The ILP Optimizer

Se obtuvieron datos de precipitaciones diarias de la localidad de 9 de Julio y semanales de la localidad de Bragado del Sistema integrado de información agropecuaria del Ministerio de Agricultura, Ganadería y Pesca, Presidencia de la Nación (http://www.siia.gov.ar/index.php/series-por-tema/agrometeorologia).

Se calcularon las precipitaciones medias mensuales correspondientes al período 1970- 2010 de la localidad de 9 de Julio y se aplicó a esta serie de lluvias el Índice de Fournier modificado por Arnoldus, realizándose su evaluación según el IFM para Latinoamérica (Besteiro et al., 2009).

Con los datos obtenidos de las precipitaciones de 9 de Julio y Bragado, se calcularon las precipitaciones mensuales correspondientes al período 2009-2010 para ambas localidades, así como las precipitaciones acumuladas y los días sin lluvia previos a cada fecha de muestreo.

En cada uno de los momentos de muestreo, se midieron las siguientes variables en el agua: temperatura, pH, conductividad, turbidez y concentración de oxígeno disuelto utilizando un sensor múltiple Horiba U-10 y un oxímetro YSI; la velocidad de corriente fue medida con un correntímetro; la transparencia del agua con un disco de Secchi y la luz incidente con un luxímetro. En laboratorio se determinaron las concentraciones de clorofila a del fitoplancton utilizando el método de Lorenzen (1967) y de los nutrientes: amonio (NH4+), nitratos y nitritos 97

Análisis de un sector de la cuenca Capítulo 4 (NO32-+NO2-), nitrógeno total (NT), fósforo reactivo soluble (PRS), fósforo total (PT); así como de sólidos en suspensión y materia orgánica en el agua, tal como fue explicado en el capítulo anterior, siguiendo las metodologías propuestas en APHA (1995).

En cada sitio de muestreo se colectaron réplicas de sedimento superficial, siguiendo la metodología realizada para el muestreo extensivo de la cuenca. Mediante el uso de minicorers de 1,327 cm2 _{se colectaron cinco réplicas (Biggs & Price, 1987) de sedimento para la} identificación de la flora algal; cada réplica se colocó en un frasco con 15 ml de agua corriente con solución de formol al 5%. Simultáneamente, mediante la utilización de corers de 6,15 cm2 y 1,2 cm de profundidad se obtuvieron cinco réplicas para el análisis de clorofila a del fitobenton y otras cinco réplicas para estimación de la materia orgánica (MO) y del fósforo total (PT) en el sedimento (excepcionalmente, por problemas metodológicos, en el sitio CV II en el muestreo de septiembre, se colectaron sólo dos replicas para análisis de clorofila a y dos para MO y TP). Consecuentemente con el objetivo de este trabajo, los talos de las macroalgas observables a simple vista, debido a su tamaño, no fueron incluidos en el muestreo con minicorers, sino la información incorporada sobre su presencia, cobertura y distribución espacial en las planillas de campo.

En el laboratorio se obtuvieron las variables del sedimento siguiendo la misma metodología descripta en el análisis extensivo de la cuenca, con la diferencia que cada réplica entera fue destinada a un análisis. Se midieron el fósforo total (PT) según la metodología propuesta por Andersen (1979) y la concentración de materia orgánica mediante el secado en estufa a 60 ºC para obtener el peso seco (PS) y posterior muflado durante 4 horas a 550 ºC para obtener el peso seco libre de cenizas (PSLC) y calcular el contenido de materia orgánica (MO) (Aboal et al., 1994). La concentración de clorofila a del fitobenton fue estimada mediante el agregado de acetona 90 % a cada réplica de sedimento y posterior lectura de pigmentos al espectrofotómetro, siguiendo el método de Lorenzen (1967) con la modificación propuesta por Varela (1981).

Previo al análisis cuantitativo del fitobenton se realizó una primera inspección visual de la muestra para determinar el volumen de concentración o dilución requerido (Acker, 2002).El conteo se realizó sobre volúmenes de 50 microlitros tomados de la alícuota homogeneizada y colocados entre portaobjetos y cubreobjetos de 1.8 x 1.8 cm (Semina, 1978). Se utilizaron diferentes aumentos (100x y 400x) para la contabilización de organismos de diferentes tamaños (Semina, 1978). El número de campos contados estuvo determinado por el área mínima (Modenutti y Balseiro, 1995).El número de algas se expresó tanto en células como en individuos. En este último caso se consideró a los organismos coloniales y filamentosos como 98

un individuo, para lo cual se estableció una “unidad de conteo natural” (Acker, 2002), que es el número de células mínimo en una colonia o la longitud promedio de filamento (O’ Farrel, 1993) a partir del cual se contabiliza un organismo. Se registraron exclusivamente los organismos viables, tal como fue descripto en el capítulo anterior.

La identificación y determinación de los taxa se realizó mediante la consulta de la bibliografíaespecífica de cada grupo. En el caso de las diatomeas, la identificación involucró el tratamiento para visualizar las estructuras del frústulo, y la observación al microscopio electrónico de barrido, tal como fue explicado en el capítulo anterior.

En cada uno de los sitios estudiados se calcularon la riqueza específica, el índice de diversidad de Shannon-Wiener, la equitabilidad (Margalef, 1983) y la abundancia algal a partir del conteo del número de individuos, y esta última también a partir de la cuantificación de células.

Se recopiló información bibliográfica para conocer las preferencias ecológicas de los taxa encontrados en el fitobenton utilizando los criterios de trofía, saprobiedad, salinidad, tolerancia a enriquecimiento orgánico y por nutrientes, y forma de vida (planctónicos o bentónicos). La bibliografía consultada fue: Denys (1991/92), Krammer y Lange- Bertalot (1986, 1988, 1991a, 1991b), Komárek y Anagnostidis (1998, 2005), Komárek y Fott (1983), Majewska et al. (2013), Porter (2008), Van Dam et al. (1994).

Análisis estadísticos

Se testearon las diferencias entre los sitios y las fechas de muestreo para variables del agua y de los sedimentos a través de análisis de la varianza con dos factores seguido de test de Tukey post-hoc. Siguiendo el mismo criterio descripto en el capítulo anterior, las variables: turbidez, amonio y NT del agua, PT de los sedimentos, clorofila a del fitoplancton y del fitobenton, y feofitina de los sedimentos fueron transformadas a log 10; mientras que velocidad de corriente, conductividad, PT y nitratos del agua fueron transformadas a la raíz cuadrada. La normalidad de las variables se verificó con el test de Kolmorogov-Smirnov y la homocedasticidad de la varianza con el test de Levene (Legendre y Legendre, 1983). Se analizó la existencia de diferencias entre los sitios y las fechas de muestreo con análisis de la varianza y de Kruskal-Wallis (Legendre y Legendre, 1983).

Se realizó un Análisis de Componentes Principales con las variables fisico-químicas del agua a partir de una matriz de correlación y utilizando el programa MVSP.

Análisis de un sector de la cuenca Capítulo 4 Se realizaron Análisis Discriminantes con el objeto de observar agrupamientos de los sitios dados por las variables físico-químicas del agua y por variables de los sedimentos. Este agrupamiento de sitios se realizó en relación con: 1) los aportes de sales desde la Pampa arenosa y el efecto atenuador de las mismas dado por las lagunas, 2) las obras hidráulicas en ejecución y 3) las diferencias en el tipo de cuerpo de agua lótico (río/canal).

Se realizaron correlaciones lineales simples entre variables físico-químicas del agua y de los sedimentos (materia orgánica, fósforo total, clorofila a, feofitina, riqueza de especies, riqueza de diatomeas, abundancia de individuos y abundancia de células) con el objeto de encontrar relaciones.

Para examinar la relación entre las variables ambientales y los ensambles algales, se utilizó una matriz que fue confeccionada excluyendo a los taxa raros (eliminando a más del 65%, que fueron los taxa cuantificados con una frecuencia menor al 20% y abundancia menor al 5%), para minimizar los efectos de un gran número de ceros e interpretaciones dudosas (Legendre y Legendre, 1983). Utilizando esta matriz de datos con la abundancia algal, se realizaron:

- Análisis de Escalamiento Multidimensional (MDS) y de similaridad (ANOSIM) para comprobar diferencias en la composición algal en relación con los momentos estudiados, el tipo de cuerpo lótico muestreado y con diferentes concentraciones de algunas variables, utilizando para este análisis la distancia Bray-Curtis.

- Análisis de Correspondencia Canónica (ACC) para determinar la influencia de las variables ambientales en la distribución de especies epipélicas. La distancia entre muestras fue determinada usando escala de Hill. La significancia estadística de las variables ambientales predictoras sobre el primer eje de ordenación se siguió con permutaciones de Monte Carlo. Las variables con factor de inflación mayor a 15 fueron excluidas del análisis (ter Braak, 1995).