente manera: P-1, P-2, P-3 se localizaron en el Urbanización Villa Machuaichas, seguido de los pozos P- 4, P-5, P-6 en la Urbanización Las Palmeras, posteriormente en la Urbanización Santa Rosa se ubicaron los pozos 7,8,9 y finalmente en la Urbanización Villa San Eugenio los pozos P-10, P-11, P-12, P-13, P-14, P- 15 del sector chilla, siendo estas las 4 zonas adyacentes al botadero de residuos sólidos esta distribución se observa en la siguiente figura:
Figura 1.Ubicación de los pozos artesanales adyacentes al botadero Chilla. Fuente: El investigador
3.3.3. Toma de muestras
Para el muestreo de agua en cada uno de los pozos artesanales se utilizó el Protocolo Nacional de monitoreo de recursos hídricos (ANA, 2016). La metodología para el muestreo de agua es el que se menciona a continuación:
- Usar frascos de vidrio o plástico de boca ancha, desinfectados o de primer uso, la determinación el volumen de la muestra se realizará de acuerdo al parámetro a examinar, estimando las
disposiciones generales de conservación, etiquetado, traslado y el envoltorio de las muestras, presentadas en el Anexo Nº I de los Requisitos contenidos en el protocolo utilizados para realizar el muestreo de agua y conservación.
- Rotular los envases con plumón de tinta indeleble y revestir la etiqueta con cinta adhesiva transparente.
- Las muestras de agua recogidas, preservadas y rotuladas, se tiene que colocar en un cooler con congelante (ice pack), de este modo asegurar que llegue en condiciones óptimas al laboratorio. Del mismo modo, procurar que no se produzcan roturas en los envases de vidrio, para esto se pueden utilizar bolsas de poliburbujas (ANA, 2016).
Una vez realizada la toma de muestra en cada uno de los puntos seleccionados se transportaron los frascos en un cooler de tecnopor con refrigerante lo que facilitó que se conserven a temperatura de 4 a 6 °C según Protocolo Nacional de monitoreo de agua. En el cooler, en la parte interna se colocó la cadena de custodia contiene lo siguiente:
- Identificación de puntos de muestreo. - Código de la muestra.
- Fecha y hora de recolección.
- Lugar de muestreo. (Zona, Urb, A.A.H.H/ Distrito /Provincia / Departamento)
- Puntos de muestreo y/o coordenadas UTM
- Matriz de muestra de agua. (Para clasificación de tipo de agua) - Volumen enviado (dependiendo del tipo de análisis).
- Indicar los parámetros a evaluar o analizar.
- Nombre y firma del encargado en la toma de muestra. - Observaciones (si sucede algún inconveniente no previsto). En el etiquetado y rotulado para los envases que contienen la muestra de agua:
- El número de muestra.
- Código del punto y/o estación de muestreo. - Tipo de muestra de agua.
- Un corto detalle del punto de muestreo. - Fecha y hora donde se tomó la muestra.
- Detallar en caso se haya adicionado un reactivo para su preservación.
- Modelo de análisis solicitado.
- Nombre del encargado en la toma de muestra.
Las muestras recogidas fueron conservadas a temperatura de refrigeración en el Megalaboratorio de la Universidad del Altiplano Puno hasta el comienzo del análisis.
Es importante mencionar que 2 muestras (pozo 2 y el pozo 14) fueron enviadas a un laboratorio acreditado específicamente a “Laboratorios del Sur”, estas muestras se enviaron al laboratoriopara tener mayor fiabilidad en los resultados de los parámetros objetos de estudio.
3.3.4. Procedimientos de Laboratorio
La metodología para determinar la concentración y/o valores de los parámetros físicos, químicos y bacteriológicos, se realizaron de acuerdo a los métodos estandarizados APHA del año 1998.
Materiales del laboratorio
Recipientes de frasco de vidrio boca ancha estériles.
Probetas 100 ml. Probetas de 10 ml. Matraz Erlenmeyer 1000 ml. Bureta 50 ml. Probetas 50 ml. Placas Petri de 15 x 100 mm.
Tubos de ensayo Durham.
Pipetas.
Embudo de filtración.
Papel kraff y filtro.
Guantes.
Barbijo.
Mandil.
Equipos
Estufa de incubación (YAMATO IC403CW).
Autoclave (MED20).
Refrigerador (MABE SIDE OM25WGTGS).
Espectrofotómetro (HACH DR-2000).
Turbidímetro (HACH – LAB TURB 2100).
Potenciómetro (OAKTON PDC650).
Conductímetro (OAKTON PDC650).
Caldo Lauril Triptosa. (Fase presuntiva).
Caldo Lauril verde Brillante 2% (Fase confirmativa coliformes totales.).
Caldo EC (Fase confirmativa coliformes termotolerantes)
Agar m-Endo Les (coliformes totales.).
Agar m-FC (coliformes termotolerantes.)
Reactivos
Kit. HACH Sulfate.
Kit. HACH HR Nitrate.
Kit. HACH Hardness.
Agua destilada y bidestilada.
Ácido sulfúrico.
Solución valorante de AEDT Tetrasodium Salt 0.004 M.
Solución valorante Nitrate Mercuric 0.005 N
Ácido clorhídrico. Buffer pH 10. Material de escritorio Cuaderno de apuntes. Impresora. Laptop. Lapiceros Plumón indeleble. Papel Bond. Cámara fotográfica.
3.3.4.1. Procedimiento para la obtención de parámetros físicos Potencial de Hidrogeno
Método: Electrométrico (APHA, 1998)
Procedimiento: Se utilizó un potenciómetro, seguidamente en un vaso precipitado se vacío un volumen de 50 ml de la muestra, el potenciómetro se colocó dentro del vaso contenido de la muestra y de esta manera se obtuvieron los resultados para finalmente ser anotados.
Conductividad eléctrica
Método: Conductimetría (APHA, 1998)
Procedimiento: En un vaso precipitado se agrega un volumen total de 50 ml de la muestra de agua, después se introdujo el conductímetro, se anotó el valor que se obtuvo en la lectura del equipo, el medidor de conductividad nos arrojó los resultados en µS/cm y finalmente procedemos a registrar los resultados.
Turbiedad
Método: Nefelométrico (APHA, 1998)
Procedimiento: Primero se procedió a calibrar el equipo para después limpiar la celda con papel esterilizado para luego vaciar un volumen de 25 ml de muestra de agua en las celdas
y después se colocó en el equipo turbidímetro. El resultado de cada muestra se observó en la pantalla del equipo y finalmente se apuntó el valor en unidades (NTU).
Sólidosdisueltos totales
Método: Conductimetría (APHA, 1998)
Procedimiento: Para el procedimiento se usó un vaso precipitado de 50 ml en el cual se vacío la muestra de agua, previamente enjuagado el nefelómetro se introdujo en cada muestra y de esta manera se obtuvo los resultados de los sólidos disueltos totales, y seguidamente se anotaron los valores que se obtuvieron.
3.3.4.2. Procedimiento para la obtención de parámetros químicos Dureza total
Método: Titulométrico (APHA, 1998)
Procedimiento: Se inició con la titulación de la muestra, en un principio se hace girar la perilla de descarga para que empiece a soltar unas gotas al titulador. Con una pipeta se mide el volumen de la muestra que será de 25 ml la que se transfiere en un matraz Erlenmeyer de 250 ml, se agrega el buffer de pH 10, después integramos el compuesto de ericromo negro T, esto ocasiona que la muestra se torne de un color purpura,
después se titula con EDTA hasta que la muestra se torne de color azul, los volúmenes de gastos obtenidos se anotaron para el resultado final.
Cloruros
Método: Mohr (APHA, 1998)
Procedimiento: Se vacío un volumen de 10 ml de muestra de agua en un matraz y se diluyo en 90 ml de agua destilada, seguidamente se agrega el indicador de dicromato de potasio (K2CrO4). El compuesto de cloruro de plata AgCl, es el primero
en precipitar, después cuando se acaba el cloruro, la muestra se tornó en un color amarillento, mientras se va removiendo el matraz se titula con el AgNO₃ que reacciona con el K2CrO4
produciendo un precipitado rojo ladrillo, finalmente se anota el volumen de gasto.
Sulfatos
Método: Espectofométrico (APHA, 1998)
Procedimiento: Se tomó un volumen de 25 ml de muestra del agua en un matraz de una capacidad de 250 ml, después se adicionó 0.01 mg (una pizca) de cloruro de bario para disolverlo dejando reposar por 10 minutos, luego se encendió y calibró el espectrofotómetro y finalmente se colocó en una cubeta de
vidrio para medir en el equipo la transmitancia anotándose el valor que nos da en porcentaje de transmitancia %T y se convierten a mg/l.
Nitratos
Método: Espectrofotométrico (APHA, 1998)
Procedimiento: Se procedió a obtener el ácido clorhídrico realizando lo siguiente, 1N: se diluyo 8.3 ml de HCl concentrado en 80 ml de agua destilada y aforamos hasta 100 ml. Seguidamente se obtuvo la solución madre de nitrato (50 mg/l): tomando una porción adecuada de KNO3 que se llevó a una
estufa a 105 °C durante 24 horas. Se debe disolver 0.0815 g de KNO3 en agua libre de nitrato, posteriormente aforamos en un
matraz de 1L y adicionar 2 ml de CHCl3. Después se obtuvieron
las soluciones patrón de nitratos para la curva de calibración: Se preparó la curva de calibración de nitrato en rangos de 5,10, 15, 20, 25, 30 de concentración en mg por litro por dilución para los siguientes volúmenes 2.5, 5, 7.5, 10,12.5 y 15 ml de solución madre y se adiciono 1 ml de ácido clorhídrico 1N. Se agito las muestras y se dejó reposar para la lectura. Se midió la absorbancia contra el blanco a 220 nm, 10 minutos después. La solución blanco estuvo contenida con agua destilada de un volumen total de25 ml y se añade 1 ml de ácido clorhídrico 1N.
Desarrollo de la prueba: Se tomó 100 ml de la muestra de nitratos para filtrarla por gravedad empleando un embudo en V, después se tomó la muestra filtrada para después transferir 25 ml a un matraz volumétrico de 25 ml, se agregó 1 ml de HCl 1 N al matraz, se mezcló la solución contenida en el matraz después se depositó la muestra en la celda de cuarzo y procedemos a medir la absorbancia a 220 nm. Se cambió la longitud de onda a 275 nm para la determinación de la absorbancia debida a la materia orgánica remanente, por último, restamos 2 veces la absorbancia obtenida a 275 nm de la absorbancia a 220 nm de esta manera se obtuvo la absorbancia final de NO3.
Metales pesados
Método: USEPA 3051ª (1998)
Procedimiento: Una un volumen de 4.5 ml de muestra de agua se transfirió a tubos de teflón y seguidamente se añadió 9 ml de HNO3 y 3 ml HCl. Los tubos se mantuvieron en un sistema
cerrado (horno de microondas Anton Paar), a un rango de temperatura a 175 ° C durante 8 minutos y 40 segundos.
3.3.4.3. Procedimiento para obtención de parámetros bacteriológicos
Coliformes termotolerantes y totales Método: Numero Más probable (NMP)
Procedimiento: Se preparó los medios de cultivo con 24 horas de anticipación y después de colocaron en la estufa a 45°C y de esta manera comprobar la esterilidad de los cultivos, este método se compone de 2 partes:
a) Test presuntivo.
Después de las especificaciones dadas se agitó enérgicamente la muestra de agua unas 25 veces por lo menos, para poder conseguir una homogenización y comenzar con la inoculación en la determinación de coliformes:
Se acondiciono una serie de 9 tubos con Caldo Lactosado (CL) con un total de 10 ml en cada uno de los tubos Durham invertidos, en cada muestra de agua, previamente rotulados. Un volumen de 10 ml con el contenido de la muestra y se inoculó en 3 tubos con un total de 10 ml de CL estéril de doble concentración.
Un volumen de 1 ml con el contenido de la muestra y se inoculó en 3 tubos con un total de 10 ml de CL estéril de simple concentración.
Un volumen de 0.1 ml con el contenido de la muestra se inoculó en 3 tubos con un total de 10 ml de CL estéril de simple concentración.
Los tubos se homogenizaron con sumo cuidado, y después fueron colocados en gradillas, se procedió a incubar en estufa a una temperatura de 35° C por un lapso de 24 a 48 horas, pasada las 48 horas se procedió a la interpretación de los tubos.
En esta prueba presuntiva, ocurre una selección de organismos lactosa positivas con producción de gas (CO2)
capturado en el tubo Durham, estos resultados positivos son los resultados que anotamos están expresados en un valor de NMP de coliformes.
Para los tubos que contengan gas y fermentación de la lactosa se consideraron positivos presuntivamente para coliformes, los tubos positivos se seleccionaron para la siguiente prueba.
b) Test confirmatorio.
Se agregó un inóculo (asada) en los tubos que resultaron positivos en la prueba presuntiva a otros conteniendo 10 ml. de (CLVBB) para los tubos Durham invertidos:
Los tubos de CLVBB se rotularon correspondientes a cada tubo positivo de CL de la prueba presuntiva.
La muestra se inoculo en los tubos de caldo (CLVBB) y se agitó cada tubo para obtener una mezcla uniforme.
Se incubó los tubos con CLVBB durante 24 a 48 horas a 35 °C o 49 °C
Se procedió a la lectura a las 24 horas considerando tubos que presentan a la vez, formación de gas y turbidez.
Se reincubó los tubos sin crecimiento 24 horas adicionales. Se procedió a la segunda lectura luego de las 24 horas
adicionales.
Finalmente se anotaron los resultados y cálculos del NMP de coliformes después de obtener los datos en la prueba confirmativa.
3.3.4.4. Clasificación del agua de pozos artesanales según tipo de parámetro
Para la clasificación del agua de los pozos se realizará utilizando los valores y/o concentraciones de los LMP del decreto supremo 031-2010-SA de la normatividad peruana para agua de consumo humano, el cual se observa a continuación:
Tabla 3
Limites máximo permisibles de parámetros físicos, químicos y bacteriológicos
3.4. PROCEDIMIENTO METODOLÓGICO PARA LA CATEGORIZACIÓN